检索结果-内蒙古大学图书馆

世界华人消化杂志 2004年第10期12卷 2491-2494页

作者：高学松成军甄真杨艳杰黄燕萍郭江刘妍戴久增中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 河北医科大学第三医院感染科河北省石家庄市050051

目的:研究β2-m对核心启动子表达的调节作用方法:根据HBV核心启动子及β2-微球蛋白的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和β2-微球蛋白基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白的真核表达载体,... 详细信息

目的:研究β2-m对核心启动子表达的调节作用方法:根据HBV核心启动子及β2-微球蛋白的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和β2-微球蛋白基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白的真核表达载体,脂质体法瞬时转染HepG2细胞.结果:成功构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白(β2-m)的真核表达载体.脂质体法瞬时转染HepG2细胞48h后,核心启动子在β2-微球蛋白(β2-m)的影响下,其启动子活性降底2倍.结论:β2-微球蛋白(β2-m)

关键词： β2-微球蛋乙型肝炎病毒核心启动子转录活性调节作用

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核孔复合体相互作用蛋白(NPIP)对乙型肝炎病毒核心启动子转录活性的调节作用

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世界华人消化杂志 2004年第10期12卷 2488-2491页

作者：高学松成军甄真黄燕萍郭江刘妍戴久增中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 河北医科大学第三医院感染科河北省石家庄市050051

目的:构建HBV核心启动子及NPIP的重组载体,研究NPIP对核心启动子表达的调节作用.方法:根据HBV核心启动子及NPIP的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和NPIP基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真... 详细信息

目的:构建HBV核心启动子及NPIP的重组载体,研究NPIP对核心启动子表达的调节作用.方法:根据HBV核心启动子及NPIP的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和NPIP基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真核表达载体,脂质体法瞬时转染HepG2细胞.结果:成功构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真核表达载体.脂质体法瞬时转染HepG2细胞48h后,用ELISA法检测β-gal的表达,显示核心启动子在NPIP的影响下,其活性有降低3-4倍.通过体内实验证明NPIP可以下调HBV核心启动子的表达.结论:NPIP明显降低HBV核心启动子的表达,为进一步研究HBV复制的分子生物学机制提供了新的线索.

关键词：核孔复合体相互作用蛋白 NPIP 乙型肝炎病毒核心启动子转录活性调节作用

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乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因的筛选

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中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 8-10页

作者：陆荫英李克王琳刘妍王业东成军张玲霞中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA... 详细信息

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落,PCR从中扩增出目的片段并测序,进行生物信息学分析。结果成功克隆出HBVPreS2基因并在酵母细胞中表达,配合后选出既能在4缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基又能在铺有X-α-半乳糖(X-α-gal)的4缺培养基上生长并变成蓝色的真阳性菌落26个,其中含金属硫蛋白A2基因的菌落有12个,细胞色素C氧化酶Ⅱ有1个,细胞色素:P450 IVF亚基2个,细胞色素C氧化酶Ⅳ亚基同功酶1有2个,人血白蛋白3个,。Na+-K+ATP酶β1亚基1个,前清蛋白2个,植物血凝素半乳糖苷结合亚基1个,未知基因2个。结论成功克隆出HBV PreS2蛋白的结合蛋白,为进一步研究HBV PreS2的作用提供了新线索。

关键词：乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因筛选

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病毒载量动态检测在乙型肝炎治疗和研究中的意义

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中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 54-56页

作者：洪卫国王福生陈菊梅中国人民解放军第三○二医院传染病研究所全军艾滋病和病毒性肝炎防治重点实验室北京100039

目前对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)与人体基因作用动态过程的具体细节还不清楚.但随着核酸定量技术的发展,已经有可能同时监测病毒在体内复制、表达的过程和人体基因表达谱的变化[1].

关键词：病毒载量动态检测乙型肝炎治疗研究

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乙型肝炎病毒核心启动子的结构及调节研究

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世界华人消化杂志 2003年第7期11卷 1006-1008页

作者：杨艳杰成军陈东风刘妍杨倩王建军中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 中国人民解放军第三军医大学大坪医院消化内科重庆市400038

0引言乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的疾病,呈全球性分布,目前全世界有3.5亿人感染乙型肝炎病毒(HBV),其中相当一部分感染者发展为慢性肝炎,少数还发展为肝硬化甚至肝癌,至今仍缺乏有效控制[1-5].造成这一局面的原因很多,其中关于HBV... 详细信息

0引言乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的疾病,呈全球性分布,目前全世界有3.5亿人感染乙型肝炎病毒(HBV),其中相当一部分感染者发展为慢性肝炎,少数还发展为肝硬化甚至肝癌,至今仍缺乏有效控制[1-5].造成这一局面的原因很多,其中关于HBV与肝细胞之间相互作用的分子生物学机制的研究进展相对滞后是严重影响新型治疗技术和新型药物开发与研究的重要原因之一.进一步弄清HBV DNA的复制、转录及调节的过程,对于我们研究乙型肝炎的发病机制具有重要意义.本文仅就乙型肝炎病毒核心启动子(CP)结构及调节近几年的研究进展作一综述.

关键词：乙型肝炎病毒核心启动子结构调节基因突变生物学病毒复制

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丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5抗独特型人源单链可变区抗体的筛选与鉴定

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肝脏 2003年第1期8卷 9-11页

作者：钟彦伟成军张忠东李强洪源王琳李莉张玲霞陈菊梅中国人民解放军第三〇二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的　制备丙型肝炎病毒 (HCV )非结构蛋白NS5 (NS5 )的抗独特型单链可变区抗体scFv(抗 IdscFv) ,为研制HCVNS5的抗 IdscFv疫苗奠定基础。方法　采用噬菌体表面展示技术 ,将HCVNS5单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,从噬菌体单链可变区抗... 详细信息

目的　制备丙型肝炎病毒 (HCV )非结构蛋白NS5 (NS5 )的抗独特型单链可变区抗体scFv(抗 IdscFv) ,为研制HCVNS5的抗 IdscFv疫苗奠定基础。方法　采用噬菌体表面展示技术 ,将HCVNS5单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,从噬菌体单链可变区抗体库中经过 5轮“吸附洗脱扩增”筛选过程 ,随机挑选 80个克隆 ,利用酶联免疫吸附试验 (ELISA)、交叉反应和竞争抑制实验 ,对其进行免疫学检测 ,获得与HCVNS5单克隆抗体结合活性较强的抗 IdscFv阳性克隆 ,并对HCVNS5特异性抗 IdscFv的编码序列进行序列测定分析。结果　筛选得到的HCVNS5抗 IdscFv片段由 786bp组成 ,具有结合HCVNS5单克隆抗体的生物学活性和特异性。结论　用噬菌体抗体库技术能够成功地获得HCVNS5的抗 IdscFv。本实验结果为开展用抗 IdscFv防治丙型肝炎的研究创造了条件。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白5 抗独特型抗体单链可变区抗体

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中国不同人群的抗TTV血清流行病学及TTV基因不同区段的分子流行病学研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2002年第1期16卷 79-81页

作者：李伯安程云侯俊高蓉李靖郑宇苏琴付体权解放军第三○二医院传染病研究所免疫研究室北京100039 解放军第三○二医院传染病研究所病毒研究室北京100039

目的　了解不同人群血清中抗 TTV抗体及ORF1 、ORF2 区段基因的分布状况 ,并分析其间的关系。方法　根据TTV的ORF1 、ORF2 区段的基因序列分别合成巢式PCR引物 ,扩增 2 46例血清标本中的TTV部分基因片段 ;采用TTVORF2 部分基因原核表... 详细信息

目的　了解不同人群血清中抗 TTV抗体及ORF1 、ORF2 区段基因的分布状况 ,并分析其间的关系。方法　根据TTV的ORF1 、ORF2 区段的基因序列分别合成巢式PCR引物 ,扩增 2 46例血清标本中的TTV部分基因片段 ;采用TTVORF2 部分基因原核表达抗原 ,应用酶联免疫吸附试验(ELISA) ,检测相同血清标本中TTV抗体。结果　不同人群TTVORF1 、ORF2 基因及抗体检测的阳性率分别为 :有偿献血者 16 0 % (12 75 ) ,10 7% (8 75 )和 2 5 3% (19 75 ) ,甲型肝炎患者 10 0 % (3 30 ) ,16 7% (5 30 )和 16 7% (5 30 ) ;乙型肝炎患者 47 5 % (19 40 ) ,42 5 % (17 40 )和 2 2 5 % (9 40 ) ,丙型肝炎患者 42 9% (15 35 ) ,37 1% (13 35 )和 2 8 6 % (10 35 ) ;丁型肝炎患者 2 0 0 % (3 15 ) ,2 6 7% (4 15 )和13 3% (2 15 ) ;戊型肝炎患者 16 7% (2 12 )、16 7% (2 12 )、33 3% (4 12 ) ;庚型肝炎患者 2 3 8% (5 2 1) ,38 1% (8 2 1)和 2 3 8% (5 2 1) ;非甲～庚型肝炎患者 6 1 1% (11 18) ,5 0 0 % (9 18)和 44 4% (8 18)。统计分析TTVORF1 与ORF2 基因的检出率相关有统计学意义 (P =0 0 0 0 <0 0 1) ;不同人群间基因检出率相差有统计学意义 (P <0 0 1) ;

关键词：输血传播病毒病毒抗体酶联免疫吸附测定聚合酶链反应血清流行病学

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Gilbert综合征的分子遗传学基础

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中华肝脏病杂志 2002年第5期10卷 395-397页

作者：成军李莉解放军第三0二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

Gilbert综合征(Gilbert's syndrome,GS)是一种遗传性结合型胆红素水平升高造成胆红素排泄障碍,而肝脏功能正常的综合征,是人类最为常见的综合征类型之一.尿苷二磷酸葡糖苷酸基转移酶(UGT)基因启动子区的基因多态性是发生GS的分子遗... 详细信息

Gilbert综合征(Gilbert's syndrome,GS)是一种遗传性结合型胆红素水平升高造成胆红素排泄障碍,而肝脏功能正常的综合征,是人类最为常见的综合征类型之一.尿苷二磷酸葡糖苷酸基转移酶(UGT)基因启动子区的基因多态性是发生GS的分子遗传学基础,由于UGT酶蛋白的表达水平下降,导致肝脏内非结合型胆红素向结合型胆红素的转化过程发生障碍,从而引起以血清非结合型胆红素水平升高为主的临床综合征.

关键词：基因多态性分子遗传学 Gilbert综合征

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乙型肝炎病毒C基因启动子区准种与变异特点的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2002年第3期16卷 264-266页

作者：董菁成军王勤环王刚施双双刘妍夏小兵李莉张国庆斯崇文解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039 北京大学第一医院感染疾病科北京大学第一医院病毒室

目的　研究乙型肝炎病毒 (HBV)C基因启动子区准种与变异的特点。方法　以中国株HBV基因序列为依据 ,设计特异性聚合酶链反应 (PCR)引物 ,自 3例慢性HBV感染患者外周血血清中扩增HBVCP序列 ,克隆入pGEMTeasy质粒 ,随机挑选克隆进行DNA测... 详细信息

目的　研究乙型肝炎病毒 (HBV)C基因启动子区准种与变异的特点。方法　以中国株HBV基因序列为依据 ,设计特异性聚合酶链反应 (PCR)引物 ,自 3例慢性HBV感染患者外周血血清中扩增HBVCP序列 ,克隆入pGEMTeasy质粒 ,随机挑选克隆进行DNA测序以确定病毒的变异程度。结果　测序结果发现HBVCP序列高度保守 ,但在TATA样盒 (1～ 3)可发生多种突变 ,其中 184nt(T→C)位替换突变最为常见 ;在直接重复序列 (DR)Ⅰ上游存有一缺失突变高发区 33 3% (5 15 )。结论　CP区内有一缺失高变区 ,TATA样盒 3的变异可能影响前C蛋白的表达。结果提示HBV长期携带者体内有HBV准种共存。

关键词：乙型肝炎病毒 C基因启动子区准种变异研究

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HCV NS3及其对信号转导途径的影响

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国外医学（流行病学．传染病学分册） 2002年第6期29卷 342-345页

作者：牟劲松刘妍解放军第三〇二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 100039

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3(HCV NS3)在HCV多聚蛋白的成熟和病毒复制过程中发挥了重要作用,同时通过蛋白质之间的相互作用,对肝细胞的生长、代谢,甚至恶性转化产生影响。本文就HCV NS3及其对信号转导途径的影响作了综述。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3 信号转导基因结构

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