检索结果-内蒙古大学图书馆

生命的化学 2007年第1期27卷 10-11页

作者：丛延广胡福泉解放军第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

宏基因组学(metagenomics)的提出是分子生物学领域的一个重要进展。在自然生境中有大量不可培养微生物的存在,无法通过培养法进行研究,而宏基因组学的策略则突破了这一束缚。宏基因组学是从生境中取得全部微生物的基因组,并进行系统研... 详细信息

宏基因组学(metagenomics)的提出是分子生物学领域的一个重要进展。在自然生境中有大量不可培养微生物的存在,无法通过培养法进行研究,而宏基因组学的策略则突破了这一束缚。宏基因组学是从生境中取得全部微生物的基因组,并进行系统研究的方法。该文介绍宏基因组学的基本情况,并着重探讨其在医学研究领域中的可能应用。

关键词：宏基因组学宏基因组医学研究微生物

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结核分枝杆菌PstS1-U1融合抗原的表达、纯化及其免疫活性测定

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第三军医大学学报 2007年第15期29卷 1473-1476页

作者：丛延广刘利陈志瑾饶贤才胡晓梅李明胡勇胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 解放军324医院检验科重庆400020

目的为获得一种适于本地结核病临床诊断用抗原,将结核分枝杆菌38×103抗原——即磷酸盐传送蛋白1(phosphate transport system protein l,PstS1)和尿蛋白1(urine protein1,U1)进行融合表达、纯化并测定其抗原活性。方法用基因拼接... 详细信息

目的为获得一种适于本地结核病临床诊断用抗原,将结核分枝杆菌38×103抗原——即磷酸盐传送蛋白1(phosphate transport system protein l,PstS1)和尿蛋白1(urine protein1,U1)进行融合表达、纯化并测定其抗原活性。方法用基因拼接法将结核分枝杆菌编码PstS1和U1蛋白的基因拼接在一起,克隆到原核表达载体pET28a中,通过IPTG诱导实现其高效表达,采用亲和层析纯化表达产物。用纯化的融合抗原免疫家兔获得抗血清,用该血清以及活动性肺结核患者血清对纯化产物的抗原活性进行测定。结果成功构建了原核表达质粒,对表达产物进行亲和层析纯化,获得相对分子质量为57×103的目的蛋白。经Western blot检测融合抗原能够与活动性肺结核患者血清中的抗体发生结合。结论本研究表达并纯化出PstS1-U1融合抗原,为进一步的应用奠定基础。

关键词：结核分枝杆菌融合抗原原核表达

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PPARα、γ配体对单核细胞来源的巨噬细胞的作用观察

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第三军医大学学报 2002年第8期24卷 924-927页

作者：舒茂琴何作云王国超方玉强李晓霞第三军医大学附属西南医院心血管内科重庆400038 第三军医大学附属新桥医院心血管内科重庆400037 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆40038 第三军医大学解放军总医院临床检验中心北京100853

目的　探讨PPARα和γ配体在动脉粥样硬化病变局部的作用。方法　观察PPARα和γ配体对氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)介导的巨噬细胞清道夫受体A(SRA)基因表达、肿瘤坏死因子 (TNF α)和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)释放、细胞增殖与凋亡的影... 详细信息

目的　探讨PPARα和γ配体在动脉粥样硬化病变局部的作用。方法　观察PPARα和γ配体对氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)介导的巨噬细胞清道夫受体A(SRA)基因表达、肿瘤坏死因子 (TNF α)和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)释放、细胞增殖与凋亡的影响。结果　中低浓度的PPARα和γ配体不但增强ox LDL介导的巨噬细胞TNF α、MMP 9表达 ,而且有促细胞凋亡和抗细胞增殖的作用 ;PPARγ配体不但能显著增加巨噬细胞PPARγmRNA表达 ,而且还能抑制ox LDL介导的巨噬细胞SRA。结论　PPARα和γ基因激活可能有抗炎和抗细胞增生的作用 ,后者可能还有助于减少粥样斑块脂质内容。

关键词：核受体泡沫细胞细胞凋亡单核巨噬细胞过氧化酶体增殖激活受体 γ基因动脉粥样硬化

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Bmi-1调节干性相关分子转录的初步分析

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第三军医大学学报 2009年第9期31卷 768-771页

作者：阮艳蹇锐程小星牛翰婕周恒宇郑宏庭胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 解放军总医院309临床部北京100091 第三军医大学新桥医院内分泌科重庆400037

目的探讨Bmi-1对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子转录表达的影响。方法分别构建鼠源和人源Bmi-1过表达载体pCI-GFP-mbmi1和pCI-GFP-hbmi1;瞬时转染鼠ES细胞CCE和人神经胶质瘤细胞U87;半定量RT-PCR检测胚胎干细胞中Oct-4、Nanog、c-Myc、... 详细信息

目的探讨Bmi-1对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子转录表达的影响。方法分别构建鼠源和人源Bmi-1过表达载体pCI-GFP-mbmi1和pCI-GFP-hbmi1;瞬时转染鼠ES细胞CCE和人神经胶质瘤细胞U87;半定量RT-PCR检测胚胎干细胞中Oct-4、Nanog、c-Myc、Klf4和Sox2及肿瘤细胞中CD133、Nestin等干性分子的表达;克隆形成实验检测CCE细胞自我更新克隆形成能力。结果瞬时转染Bmi-1过表达载体后,CCE细胞中Nanog的表达上调,Oct-4、Sox2和Klf4的表达无明显变化;U87细胞中Nestin和Oct-4表达上调,CD133、Nanog变化不明显;两者c-Myc的转录表达均显著降低;过表达Bmi-1促进CCE细胞自我更新克隆形成。结论Bmi-1参与了对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子的转录调节。

关键词： Bmi-1 干细胞干性相关分子转录调控

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基于分组重量编码和特征选择技术预测外膜蛋白

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第三军医大学学报 2013年第13期35卷 1366-1370页

作者：南重汉邹凌云解放军第3医院传染结核病防治所陕西宝鸡721006 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

目的建立新的机器学习模型,从蛋白质数据集或全基因组蛋白质序列中预测外膜蛋白。方法采用分组重量编码和氨基酸组成计算蛋白质序列特征,采用F-score方法反向选择特征,采用支持向量机算法建立分类模型,在1 087条蛋白质序列构成的数据集... 详细信息

目的建立新的机器学习模型,从蛋白质数据集或全基因组蛋白质序列中预测外膜蛋白。方法采用分组重量编码和氨基酸组成计算蛋白质序列特征,采用F-score方法反向选择特征,采用支持向量机算法建立分类模型,在1 087条蛋白质序列构成的数据集上进行测试,评价预测模型的敏感性、特异性和预测精度,在多个细菌的全基因组蛋白质中预测外膜蛋白。结果新的序列组合编码方法与SVM相结合,区分外膜蛋白和α螺旋跨膜蛋白、球状蛋白、非外膜蛋白的准确度分别达到94.7%、96.4%和94.6%,经特征选择之后,分类准确度分别提高到95.7%、96.9%和95.9%,且在基因组数据集中的预测结果与已知事实相符度高。结论该方法预测准确度优于其他基于序列特征的预测方法,可用于在基因组序列中预测和筛选新的外膜蛋白。

关键词：外膜蛋白分组重量编码特征选择支持向量机

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HeLa细胞感染痢疾杆菌前后差异表达的新EST序列的电子延伸及验证

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世界华人消化杂志 2007年第17期15卷 1905-1913页

作者：黄留玉史兆兴袁静胡福泉军事医学科学院疾病预防控制所北京市100071 中国人民解放军第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆市400038

目的:研究痢疾杆菌福氏2a入侵前和入侵后3h的人上皮细胞差异表达的新基因.方法:采用增毒的痢疾杆菌福氏2a 2457T侵袭HeLa细胞,检查HeLa细胞中细菌的数量并用RT-PCR方法从HeLa细胞中提取总RNA,制备探针.采用含有约3000个代表新基因的芯... 详细信息

目的:研究痢疾杆菌福氏2a入侵前和入侵后3h的人上皮细胞差异表达的新基因.方法:采用增毒的痢疾杆菌福氏2a 2457T侵袭HeLa细胞,检查HeLa细胞中细菌的数量并用RT-PCR方法从HeLa细胞中提取总RNA,制备探针.采用含有约3000个代表新基因的芯片进行芯片杂交,分析杂交结果.将所获得的新的156条EST序列为种子序列用cDNA微阵列实验,以人类EST数据库为基础库,应用siClone软件进行EST拼接、校对并尽可能延长获得大片段或全长cDNA.选取基因组未注释的编码区序列作为新基因进行RT-PCR实验验证.结果:共鉴定到≥3倍或≤0.33的差异表达的代表新基因的EST序列45条,其中25个延伸序列鉴定为与重要的肠道功能相关的已知基因,并有3个在痢疾杆菌侵袭期间高表达的存在显著差异的新EST序列,他们分别名为:NPCCKH12、ADBCSB02和HTBAMG05,这3个基因是新的人基因或假基因.结论:鉴定出了在HeLa细胞感染痢疾杆菌前后差异表达的新EST序列,为进一步研究痢疾杆菌与寄主相互作用奠定了基础.

关键词：痢疾杆菌福氏2a 表达序列标签:cDNA微阵列电子延伸反转录聚合酶链反应基因鉴定

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结核抗原特异性CD4^＋中央型记忆T细胞的检测及分布特性研究

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第三军医大学学报 2009年第16期31卷 1549-1551页

作者：牛翰婕程小星王心静曹志红董梅佟爱华第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室重庆400038 解放军总医院第二附属医院结核病研究室北京100091 解放军总医院第二附属医院检验科北京100091

目的比较活动期肺结核患者和纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)试验阳性健康人记忆T细胞的产生和分布特性。方法取乙二胺四乙酸(ethylene diaminete traacetic acid,EDTA)抗凝静脉血,Ficoll进行密度梯度离心获取PBMCs。采... 详细信息

目的比较活动期肺结核患者和纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)试验阳性健康人记忆T细胞的产生和分布特性。方法取乙二胺四乙酸(ethylene diaminete traacetic acid,EDTA)抗凝静脉血,Ficoll进行密度梯度离心获取PBMCs。采用卡介苗刺激后,通过CD4、CD154、CCR7、CD45RA4种抗体共染色,用流式细胞仪检测结核抗原特异性CD4+记忆T细胞。结果以CD4+CD154+双阳性区设门,研究结核抗原特异性CD4+记忆T细胞,结果显示,肺结核患者CD4+CD154+CD45RA-CCR7+中央型T淋巴细胞亚群分布频率显著降低(P<0.05),CD4+CD154+CD45RA+CCR7+初始T细胞亚群的比例明显增高(P<0.05)。结论肺结核患者CD4+中央型记忆T淋巴细胞亚群的产生存在异常,可能与免疫功能低下和结核病发病密切相关。

关键词：结核免疫 CD4^+T细胞记忆T细胞

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