检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2015年第7期31卷 949-952页

作者：刘艳华王若程小星解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的研究活动性结核患者单核细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)的mRNA水平与结核分枝杆菌(MTB)潜伏感染者和健康者相比是否发生改变。方法收集活动性结核患者、结核菌潜伏感染者和和健康者的抗凝外周血,从外周血中分离并纯化单核细... 详细信息

目的研究活动性结核患者单核细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)的mRNA水平与结核分枝杆菌(MTB)潜伏感染者和健康者相比是否发生改变。方法收集活动性结核患者、结核菌潜伏感染者和和健康者的抗凝外周血,从外周血中分离并纯化单核细胞,荧光定量PCR检测单核细胞中Blimp-1 mRNA的水平。而后分别用MTB的H37Rv菌株全菌裂解液和ESAT-6/CFP-10的抗原多肽刺激健康者的单核细胞,荧光定量PCR检测刺激前后单核细胞中Blimp-1 mRNA的水平。结果与健康者相比,活动性结核患者、潜伏感染者单核细胞Blimp-1的mRNA水平显著降低;与未刺激的单核细胞相比,全菌裂解液刺激后的单核细胞Blimp-1的mRNA水平显著降低,而ESAT-6/CFP-10抗原多肽刺激后的单核细胞中Blimp-1的mRNA水平无显著变化。结论活动性结核患者和MTB潜伏感染者单核细胞Blimp-1的mRNA水平降低,MTB全菌裂解液刺激的人单核细胞中Blimp-1的mRNA水平降低。

关键词：结核分枝杆菌活动性结核 B淋巴细胞诱导成熟蛋白1 单核细胞

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结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白Rv2004c的抗原表位预测

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生物医学工程学杂志 2016年第2期33卷 325-331页

作者：王东方白雪娟刘银萍梁艳吴雪琼林明贵河北北方学院张家口075000 解放军第三〇九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

本文应用生物信息学技术预测结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白Rv2004c的抗原表位,为结核病的诊断和疫苗研发筛选合适的抗原靶位。通过Blast分析发现Rv2004c蛋白与人类蛋白的同源性较低;采用DNAStar软件包中的Protean软件分析其二级结构、... 详细信息

本文应用生物信息学技术预测结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白Rv2004c的抗原表位,为结核病的诊断和疫苗研发筛选合适的抗原靶位。通过Blast分析发现Rv2004c蛋白与人类蛋白的同源性较低;采用DNAStar软件包中的Protean软件分析其二级结构、亲水性、抗原性、柔韧性及表面可能性,预测该蛋白有10个候选B细胞抗原表位;应用RANKPEP及SYFPEITHI法预测该蛋白有37个候选Th细胞抗原表位,主要位于第200位氨基酸之后,其中HLA-DRB1*0401及HLA-DRB1*0701表型相对的表位数目较多且某些候选表位的主要组织相容性复合体(MHC)限制类型存在交叉重叠;应用SYFPEITHI法、BIMAS法及NetCTL法预测该蛋白有10个候选细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位,其中以HLA-A2限制性表位数目较多、分值较高。由此得出结论:Rv2004c蛋白含有较多潜在的T细胞和B细胞抗原表位,可作为新的结核病诊断试剂和疫苗研发的候选靶蛋白。

关键词：结核分枝杆菌 Rv2004c 表位预测生物信息学

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结核分枝杆菌早期分泌抗原对人单核细胞活化T细胞核因子5表达的影响

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中华结核和呼吸杂志 2015年第4期38卷 290-293页

作者：刘艳华王若程小星解放军第三○九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的研究MTB早期分泌靶抗原6/培养滤液蛋白10（ESAT-6/CFP-10）抗原对人单核细胞的活化T细胞核因子5（NFAT5）表达的影响.方法收集解放军第三○九医院收治的活动性肺结核患者15例,男9例,女6例,年龄33 ～42岁,平均37岁.健康人来自解放... 详细信息

目的研究MTB早期分泌靶抗原6/培养滤液蛋白10（ESAT-6/CFP-10）抗原对人单核细胞的活化T细胞核因子5（NFAT5）表达的影响.方法收集解放军第三○九医院收治的活动性肺结核患者15例,男9例,女6例,年龄33 ～42岁,平均37岁.健康人来自解放军第三○九医院健康体检中心,共15名,男9名,女6名,年龄37 ～ 42岁,平均40岁.抽取患者和健康体检者的外周血,分离单核细胞,分别用H37Rv全菌裂解液和ESAT-6/CFP-10抗原多肽刺激,提取细胞总RNA,荧光定量PCR方法检测NFAT5 mRNA的表达,采用配对t检验分析刺激前后单核细胞NFAT5mRNA的表达差异.结果活动性结核患者刺激前单核细胞NFAT5 mRNA的相对表达量为（0.23±0.15）,EAST-6/CFP-10抗原多肽刺激后为（0.18±0.12）,表达显著下调（t=2.591,P＜0.05）,而全菌裂解液刺激后表达量（0.28±0.25）没有显著变化（t=1.142,P＞0.05）.健康人刺激前单核细胞NFAT5 mRNA的相对表达量为（0.21 ±0.09）,EAST-6/CFP-10抗原多肽刺激后为（0.17±0.09）,表达显著下调（t=2.828,P＜0.05）,而全菌裂解液刺激后表达量（0.20±0.12）没有显著变化（t=0.452,P＞0.05）.结论 MTB分泌的ESAT-6/CFP-10抗原多肽能够抑制人单核细胞中NFAT5的表达.

关键词：分枝杆菌,结核抗原单核细胞活化T细胞核因子5

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结核分枝杆菌Rv3134c蛋白抗原表位的预测

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中国人兽共患病学报 2015年第6期31卷 541-546页

作者：崔瑞娜白雪娟阳幼荣梁艳张俊仙赵卫国吴雪琼解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091 解放军第309医院呼吸科北京100091

目的预测结核分枝杆菌Rv3134c的抗原表位,了解其免疫学特性。方法利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv3134c氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位,最... 详细信息

目的预测结核分枝杆菌Rv3134c的抗原表位,了解其免疫学特性。方法利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv3134c氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位,最后BLAST分析其与人类抗原表位的同源性。结果 Rv3134c蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,含有较多潜在的B细胞抗原表位,可能位于1-7、30-37、65-81、89-100、111-120、138-148、184-195、209-216、233-238位氨基酸残基或其附近,这些区域基本上含有β转角结构,亲水性、表面可能性和柔韧性指数都较高。该蛋白潜在的T细胞抗原表位较少,可能位于62-76、89-97、185-195、203-213、219-231、248-255位氨基酸残基或其附近。BLAST分析结果显示,其与人类抗原表位的同源性很低。结论结核分枝杆菌Rv3134c是一个即含有较多B细胞抗原表位又含有较多T细胞抗原表位的蛋白抗原,实验结果为该蛋白抗原表位的进一步研究与合成肽疫苗奠定了基础。

关键词：结核分枝杆菌 Rv3134c蛋白抗原表位二级结构预测

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活动性肺结核患者CD4-＋T细胞中T-bet表达与IFN-γ和TNF-α表达负相关

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细胞与分子免疫学杂志 2017年第1期33卷 72-76页

作者：杨秉芬翟斐蒋静孙卫国王若安红娟程小星解放军第三〇九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的检测在活动性肺结核患者CD4^+T细胞中转录因子T细胞表达的T盒(T-bet)与γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)表达的关系。方法用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),用酶联免疫斑点试验(ELISPOT)筛... 详细信息

目的检测在活动性肺结核患者CD4^+T细胞中转录因子T细胞表达的T盒(T-bet)与γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)表达的关系。方法用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),用酶联免疫斑点试验(ELISPOT)筛选结核分枝杆菌(MTB)潜伏感染者,用流式细胞术检测CD4^+T细胞中T-bet与IFN-γ、TNF-α、IL-2表达的关系。结果潜伏感染者PBMC用MTBH 37Rv裂解液刺激后IFN-γ表达显著性升高;在活动性肺结核患者用MTB H37Rv裂解液刺激,在CD4^+IFN-γ+细胞中的T-bet显著性高于潜伏感染者;在MTB抗原特异性的CD4^+T细胞中T-bet-细胞IFN-γ和TNF-α的表达显著性高于T-bet+细胞;而在MTB抗原特异性的CD4^+T细胞中T-bet-细胞与T-bet+细胞的IL-2的表达无显著差异。结论在活动性肺结核患者外周血抗原特异性CD4^+T细胞中T-bet与IFN-γ、TNF-α表达负相关。

关键词： T细胞表达的T盒(T-bet) γ干扰素(IFN-γ) 肿瘤坏死因子α(TNF-α) 白细胞介素2(IL-2)

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IRG1 mRNA定量检测对结核感染诊断的价值

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中国免疫学杂志 2015年第5期31卷 667-669,673页

作者：曹志红曹彦程小星解放军第三0九医院全军结核病研究所/全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的:研究活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMCs)经结核特异性抗原刺激后免疫应答基因1(Immuno-responsive gene 1,IRG1)的mRNA表达情况并与结核潜伏感染(Latent tuberculosis infection,LTBI)及非结核感染健康对照组进行比较。方法... 详细信息

目的:研究活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMCs)经结核特异性抗原刺激后免疫应答基因1(Immuno-responsive gene 1,IRG1)的mRNA表达情况并与结核潜伏感染(Latent tuberculosis infection,LTBI)及非结核感染健康对照组进行比较。方法:提取研究对象的PBMCs,经特异性抗原肽刺激后,收集细胞并提取总RNA然后经实时荧光定量PCR检测技术比较各组IRG1 mRNA表达情况。然后以敏感性(Sensitivity)为纵坐标,1-特异性(1-specificity)为横坐标绘制结核感染组(活动性肺结核+LTBI)和非结核感染健康对照组相比较的ROC曲线。结果:经结核特异性抗原刺激后,健康对照组PBMCs中IRG1基因mRNA的相对表达量明显低于结核组和潜伏感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线下面积为0.91。以0.015 36为临界值,鉴别结核感染和非结核感染健康对照的敏感性和特异性分别为76.47%和96.30%,此时阳性似然比等于20.65,85.2%的病例诊断准确。结论:IRG1可能有助于诊断结核感染。

关键词：结核趋化因子 IRG1 LTBI

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ELISPOT检测胸水γ干扰素效应T细胞对结核性胸膜炎的诊断价值研究

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中国病原生物学杂志 2015年第4期10卷 299-302页

作者：白雪娟梁艳刘银萍阳幼荣刘宇崔磊王瞳李江英吴雪琼解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的研究酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测胸水γ干扰素效应T细胞对结核性胸膜炎的诊断价值。方法收集解放军第三O九医院临床确诊的120例结核性胸膜炎患者和55例其他原因所致胸膜炎患者(如恶性或炎性反应等)治疗前的胸水单个核细胞(PEMCs... 详细信息

目的研究酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测胸水γ干扰素效应T细胞对结核性胸膜炎的诊断价值。方法收集解放军第三O九医院临床确诊的120例结核性胸膜炎患者和55例其他原因所致胸膜炎患者(如恶性或炎性反应等)治疗前的胸水单个核细胞(PEMCs)及外周血单个核细胞(PBMCs),用重组CFP10-ESAT6融合蛋白刺激后应用ELISPOT法检测分泌γ干扰素的效应T细胞斑点形成细胞数(SFCs)。结果结核性胸膜炎组(结核组)PBMCs及PEMCs产生的SFCs值均显著高于非结核性胸膜炎组(非结核组)(P<0.01),结核组PBMCs与PEMCs产生的SFCs值差异无统计学意义(P>0.05),但非结核组PBMCs产生的SFCs值显著高于PEMCs(P<0.05)。结核组血和胸水性胸膜炎ELISPOT阳性率分别为62.9%和60.8%,与非结核组36.6%和16.4%比较差异有统计学意义(P<0.05)。结核组血和胸水ELISPOT阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05),但非结核组血ELISPOT阳性率显著高于胸水(P<0.05)。依据PEMC ELISPOT结果诊断结核的灵敏度为60%(63/105),特异度为82.9%(34/41),优于PBMCs和PEMC+PBMCs ELISPOT。结论胸水ELISPOT检测是一种较灵敏、特异的结核性胸膜炎辅助诊断和鉴别诊断方法。

关键词：结核胸膜炎胸水酶联免疫斑点实验诊断

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CD244与活动性肺结核患者CD56^(bright)NK细胞表型及功能的关系研究

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中国免疫学杂志 2017年第5期33卷 721-725页

作者：杨秉芬翟斐蒋静王心静曹志红程小星解放军第三〇九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的:探索CD244与活动性肺结核患者CD56^(bright)NK细胞表型及功能的关系。方法:用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMCs),用流式细胞术检测活动性肺结核患者与正常对照者CD56^(bright)NK细胞表面CD244、CD94、NKG2D表达差异,进一... 详细信息

目的:探索CD244与活动性肺结核患者CD56^(bright)NK细胞表型及功能的关系。方法:用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMCs),用流式细胞术检测活动性肺结核患者与正常对照者CD56^(bright)NK细胞表面CD244、CD94、NKG2D表达差异,进一步检测活动性肺结核患者CD56^(bright)NK细胞CD244与Tim3、CD27、CD62L、CCR7、CD107a、IFN-γ表达的关系。结果:不经过结核菌抗原刺激的外周血中的CD56^(bright)NK细胞表面CD244表达在活动性肺结核患者和正常对照中并没有显著性差异;经过结核菌抗原刺激的活动性肺结核患者CD56^(bright)NK细胞表面CD244表达显著高于正常对照者;CD56^(bright)NK细胞表面CD94和NKG2D表达,在活动性肺结核患者与健康对照者之间无显著性差异;活动性肺结核患者CD244+CD56^(bright)NK细胞表面Tim3^+细胞显著性升高,而细胞表面CD62L显著性降低,细胞内IFN-γ显著性降低;然而CD244^+CD56^(bright)NK细胞和CD244^-CD56^(bright)NK细胞之间CD107a表达无显著性差异。结论:在活动性肺结核患者PBMCs中CD56^(bright)NK细胞表面高表达CD244,可能与抑制受体Tim3协同抑制IFN-γ的表达,但是与NK细胞的脱颗粒作用无关。

关键词： CD56^brightNK细胞 CD244 Tim3 IFN-γ CD107a

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结核分枝杆菌Rv3425-Rv1168c蛋白融合表达与血清学评价

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中国人兽共患病学报 2019年第1期35卷 1-4,10页

作者：胡永亮孙卫国张灵霞梁晓博中国人民解放军第309医院皮肤科北京100091 解放军第309医院结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的原核表达结核分枝杆菌Rv3425-Rv1168c融合蛋白并进行纯化,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)方法评价重组蛋白在结核病血清学诊断中的价值。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,通过重叠PCR扩增得到Rv3425-Rv1168c全核酸序列克隆至表... 详细信息

目的原核表达结核分枝杆菌Rv3425-Rv1168c融合蛋白并进行纯化,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)方法评价重组蛋白在结核病血清学诊断中的价值。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,通过重叠PCR扩增得到Rv3425-Rv1168c全核酸序列克隆至表达载体pET-24b中,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导、表达和纯化,通过ELISA检测100份确诊结核病人、20例非结核呼吸疾病患者、100份健康人血清,评价融合蛋白进行临床血清学诊断的可行性。结果 Rv3425-Rv1168c融合蛋白在原核系统内获得高表达,纯化的融合蛋白经ELISA方法测定,在血清学实验中敏感性为54%,特异性为95%。结论 Rv3425-Rv1168c融合蛋白具有较高的抗原特异性和免疫原性,在结核病血清学诊断方面具有很大的应用价值。

关键词：结核分枝杆菌 Rv3425蛋白 Rv1168c蛋白血清学诊断

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结核分枝杆菌rpoB基因突变与三种利福霉素类抗结核药物耐受相关性研究

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中国病原生物学杂志 2016年第11期11卷 982-985页

作者：刘银萍王杰张俊仙李洪敏吴雪琼解放军第三〇九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的研究结核分枝杆菌(Mtb)rpoB基因突变与3种利福霉素类抗结核药物耐受之间的关系,了解Mtb对3种利福霉素类抗结核药物的耐药情况。方法 104例PNB、TCH鉴别培养Mtb阳性患者的临床标本通过绝对浓度法同时进行利福平(RFP)、利福喷丁(RFT)... 详细信息

目的研究结核分枝杆菌(Mtb)rpoB基因突变与3种利福霉素类抗结核药物耐受之间的关系,了解Mtb对3种利福霉素类抗结核药物的耐药情况。方法 104例PNB、TCH鉴别培养Mtb阳性患者的临床标本通过绝对浓度法同时进行利福平(RFP)、利福喷丁(RFT)和利福布丁(RFB)药敏试验,并用基因芯片检测Mtb rpoB基因型。结果在104例患者临床标本中,传统药敏试验显示Mtb对RFP、RFT和RFB的耐药率分别为22.1%(其中高耐药率19.2%、低耐药率2.9%)、21.2%(其中高耐药率18.3%、低耐药率2.9%)、20.2%(其中高耐药率11.5%、低耐药率8.7%)。以传统药敏试验为对照,基因芯片检测rpoB基因突变预示RFP、RFT和RFB耐受的灵敏度分别为78.3%(18/23)、77.3%(17/22)和81.0%(17/21),特异性分别为88.9%(72/81)、87.8%(72/82)和88.0%(73/83)。结论 Mtb对3种利福霉素类抗结核药物耐受的一致率高,rpoB基因突变与3种利福霉素类药物耐受密切相关。应用基因芯片可快速检测其耐药基因型,指导临床合理用药。

关键词：结核分枝杆菌利福霉素类药物 rpoB基因基因芯片耐药

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