检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验和临床病毒学杂志 2008年第5期22卷 373-375页

作者：沈宏辉孙红岩赵景民侯俊白冰珂胡燕孔维貌盼勇解放军第三○二医院传染病研究所病毒研究室北京100039 解放军总医院第一附属医院吉林大学生命科学学院

目的研究慢性乙型肝炎患者血清中sCD40水平及其临床意义。方法采用酶联免疫方法检测176例慢性乙型肝炎患者血清中sCD40浓度，分析患者血清中sCD40浓度与临床轻重程度及肝组织不同炎症坏死分级的关系。结果慢性乙型肝炎患者血清中sCD40... 详细信息

目的研究慢性乙型肝炎患者血清中sCD40水平及其临床意义。方法采用酶联免疫方法检测176例慢性乙型肝炎患者血清中sCD40浓度，分析患者血清中sCD40浓度与临床轻重程度及肝组织不同炎症坏死分级的关系。结果慢性乙型肝炎患者血清中sCD40浓度明显高于健康人，临床病情越重、肝组织炎症坏死越明显，sCD40浓度越高；在ALT低于80IU／L的患者中，sCD40浓度大于80pg／ml的患者中肝组织炎症坏死G2以上的占65舟5％，明显高于sCD40浓度低于80pg／m1的患者。结论血清中sCD40水平与肝组织炎症坏死的程度呈正相关，可作为用于辅助判断乙肝患者病情的免疫学指标。

关键词：肝炎乙型慢性抗原 CD40 炎症

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抗炎保肝治疗在肝病临床中的应用与地位

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中华肝脏病杂志 2008年第9期16卷 714-716页

作者：张玲霞高志良扈晓宇范振平曲建慧罗生强解放军第三0二医院传染病研究所病毒性肝炎研究室北京100039 中山大学附属第三医院感染科成都中医药大学附属医院

肝脏炎症坏死及其所致的肝纤维化是疾病进展的主要病理学基础，因此，如能找出病因，在对因治疗的基础上有效控制肝组织炎症，有可能减少肝细胞破坏和延缓肝纤维化的发展。如慢性乙型肝炎在免疫清除期，应用干扰索仅及核苷类似物就能有... 详细信息

肝脏炎症坏死及其所致的肝纤维化是疾病进展的主要病理学基础，因此，如能找出病因，在对因治疗的基础上有效控制肝组织炎症，有可能减少肝细胞破坏和延缓肝纤维化的发展。如慢性乙型肝炎在免疫清除期，应用干扰索仅及核苷类似物就能有效抑制病毒，从病原学控制的角度阻止病毒性肝炎肝组织炎症的发生。而抗炎保肝治疗只是其综合治疗的一部分，须在病原学或特异性治疗的基础上适当选用抗炎保肝药物。

关键词：肝病药物疗法抗炎保肝

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拉米夫定耐药患者乙型肝炎病毒多聚酶区基因突变的检测分析

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肝脏 2008年第2期13卷 104-107页

作者：许彪成军徐东平李晓东毛远丽王海滨马洪滨胡瑾华王业东解放军第三○二医院全军传染病研究所病毒性肝炎研究室北京100039 解放军第三○二医院全军传染病研究所肝衰竭治疗研究中心北京100039 北京地坛医院解放军第三○二医院全军传染病研究所临床检验中心北京100039 解放军第三○二医院院办北京100039

目的建立以基因测序检测乙型肝炎病毒(HBV)多聚酶区基因突变的方法,并分析拉米夫定耐药者HBV多聚酶区基因主要耐药突变的分布情况。方法采用巢式PCR方法对174例拉米夫定耐药患者血清HBV多聚酶区进行扩增,对PCR产物进行直接测序,将YMDD... 详细信息

目的建立以基因测序检测乙型肝炎病毒(HBV)多聚酶区基因突变的方法,并分析拉米夫定耐药者HBV多聚酶区基因主要耐药突变的分布情况。方法采用巢式PCR方法对174例拉米夫定耐药患者血清HBV多聚酶区进行扩增,对PCR产物进行直接测序,将YMDD突变阳性与阴性的病例分别进行HBV耐药基因突变的分析和比较。结果本研究154例YMDD突变阳性的患者中有10种突变类型,其中以rt M204I突变最多见,为46例(29.9%),其次为rt L180M/M204V(26.6%)、rt L180M/M204I(17.5%)、rt V173/L180M/M204V(13.0%)、rt M204V(2.6%)、rt L180M/M204V/M204I(5.8%)、rt V173L/L180M/M204V/M204I(1.3%)、rt V173L/M204I rt M204I/M204V(1.3%)、rt M204I/M204V(1.3%)。另外,rt M204V联合rt L180M或rt V173L的突变率较rt M204I联合rt L180M或rt V173L显著增高。从rt L180M突变角度来看,rt L180M与rt M204V的联合突变率最高,其次为rt L180M联合rt M204I突变,rt L180M与rt L173M的联合突变率最低。从rt V173L突变角度来看,rt V173L联合rt M204V或rt L180M突变的发生率均高于rt V173L联合rt M204I的突变率,且rt V173L突变多联合rt M204V和rt L180M突变同时发生。结论拉米夫定耐药株的氨基酸突变复杂多样,需要对拉米夫定耐药多个相关位点进行检测。

关键词：肝炎病毒,乙型变异拉米夫定 YMDD

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抗人红细胞抗体和HIV抗原融合蛋白的构建及活性鉴定

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中华实验和临床病毒学杂志 2007年第1期21卷 76-78页

作者：胡燕杨健洋朱雷侯俊沈宏辉貌盼勇解放军第三0二医院传染病研究所病毒研究室北京100039

目的构建及表达抗红细胞（RBC）单链抗体（ScFv）和HIV抗原的融合蛋白，并做活性测试。方法将鼠抗人红细胞单链抗体可变区重链、轻链基因与HIV抗原基因相连，重组于高效表达载体中，并在大肠埃希菌中表达。结果经ELISA检测和红细胞... 详细信息

目的构建及表达抗红细胞（RBC）单链抗体（ScFv）和HIV抗原的融合蛋白，并做活性测试。方法将鼠抗人红细胞单链抗体可变区重链、轻链基因与HIV抗原基因相连，重组于高效表达载体中，并在大肠埃希菌中表达。结果经ELISA检测和红细胞凝集检测，证明表达的融合蛋白具有HIV抗原和抗人红细胞的双重活性，可使含有HIV抗体的红细胞悬液凝集。结论融合蛋白构建成功，可用于HIV的快速检测。

关键词：融合蛋白 HIV 凝集试验

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小儿慢性丙型肝炎外周血T细胞亚群和TH1／TH2型细胞因子的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2007年第1期21卷 26-28页

作者：董漪张鸿飞陈昊李靖杨晓晋朱世殊程云解放军第三0二医院感染五科北京 100039 解放军第三0二医院传染病研究所免疫室北京 100039

目的通过研究小儿慢性丙型肝炎外周血T细胞亚群及TH1／TH2型细胞因子的表达，进一步探讨小儿慢性丙型肝炎的免疫发病机制。方法（1）流式细胞仪（FACS）检测16例慢性丙型肝炎患儿及10例正常对照外周血T细胞亚群。（2）将慢性丙型肝炎... 详细信息

目的通过研究小儿慢性丙型肝炎外周血T细胞亚群及TH1／TH2型细胞因子的表达，进一步探讨小儿慢性丙型肝炎的免疫发病机制。方法（1）流式细胞仪（FACS）检测16例慢性丙型肝炎患儿及10例正常对照外周血T细胞亚群。（2）将慢性丙型肝炎患儿和正常对照外周血单个核细胞（PBMC）体外培养72h后，用ELISA法检测培养上清中TH1型细胞因子（IFN-γ、IL-2、IL-12和TNF-γ）和TH2型细胞因子（IL-4、IL-10）的浓度。结果（1）CD4^＋细胞无明显变化。CD8^＋细胞与正常对照比较明显升高（P〈0．05）。CD3^＋细胞升高，CD4^＋／CD8^＋比值下降，但与正常对照比较无统计学意义（P〉0．05）。（2）PBMC培养上清中IFN-γ、IL-10和TNF-α的水平明显升高（P〈0．01），而没有检测到IL-2、IL-4、IL-12的基础分泌。结论慢性丙型肝炎患儿体内T淋巴细胞存在数量和功能的异常，CD8^＋细胞数升高，CD4^＋细胞功能异常，表现在以TH2型细胞因子的分泌为主。这可能与丙肝病毒（HCV）感染的慢性化有关。

关键词：儿童保健服务肝炎,丙型,慢性 T淋巴细胞细胞因子类

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HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测试剂盒的研制与评价

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中华实验和临床病毒学杂志 2007年第4期21卷 391-393页

作者：胡燕侯俊冯燕青冯长访史素娟沈宏辉王志杰王保君貌盼勇解放军第三○二医院传染病研究所病毒研究室 100039 解放军第三○二医院传临床检验中心 100039 北京科卫临床诊断试剂有限公司

目的研制HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测酶免疫试剂盒并评价其实用性。方法联合使用基因工程HIV1/2型抗原和抗HIVP24单克隆抗体包被酶联反应板,以辣根过氧化物酶标记的HIV1/2型抗原和生物素化的兔抗HIVP24抗体作为标记物,研制了联合检测H... 详细信息

目的研制HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测酶免疫试剂盒并评价其实用性。方法联合使用基因工程HIV1/2型抗原和抗HIVP24单克隆抗体包被酶联反应板,以辣根过氧化物酶标记的HIV1/2型抗原和生物素化的兔抗HIVP24抗体作为标记物,研制了联合检测HIV1/2抗体和P24抗原的ELISA诊断试剂,并对其特异性、敏感性、稳定性等进行评价和临床考评。结果检测P24抗原质控品的灵敏度可达0.2ng/ml;与雅培公司试剂比较检测78份AIDS患者血清和85份正常人血清、对照检测中国药品生物制品检定所研制的HIV参比血清,特异度和灵敏度均为100%。临床考核检测12051份各种血清,灵敏度为100%(543/543),特异度为99.48%(11448/11508)。试剂在37℃放置6d后,试验结果无明显差异。结论本试剂盒具备特异度强、敏感度高、稳定性好、操作简便等优点,可以一步检出HIV特异性抗体和HIVP24抗原,缩短了HIV感染的检测窗口期,适用于HIV感染的实验室诊断和流行病学调查。

关键词： HIV 抗原病毒抗体单克隆试剂盒诊断

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基因表达谱芯片技术筛选乙型肝炎病毒X蛋白反式调节基因12

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临床荟萃 2007年第23期22卷 1694-1697页

作者：宫嫚成军刘妍李筠解放军三0二医院传染病研究所病毒性肝炎研究室北京100039 北京市地坛医院传染病研究所北京100011

目的应用基因表达谱芯片技术研究乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因12(XTP12)的反式调节基因。方法以分子生物学技术构建XTP12的真核表达载体[pcDNA 3.1(-)]-XTP12,以表达质粒pcDNA 3.1(-)-XTP12转染人肝母细胞瘤细胞系(HepG2)细胞,以空载... 详细信息

目的应用基因表达谱芯片技术研究乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因12(XTP12)的反式调节基因。方法以分子生物学技术构建XTP12的真核表达载体[pcDNA 3.1(-)]-XTP12,以表达质粒pcDNA 3.1(-)-XTP12转染人肝母细胞瘤细胞系(HepG2)细胞,以空载体pcDNA 3.1(-)为平行对照,制备转1染后的细胞裂解液,提取mRNA。应用基因表达谱芯片技术对差异表达mRNA进行检测和分析。结果HepG2细胞经转染XTP12后,有21条基因表达增强,14条基因表达降低。这些基因包括免疫调节、细胞凋亡、信号转导等基因。结论XTP12基因的表达对于肝细胞基因表达谱有显著影响。DNA芯片技术是分析反式激活靶基因的有效技术途径。

关键词：肝炎病毒乙型基因表达谱 X蛋白反式激活基因芯片

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自体细胞因子诱导杀伤细胞治疗HBV感染肝硬变患者的临床疗效分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2007年第1期21卷 64-66页

作者：苏海滨李捍卫赵洪兰施明张冰汤紫荣雷周云王慧芬王福生解放军第三0二医院感染十三科北京100039 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所解放军第三0二医院传染病研究所生物治疗研究中心

目的观察自体细胞因子诱导杀伤细胞（CIK细胞）治疗HBV DNA阳性肝硬化患者的近期疗效。方法 33例HBV DNA阳性肝硬化患者给予CIK细胞治疗，在体外培养前后以及回输体内后检测CD3^＋、CD3^＋ CD4^＋、CD3^＋ CD8^＋、CD3^＋ CD56^＋、CD... 详细信息

目的观察自体细胞因子诱导杀伤细胞（CIK细胞）治疗HBV DNA阳性肝硬化患者的近期疗效。方法 33例HBV DNA阳性肝硬化患者给予CIK细胞治疗，在体外培养前后以及回输体内后检测CD3^＋、CD3^＋ CD4^＋、CD3^＋ CD8^＋、CD3^＋ CD56^＋、CD25^＋细胞以及mDC和pDC。比较治疗前后病毒学指标及肝脏功能的变化。结果培养结束以及回输体内后，CD3^＋细胞、CD3^＋ CD8^＋细胞、CD3^＋ CD56^＋细胞较培养前显著升高，mDC和pDC在回输后也明显增高。12例患者HBV DNA阴转，4例患者拷贝数下降大于2个log。在14例HBeAg阳性患者中有10例阴转，2例出现HBeAb转换。肝脏功能较治疗前有所好转。所有患者均能耐受治疗。结论 CIK细胞可明显提高免疫效应细胞数量，具有一定的抗病毒效应作用，毒副作用低。

关键词：细胞系细胞因子类肝硬化肝炎,乙型

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自身免疫性肝炎新型抗原分子高迁移率族蛋白B1的克隆表达鉴定及蛋白纯化

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实用预防医学 2007年第1期14卷 53-56页

作者：赵擎辛绍杰胡燕侯俊貌盼勇解放军军医进修学院北京100853 解放军第三O二医院感染三科解放军第三O二医院传染病研究所病毒研究室

目的获得高纯度的人高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1),为制备单克隆抗体及研究其与自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)的关系打基础。方法应用PCR从乳腺文库中扩增得到HMGB1基因片段,并将其克隆到pET2... 详细信息

目的获得高纯度的人高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1),为制备单克隆抗体及研究其与自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)的关系打基础。方法应用PCR从乳腺文库中扩增得到HMGB1基因片段,并将其克隆到pET28a(+)载体上,对获得的pET28a(+)-HMGB1重组质粒扩增后进行PCR、酶切和测序鉴定。将鉴定完全正确的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析和Western blotting鉴定。最后进行大量诱导并纯化,得到带His标签的HMGB1蛋白。结果成功构建pET28a(+)-HMGB1重组质粒,并经诱导表达,得到了纯化的His-HMGB1蛋白。结论构建pET28a(+)-HMGB1重组质粒并得到其表达蛋白,为今后深入研究HMGB1在AIH中的作用机理提供有力的实验工具。

关键词：高迁移率族蛋白B1 自身免疫性肝炎克隆表达蛋白纯化

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SARS冠状病毒N蛋白相关蛋白的发现及鉴定

SARS冠状病毒N蛋白相关蛋白的发现及鉴定

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全军第十次传染病学学术研讨会

作者：戚扬舒翠丽孙杰周继文李泊安李靖迟淑萍丈翠容何卫平程云解放军第三0二医院传染病研究所免疫室北京 100039

严重急性呼吸综合征(severe acute re-spiratorysyndrome，SARS)是一种具有明显传染性、可累及多脏器系统的特殊肺炎，其病原体为SARS冠状病毒(SARScoron-avirus，SARS-CoV)。SARS-CoV的N蛋白(nucleocapsid protein)是一种重要的结构蛋白，位于病毒颗粒的核心部分与病毒RNA结合，在病毒的包装等过程中起重要作用。本研究构建了pCDNA3.1/N载体，瞬时转染人胚肺成纤维细胞，将抗Sars冠状病毒N蛋白的单克隆抗体(mAb )交联到Sepharose 4B，采用免疫共沉淀方法，寻找到与N蛋白相关的myosin ⅡA ( non-muscle)蛋白，为SARS-CoV的研究提供了新方向和依据。

关键词： SARS 冠状病毒 N蛋白急性呼吸综合征免疫共沉淀

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