检索结果-内蒙古大学图书馆

中国防痨杂志 2016年第2期38卷 87-89页

作者：赵爱华徐苗郑素华逄宇吴雪琼王国治中国食品药品检定研究院结核病疫苗室北京100050 首都医科大学附属北京胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所流行病学研究室中国疾病预防控制中心结核病预防控制中心国家结核病参比实验室解放军第三0九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室

对世界卫生组织1995年发布的卡介苗声明与2004年发布的卡介苗接种立场文件中的相关观点进行比较、分析、解读，为重新认识卡介苗提供参考依据。同时，从结核病预防控制策略角度，探讨进行卡介苗对青少年及成年人保护效力临床评价的必要... 详细信息

对世界卫生组织1995年发布的卡介苗声明与2004年发布的卡介苗接种立场文件中的相关观点进行比较、分析、解读，为重新认识卡介苗提供参考依据。同时，从结核病预防控制策略角度，探讨进行卡介苗对青少年及成年人保护效力临床评价的必要性，并对如何评价提出建议，以期充分发挥卡介苗的作用。

关键词：结核疫苗卡介苗

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针对世界卫生组织对卡介苗两次文件立场观点差异的探讨

针对世界卫生组织对卡介苗两次文件立场观点差异的探讨

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2016结核病防治服务体系建设研讨会

作者：赵爱华徐苗郑素华逄宇吴雪琼王国治中国食品药品检定研究院结核病疫苗室首都医科大学附属北京胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所流行病学研究室中国疾病预防控制中心结核病预防控制中心国家结核病参比实验室解放军第三O九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室

对世界卫生组织1995年发布的卡介苗声明与2004年发布的卡介苗接种立场文件中的相关观点进行比较、分析、解读,为重新认识卡介苗提供参考依据。同时,从结核病预防控制策略角度,探讨进行卡介苗对青少年及成年人保护效力临床评价的必要性,... 详细信息

对世界卫生组织1995年发布的卡介苗声明与2004年发布的卡介苗接种立场文件中的相关观点进行比较、分析、解读,为重新认识卡介苗提供参考依据。同时,从结核病预防控制策略角度,探讨进行卡介苗对青少年及成年人保护效力临床评价的必要性,并对如何评价提出建议,以期充分发挥卡介苗的作用。

关键词：结核疫苗卡介苗

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以CFP10/ESAT6融合蛋白为抗原的酶联免疫斑点技术在脊柱结核感染辅助诊断中的应用价值

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中国医学科学院学报 2015年第1期37卷 44-49页

作者：袁凯梁德吴雪琼姚珍松晋大祥杨志东张顺聪丁金勇江晓兵陈建庭广州中医药大学第一附属医院脊柱骨科广州510405 中国人民解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室北京100091 南方医科大学南方医院脊柱骨科广州510515

目的评价以CFP10/ESAT6融合蛋白为抗原的酶联免疫斑点(ELISPOT)技术在脊柱结核感染辅助诊断中的应用价值。方法选取2012年5月至2013年12月广州中医药大学第一附属医院脊柱骨科和南方医科大学南方医院脊柱骨科收治的疑似脊柱结核患者91例... 详细信息

目的评价以CFP10/ESAT6融合蛋白为抗原的酶联免疫斑点(ELISPOT)技术在脊柱结核感染辅助诊断中的应用价值。方法选取2012年5月至2013年12月广州中医药大学第一附属医院脊柱骨科和南方医科大学南方医院脊柱骨科收治的疑似脊柱结核患者91例,根据临床和细菌性诊断结果分为脊柱结核组(n=52)和对照组(n=39)。采用ELISPOT试验检测脊柱结核组和对照组外周血单个核细胞,观察斑点形成细胞的数量。患者同时接受结核菌素(PPD)皮肤试验、血清抗结核抗体检测、病灶病理学检查、抗酸杆菌涂片和病灶结核分枝杆菌培养,比较不同检测方法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值,分析不同检测结果的一致性。结果 52例脊柱结核患者中共47例接受病灶活检穿刺病理检查,其中41例病理证实为结核。ELISPOT试验在脊柱结核诊断中的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为82.7%、87.2%、89.6%和79.1%;PPD皮肤试验的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为61.5%、46.2%、60.4%和47.4%;血清抗结核抗体试验的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为55.8%、61.5%、65.9%和51.1%。在脊柱结核患者中,ELISPOT试验的阳性率显著高于PPD皮肤试验(82.7%比61.5%,χ2=5.786,P=0.016)和血清抗结核抗体试验(82.7%比55.8%,χ2=8.847,P=0.003),与病理学检查比较差异无统计学意义(82.7%比87.2%,χ2=0.396,P=0.529)。ELISPOT试验与病理学检查一致性较好(87.2%,κ=0.498,P=0.001)。结论以CFP10/ESAT6融合蛋白为抗原的ELISPOT法应用于脊柱结核诊断有良好的敏感性和特异性,可作为脊柱结核感染辅助诊断的有效方法。

关键词：脊柱结核酶联免疫斑点试验 CFP10/ESAT6融合蛋白辅助诊断

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环介导等温扩增法在结核病诊断中的应用

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临床肺科杂志 2015年第3期20卷 423-425页

作者：杨秉芬王心静蒋静翟斐曹志红程小星解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室北京100091

目的研究环介导等温扩增法在不同临床样本中的结核病诊断价值。方法使用环介导等温扩增法检测肺泡灌洗液、局部穿刺液、腹水和脑脊液中的结核分枝杆菌复合群的特异性基因IS1081,并与实时荧光定量PCR进行比较。结果在荷菌量较高的肺泡灌... 详细信息

目的研究环介导等温扩增法在不同临床样本中的结核病诊断价值。方法使用环介导等温扩增法检测肺泡灌洗液、局部穿刺液、腹水和脑脊液中的结核分枝杆菌复合群的特异性基因IS1081,并与实时荧光定量PCR进行比较。结果在荷菌量较高的肺泡灌洗液和局部穿刺液中,环介导等温扩增法敏感性比实时荧光定量PCR低(80%vs 92%);在荷菌量极低的腹水和脑脊液中,环介导等温扩增法敏感性比实时荧光定量PCR高(34.6%vs 15.4%),但特异性略有下降(80%vs 93.3%);综合计算所有样本的敏感性,环介导等温扩增法与实时荧光定量PCR无显著差别(56.9%vs 52.9%)。结论环介导等温扩增法具有较高敏感性和特异性,可以用于结核病诊断。

关键词：环介导等温扩增法荧光实时定量PCR 结核病

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MCP-1在结核病诊断中的价值

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临床肺科杂志 2015年第2期20卷 195-198页

作者：曹志红曹彦程小星北京解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室100091

目的通过测定外周血单个核细胞(PBMCs)中单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的表达水平,探讨其对结核诊断的意义。方法收集活动性肺结核患者、结核潜伏感染(latent tuberculosis infection,LTBI)及非结核感染健康对照个体的全血并提取PBMCs,经结... 详细信息

目的通过测定外周血单个核细胞(PBMCs)中单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的表达水平,探讨其对结核诊断的意义。方法收集活动性肺结核患者、结核潜伏感染(latent tuberculosis infection,LTBI)及非结核感染健康对照个体的全血并提取PBMCs,经结核特异性抗原肽刺激后,采用基因芯片分析方法和酶联免疫吸附试验(ELISA)比较各组MCP-1表达情况。结果基因芯片分析发现活动期肺结核患者MCP-1表达(4460±3154)明显高于LTBI组(951.8±641.5,P=0.0043)。ELISA分析结果发现刺激前三组MCP-1浓度无差异(P=0.4747),而刺激后只有活动期肺结核患者组(37112±3790 pg/ml)和非结核感染健康对照组(15546±3143 pg/ml)之间的MCP-1浓度相比有显著差异(P<0.0001)。结论高表达的MCP-1有可能作为诊断结核及监测结核严重程度的指标之一,但是无法区分潜伏感染和活动期感染病例。

关键词：结核趋化因子 MCP-1 LTBI

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CD244抑制活动性肺结核患者CD8＋T细胞细胞因子分泌的实验研究

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国际免疫学杂志 2015年第1期38卷 1-4页

作者：杨秉芬翟斐蒋静王心静曹志红程小星解放军第309医院结核病研究所全军结核病防治重点实验室北京100091

目的探讨表面受体CD244在活动性肺结核患者CD8＋T细胞中的功能。方法密度梯度离心法提取活动性肺结核患者和健康对照者的外周血单个核细胞，通过流式细胞术检测CD244在CD3＋CD8＋细胞中的表达；通过细胞内染色方法检测CD244与细胞因子I... 详细信息

目的探讨表面受体CD244在活动性肺结核患者CD8＋T细胞中的功能。方法密度梯度离心法提取活动性肺结核患者和健康对照者的外周血单个核细胞，通过流式细胞术检测CD244在CD3＋CD8＋细胞中的表达；通过细胞内染色方法检测CD244与细胞因子IFN-γ和TNF-α表达的关系。结果CD244在活动性肺结核患者CD8＋T细胞表达强度显著高于健康对照者（P=0．0003）；复治肺结核患者的CD244表达强度显著高于新发肺结核患者（P=0．0011）；CD244-细胞表达IFN-γ比例显著高于CD244＋细胞（P=0．0013）；CD244-细胞表达TNF-α比例显著高于CD244＋细胞（P=0．0016）。结论CD244抑制活动性肺结核患者CD8＋T细胞的细胞因子分泌表达。

关键词：肺结核 CD244 CD8+T细胞细胞因子

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人表皮生长因子的原核优势表达与复性

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生物技术通讯 2015年第5期26卷 655-657页

作者：孙卫国杨栗坤熊志红杨秉芬刘艳华张灵霞解放军第309医院结核病研究所全军结核病防治重点实验室北京100091

目的:在原核系统中获得具有活性和高表达量的重组人表皮生长因子(rh EGF)。方法:对h EGF编码全序列进行优化,构建原核表达载体p ET-24b-h EGF,在大肠杆菌中表达rh EGF;对rh EGF包涵体进行复性,获得具有较高生物活性的重组蛋白。结果:构... 详细信息

目的:在原核系统中获得具有活性和高表达量的重组人表皮生长因子(rh EGF)。方法:对h EGF编码全序列进行优化,构建原核表达载体p ET-24b-h EGF,在大肠杆菌中表达rh EGF;对rh EGF包涵体进行复性,获得具有较高生物活性的重组蛋白。结果:构建了携带159 bp h EGF基因的表达载体p ET-24b-h EGF,rh EGF在原核系统内得到高表达,重组蛋白相对分子质量为6×103,表达量可占细菌总蛋白的15%,包涵体复性率达90%。结论:对h EGF的编码序列进行了优化,实现了其在原核系统内的高表达,通过复性获得了具有良好生物活性的rh EGF。

关键词：人表皮生长因子优化表达包涵体生物活性

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结核潜伏感染蛋白Rv1737cB细胞、CTL及Th表位预测与分析

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实用临床医药杂志 2015年第3期19卷 5-9,43页

作者：白雪娟赵亚静梁艳吴雪琼解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的利用生物信息学方法建立一套预测B细胞、CTL及Th细胞免疫功能多肽的方法,用于筛选新型结核病诊断抗原分子和候选疫苗抗原。方法采用DNAStar软件包中的Protean软件从α螺旋、β折叠及转角等二级结构的数量和分布、亲水性和表面可及... 详细信息

目的利用生物信息学方法建立一套预测B细胞、CTL及Th细胞免疫功能多肽的方法,用于筛选新型结核病诊断抗原分子和候选疫苗抗原。方法采用DNAStar软件包中的Protean软件从α螺旋、β折叠及转角等二级结构的数量和分布、亲水性和表面可及性等方面预测分析该蛋白序列成为B细胞表位的可能性,预测CTL表位时,先采用Blast方法分析该序列与人类序列的同源性,然后综合应用SYFPEITHI超基序法、BIMAS量化基序法及Net CTL预测其CTL表位,应用RANKPEP及SYFPEITHI超基序法远程预测Th细胞表位,筛选表位集中、分值较高者作为候选多肽片段。结果 Protean软件预测结果表明Rv1737c蛋白序列亲水性和表面可及性都较弱,α转角、β折叠结构数目较多且分布广泛,而转角及卷曲结构较少,B细胞表位数目较少;Rv1737c蛋白的CTL及Th表位主要集中于第100位氨基酸之后,其中与HLA-A2表型相对的CTL表位,与HLA-DRB1*0401及HLA-DRB1*1501表型相对的Th表位较其他表型数目较多、分值较高。结论 Rv1737c蛋白可能不利于作为B细胞抗原,但其可能是一种较好的T细胞抗原,成为结核病诊断抗原分子和候选疫苗抗原。

关键词：结核分枝杆菌 Rv1737c 表位预测生物信息学

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人巨细胞病毒pp150-gp52蛋白原核可溶性表达与IgM捕获ELISA方法建立和应用

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现代检验医学杂志 2015年第5期30卷 1-4页

作者：孙卫国孙雯娜侯江厚杨秉芬张灵霞解放军第309医院、结核病研究所、全军结核病防治重点实验室北京100091

目的原核系统内表达并纯化巨细胞病毒pp150-gp52融合蛋白优势抗原表位,建立IgM捕获ELISA方法并应用.方法通过重叠PCR技术扩增获得巨细胞病毒pp150-gp52优势片段核酸序列,在原核系统内可溶性表达DsbCpp150-gp52融合蛋白并纯化,用Wester... 详细信息

目的原核系统内表达并纯化巨细胞病毒pp150-gp52融合蛋白优势抗原表位,建立IgM捕获ELISA方法并应用.方法通过重叠PCR技术扩增获得巨细胞病毒pp150-gp52优势片段核酸序列,在原核系统内可溶性表达DsbCpp150-gp52融合蛋白并纯化,用Western blot和ELISA检测融合蛋白的特异性和应用价值.结果纯化获得的融合蛋白DsbC-pp150-gp52经酶标记建立IgM捕获ELISA方法,检测60份临床阳性血清和60份健康人血清.其中以酶标记DsbC-pp150-gp52蛋白建立的捕获ELISA法阳性检出率96.7％,阴性检出率100％,初步验证DsbC-pp150-gp52融合肽具有非常好的抗原特异性.结论融合蛋白DsbC-pp150-gp52在大肠埃希菌中以可溶性表达形式存在,获得的高纯度重组融合蛋白具有抗原性和特异性强的特点,采用IgM捕获ELISA的实验方法,可开发检测试剂盒用于风疹病毒的早期检测.

关键词：巨细胞病毒 pp150蛋白 gp52蛋白可溶性表达

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人血小板衍生生长因子BB的原核高表达及其包涵体复性

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生物技术通讯 2015年第1期26卷 91-94页

作者：孙卫国张灵霞杨秉芬刘艳华程小星解放军第309医院结核病研究所全军结核病防治重点实验室北京100091

目的:在原核系统内获得高表达的人血小板衍生生长因子BB(PGDF-BB),并对形成的包涵体进行复性。方法:对PGDF-BB核酸编码序列进行优化,构建pET-22b-PGDF-BB表达载体,以提高PCDF-BB的表达量;优化PGDF-BB包涵体复性条件,提高蛋白复性率和生... 详细信息

目的:在原核系统内获得高表达的人血小板衍生生长因子BB(PGDF-BB),并对形成的包涵体进行复性。方法:对PGDF-BB核酸编码序列进行优化,构建pET-22b-PGDF-BB表达载体,以提高PCDF-BB的表达量;优化PGDF-BB包涵体复性条件,提高蛋白复性率和生物活性。结果:构建了pET-22b-PGDF-BB高效表达载体,原核表达的重组人PGDF-BB占细菌总蛋白的25%,PGDF-BB包涵体复性率达到15%。结论:对表达序列的优化设计可显著提高蛋白的表达量,复性方法的改良提高了蛋白的复性率和生物活性。

关键词：人血小板衍生生长因子BB 高表达包涵体复性

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