检索结果-内蒙古大学图书馆

器官移植 2016年第5期7卷 355-359页

作者：魏玉香杨绍臻肖漓蔡明钱叶勇于涛石炳毅解放军第309医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨输注体外光化学法处理的脾淋巴细胞对皮肤移植受体小鼠产生调节性T细胞(Treg)及移植物存活时间的影响。方法以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体,建立小鼠皮肤移植模型。分离C57BL/6和BALB/c小鼠脾淋巴细胞(CSP、BSP),制备经8... 详细信息

目的探讨输注体外光化学法处理的脾淋巴细胞对皮肤移植受体小鼠产生调节性T细胞(Treg)及移植物存活时间的影响。方法以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体,建立小鼠皮肤移植模型。分离C57BL/6和BALB/c小鼠脾淋巴细胞(CSP、BSP),制备经8-甲氧基补骨脂素联合长波紫外线(PUVA)处理的小鼠脾淋巴细胞(PUVA-SP)。根据受者静脉输注的成分将实验动物随机分为5组(每组12只):PUVA-BSP组、PUVA-CSP组、BSP组、CSP组及磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,每组受体分别于术前7 d、手术当日和术后7 d按组别从尾静脉注入PUVA-BSP、PUVA-CSP、BSP、CSP或PBS。观察受体移植物的存活时间,检测受体外周血中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达情况。结果皮肤移植术后,PUVA-BSP组和PUVA-CSP组的受体小鼠外周细胞CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg的比例明显高于输注BSP组、CSP组和PBS对照组;PUVA-CSP组高于PUVA-BSP,BSP组和CSP组低于PBS对照组。PUVA-BSP组和PUVA-CSP组的受者小鼠移植皮片存活时间明显长于BSP组、CSP组和PBS对照组(均为P<0.05)。结论输注足够数量的PUVA-SP可诱导受体体内产生较多的CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg,可以显著延长移植物的存活时间。

关键词：体外光化学疗法皮肤移植小鼠调节性T细胞

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肾脏固有树突状细胞在肾缺血-再灌注期间的变化

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器官移植 2016年第5期7卷 360-364页

作者：药晨李树欣于涛许小东石炳毅解放军第309医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨在肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)期间肾脏固有树突状细胞(rDC)的变化。方法采用C57BL/6J小鼠建立双侧肾脏热缺血模型,再灌注24、48 h后取肾组织制备单细胞悬液,流式细胞仪分析CD45^+细胞和CD11c^+rDC的比例变化;采用绿色荧光蛋白和... 详细信息

目的探讨在肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)期间肾脏固有树突状细胞(rDC)的变化。方法采用C57BL/6J小鼠建立双侧肾脏热缺血模型,再灌注24、48 h后取肾组织制备单细胞悬液,流式细胞仪分析CD45^+细胞和CD11c^+rDC的比例变化;采用绿色荧光蛋白和白喉毒素受体标记(CD11c^+GDTR)的小鼠肾组织制作单细胞悬液,流式细胞仪分析CD11c^+rDC的比例及表型;采用CD11c^+GDTR小鼠建立双侧肾脏热缺血模型,再灌注24 h后取肾组织制备单细胞悬液,MACS磁珠富集CD45^+细胞,经流式细胞仪分析rDC表面共刺激分子表达情况。结果再灌注24 h后C57BL/6J小鼠肾脏内CD45^+细胞比例明显增加,48 h后其比例进一步升高,再灌注24 h后CD11c^+rDC数量同样持续升高,但其占CD45^+细胞的比例出现明显下调,48 h后恢复并较Sham组轻度升高;CD11c^+GDTR小鼠正常肾脏CD45^+细胞比例低于1%,其中约40%为CD11c^+的肾脏rDC,主要呈CD11b^(int)F4/80^-MHCⅡ^+;再灌注24 h后CD11c^+F4/80^-亚群rDC表面共刺激分子CD40、CD80、CD86均显著升高。结论热IRI后rDC比例、数量及其表面共刺激分子表达均增加,提示热IRI后肾脏rDC浸润增多且表型成熟。

关键词：肾脏树突状细胞缺血-再灌注损伤小鼠流式细胞术

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器官移植免疫耐受的研究热点追踪

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临床泌尿外科杂志 2016年第10期31卷 863-867页

作者：石炳毅许晓光解放军第309医院全军器官移植研究所北京市器官移植和免疫调节重点实验室北京100091

移植免疫耐受是临床器官移植的最高目标,随着其诱导方法和机制研究的逐步深入,临床免疫耐受的诱导也取得了诸多进展。本文拟简述近年来肾移植免疫耐受机制研究和临床诱导方案的发展变化,并对其今后研究的发展方向进行展望。

关键词：器官移植免疫耐受研究进展

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脐带间充质干细胞外泌体的分离和鉴定

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2016年第4期6卷 236-239页

作者：肖漓白剑陈文黄海燕何秀云韩永许晓光樊文梅毕丽丽高钰孔祥瑞魏玉香石炳毅解放军第三〇九医院全军器官移植研究所移植研究室北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨脐带间充质干细胞的外泌体的获取与鉴定方法。方法通过组织块贴壁法从胎儿脐带分离和培养脐带间充质干细胞并通过RiboTMExosome Isolation Kit收集外泌体，采用电镜和流式细胞仪鉴定外泌体。结果第二代脐带间充质干细胞表面CD45... 详细信息

目的探讨脐带间充质干细胞的外泌体的获取与鉴定方法。方法通过组织块贴壁法从胎儿脐带分离和培养脐带间充质干细胞并通过RiboTMExosome Isolation Kit收集外泌体，采用电镜和流式细胞仪鉴定外泌体。结果第二代脐带间充质干细胞表面CD45、CD34和HLA-DR呈阴性表达，CD29、CD44和CD105呈阳性表达；在透射电镜下观察到脐带间充质干细胞外泌体呈圆形或椭圆形，大小不均匀，直径30～100nm，有完整的膜结构，内含低密度物质；流式细胞检测外泌体CD9、CD63、CD81和CD83呈阳性表达。结论在培养脐带间充质干细胞的培养基中可以收集到外泌体，可以通过电镜和流式细胞仪对脐带间充质干细胞的外泌体进行鉴定。

关键词：脐带间质干细胞细胞分离外泌体生物学标记鉴定

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流式微球分析技术联合检测Cys C、NGAL方法的建立及其在肾移植术后CMV感染患者中的应用

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器官移植 2016年第3期7卷 191-195页

作者：马锡慧黄海燕高钰毕丽丽孔祥瑞刘一松肖漓石炳毅军事医学科学院北京100850 解放军第309医院器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室

目的建立流式微球分析技术联合检测胱抑素(Cys)C和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的方法,并初步研究两者在肾移植术后巨细胞病毒(CMV)感染患者血清中的含量变化。方法实验方法的建立包括检测微球包被的效果和稳定性,优化Cys C... 详细信息

目的建立流式微球分析技术联合检测胱抑素(Cys)C和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的方法,并初步研究两者在肾移植术后巨细胞病毒(CMV)感染患者血清中的含量变化。方法实验方法的建立包括检测微球包被的效果和稳定性,优化Cys C和NGAL的检测含量范围,确定生物素化抗体浓度,确定PE-链霉亲和素浓度,绘制标准曲线图确定相关系数。采用该法检测对照组(10名健康人)、CMV阴性组(10例肾移植术后CMV-pp65阴性患者)和CMV阳性组(20例肾移植术后CMV-pp65阳性患者)的血清Cys C和NGAL含量。结果成功建立流式微球分析技术联合检测Cys C和NGAL的方法。对照组、CMV阴性组和CMV阳性组的血清NGAL含量分别为8 759(1 465)pg/ml、10 472(856)pg/ml、12 817(4 533)pg/ml,依次升高且差异有统计学意义(P<0.001)。3组间Cys C比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验建立流式微球分析技术联合检测Cys C和NGAL标准曲线的方法相关性和重复性良好,并初步验证NGAL含量在肾移植术后CMV感染中明显升高,提示肾移植术后CMV活动性感染可能对肾小管造成急性损伤。

关键词：流式微球分析技术肾移植急性肾损伤胱抑素C 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白巨细胞病毒

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巨细胞病毒感染的肾移植受者体内中性粒细胞表面粘附分子CD11b、CD15和CD62L的表达及意义

巨细胞病毒感染的肾移植受者体内中性粒细胞表面粘附分子CD11b、C...

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中华医学会2016年器官移植学年会

作者：肖漓白剑何秀云韩永许晓光樊文梅毕丽丽高钰孔祥瑞魏玉香石炳毅北京解放军第三〇九医院全军器官移植研究所移植研究室北京市器官移植与免疫调节重点实验室

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流式微珠阵列术在医学中的研究进展

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生物技术通讯 2016年第1期27卷 138-141页

作者：马锡慧(综述) 肖漓(审校) 石炳毅(审校) 军事医学科学院研究生部北京100850 解放军第309医院器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

随着高分子微球技术的日益创新,流式细胞术与高分子微球技术相结合的流式细胞微球芯片捕获技术也随之产生,流式细胞微球芯片捕获技术又称为流式微球分析技术、流式微球技术、流式微珠阵列术,具有检测灵敏度高、特异性强、分析速度快等优... 详细信息

随着高分子微球技术的日益创新,流式细胞术与高分子微球技术相结合的流式细胞微球芯片捕获技术也随之产生,流式细胞微球芯片捕获技术又称为流式微球分析技术、流式微球技术、流式微珠阵列术,具有检测灵敏度高、特异性强、分析速度快等优点,应用前景广阔。我们就流式细胞微球捕获芯片技术在医学中的研究进展做简要综述。

关键词：流式微珠阵列术细胞微球芯片捕获技术流式细胞术液相多重蛋白定量技术

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HLA—G在肾移植受者外周血外泌体中表达的初步研究

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中华器官移植杂志 2015年第9期36卷 515-519页

作者：肖漓黄海燕毕丽丽韩永何秀云许晓光樊文梅高钰孔祥瑞魏玉香石炳毅解放军第三0九医院全军器官移植研究所移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的研究人豢白细胞抗原-G（HLA-G）在肾移植受者外周血外泌体中的表达情况。方法以2012年1月至2014年6月在单中心进行同种异体肾移植术且术后无排斥反应的12例肾移植受者（肾移植组）以及健康志愿者（对照组）5例为研究对象。每个对象... 详细信息

目的研究人豢白细胞抗原-G（HLA-G）在肾移植受者外周血外泌体中的表达情况。方法以2012年1月至2014年6月在单中心进行同种异体肾移植术且术后无排斥反应的12例肾移植受者（肾移植组）以及健康志愿者（对照组）5例为研究对象。每个对象收集5ml外周血并采用总外泌体提取试剂盒提取总外泌体。通过透射电子显微镜观察外泌体的大小及形态；流式细胞术检测血浆外泌体表面CD63、CD73、CD81和CD106的表达；蛋白印迹方法分析HLA-G在外泌体的表达情况。结果在肾移植组12例中9例以及对照组5例中2例的外周血血浆获得外泌体，可见大小不一、呈现类似圆形或椭圆形、直径为40-100nm的膜性微囊泡结构，透射电子显微镜下观察，符合外泌体形态和结构。将其标志分子CD63抗体包被磁珠实现捕获，肾移植组CD81阳性率为（78．57±12．35）％，CD106为（45．39±11．23）％，CD73为（63．37±15．62）％；对照组CD81阳性率为（35．37±8．42）％，CD106为（12．44±2．31）％，CD73为（10．23±2．57）％。肾移植组9例受者血浆外泌体均表达HLA-G;对照组5例仅中1例呈低表达。结论肾移植术后无排斥反应患者血浆外泌体高表达HLA-G，外泌体可能在移植后的免疫耐受中发挥着重要作用。

关键词： HLA-G抗原肾移植

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供者特异性抗体与补体活化是影响移植肾长期存活的关键因素

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中华器官移植杂志 2015年第2期36卷 65-67页

作者：石炳毅袁清解放军第三0九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

上世纪中叶，器官移植技术兴起的早期人们就对排斥反应发生的原因进行过激烈的争论。以Gorer为代表的一方认为，是抗原抗体结合导致了移植物的排斥反应；而以Medawar为代表的另一方则认为，由T淋巴细胞介导的细胞免疫才是引起排斥反应... 详细信息

上世纪中叶，器官移植技术兴起的早期人们就对排斥反应发生的原因进行过激烈的争论。以Gorer为代表的一方认为，是抗原抗体结合导致了移植物的排斥反应；而以Medawar为代表的另一方则认为，由T淋巴细胞介导的细胞免疫才是引起排斥反应的关键。两种理论的根本区别在于，造成移植物直接损害的究竟是抗体还是T淋巴细胞，或者说究竟是体液免疫还是细胞免疫介导了排斥反应争论持续了多年，器官移植免疫学在争论中发展起来。

关键词：特异性抗体长期存活补体活化移植肾器官移植技术 T淋巴细胞排斥反应供者

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肾移植排斥反应的无创诊断进展及展望

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中华器官移植杂志 2015年第9期36卷 513-514页

作者：石炳毅肖漓解放军第三0九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

迄今为止，肾移植仍然是临床治疗终末期肾病的优选手段。随着对移植后各种并发症的发生机制、进展及预后不断的深入了解，新型免疫抑制剂层出不穷。近年来移植界的趋势是更加强调治疗手段、药物种类及剂量等的个体化，在降低急性排斥反... 详细信息

迄今为止，肾移植仍然是临床治疗终末期肾病的优选手段。随着对移植后各种并发症的发生机制、进展及预后不断的深入了解，新型免疫抑制剂层出不穷。近年来移植界的趋势是更加强调治疗手段、药物种类及剂量等的个体化，在降低急性排斥反应发生率的同时确实提高了对受者和移植物的中短期疗效。然而仅仅拥有丰富的临床经验还是难以精确把握个体的用药，控制药物可能发生的各种不良反应和受者的远期疗效。

关键词：移植排斥反应终末期肾病无创诊断急性排斥反应临床治疗药物种类免疫抑制剂发生机制

来源：评论

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