检索结果-内蒙古大学图书馆

中国防痨杂志 2016年第1期38卷 17-22页

作者：凌彦博梁艳王小美王兰张俊仙阳幼荣白雪娟陈实兵刘军杨春玮罗华锋刘光陵吴雪琼解放军第三0九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091 广东奇方药业有限公司

目的研究中药复方牛贝消核提取物治疗结核病的相关靶标，阐明其作用机制。方法9只小鼠分为正常组、结核模型组和牛贝消核治疗组，每组3只。结核模型组和牛贝消核治疗组经尾静脉注射5x105^CFU（菌落形成单位）的结核分枝杆菌H37Rv标准株... 详细信息

目的研究中药复方牛贝消核提取物治疗结核病的相关靶标，阐明其作用机制。方法9只小鼠分为正常组、结核模型组和牛贝消核治疗组，每组3只。结核模型组和牛贝消核治疗组经尾静脉注射5x105^CFU（菌落形成单位）的结核分枝杆菌H37Rv标准株的悬液感染7d后，牛贝消核治疗组用牛贝消核水提取物进行灌胃。治疗12周后，杀鼠采血至抗凝管，提取小鼠全血总RNA，反转录后与小鼠基因表达谱芯片杂交，应用IPA（Ingenuity Pathway Analysis）数据库分析、比较各组间的基因表达结果，以差异变化倍数≥2．0作为基因表达明显上调或下调的判断标准。结果结核模型组和正常组基因表达谱比较共有差异表达基因5647条，其中2898条上调，2749条下调。结核模型组和牛贝消核治疗组比较共有差异表达基因7051条，3454条基因上调，其中涉及多个免疫相关因子；3597条基因下调，c-Jun氨基末端激酶（c-JunN-terminalkinase，JNK）信号通路明显抑制下调。结论牛贝消核提取物具有明显的免疫调节作用，具有下调JNK信号通路、抑制炎症的作用。

关键词：中草药结核药理作用分子作用机制基因表达谱

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应用荧光定量PCR-探针熔解曲线法快速鉴定分枝杆菌菌种方法的建立及初步评价

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中国医刊 2016年第4期51卷 74-78页

作者：张俊仙王杰孙伟民梁艳阳幼荣王兰殷铭俊吴雪琼解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091 江苏省无锡锐奇基因科技有限公司江苏无锡214092

目的应用荧光定量PCR-探针熔解曲线法建立一种快速、简便、高效的分枝杆菌菌种鉴定新方法,为临床医师正确诊断提供理论依据。方法以DNA直接测序法为对照,通过荧光定量PCR技术-探针熔解曲线法(包括反应A、B、C)分析22种分枝杆菌标准株、1... 详细信息

目的应用荧光定量PCR-探针熔解曲线法建立一种快速、简便、高效的分枝杆菌菌种鉴定新方法,为临床医师正确诊断提供理论依据。方法以DNA直接测序法为对照,通过荧光定量PCR技术-探针熔解曲线法(包括反应A、B、C)分析22种分枝杆菌标准株、11种非分枝杆菌标准株和32株分枝杆菌临床分离株的菌种。结果应用荧光定量PCR-探针熔解曲线法分析22种分枝杆菌标准株和11种非分枝杆菌标准株,结果与标准株DNA测序一致,成功地建立鉴定方法。32株分枝杆菌临床分离株中,经DNA测序和荧光定量PCR-探针熔解曲线法分析显示,4株为结核分枝杆菌复合群(mycobacterium tuberculosis complex,MTC),7株为胞内分枝杆菌,6株为龟分枝杆菌脓肿亚种,4株为瘰疬分枝杆菌,4株为偶然分枝杆菌,3株为堪萨斯和胃分枝杆菌,2株为戈登分枝杆菌;另有2株分离株反应A的熔解曲线显示为分枝杆菌属的熔解温度(melting temperature,Tm)值,反应B和C的熔解曲线Tm值与22株分枝杆菌标准株的Tm值均不同,经DNA测序证实与戈登分枝杆菌标准株序列不同,与报道的戈登分枝杆菌分离株一致。结论用荧光定量PCR-探针熔解曲线法可简便、快速、灵敏、特异地将大多数分枝杆菌鉴定到种,提高分枝杆菌病的正确诊断率,指导临床合理用药。

关键词：分枝杆菌菌种鉴定荧光定量PCR 探针熔解曲线 DNA测序

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组合药敏检测技术提高耐多药结核病诊断率

组合药敏检测技术提高耐多药结核病诊断率

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第三届耐药结核病防控与诊治新进展研讨会

作者：吴雪琼张俊仙解放军第三○九医院全军结核病研究所/全军结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室

耐多药结核病(MDR-TB)是目前临床结核病治疗的难题之一,快速检出耐多药结核分枝杆菌(***),指导临床选择有效抗结核药物,制定合理的化疗方案,是控制MDR-TB的关键。目前抗结核药物的药敏试验方法主要有下列三类:一是建立在细菌生长基础上... 详细信息

耐多药结核病(MDR-TB)是目前临床结核病治疗的难题之一,快速检出耐多药结核分枝杆菌(***),指导临床选择有效抗结核药物,制定合理的化疗方案,是控制MDR-TB的关键。目前抗结核药物的药敏试验方法主要有下列三类:一是建立在细菌生长基础上的药敏试验方法;二是建立在基因多态性分析基础上的分子药敏试验方法;三是建立在耐药***特异组分基础上的色谱、质谱方法。本文概要地介绍***药敏试验方法,及联合应用现有药敏检测技术,提高临床MDR-TB诊断率。

关键词：结核分枝杆菌耐多药药敏试验抗结核药物耐药基因

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活动性结核患者单核细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白1的mRNA水平降低

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第7期31卷 949-952页

作者：刘艳华王若程小星解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的研究活动性结核患者单核细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)的mRNA水平与结核分枝杆菌(MTB)潜伏感染者和健康者相比是否发生改变。方法收集活动性结核患者、结核菌潜伏感染者和和健康者的抗凝外周血,从外周血中分离并纯化单核细... 详细信息

目的研究活动性结核患者单核细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)的mRNA水平与结核分枝杆菌(MTB)潜伏感染者和健康者相比是否发生改变。方法收集活动性结核患者、结核菌潜伏感染者和和健康者的抗凝外周血,从外周血中分离并纯化单核细胞,荧光定量PCR检测单核细胞中Blimp-1 mRNA的水平。而后分别用MTB的H37Rv菌株全菌裂解液和ESAT-6/CFP-10的抗原多肽刺激健康者的单核细胞,荧光定量PCR检测刺激前后单核细胞中Blimp-1 mRNA的水平。结果与健康者相比,活动性结核患者、潜伏感染者单核细胞Blimp-1的mRNA水平显著降低;与未刺激的单核细胞相比,全菌裂解液刺激后的单核细胞Blimp-1的mRNA水平显著降低,而ESAT-6/CFP-10抗原多肽刺激后的单核细胞中Blimp-1的mRNA水平无显著变化。结论活动性结核患者和MTB潜伏感染者单核细胞Blimp-1的mRNA水平降低,MTB全菌裂解液刺激的人单核细胞中Blimp-1的mRNA水平降低。

关键词：结核分枝杆菌活动性结核 B淋巴细胞诱导成熟蛋白1 单核细胞

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积极探索和发展中西医结合治疗结核病——难治性结核病患者的新希望

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中国防痨杂志 2016年第1期38卷 9-13页

作者：吴雪琼粱秋解放军第三O九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091 沈阳市胸科医院中西医结合病房

目前结核病（TB）疫情仍相当严重，TB化疗面临诸多难题，而中医药是我国传统医学的瑰宝，中西医结合治疗TB具有优势互补的特点，将给难治性结核病带来新的希望。因此，笔者概要地论述了目前西医药治疗结核病存在的问题、中医药治疗结核... 详细信息

目前结核病（TB）疫情仍相当严重，TB化疗面临诸多难题，而中医药是我国传统医学的瑰宝，中西医结合治疗TB具有优势互补的特点，将给难治性结核病带来新的希望。因此，笔者概要地论述了目前西医药治疗结核病存在的问题、中医药治疗结核病所具有的优势、中西医联合治疗结核病互补的优势、抗结核中药作用机制研究的进展，并对中西医结合治疗结核病可能存在的问题进行阐述，对其发展前景进行展望。

关键词：结核/药物疗法医药传统药物疗法联合

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结核分枝杆菌早期分泌抗原对人单核细胞活化T细胞核因子5表达的影响

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中华结核和呼吸杂志 2015年第4期38卷 290-293页

作者：刘艳华王若程小星解放军第三○九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的研究MTB早期分泌靶抗原6/培养滤液蛋白10（ESAT-6/CFP-10）抗原对人单核细胞的活化T细胞核因子5（NFAT5）表达的影响.方法收集解放军第三○九医院收治的活动性肺结核患者15例,男9例,女6例,年龄33 ～42岁,平均37岁.健康人来自解放... 详细信息

目的研究MTB早期分泌靶抗原6/培养滤液蛋白10（ESAT-6/CFP-10）抗原对人单核细胞的活化T细胞核因子5（NFAT5）表达的影响.方法收集解放军第三○九医院收治的活动性肺结核患者15例,男9例,女6例,年龄33 ～42岁,平均37岁.健康人来自解放军第三○九医院健康体检中心,共15名,男9名,女6名,年龄37 ～ 42岁,平均40岁.抽取患者和健康体检者的外周血,分离单核细胞,分别用H37Rv全菌裂解液和ESAT-6/CFP-10抗原多肽刺激,提取细胞总RNA,荧光定量PCR方法检测NFAT5 mRNA的表达,采用配对t检验分析刺激前后单核细胞NFAT5mRNA的表达差异.结果活动性结核患者刺激前单核细胞NFAT5 mRNA的相对表达量为（0.23±0.15）,EAST-6/CFP-10抗原多肽刺激后为（0.18±0.12）,表达显著下调（t=2.591,P＜0.05）,而全菌裂解液刺激后表达量（0.28±0.25）没有显著变化（t=1.142,P＞0.05）.健康人刺激前单核细胞NFAT5 mRNA的相对表达量为（0.21 ±0.09）,EAST-6/CFP-10抗原多肽刺激后为（0.17±0.09）,表达显著下调（t=2.828,P＜0.05）,而全菌裂解液刺激后表达量（0.20±0.12）没有显著变化（t=0.452,P＞0.05）.结论 MTB分泌的ESAT-6/CFP-10抗原多肽能够抑制人单核细胞中NFAT5的表达.

关键词：分枝杆菌,结核抗原单核细胞活化T细胞核因子5

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结核分枝杆菌Rv3134c蛋白抗原表位的预测

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中国人兽共患病学报 2015年第6期31卷 541-546页

作者：崔瑞娜白雪娟阳幼荣梁艳张俊仙赵卫国吴雪琼解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091 解放军第309医院呼吸科北京100091

目的预测结核分枝杆菌Rv3134c的抗原表位,了解其免疫学特性。方法利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv3134c氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位,最... 详细信息

目的预测结核分枝杆菌Rv3134c的抗原表位,了解其免疫学特性。方法利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv3134c氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位,最后BLAST分析其与人类抗原表位的同源性。结果 Rv3134c蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,含有较多潜在的B细胞抗原表位,可能位于1-7、30-37、65-81、89-100、111-120、138-148、184-195、209-216、233-238位氨基酸残基或其附近,这些区域基本上含有β转角结构,亲水性、表面可能性和柔韧性指数都较高。该蛋白潜在的T细胞抗原表位较少,可能位于62-76、89-97、185-195、203-213、219-231、248-255位氨基酸残基或其附近。BLAST分析结果显示,其与人类抗原表位的同源性很低。结论结核分枝杆菌Rv3134c是一个即含有较多B细胞抗原表位又含有较多T细胞抗原表位的蛋白抗原,实验结果为该蛋白抗原表位的进一步研究与合成肽疫苗奠定了基础。

关键词：结核分枝杆菌 Rv3134c蛋白抗原表位二级结构预测

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用DNAStar软件预测Rv1410c结核分枝杆菌蛋白抗原表位

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第4期31卷 474-477页

作者：李江英白雪娟梁艳张俊仙阳幼荣赵卫国吴雪琼河北北方学院河北张家口075000 解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室北京100000

目的预测Rv1410c结核分枝杆菌（MTB）的抗原表位。方法利用DNAStar软件包中Editseq软件将Rv1410c MTB氨基酸序列进行编辑保存,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,预测Rv1410c MTB的二级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位,然后再... 详细信息

目的预测Rv1410c结核分枝杆菌（MTB）的抗原表位。方法利用DNAStar软件包中Editseq软件将Rv1410c MTB氨基酸序列进行编辑保存,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,预测Rv1410c MTB的二级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位,然后再用BLAST分析其与人类抗原表位的同源性。结果 Rv1410c具有丰富的二级结构,含有较多潜在的B细胞抗原肽表位,主要位于1~10、67~77、129~137、189~205、222~235、253~267、296~306、330~338、359~367、462~467、494~517氨基酸残基或其附近,这些区域基本上含有β转角结构,亲水性、表面可能性和柔韧性指数都较高;也含有较多潜在的T细胞表位,主要位于16~37、84~102、108~115、137~160、202~207、219~222、245~263、321~325、355~362、387~391、417~445、486~494氨基酸残基或其附近。结论 Rv1410c MTB既含有较多潜在的B细胞抗原表位,也含有较多潜在的T细胞抗原表位。

关键词：抗原表位 DNAStar软件结核分枝杆菌 Rv1410c 二级结构

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ELISPOT检测胸水γ干扰素效应T细胞对结核性胸膜炎的诊断价值研究

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中国病原生物学杂志 2015年第4期10卷 299-302页

作者：白雪娟梁艳刘银萍阳幼荣刘宇崔磊王瞳李江英吴雪琼解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的研究酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测胸水γ干扰素效应T细胞对结核性胸膜炎的诊断价值。方法收集解放军第三O九医院临床确诊的120例结核性胸膜炎患者和55例其他原因所致胸膜炎患者(如恶性或炎性反应等)治疗前的胸水单个核细胞(PEMCs... 详细信息

目的研究酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测胸水γ干扰素效应T细胞对结核性胸膜炎的诊断价值。方法收集解放军第三O九医院临床确诊的120例结核性胸膜炎患者和55例其他原因所致胸膜炎患者(如恶性或炎性反应等)治疗前的胸水单个核细胞(PEMCs)及外周血单个核细胞(PBMCs),用重组CFP10-ESAT6融合蛋白刺激后应用ELISPOT法检测分泌γ干扰素的效应T细胞斑点形成细胞数(SFCs)。结果结核性胸膜炎组(结核组)PBMCs及PEMCs产生的SFCs值均显著高于非结核性胸膜炎组(非结核组)(P<0.01),结核组PBMCs与PEMCs产生的SFCs值差异无统计学意义(P>0.05),但非结核组PBMCs产生的SFCs值显著高于PEMCs(P<0.05)。结核组血和胸水性胸膜炎ELISPOT阳性率分别为62.9%和60.8%,与非结核组36.6%和16.4%比较差异有统计学意义(P<0.05)。结核组血和胸水ELISPOT阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05),但非结核组血ELISPOT阳性率显著高于胸水(P<0.05)。依据PEMC ELISPOT结果诊断结核的灵敏度为60%(63/105),特异度为82.9%(34/41),优于PBMCs和PEMC+PBMCs ELISPOT。结论胸水ELISPOT检测是一种较灵敏、特异的结核性胸膜炎辅助诊断和鉴别诊断方法。

关键词：结核胸膜炎胸水酶联免疫斑点实验诊断

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IRG1 mRNA定量检测对结核感染诊断的价值

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中国免疫学杂志 2015年第5期31卷 667-669,673页

作者：曹志红曹彦程小星解放军第三0九医院全军结核病研究所/全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的:研究活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMCs)经结核特异性抗原刺激后免疫应答基因1(Immuno-responsive gene 1,IRG1)的mRNA表达情况并与结核潜伏感染(Latent tuberculosis infection,LTBI)及非结核感染健康对照组进行比较。方法... 详细信息

目的:研究活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMCs)经结核特异性抗原刺激后免疫应答基因1(Immuno-responsive gene 1,IRG1)的mRNA表达情况并与结核潜伏感染(Latent tuberculosis infection,LTBI)及非结核感染健康对照组进行比较。方法:提取研究对象的PBMCs,经特异性抗原肽刺激后,收集细胞并提取总RNA然后经实时荧光定量PCR检测技术比较各组IRG1 mRNA表达情况。然后以敏感性(Sensitivity)为纵坐标,1-特异性(1-specificity)为横坐标绘制结核感染组(活动性肺结核+LTBI)和非结核感染健康对照组相比较的ROC曲线。结果:经结核特异性抗原刺激后,健康对照组PBMCs中IRG1基因mRNA的相对表达量明显低于结核组和潜伏感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线下面积为0.91。以0.015 36为临界值,鉴别结核感染和非结核感染健康对照的敏感性和特异性分别为76.47%和96.30%,此时阳性似然比等于20.65,85.2%的病例诊断准确。结论:IRG1可能有助于诊断结核感染。

关键词：结核趋化因子 IRG1 LTBI

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