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第十届全国免疫学学术大会

作者：孔祥瑞肖漓周林高钰马锡慧石炳毅中国人民解放军第三〇九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室

目的 :分析在以西罗莫司为主联合槐耳颗粒及胸腺法新的药物干预下,Fox P3+Treg在肝癌肝移植术后患者免疫调节中作用的变化;方法 :以我院肝移植患者临床资料为研究对象,分析肝移植术后机体Treg的变化趋势,对效应T细胞的影响以及相关细胞... 详细信息

目的 :分析在以西罗莫司为主联合槐耳颗粒及胸腺法新的药物干预下,Fox P3+Treg在肝癌肝移植术后患者免疫调节中作用的变化;方法 :以我院肝移植患者临床资料为研究对象,分析肝移植术后机体Treg的变化趋势,对效应T细胞的影响以及相关细胞因子的变化。结果 :肝癌肝移术后患者体内Fox P3+Treg水平呈短期内先下降后上升的趋势,效应性T细胞变化趋势与之呈相关,与非肝癌肝移植患者相比,肝癌患者术后Treg水平显著降低(P<0.05);细胞因子方面,肝移植术后IL-10、TGF-β水平显著下降(P<0.05),且与Treg细胞的变化相关,而IL-2、INF-γ水平却明显上升(P<0.05),且与Treg细胞的变化相反。结论 :在肝癌肝移植患者,三联药物干预可通过影响效应T细胞及细胞因子的表达及分析,显著改善Treg细胞的免疫调节功能。

关键词：肝癌肝移植免疫调节调节性T细胞

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三联药物干预后肝癌肝移植术后调节性T细胞作用变化的分析

三联药物干预后肝癌肝移植术后调节性T细胞作用变化的分析

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：孔祥瑞肖漓周林高钰马锡慧石炳毅中国人民解放军第三○九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室 100091

目的：分析在以西罗莫司为主联合槐耳颗粒及胸腺法新的药物干预下,FoxP3+Treg在肝癌肝移植术后患者免疫调节中作用的变化;方法：以我院肝移植患者临床资料为研究对象,分析肝移植术后机体Treg的变化趋势,对效应T细胞的影响以及相关细胞... 详细信息

目的：分析在以西罗莫司为主联合槐耳颗粒及胸腺法新的药物干预下,FoxP3+Treg在肝癌肝移植术后患者免疫调节中作用的变化;方法：以我院肝移植患者临床资料为研究对象,分析肝移植术后机体Treg的变化趋势,对效应T细胞的影响以及相关细胞因子的变化。

关键词：肝癌肝移植免疫调节调节性T细胞

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肾移植受者外周血T淋巴细胞因子的表达变化

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中华医学杂志 2014年第32期94卷 2506-2509页

作者：肖漓何秀云周文强樊文梅魏玉香高钰马锡慧孔祥瑞韩永许晓光黄海燕王新颖石炳毅解放军第三0九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的：探讨外周血中T淋巴细胞因子检测在肾移植排斥反应中的临床应用价值。方法将2010年1月至2012年1月在解放军第三〇九医院移植研究所进行肾移植术的31例肾移植受者及15名健康志愿者纳入研究，肾移植受者根据入组标准分为急性排斥反应... 详细信息

目的：探讨外周血中T淋巴细胞因子检测在肾移植排斥反应中的临床应用价值。方法将2010年1月至2012年1月在解放军第三〇九医院移植研究所进行肾移植术的31例肾移植受者及15名健康志愿者纳入研究，肾移植受者根据入组标准分为急性排斥反应组11例和肾功能稳定组20例。分别于移植术前1天，术后第1、7、14、28天，以及排斥反应发生时收集受者外周血，采用流式微球捕获技术（ CBA）分别检测白细胞介素（ IL）-17、干扰素（ IFN）-γ、肿瘤坏死因子（ TNF）、IL-10、IL-6、IL-4和IL-2共7种T淋巴细胞因子，分析3组的细胞因子水平及细胞因子间的相关性。结果31例肾移植受者术前外周血浆中 IL-17A、TNF、IL-10和IL-2水平分别为（3.40±1.29）、（1.79±0.53）、（2.73±0.65）、（1.79±1.02） ng/L，均低于健康对照组[（4.52±2.01）、（3.36±1.09）、（3.91±0.42）、（3.12±1.07）ng/L，均P＜0.05]，而IFN-γ、IL-6、IL-4水平与健康对照比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。急性排斥反应组中IL-17A、IFN-γ、IL-10、IL-6水平分别为（9.47±4.75）、（5.01±2.23）、（12.20±5.79）、（6.55±3.45） ng/L，均高于肾功能稳定组[（4.39±.26）、（2.90±0.87）、（5.68±2.25）、（2.10±0.70）ng/L，均P＜0.05]；TNF、IL-4、IL-2水平两组差异无统计学意义（均P＞0.05）。急性排斥反应组和肾功能稳定组细胞因子之间的相关性趋势一致，其中IL-17A与IFN-γ、IL-4呈正相关（Pearson检验，r＝0.519、0.395，均P＜0.01），IFN-γ与IL-4、IL-2呈正相关（r＝0.276、0.335，均P＜0.05），TNF与IL-4呈正相关（r＝0.423，P＜0.05），IL-10与IL-6呈正相关（ r＝0.361，P＜0.05）。结论细胞因子在肾移植排斥反应中发挥重要作用，深入了解其作用机制能够为临床提供实验依据和防治思路。

关键词：细胞因子类肾移植移植物排斥

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肾移植受者外周血巨细胞病毒特异性CTL的比例及其意义探讨

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中华医学杂志 2014年第42期94卷 3289-3292页

作者：肖漓石炳毅黄海燕王新颖樊文梅魏玉香高钰周文强何秀云许晓光韩永解放军第三○九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的建立检测巨细胞病毒（CMV）特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的新方法,探讨其在肾移植受者外周血的比例及其意义.方法筛选2009年1月至2010年12月期间在解放军第三○九医院全军器官移植研究所接受初次肾移植受者共计30例入组,健康... 详细信息

目的建立检测巨细胞病毒（CMV）特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的新方法,探讨其在肾移植受者外周血的比例及其意义.方法筛选2009年1月至2010年12月期间在解放军第三○九医院全军器官移植研究所接受初次肾移植受者共计30例入组,健康体检志愿者10名作为健康对照组.采用四聚体技术（tetramer technology）,在流式细胞仪上直接检测各组的CMV抗原特异性CTL的表达比例.结果移植组和健康对照组外周血CMV抗原特异性CTL（CMV-pp65特异性CD8＋T细胞）的阳性率在0.16％～7.21％.移植患者根据是否发生CMV活动性感染,分为巨细胞病毒阳性组（CMV＋组,n=15）和巨细胞病毒阴性组（CMV-组,n=15）.CMV＋组患者的CMV抗原特异性CTL的比例（2.95％ ±0.62％）显著高于CMV-组患者（1.17％±0.45％）和健康对照组（0.65％±0.17％）,差异具有统计学意义（P=0.003、0.006）.CMV＋组患者在CMV抗原（CMV-pp65）阳性期,其CMV抗原特异性CTL的比例为（2.95％±0.62％）,转阴后,比例明显下降至（1.50％±0.32％）.CMV＋组患者的CMV抗原特异性CTL比例与CMV-pp65阳性细胞数呈显著正相关（Pearson检验,r=0.871,P＜0.01）.结论肾移植受者外周血CMV特异性CTL比例对于判断CMV预后具有重要评价指导意义,为今后肾移植术后CMV感染靶向治疗提供依据.

关键词：肾移植巨细胞病毒细胞毒性T淋巴细胞四聚体技术

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人类白细胞抗原G与移植免疫耐受

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中华医学杂志 2014年第42期94卷 3281-3283页

作者：石炳毅解放军第三○九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

人类白细胞抗原-G（human leucocyte antigen G,HLA-G）是一种非经典的主要组织相容性复合体Ⅰ类分子（major histocompatibility complex,MHC-Ⅰ）.近年来,对HLA-G基因与分子的研究日趋增多.自1989年Geraghty首次报道克隆成功HLA-G[1],... 详细信息

关键词：人类白细胞抗原G 移植免疫耐受组织相容性复合体Ⅰ类分子 HLA-G基因 MHC-Ⅰ 国际会议研究所免疫学

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外周血中性粒细胞CD64检测在肾移植受者肺部感染诊断中的应用价值

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中华器官移植杂志 2013年第8期34卷 469-472页

作者：肖漓何秀云周文强魏玉香樊文梅高钰马锡慧孔祥瑞韩永许晓光黄海燕王新颖石炳毅解放军第三O九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨肾移植受者外周血中性粒细胞CD64指数在移植后细菌和巨细胞病毒（CMV）感染中的应用价值。方法2007年1月至2010年7月间79例受者纳入研究，术后受者均采用以他克莫司为基础的免疫抑制方案。依据病原学诊断结果分为细菌感染组（4... 详细信息

目的探讨肾移植受者外周血中性粒细胞CD64指数在移植后细菌和巨细胞病毒（CMV）感染中的应用价值。方法2007年1月至2010年7月间79例受者纳入研究，术后受者均采用以他克莫司为基础的免疫抑制方案。依据病原学诊断结果分为细菌感染组（42例）、CMV感染组（17例）以及无感染的功能稳定组（20例）。CMV感染的诊断采用间接免疫荧光方法。采用流式细胞术检测移植前后受者外周血CD64指数和T淋巴细胞绝对值，用全自动血细胞分析仪检测白细胞数量和中性粒细胞的数量。结果功能稳定组、细菌感染组和CMV感染组术前外周血白细胞、CD3’细胞和中性粒细胞绝对值的差异无统计学意义（P〉0．05）。功能稳定组术后3个月、细菌感染组和CMV感染组感染时受者外周血的白细胞、CD3’细胞和中性粒细胞绝对值的变化趋势一致，即CMV感染组绝对值均低于功能稳定组和细菌感染组，而细菌感染组高于功能稳定组，差异均有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。术前以及术后1、3、7和14d时3组受者外周血中性粒细胞CD64指数的差异无统计学意义（P〉0．05）。细菌感染组感染时中性粒细胞CD64指数为4．087±1．485，与功能稳定组术后3个月时的1．031±0．412相比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；细菌感染组与CMV感染组感染时的1．694±0．801相比较，差异也有统计学意义（P〈0．01）；CMV感染组感染时与功能稳定组术后3个月相比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。CD64指数预测细菌感染的最适cutoff值为1．51，其敏感性为95．3％，特异性为86．5％，曲线下面积（AUC）为0．91。CD64指数预测CMV感染的最适cutoff值为1．48，其敏感性为52．9％，特异性为90．0％，AUC为0．76。结论CD64指数可以作为诊断肾移植受者细菌感染的参考指标，具有较高的敏感性、特异性及准确性。

关键词：肾移植 CD64 感染流式细胞术

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尿液与血液病毒载量在肾移植受者BK病毒性肾病诊断中的应用

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中华器官移植杂志 2013年第10期34卷 595-599页

作者：范宇石炳毅钱叶勇解俊杰王新颖解放军第三0九医院器官移植研究所泌尿外科器官移植研究所器官移植与免疫调节北京市重点实验室北京100091

目的对比尿液和血液样本BK病毒DNA载量检测在肾移植受者BK病毒性肾病诊断中的应用价值。方法2011年2月至2012年1月间接受同种异体肾移植的受者88例，应用实时荧光定量聚合酶链反应法对其血液和尿液样本定期进行BK病毒DNA载量检测；对具... 详细信息

目的对比尿液和血液样本BK病毒DNA载量检测在肾移植受者BK病毒性肾病诊断中的应用价值。方法2011年2月至2012年1月间接受同种异体肾移植的受者88例，应用实时荧光定量聚合酶链反应法对其血液和尿液样本定期进行BK病毒DNA载量检测；对具备指征的移植受者行移植肾组织活检，通过免疫组织化学法明确BK病毒性肾病（BKVN）诊断。结果88例中病毒尿症者35例（39．8％），病毒血症者18例（20．5％），病理学明确诊断为BKVN者5例（5．7％）。统计学分析显示，BKVN患者尿液和血液样本中的BK病毒DNA载量均显著高于非BKVN患者（P〈0．05）。尿液样本预测BKVN发生的敏感性为100％，特异性为57．7％（P=0．003）；血液样本预测BKVN发生的敏感性为100％，特异性为82．9％（P=0．0002）。将尿液BK病毒DNA〉~10^5拷贝／ml和血液病毒DNA≥10^5拷贝／ml做为预测诊断BKVN发生的阳性指标时，尿液阳性指标的阳性预测值为26．3％，阴性预测值为95．7％；血液阳性指标的阳性预测值为83．3％，阴性预测值为98．8％。结论血液BK病毒DNA载量≥10^5拷贝／ml，可作为辅助诊断BKVN发生的阳性指标，而尿液BKVDNA载量监测可作为BKV感染的筛查。

关键词：肾移植 BK病毒 BK病毒性肾病聚合酶链反应

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BK病毒活化对移植肾功能的影响

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中华器官移植杂志 2013年第7期34卷 404-406页

作者：王新颖范宇韩永解俊杰石炳毅军事医学科学院北京100850 解放军第三0九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室

目的探讨肾移植后BK病毒活化情况对移植肾功能的影响。方法88例-肾移植受者分别于术后0．5、1、2、3、6、9和12个月采集尿液和血液，应用实时定量聚合酶链反应方法检测BK病毒DNA载量。结果88例肾移植受者中，发生BK病毒尿症27例，发生率... 详细信息

目的探讨肾移植后BK病毒活化情况对移植肾功能的影响。方法88例-肾移植受者分别于术后0．5、1、2、3、6、9和12个月采集尿液和血液，应用实时定量聚合酶链反应方法检测BK病毒DNA载量。结果88例肾移植受者中，发生BK病毒尿症27例，发生率为30．7％，其中持续性17例，一过性10例；37．0％（10／27）的BK病毒尿症继续发展为病毒血症，其中持续性和一过性者各5例，移植肾病理活检确诊BK病毒肾病（BKVAN）4例。持续BK病毒血症受者的BK病毒DNA载量较一过性者显著升高，差异有统计学意义（P〈0．05），诊断为BK病毒血症时血清肌酐显著升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论肾移植术后BK病毒血症进展时移植肾功能受损，定期规律检测BK病毒及临床干预BK病毒血症能有效预防移植肾功能损伤。

关键词：肾移植 BK病毒

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肾移植受者外周血单个核细胞中miR-29与急性排斥反应的相关性研究

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中华器官移植杂志 2013年第3期34卷 174-177页

作者：黄海燕陈梅梅许晓光钱叶勇蔡明韩永王新颖石炳毅解放军第三0九医院全军器官移植研究所器官移植与免疫调节北京市重点实验室北京100091 湖北省荆门市第二人民医院药剂科

目的了解肾移植受者外周血单个核细胞（PBMC）中的微小RNA（miRNA-29（miR-29）家族分子在急性排斥反应（AR）发生及恢复后的变化。方法15例肾移植后发生AR的受者，分别在AR发生时（AR组）和恢复后（恢复组）采集外周血，提取PBMC的总RN... 详细信息

目的了解肾移植受者外周血单个核细胞（PBMC）中的微小RNA（miRNA-29（miR-29）家族分子在急性排斥反应（AR）发生及恢复后的变化。方法15例肾移植后发生AR的受者，分别在AR发生时（AR组）和恢复后（恢复组）采集外周血，提取PBMC的总RNA，共采集30个样本。用实时荧光定量聚合酶链反应方法分别对miR-29a、miR-29b和miR-29c的表达水平进行相对定量。通过PicTar和TargetScan预测miR-29调控的靶基因，再通过组织特异性数据库，对血液中miRNA靶基因进行筛查过滤。对miR-29对应的靶基因进行基因本体论（G0）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析，得到miR-29可能的生物学过程和作用通路。结果miR-29a和-29c在恢复组的表达水平明显高于AR组（P〈0．05），而两组miR-29b的表达的差异无统计学意义（P〉0．05）。GO中，有14个生物学过程在预测的靶基因中被有意义的富集（P〈0．05）；在KECG中，3条途径被有效富集（P〈0．05）。结论miR-29通过调控代谢、生物学合成等生物学过程和（或）黏着斑通路等影响AR的恢复。受者PBMC中miR-29的检测未来可能会成为判断AR后移植。肾转归的微创检测方法。

关键词：急性排斥反应微RNAs 聚合酶链反应肾移植

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建立结核分枝杆菌抗原K6IFN-γ ELISPOT用于结核病辅助诊断

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中国免疫学杂志 2013年第6期29卷 600-604,609页

作者：蒋丽气黄香玉陈红兵李静何珂邵进士张春青何秀云西南大学生命科学学院重庆400715 解放军第三0九医院器官移植与免疫调节北京市重点实验室北京100091 解放军第三0九医院结核病研究所北京100091

目的:建立结核分枝杆菌抗原K6作为刺激源的IFN-γELISPOT检测方法,并初步评价该方法用于结核病辅助诊断价值。方法:结核病患者和非结核性肺部相关疾病患者外周血单核细胞(PBMC)分别加入预包被ELISPOT板对应孔,分别加入抗原K6、***试剂... 详细信息

目的:建立结核分枝杆菌抗原K6作为刺激源的IFN-γELISPOT检测方法,并初步评价该方法用于结核病辅助诊断价值。方法:结核病患者和非结核性肺部相关疾病患者外周血单核细胞(PBMC)分别加入预包被ELISPOT板对应孔,分别加入抗原K6、***试剂盒抗原A和B,每个PBMC样品设阴性对照孔和阳性质控孔。37℃、5%CO2培养20～24小时,弃细胞,依次加入酶标检测抗体、底物显色获得斑点。ELISPOT读板仪进行斑点计数和分析。结果:K6和***试剂盒检测敏感度分别为80.0%和85.9%、特异度分别为83.9%和73.2%,两者比较差异均无统计学意义。K6作为刺激原的IFN-γELISPOT诊断结核病阳性预示值为88.3%,阴性预示值为73.4%。结核病组,抗原B刺激PBMC分泌IFN-γ的细胞斑点数(SFC)平均值分别高于抗原A和K6(P=0.011和P=0.004),抗原A和K6刺激PBMC分泌IFN-γ的SFC平均值比较差异无统计学意义(P>0.05)。非结核性肺部相关疾病组,抗原A、抗原B和K6刺激PBMC分泌IFN-γ的SFC平均值两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:K6可作为结核病IFN-#ELISPOT诊断候选抗原之一。

关键词：结核病抗原K6 ELISPOT IFN-γ

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