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中国防痨杂志 2017年第5期39卷 439-441页

作者：凌彦博吴雪琼解放军第三〇九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

结核病是一直受到广泛关注的世界性健康问题，耐药结核病的不断增长是有效控制结核病的主要威胁，结核病的防控形势非常严峻。因此，以细胞治疗为代表的生物治疗得到广泛应用，细胞免疫治疗将有机会成为复治、难治结核病个体化综合治疗... 详细信息

结核病是一直受到广泛关注的世界性健康问题，耐药结核病的不断增长是有效控制结核病的主要威胁，结核病的防控形势非常严峻。因此，以细胞治疗为代表的生物治疗得到广泛应用，细胞免疫治疗将有机会成为复治、难治结核病个体化综合治疗的重要组成部分及研究热点。作者就结核病的细胞免疫治疗研究进展结合参考文献进行重点阐述。

关键词：结核病免疫疗法组织疗法综合疗法评论

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Rv1813c在结核分枝杆菌潜伏感染诊断中的价值

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标记免疫分析与临床 2017年第4期24卷 361-365页

作者：白雪娟梁艳阳幼荣吴雪琼解放军第三〇九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的研究重组结核分枝杆菌潜伏感染蛋白Rv1813c在诊断结核分枝杆菌潜伏感染方面的价值。方法 20例结核潜伏感染者和79例健康志愿者均行胸部X线检查、PPD皮肤试验、结核抗体检测,同时应用ELISA联合重组融合蛋白CFP10-ESAT6和潜伏感染蛋白... 详细信息

目的研究重组结核分枝杆菌潜伏感染蛋白Rv1813c在诊断结核分枝杆菌潜伏感染方面的价值。方法 20例结核潜伏感染者和79例健康志愿者均行胸部X线检查、PPD皮肤试验、结核抗体检测,同时应用ELISA联合重组融合蛋白CFP10-ESAT6和潜伏感染蛋白Rv1813c进行IGRA检测。结果所有受试者中,PPD皮肤试验和抗体检测的阳性率分别为50%和28%。Rv1813c刺激潜伏感染者后产生IFN-γ的水平显著高于健康对照(P<0.05),其刺激PPD强阳性组(皮试直径≥15mm)产生的IFN-γ值低于弱阳性组(5mm≤皮试直径<15mm),但无统计学意义,而CFP10-ESAT6刺激PPD强阳性组后产生的IFN-γ值高于弱阳性组(P<0.05)。CFP10-ESAT6和Rv1813c刺激抗体阴性及阳性组后产生的IFN-γ水平没有显著性差异(P>0.05)。Rv1813c诊断结核感染的ROC曲线下面积为0.834,特异性80%时,灵敏度为85%;特异性为90%时,灵敏度为45%。结论同时检测Rv1813c及CFP10-ESAT6抗原特异的IFN-γ值有可能筛选出潜伏感染者中的活动感染人群,对于结核分枝杆菌潜伏感染诊断有重要的应用价值。

关键词：结核潜伏感染 CFP10-ESAT6融合蛋白 Rv1813c蛋白 γ干扰素释放试验诊断

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合理应用药物敏感性试验提高耐多药结核病诊断率

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中国防痨杂志 2017年第3期39卷 222-225页

作者：吴雪琼张俊仙解放军第三○九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

耐多药结核病（MDR-TB）是目前临床结核病治疗的难题之一,快速检出耐多药的结核分枝杆菌（MTB）,指导临床选择有效抗结核药物,制定合理的化疗方案,是控制MDR-TB的关键.目前抗结核药物的药物敏感性试验（简称“药敏试验”）方法主要有下... 详细信息

耐多药结核病（MDR-TB）是目前临床结核病治疗的难题之一,快速检出耐多药的结核分枝杆菌（MTB）,指导临床选择有效抗结核药物,制定合理的化疗方案,是控制MDR-TB的关键.目前抗结核药物的药物敏感性试验（简称“药敏试验”）方法主要有下列三类：一是建立在细菌生长基础上的药敏试验方法;二是建立在基因多态性分析基础上的分子药敏试验方法;三是建立在耐药MTB特异组分基础上的色谱、质谱方法.作者概要地介绍了MTB的药敏试验方法,以及联合应用现有药敏检测技术以提高临床对MDR-TB的诊断率.

关键词：分枝杆菌,结核药物耐受性微生物敏感性试验

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结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白Rv2004c的抗原表位预测

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生物医学工程学杂志 2016年第2期33卷 325-331页

作者：王东方白雪娟刘银萍梁艳吴雪琼林明贵河北北方学院张家口075000 解放军第三〇九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

本文应用生物信息学技术预测结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白Rv2004c的抗原表位,为结核病的诊断和疫苗研发筛选合适的抗原靶位。通过Blast分析发现Rv2004c蛋白与人类蛋白的同源性较低;采用DNAStar软件包中的Protean软件分析其二级结构、... 详细信息

本文应用生物信息学技术预测结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白Rv2004c的抗原表位,为结核病的诊断和疫苗研发筛选合适的抗原靶位。通过Blast分析发现Rv2004c蛋白与人类蛋白的同源性较低;采用DNAStar软件包中的Protean软件分析其二级结构、亲水性、抗原性、柔韧性及表面可能性,预测该蛋白有10个候选B细胞抗原表位;应用RANKPEP及SYFPEITHI法预测该蛋白有37个候选Th细胞抗原表位,主要位于第200位氨基酸之后,其中HLA-DRB1*0401及HLA-DRB1*0701表型相对的表位数目较多且某些候选表位的主要组织相容性复合体(MHC)限制类型存在交叉重叠;应用SYFPEITHI法、BIMAS法及NetCTL法预测该蛋白有10个候选细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位,其中以HLA-A2限制性表位数目较多、分值较高。由此得出结论:Rv2004c蛋白含有较多潜在的T细胞和B细胞抗原表位,可作为新的结核病诊断试剂和疫苗研发的候选靶蛋白。

关键词：结核分枝杆菌 Rv2004c 表位预测生物信息学

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牛贝消核验方治疗结核病临床观察

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中医学报 2017年第4期32卷 528-530页

作者：李改梅凌彦博梁艳陈实兵刘光陵吴雪琼南京中医药大学江苏南京210029 中国人民解放军第三0九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的:观察牛贝消核验方治疗结核病的临床疗效。方法:90例结核病患者均给予牛贝消核复方进行治疗,其中83例服用汤剂,7例服用散剂,3~4个月后复查胸片和痰菌。结果:治疗3~8个月后,汤剂组83例患者中治愈46例(55.42%),显效29例(34.94%),有效6... 详细信息

目的:观察牛贝消核验方治疗结核病的临床疗效。方法:90例结核病患者均给予牛贝消核复方进行治疗,其中83例服用汤剂,7例服用散剂,3~4个月后复查胸片和痰菌。结果:治疗3~8个月后,汤剂组83例患者中治愈46例(55.42%),显效29例(34.94%),有效6例(7.23%),无效2例(2.41%),有效率97.59%;散剂组7例患者中,治愈5例(71.43%),显效2例(28.57%),有效率100.00%。结论:牛贝消核复方汤剂和散剂治疗结核病疗效均显著。

关键词：结核病牛贝消核验方中医疗法

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军事医学 2016年第5期40卷 401-404页

作者：崔波彭伟白雪娟李江英吴霄阳幼荣黄迅悟吴雪琼河北北方学院河北张家口075000 解放军309医院关节外科北京100091 解放军309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的研究结核分枝杆菌（***）潜伏感染相关蛋白Rv2659c对结核潜伏感染与活动性骨关节结核T细胞免疫应答的特性。方法使用CFP10-ESTA6蛋白（CE）通过酶联免疫斑点实验（ELISPOT）从健康志愿者中筛选出未感染健康组（42例）和结核潜伏感... 详细信息

目的研究结核分枝杆菌（***）潜伏感染相关蛋白Rv2659c对结核潜伏感染与活动性骨关节结核T细胞免疫应答的特性。方法使用CFP10-ESTA6蛋白（CE）通过酶联免疫斑点实验（ELISPOT）从健康志愿者中筛选出未感染健康组（42例）和结核潜伏感染组（33例）。从住院志愿者中筛选出非结核骨关节病组（35例）及活动性骨关节结核病组（30例）。使用Rv2659c蛋白刺激各组人群外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,应用ELISPOT技术检测分泌IFN-γ的效应T细胞斑点数（斑点形成细胞,spot forming cells,SFC）,比较其在不同人群中的差异;以潜伏感染组为阳性组,以活动性骨关节结核病组为阴性组,绘制Rv2659c潜伏抗原的ROC曲线,在特异度80%及90%两个点取SFC的cut-off值,评价Rv2659c对结核潜伏感染与活动性骨关节结核的鉴别诊断效能。结果潜伏感染组的SFC值（2.5/28）显著高于活动性骨关节结核病组（0/2）、非结核骨关节病组（2.5/6.25）及未感染健康组（0/2.5）,均P〈0.05。Rv2659c重组蛋白的曲线下面积（AUC）为65.2%,95%可信区间（CI）0.51～0.794。特异度80%时,cut-off值为3;特异度90%时,cut-off值为5。Rv2659c蛋白诱导产生细胞免疫应答的阳性率在潜伏感染组最高（54.5%）,显著高于活动性骨关节结核病组（20%）、非结核骨关节病组（11.4%）以及未感染健康组（16.7%）3组,均P〈0.05。结论 Rv2659c诱导活动性骨关节结核患者效应T细胞产生的免疫应答显著低于结核潜伏感染人群;Rv2659c对于鉴别结核潜伏感染人群与活动性骨关节结核病具有一定诊断价值。

关键词：结核分枝杆菌潜伏感染结核,骨关节免疫 Rv2659c蛋白 T淋巴细胞

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结核分枝杆菌rpoB基因突变与三种利福霉素类抗结核药物耐受相关性研究

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中国病原生物学杂志 2016年第11期11卷 982-985页

作者：刘银萍王杰张俊仙李洪敏吴雪琼解放军第三〇九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的研究结核分枝杆菌(Mtb)rpoB基因突变与3种利福霉素类抗结核药物耐受之间的关系,了解Mtb对3种利福霉素类抗结核药物的耐药情况。方法 104例PNB、TCH鉴别培养Mtb阳性患者的临床标本通过绝对浓度法同时进行利福平(RFP)、利福喷丁(RFT)... 详细信息

目的研究结核分枝杆菌(Mtb)rpoB基因突变与3种利福霉素类抗结核药物耐受之间的关系,了解Mtb对3种利福霉素类抗结核药物的耐药情况。方法 104例PNB、TCH鉴别培养Mtb阳性患者的临床标本通过绝对浓度法同时进行利福平(RFP)、利福喷丁(RFT)和利福布丁(RFB)药敏试验,并用基因芯片检测Mtb rpoB基因型。结果在104例患者临床标本中,传统药敏试验显示Mtb对RFP、RFT和RFB的耐药率分别为22.1%(其中高耐药率19.2%、低耐药率2.9%)、21.2%(其中高耐药率18.3%、低耐药率2.9%)、20.2%(其中高耐药率11.5%、低耐药率8.7%)。以传统药敏试验为对照,基因芯片检测rpoB基因突变预示RFP、RFT和RFB耐受的灵敏度分别为78.3%(18/23)、77.3%(17/22)和81.0%(17/21),特异性分别为88.9%(72/81)、87.8%(72/82)和88.0%(73/83)。结论 Mtb对3种利福霉素类抗结核药物耐受的一致率高,rpoB基因突变与3种利福霉素类药物耐受密切相关。应用基因芯片可快速检测其耐药基因型,指导临床合理用药。

关键词：结核分枝杆菌利福霉素类药物 rpoB基因基因芯片耐药

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应用DNAStar软件预测结核分枝杆菌Rv3812的抗原表位

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郑州大学学报（医学版） 2016年第2期51卷 166-170页

作者：李江英白雪娟梁艳张俊仙阳幼荣赵卫国吴雪琼河北北方学院张家口075000 解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室北京100091

目的：预测结核分枝杆菌Rv3812蛋白的抗原表位。方法：利用DNAStar软件包中Editseq软件将结核分枝杆菌Rv3812氨基酸序列进行编辑保存,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,预测Rv3812蛋白的二级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位,... 详细信息

目的：预测结核分枝杆菌Rv3812蛋白的抗原表位。方法：利用DNAStar软件包中Editseq软件将结核分枝杆菌Rv3812氨基酸序列进行编辑保存,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,预测Rv3812蛋白的二级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位,然后再用BLAST分析其与人类抗原表位的同源性。结果：Rv3812蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,潜在的B细胞抗原表位较少,可能位于55～68、77～99、116～120、265～280、283～294、303～326、330～337和425～435位氨基酸残基或其附近。该蛋白潜在的T细胞抗原表位较多,可能位于6～30、55～85、97～140、159～191、202～204、208～231、251～264、270～281、287～299、311～334、337～343、349～356、368～385、394～413、428～433、437～441、470～476、479～481和488～493位氨基酸残基或其附近。结论：Rv3812是一个T细胞抗原表位占优势的蛋白抗原,B细胞抗原表位略少。

关键词：抗原表位结核分枝杆菌Rv3812 二级结构

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结核分枝杆菌Rv1242蛋白抗原表位的预测

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郑州大学学报（医学版） 2016年第3期51卷 345-348页

作者：侯英白雪娟梁艳吴雪琼北京卫生职业学院医学技术系北京100053 中国人民解放军第309医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京100091

目的:预测结核分枝杆菌Rv1242蛋白的抗原表位。方法:利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv1242氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位。结果:Rv1242蛋... 详细信息

目的:预测结核分枝杆菌Rv1242蛋白的抗原表位。方法:利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv1242氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位。结果:Rv1242蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,有7个亲水性区域,含有B细胞抗原肽表位(可能在17-38、72-82、84-90、116-130、134-143位氨基酸残基或其附近),这些表位抗原性较好,都含有β转角和不规则卷曲结构,表面可能性和柔韧性都较大。该蛋白还含有T细胞抗原肽表位(可能在24-33、42-59、68-77、90-108位氨基酸残基或其附近)。结论:Rv1242蛋白可能是一个既有T细胞抗原表位、也有B细胞抗原表位的抗原,该研究为进一步研究该蛋白抗原表位及其应用奠定了基础。

关键词：抗原表位 Rv1242蛋白二级结构结核分枝杆菌

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应用PCR-反向膜杂交技术对疑似关节结核患者行分枝杆菌菌种鉴定

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中国矫形外科杂志 2016年第7期24卷 653-656页

作者：吴霄张俊仙王杰彭伟吴涛崔波黄迅悟吴雪琼河北北方学院河北张家口市075000 解放军第三〇九医院关节外科北京市100091 解放军第三〇九医院全军结核病研究所全军结核病防治重点实验室/结核病诊疗新技术北京市重点实验室北京市100091

[目的]探讨PCR-反向膜杂交技术鉴定疑似关节结核临床标本中分枝杆菌菌种的应用价值。[方法]应用PCR-反向膜杂交法和培养菌种鉴定法对35例疑似关节结核和35例非关节结核临床标本行分枝杆菌菌种鉴定,应用PCR-直接测序法验证PCR-反向膜杂... 详细信息

[目的]探讨PCR-反向膜杂交技术鉴定疑似关节结核临床标本中分枝杆菌菌种的应用价值。[方法]应用PCR-反向膜杂交法和培养菌种鉴定法对35例疑似关节结核和35例非关节结核临床标本行分枝杆菌菌种鉴定,应用PCR-直接测序法验证PCR-反向膜杂交法阳性鉴定结果准确性。[结果]培养菌种鉴定法在疑似关节结核组培养鉴定出8例结核分枝杆菌,1例牛结核分枝杆菌,非关节结核组培养结果均为阴性;灵敏度25.7%,特异度100%。PCR-反向膜杂交法在疑似关节结核组鉴定出18例结核分枝杆菌复合群,1例戈登分枝杆菌,1例浅黄分枝杆菌,与PCR-直接测序结果一致;非关节结核组中1例结核分枝杆菌复合群阳性,PCR-直接测序未扩增出核苷酸序列;灵敏度57.1%,特异度97.1%。两种菌种鉴定法检测阳性率差异有统计学意义(x^2=11.28,P=0.01)。[结论]PCR-反向膜杂交技术可快速将疑似关节结核中分枝杆菌鉴定至种,指导诊断。

关键词：关节结核 PCR-反向膜杂交分枝杆菌菌种鉴定

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