检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究与临床康复 2009年第5期13卷 837-840页

作者：施晓敏傅志仁朱有华罗明丁国善王正昕郭闻渊倪之嘉傅宏孟进解放军第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海市200003

背景:猪肝结构与人类较为相似,结构相对简单,是研究活体肝移植较好的模型之一。供肝体积过小是临床成人活体肝移植面临的主要问题之一,探索稳定高效的动物模型对于推动小肝综合征的相关研究具有重要意义。目的:对体内和体外2种小体积肝... 详细信息

背景:猪肝结构与人类较为相似,结构相对简单,是研究活体肝移植较好的模型之一。供肝体积过小是临床成人活体肝移植面临的主要问题之一,探索稳定高效的动物模型对于推动小肝综合征的相关研究具有重要意义。目的:对体内和体外2种小体积肝移植物获取方法进行对比分析,以提供一个理想的成功率高的猪小体积肝移植模型建立方法。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-01/03在上海市泰科公司医疗培训部完成。材料:选用健康成年实验用广西巴马小型猪42只,制备21例次猪小体积肝移植模型。方法:选取体质量相近的广西巴马小型猪作为供受体,将动物按随机数字表法分为2组,体内切除减体积组共10对动物,体外切除减体积组共11对动物。应用全频超声乳化吸引刀+滴水双极电凝镊分别通过体内和体外2种途径,切除部分肝叶以获取小体积供肝植入受体。主要观察指标:小体积肝移植的无肝期时间、总手术时间、冷缺血时间、受体移植术中出血量和移植后肝断面胆漏例数。结果:两组在无肝期时间、总手术时间和冷缺血时间差异无显著性意义(P>0.05)。在移植术中出血量上,体外切除减体积组明显多于体内切除减体积组(P<0.05)。体外切除减体积组移植后肝断面胆漏发生率亦较体内切除减体积组高(50%,20%,P<0.05)。结论:选取体质量相近的供受体,应用超声刀行体内切除减体积是猪小体积肝移植模型建立可行有效的方法。

关键词：肝移植小体积疾病模型,动物器官移植

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同一机构10年期间不同亲属活体供肾移植94例供者、配型与移植效果有关吗?

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第5期14卷 879-882页

作者：陈瑜张雷王立明曾力朱有华解放军第二军医大学长征医院全军器官移植研究所肾移植科上海市200003

目的:相关研究表明,亲属活体供肾移植的临床效果优于尸体供肾移植,但不同亲属活体肾移植效果是否有差异的相关研究较少。文章旨在揭示不同亲属活体供肾移植的临床疗效以及供者选择、配型结果与移植疗效的关系。方法:供者中男36名,女58名... 详细信息

目的:相关研究表明,亲属活体供肾移植的临床效果优于尸体供肾移植,但不同亲属活体肾移植效果是否有差异的相关研究较少。文章旨在揭示不同亲属活体供肾移植的临床疗效以及供者选择、配型结果与移植疗效的关系。方法:供者中男36名,女58名,年龄(42.6±8.8)岁。受者中男72例,女22例,年龄(33.9±8.7)岁。血缘亲属供肾88例,其中父母供给子女35例,兄弟姐妹间供肾53例,非血缘亲属(妻子给丈夫)供肾6例。供、受者HLA全相合者18例,1个抗原错配者2例,2个抗原错配者5例,3个抗原错配者56例,4个抗原错配者2例,5个抗原错配者1例,HLA完全错配者10例。供、受者ABO血型相同者85例,相容者9例。受者移植前群体反应性抗体检查均为阴性,供、受者术前淋巴细胞毒交叉试验均小于10%。结果:所有供者术后恢复良好。6例夫妻间供肾中,1例移植后第3天发生加速排斥反应,HLA配型为完全错配,经抗淋巴细胞球蛋白治疗后逆转但发生肾功能恢复延迟,于术后第5周恢复正常。8例于移植后7～90d发生急性排斥反应,其中4例为父母供给子女供肾,HLA配型均为3个抗原错配;3例为兄弟姐妹间供肾,HLA配型1例为全相合,1例为2个抗原错配,1例为3个抗原错配;1例为夫妻间供肾,完全错配。7例经大剂量甲泼尼龙冲击治疗后逆转,1例经抗淋巴细胞球蛋白治疗后逆转。移植后随访6个月～10年,所有供者肾功能正常;94例受者中,死亡2例,1例移植后2年死于呼吸衰竭,1例移植后7年死于心力衰竭;2例发生慢性移植肾肾病。结论:亲属活体供肾移植组织配型好,排斥反应发生少,移植肾长期存活率高,其中以血缘亲属供肾移植效果更佳。

关键词：活体供者亲属肾移植排斥反应组织配型

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利奈唑胺治疗肾移植后重症肺部感染30例

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第31期13卷 6145-6148页

作者：傅尚希王立明朱有华周梅生张雷解放军第二军医大学长征医院解放军器官移植研究所上海市200003

为评价利奈唑胺对肾移植患者重症肺部感染的疗效与安全性,对30例肾移植后重症肺部感染患者应用利奈唑胺治疗的临床资料进行回顾性分析。根据临床症状初步判断病原菌,采取经验性降阶梯治疗,联合给予抗细菌、抗病毒和抗真菌治疗,抗生素均... 详细信息

为评价利奈唑胺对肾移植患者重症肺部感染的疗效与安全性,对30例肾移植后重症肺部感染患者应用利奈唑胺治疗的临床资料进行回顾性分析。根据临床症状初步判断病原菌,采取经验性降阶梯治疗,联合给予抗细菌、抗病毒和抗真菌治疗,抗生素均采用利奈唑胺300mg静滴,2次/d,结合抗杆菌类药物常用的有氨曲南、头孢吡肟、亚胺培南,更昔洛韦抑制巨细胞病毒感染,抗真菌感染应用氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、卡泊芬净、米卡芬净,复方新诺明抗肺孢子虫四联治疗。1例病情严重给予气管插管机械通气辅助呼吸,3d后死亡外,其余29例患者经积治疗痊愈,其中4例并发急性呼吸窘迫综合征,治愈率达97%,利奈唑胺治疗有效率97%,细菌清除率为91%,未发现与药物相关不良反应导致停止治疗的记录。提示利奈唑胺是治疗肾移植患者重症肺部感染安全有效的药物。

关键词：肾移植抗生素肺感染器官移植

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应用生物发光法监测CD4^+细胞三磷酸腺苷水平评估肝移植术后患者的免疫功能

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中国临床康复 2006年第25期10卷 115-117页

作者：王志才付志仁解放军第二军医大学长征医院全军器官移植研究所肝移植部上海市200003

目的:评估三磷酸腺苷生物发光法检测肝移植受者早期CD4+细胞免疫功能的变化。方法:选择2004-06/10在解放军第二军医大学长征医院器官移植研究所进行的30例肝移植受者手术前后(0,1,2,4周)和50例健康志愿者。采用三磷酸腺苷生物发光法通... 详细信息

目的:评估三磷酸腺苷生物发光法检测肝移植受者早期CD4+细胞免疫功能的变化。方法:选择2004-06/10在解放军第二军医大学长征医院器官移植研究所进行的30例肝移植受者手术前后(0,1,2,4周)和50例健康志愿者。采用三磷酸腺苷生物发光法通过植物凝血素刺激后CD4+细胞三磷酸腺苷量的变化来监测细胞的免疫功能。①三磷酸腺苷标准品的检测:用培养基将三磷酸腺苷标准品配制成系列浓度:1,10,1×102,1×103和1×104μg/L,加入等量的Celltiter-GloTM荧光试剂混匀,取200μL进行测定,取对数制作标准曲线。②样本三磷酸腺苷检测:采集两组人员全血样本(肝素抗凝),置于细胞培养板过夜,加入含有洗涤过的抗人CD4单抗免疫磁粒悬浮液,用磁珠强效分离磁架将CD4+细胞吸于培养孔的一侧,用磷酸盐缓冲液洗3～5次,加入培养基(+体积分数为0.1的胎牛血清),加入Celltiter-GloTM试剂,1h内用荧光仪(发射波长562nm)读取荧光发光信号,计算其平均数值。③外周血T淋巴细胞亚群检测:肝素钠抗凝血加相应的抗体,放于Q-prep,workstation上处理后上机,计算出阳性细胞的百分率;或标记后的标本同样处理后,加混匀的Flow-Count标准荧光小球到标本管2h内上机,计算出CD4+细胞的绝对计数。④检测他克莫司血药浓度。结果:①在三磷酸腺苷浓度为1×(100～104)μg/L之间时,三磷酸腺苷标准品与荧光发光信号呈线性关系。直线方程为Y=0.75X+2.37(r=0.99484)。②移植组患者三磷酸腺苷明显低于健康人群犤(350±191),(735±370)μg/L,P<0.05犦,术后1周显著下降为(161±107)μg/L,而后逐渐提高。表明肝移植受者的细胞免疫功能术后第1周明显下降,以后逐渐恢复,第4周仍低于术前水平。③反应细胞免疫功能的三磷酸腺苷量与免疫抑制剂他克莫司血药浓度缺乏直接的相关性(r2=0.02)。结论:三磷酸腺苷生物发光法有利于正确评估肝移植后患者的细胞免疫功能。

关键词：肝移植腺苷三磷酸 CD4阳性T淋巴细胞

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应用原代培养的小鼠肾小管上皮细胞建立体外模拟缺血再灌注损伤模型

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中华器官移植杂志 2012年第7期33卷 426-429页

作者：袁清蔡明曾力洪善娟张雷朱有华解放军第三0九医院器官移植中心泌尿一科解放军器官移植研究所北京100091 第二军医大学长征医院器官移植中心解放军器官移植研究所第二军医大学免疫研究所

目的原代培养小鼠。肾小管上皮细胞（TEC），建立小鼠TEC体外模拟缺血再灌注（IR）的模型。方法切取C57BL／6J小鼠肾脏外侧髓质，用I型胶原酶消化后进行原代培养，采用免疫组织化学法进行鉴定。将贴壁生长的TEC用石蜡油覆盖模拟缺血过程... 详细信息

目的原代培养小鼠。肾小管上皮细胞（TEC），建立小鼠TEC体外模拟缺血再灌注（IR）的模型。方法切取C57BL／6J小鼠肾脏外侧髓质，用I型胶原酶消化后进行原代培养，采用免疫组织化学法进行鉴定。将贴壁生长的TEC用石蜡油覆盖模拟缺血过程，60min后更换全培养基模拟再灌注过程。在更换培养基后不同时间点收集细胞，抽提RNA，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和IL-6mRNA的表达；在再灌注后24h收集细胞培养上清液，采用酶联免疫吸附试验检测各细胞因子蛋白的表达。结果经过原代培养的小鼠TEC呈上皮细胞特有的“铺路石”状，细胞胞浆内高表达细胞骨架蛋白18。与对照组相比，IR组TEC在更换培养基后TNF-α、IL-1β和IL-6的转录水平均明显增高。TNF-αmRNA表达量在更换培养基后0．5h达峰，约为对照组的（24．45±6．51）倍（P〈0．01），随后逐渐下降；在更换培养基后IL-113mRNA表达量呈逐渐上升的趋势，更换培养基后6h约为对照组的（15．27±4．29）倍（P〈0．05）；IL-6mRNA表达量在更换培养基后3、h达峰，约为对照组的（11．19±4．55）倍（P〈0．01）。与对照组相比，1R组TEC在更换培养基后24h，上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的蛋白表达均明显增高。结论小鼠肾脏外侧髓质经分离、消化后可获得高纯度的原代培养TEC；应用石蜡油可以成功建立小鼠TEC体外模拟IR的模型。

关键词：小鼠肾小管上皮细胞细胞培养技术缺血再灌注

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塞来昔布诱导多囊肾囊肿衬里上皮细胞凋亡的实验研究

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中华肾脏病杂志 2006年第10期22卷 632-636页

作者：许涛梅长林曲巍叶朝阳付莉莉蔡厚安李丹第二军医大学长征医院肾内科解放军肾脏病研究所上海200003 第二军医大学长征医院器官移植科解放军器官移植研究所上海200003

目的通过观察特异性环氧酶2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib,CXB)诱导人多囊肾囊肿衬里上皮细胞凋亡,初步探讨该药诱导细胞凋亡的作用机制。方法(1)原代培养囊肿衬里上皮细胞,分为对照组、CXB组,采用Brdu法检测细胞增殖状态。(2)应用... 详细信息

目的通过观察特异性环氧酶2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib,CXB)诱导人多囊肾囊肿衬里上皮细胞凋亡,初步探讨该药诱导细胞凋亡的作用机制。方法(1)原代培养囊肿衬里上皮细胞,分为对照组、CXB组,采用Brdu法检测细胞增殖状态。(2)应用透射电镜观察细胞超微结构。(3)TUNEL法检测细胞凋亡及凋亡率。(4)应用AnnexinV+流式细胞术检测CXB诱导细胞凋亡及凋亡率。(5)应用免疫印迹法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果(1)Brdu结果显示,CXB能抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞的增殖,在24～72 h,浓度为(0．25～2)×10^(-5) mol/L的范围内呈时间和剂量依赖性。(2)电镜下可见细胞核浓缩、染色质聚集、胞浆空泡化、凋亡小体出现、沟裂和裸核形成等典型凋亡征象。(3)TUNEL法显示,对照组细胞凋亡率为(2．8±0．2)%,2×10^(-5) mol/L CXB作用24、48 h细胞凋亡率为(28．5±1．6)%和(48．5±1．2)%,两者差异有统计学意义(P＜0．05)。(4)AnnexinV+流式细胞仪法结果显示,不同浓度(0．5、1、2×10^(-5) mol/L)CXB处理24 h凋亡率分别为(7．15±0．11)%、(7．76±0．08)%和(12．15±0．07)%,显著高于无血清对照组(3 15±0．05)%；不同浓度CXB处理48 h的凋亡率分别为(18．36±0．17)%、(24．87±0．25)%和(53．66±0．32)%,显著高于无血清对照组(13．53±0．21)%,组间差异均有统计学意义(P均＜0．01)。(5) Western印迹结果显示,随CXB作用时间延长,Bcl-2的表达逐渐减弱而Bax的表达逐渐增强,Bcl-2/Bax的比值逐渐减少。结论塞来昔布呈时间和剂量依赖性抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,通过下调Bcl-2,上调Bax,减少Bcl-2/Bax的比值诱导细胞凋亡。本研究结果为将CXB用于治疗常染色体显性多囊肾病提供了实验依据。

关键词：多囊肾常染色体显性凋亡塞来昔布衬里上皮细胞

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羟苯磺酸钙治疗慢性移植肾功能不全的临床观察（英文）

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中国组织工程研究 2014年第49期18卷 7979-7984页

作者：郑鳕洋韩澍周梅生傅尚希王立明解放军第二军医大学附属长征医院全军器官移植研究所上海市200003

背景:羟苯磺酸钙作为一种血管保护剂被广泛用于治疗慢性静脉功能不全和糖尿病肾病,尤其大量临床研究表明它可以减轻糖尿病肾病的肾损害,但很少有关于羟苯磺酸钙用于治疗肾移植后慢性移植肾功能不全的文献报道。目的:观察羟苯磺酸钙治疗... 详细信息

背景:羟苯磺酸钙作为一种血管保护剂被广泛用于治疗慢性静脉功能不全和糖尿病肾病,尤其大量临床研究表明它可以减轻糖尿病肾病的肾损害,但很少有关于羟苯磺酸钙用于治疗肾移植后慢性移植肾功能不全的文献报道。目的:观察羟苯磺酸钙治疗慢性移植肾功能不全的有效性和安全性。方法:收集解放军第二军医大学附属长征医院全军器官移植研究所收治的152例肾移植后出现慢性移植肾功能不全的患者,分为治疗组(n=78)和对照组(n=74)。治疗组患者口服羟苯磺酸钙500 mg 3次/d,连续服用8周。所有患者均接受钙调磷酸酶抑制剂为基础的免疫抑制方案和综合治疗。结果与结论:对于服用羟苯磺酸钙治疗的患者,其血肌酐、尿素氮和尿酸在治疗第2周时均较治疗前明显下降并维持稳定(P<0.05),但血肌酐和尿素氮在停药后立即回复到原基线水平。而两组患者的血常规、肝功能、血脂、电解质、血压及24 h尿量在治疗前后差异均无显著性意义(P>0.05)。服用羟苯磺酸钙并不会对肾功能不全患者的一般情况和免疫抑制剂的血药浓度产生影响。羟苯磺酸钙可能通过自身与血肌酐结合、减轻微循环损伤及其抗氧化的特性延缓慢性移植肾功能不全的进展。同时,服药后血肌酐下降有助于缓解患者的焦虑和担忧。然而,羟苯磺酸钙对血肌酐检测的负性干扰需引起重视,以免对患者病情产生误判。

关键词：羟苯磺酸钙肾机能不全慢性微循环肾移植

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水溶性一氧化碳释放分子抑制供肾树突状细胞活化减轻移植后排斥反应

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中华器官移植杂志 2012年第8期33卷 462-465页

作者：袁清洪善娟蔡明王毅张雷曾力朱有华解放军第三0九医院器官移植中心泌尿一科北京100091 第二军医大学免疫研究所第二军医大学长征医院器官移植中心解放军器官移植研究所

目的研究水溶性一氧化碳释放分子3（CORM-3）减轻小鼠肾移植后排斥反应的作用及机制。方法以C57BL／6J小鼠为供鼠，Balb／c小鼠为受鼠，采用随机数字表法将供、受鼠分为2组，制备小鼠肾移植模型。CORM-3组受鼠接受经CORM-3预处理的供肾... 详细信息

目的研究水溶性一氧化碳释放分子3（CORM-3）减轻小鼠肾移植后排斥反应的作用及机制。方法以C57BL／6J小鼠为供鼠，Balb／c小鼠为受鼠，采用随机数字表法将供、受鼠分为2组，制备小鼠肾移植模型。CORM-3组受鼠接受经CORM-3预处理的供肾，iCORM组受鼠接受经无CO活性的iCORM预处理的供肾。术后检测各组受鼠的血清肌酐（SCr）水平，观察各组移植肾组织的病理改变，记录各组移植肾存活时间。以***-Tg（Itgax-DTR／GFP）57Lan／J小鼠为供鼠，Balb／czb鼠为受鼠，肾移植后24h通过流式细胞仪检测移植肾内供鼠rDC的活化情况。结果术后iCORM组和CORM-3组间移植肾中位存活时间分别为40．5和70d（P〈0．05）；术后两组受鼠的SCr水平均进行性升高，但CORM-3组受鼠的SCr水平始终保持在较低的水平（P〈0．05或P〈0．01）；与正常小鼠肾组织相比，术后第4周iCORM组受鼠的移植肾间质出现弥漫性单个核细胞浸润，中度肾小管炎症，以及部分肾小球硬化；CORM-3组移植肾组织单个核细胞浸润较iCORM组明显减轻，肾小球与肾小管形态基本正常。移植后24h，iCORM组和CORM-3组移植肾内供鼠rDC表面均高表达CDS0和CD86，表明rDC处于活化状态，而CORM-3组rDC表面CD80和CD86的表达较iCORM组明显减少（P〈0．05）。结论CORM-3可显著减轻同种肾移植小鼠的排斥反应，改善移植肾功能，其机制可能是CORM-3抑制了移植后供鼠rDC的活化。

关键词：小鼠肾移植一氧化碳树突细胞移植物排斥

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乙醛脱氢酶2介导乙醇预处理减轻肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤的作用

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中华器官移植杂志 2012年第8期33卷 451-454页

作者：蔡明袁清崔瀚文洪善娟曾力王全兴朱有华解放军第三0九医院器官移植中心泌尿一科北京100091 第二军医大学免疫研究所第二军医大学长征医院器官移植中心解放军器官移植研究所

目的研究乙醛脱氢酶2（ALDH2）介导乙醇预处理减轻小鼠肾小管上皮细胞（TEC）缺血再灌注（IR）损伤的作用。方法取C57BL／6J小鼠的TEC，进行原代培养。小鼠TEC经乙醇预处理3h后，建立体外模拟IR的模型，检测细胞的乳酸脱氢酶（LDH）漏... 详细信息

目的研究乙醛脱氢酶2（ALDH2）介导乙醇预处理减轻小鼠肾小管上皮细胞（TEC）缺血再灌注（IR）损伤的作用。方法取C57BL／6J小鼠的TEC，进行原代培养。小鼠TEC经乙醇预处理3h后，建立体外模拟IR的模型，检测细胞的乳酸脱氢酶（LDH）漏出率，观察乙醇预处理减轻TEC的IR损伤的作用。采用已构建的ALDH2的小干扰RNA（ALDH2-siRNA）转染TEC，转染48h后采用蛋白质印迹法验证ALDH2蛋白的变化情况，检测ALDH酶活性的改变，然后进行乙醇预处理和模拟IR操作，最后检测TEC的LDH漏出率，分析ALDH2在乙醇预处理减轻TEC的IR损伤中的作用。结果乙醇预处理显著降低了IR后小鼠TEC的LDH漏出率，验证了乙醇预处理减轻小鼠TEC的IR损伤的作用；转染ALDH2-siRNA后，TEC的ALDH2蛋白．含量下降82．1％，ALDH酶活性下降了67．3％。在下调ALDH2表达之后，乙醇预处理减轻TEC的IR损伤的作用几乎消失。结论乙醇预处理可以减轻小鼠TEC的IR损伤，ALDH2酶在此效应中发挥了重要作用。

关键词：小鼠肾小管上皮细胞再灌注损伤乙醛脱氢酶2 乙醇

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肾移植患者术后BK病毒感染的检测及危险因素分析

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第二军医大学学报 2007年第1期28卷 71-76页

作者：陆明朱有华王皓韩澍冀俊峰第二军医大学长征医院器官移植科解放军器官移植研究所上海200003 长征医院实验诊断科解放军临床免疫中心

目的：检测肾移植患者术后BK病毒（BKV）感染率，分析BKV感染的危险因素。方法：收集63例肾移植患者术后第1、2、3、4、6和8个月的尿液和血液标本，实时荧光定量PCR方法检测标本中BKVDNA含量，并根据检测结果进行分组：尿液、血液BKVDN... 详细信息

目的：检测肾移植患者术后BK病毒（BKV）感染率，分析BKV感染的危险因素。方法：收集63例肾移植患者术后第1、2、3、4、6和8个月的尿液和血液标本，实时荧光定量PCR方法检测标本中BKVDNA含量，并根据检测结果进行分组：尿液、血液BKVDNA均阳性者为UV^＋PV^＋组，尿液阳性而血液阴性者为UV-PV组，尿液、血液均阴性者为UV^-PV^-组。尿沉渣涂片寻找含有病毒包涵体的脱落尿路上皮细胞（Decoy细胞），并对Decoy细胞进行细胞免疫学检测；对临床高度怀疑为BK病毒相关性肾病患者（BKVAN）行移植肾活检。比较3组患者的年龄、术前冷缺血时间、术前血透时间、免疫抑制方案、群体反应性抗体（PRA）致敏程度、术后是否合并其他病毒感染等临床指标的差异，应用Logistic回归法分析筛选BKV感染和BKVAN发生的危险因素。结果：UV^＋PV^-组19例（30．1％）。UV^＋PV^＋组患者9例（14．3％），UV^-PV^-组患者35例；前两组首次发现BKV的中位时间分别为术后4个月和3个月。63例患者Decoy细胞检出率为39．7％，Decoy细胞免疫染色阳性率为54．3％。1例移植肾活检未见BKVAN表现。Logistic回归法发现BKVDNA感染与冷缺血时间有显著联系（P=0．048；OR=1．151），与其他指标无显著相关（P=0．069）。结论：实时荧光定量PCR能较好地监测术后BKV感染，术后3～4个月是BKV排泄高峰，术前冷缺血时间可能是BKV感染的危险因素之一。而术后免疫抑制方案对BKV感染可能无明显影响。

关键词： BK病毒肾移植 Decoy细胞

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