检索结果-内蒙古大学图书馆

解放军医学杂志 2013年第8期38卷 625-628页

作者：魏玉香周文强肖漓郑德华齐帜蔡明钱叶勇于涛廖珂石炳毅解放军309医院全军器官移植研究所器官移植与免疫调节北京市重点实验室北京100091

目的探讨吞噬经体外光化学法(PUVA)处理的同种异基因淋巴细胞的未成熟树突细胞(imDC)对脂多糖(LPS)介导的树突细胞(DC)激活的抑制作用。方法分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,经小鼠重组白细胞介素4(rmIL-4)和重组粒-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-... 详细信息

目的探讨吞噬经体外光化学法(PUVA)处理的同种异基因淋巴细胞的未成熟树突细胞(imDC)对脂多糖(LPS)介导的树突细胞(DC)激活的抑制作用。方法分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,经小鼠重组白细胞介素4(rmIL-4)和重组粒-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)共同诱导培养制备骨髓来源的C57BL/6小鼠imDC。分离BALB/c小鼠脾淋巴细胞(SP),经PUVA处理制备成PUVA-SP。在体外将BALB/c小鼠的PUVA-SP与C57BL/6小鼠骨髓来源的imDC共同培养,获得PUVA-SP DCs。在上述imDC和PUVA-SP DCs中分别加入10ng/ml LPS刺激24h,获得LPS DCs。采用ELISA法检测上清中IL-10和IL-12的浓度,流式细胞仪检测细胞表面MHC-Ⅱ、CD40、CD86和CD80的表达水平。结果 LPS刺激后,PUVA-SP DCs表面分子CD80、CD86、CD40的表达分别为21.26%、38.50%和39.78%,远远低于imDC经LPS刺激后的表达(50.58%、66.29%、71.20%,P<0.01)。LPS刺激后PUVA-SP DCs和imDCs MHC-Ⅱ的表达分别为67.29%和68.64%,差异无统计学意义(P>0.05)。LPS刺激后,PUVA-SP DCs和imDCs分泌IL-10的水平分别为435.6±13.9pg/ml和132.6±2.8pg/ml,与刺激前相比均增高,但前者增高的水平要显著高于后者(P<0.01)。LPS刺激后,imDCs分泌高水平的IL-12,其p70和p40的表达量分别为192.1±5.9和999.8±26.9pg/ml,而PUVA-SP DCs分泌IL-12的水平分别为p7018.56±1.3pg/ml,p40 15.22±1.2pg/ml,显著低于imDCs,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PUVA-SP DCs虽然表达不成熟表型,但其功能不同于imDC,对LPS刺激具有抑制作用,适用于诱导体内免疫耐受。

关键词：树突细胞免疫耐受脂多糖类

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调节性树突细胞对皮肤移植小鼠IL-10＋调节性B细胞的影响

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解放军医学杂志 2013年第4期38卷 274-278页

作者：魏玉香周文强肖漓郑德华齐帜蔡明钱叶勇于涛廖珂石炳毅解放军309医院全军器官移植研究所器官移植与免疫调节北京市重点实验室北京100091

目的探讨吞噬了供者凋亡淋巴细胞的未成熟树突细胞(imDC)对皮肤移植受体小鼠外周血IL-10+CD19+调节性B细胞(Breg)比例及移植物存活时间的影响。方法以C57BL/6小鼠作为受者,BALB/c小鼠为供者,建立小鼠皮肤移植模型。分离C57BL/6小鼠骨髓... 详细信息

目的探讨吞噬了供者凋亡淋巴细胞的未成熟树突细胞(imDC)对皮肤移植受体小鼠外周血IL-10+CD19+调节性B细胞(Breg)比例及移植物存活时间的影响。方法以C57BL/6小鼠作为受者,BALB/c小鼠为供者,建立小鼠皮肤移植模型。分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,经小鼠重组白细胞介素4(IL-4)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)共同诱导,制备并培养imDC。分离BALB/c小鼠脾淋巴细胞(SP),经光化学照射方法(PUVA)处理,得到供者小鼠脾淋巴细胞(PUVA-SP)。在体外将PUVA-SP与C57BL/6小鼠骨髓来源的imDC共同培养,得到PUVA-SP DCs。根据受体小鼠术前接受的静脉输注成分将其随机分为4组(n=14):PUVA-SP DC组、imDC组、成熟树突细胞(maDC)组和PBS对照组。于手术前7d分别从尾静脉注入1×l06个(0.2ml)PUVA-SP DC、imDC、maDC或0.2ml PBS。于移植术后观察受体小鼠的移植物存活时间、外周血IL-10+CD19+Breg比例及IL-10的表达情况。结果移植术后,受体小鼠外周血IL-10+CD19+Breg细胞占CD19+B细胞的比例在PUVA-SP DC组为7.48%,明显高于imDC组(4.12%)、maDC组(3.01%)和PBS对照组(2.37%)。PUVA-SP DC组小鼠血清中IL-10表达水平为58.2±0.9ng/ml,与maDC组(20.1±1.6ng/ml)、imDC组(26.2±1.3ng/ml)及PBS对照组(19.0±0.6ng/ml)比较显著升高(P<0.01)。PUVA-SP DC组移植物存活时间为62.3±2.6d,显著长于maDC组(20.7±1.9d)、imDC组(12.1±1.0d)和PBS对照组(11.0±1.3d,P<0.01)。结论移植术前输注PUVA-SP DCs可显著延长移植物存活时间,增加受者体内IL-10的表达水平,诱导产生较多分泌IL-10的调节性B细胞。

关键词：树突细胞皮肤移植调节性B细胞

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趋化性细胞因子在肾移植排斥反应中的临床应用价值

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解放军医学杂志 2014年第10期39卷 826-830页

作者：肖漓何秀云周文强樊文梅魏玉香王新颖高钰马锡慧孔祥瑞韩永许晓光黄海燕石炳毅解放军309医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨趋化性细胞因子在肾移植排斥反应中的临床应用价值。方法选取2011年1-12月在解放军第309医院全军器官移植研究所进行同种异体肾移植术的患者21例[分为急性排斥反应(AR)组(n=11)、功能稳定组(F组,n=10)]和健康志愿者10例(C组,n=... 详细信息

目的探讨趋化性细胞因子在肾移植排斥反应中的临床应用价值。方法选取2011年1-12月在解放军第309医院全军器官移植研究所进行同种异体肾移植术的患者21例[分为急性排斥反应(AR)组(n=11)、功能稳定组(F组,n=10)]和健康志愿者10例(C组,n=10)。分别于术前1d,术后第1、7、14、28天以及排斥反应发生时应用流式微球捕获技术(CBA)检测患者血浆中单核趋化蛋白-1(MCP-1)、调节激活正常T细胞表达分泌因子(RNATES)、中性粒细胞激活蛋白-1(NAP-1/IL-8)、IFN-γ诱生单核因子(MIG)和IFN-γ诱导蛋白-10(IP-10)的表达情况;并采用Spearman相关分析趋化细胞因子与肌酐水平的相关性。结果与健康志愿组相比,肾移植患者术前MCP-1、MIG、IP-10水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);IL-8和RANTES无明显差异(P>0.05)。AR发生时,AR组患者的MCP-1、IL-8、MIG、IP-10与F组比较明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),而两组RANTES差异无统计学意义(P>0.05)。趋化性细胞因子与肌酐的相关性分析发现,IL-8和MIG与肌酐均呈正相关[r分别为0.4896、0.6245(P<0.01)],MCP-1、RNATES、IP-10与肌酐无显著相关性(P>0.05)。结论趋化性细胞因子在肾移植排斥反应中发挥重要作用,肾移植术后应监测其变化情况。

关键词：炎症趋化因子类肾移植移植物排斥

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膜型HLA-G及其受体的表达与肾移植术后排斥反应以及CMV活动性感染的相关性

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中华医学杂志 2017年第2期97卷 104-107页

作者：毕丽丽高钰孙玉洁孔祥瑞何秀云马锡慧张文慧肖漓石炳毅解放军第三〇九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的研究膜型人类白细胞抗原G（mHLA－G）及其受体免疫球蛋白样转录物2（ILT2）在淋巴细胞上的表达率与肾移植术后发生排斥反应和巨细胞病毒（CMV）感染的相关性。方法选取2014年2月至2016年2月解放军第三〇九医院全军器官移植中心施行... 详细信息

目的研究膜型人类白细胞抗原G（mHLA－G）及其受体免疫球蛋白样转录物2（ILT2）在淋巴细胞上的表达率与肾移植术后发生排斥反应和巨细胞病毒（CMV）感染的相关性。方法选取2014年2月至2016年2月解放军第三〇九医院全军器官移植中心施行初次肾移植受者88例，按照术后是否单纯发生排斥反应，将受者分为排斥反应组（12例）和肾功能稳定组（41例）；肾移植术后未发生排斥反应，仅单纯发生CMV活动性感染为CMV阳性组（24例）；肾移植术后未发生排斥反应，曾经发生CMV活动性感染，后又转阴的受者为CMV阴性组（11例）。通过流式细胞术检测mHLA－G、ILT2在T、B淋巴细胞的表达，分析不同组间差异。结果肾移植术后发生排斥反应时T、B淋巴细胞mHLA－G的表达率最低（0.42%±0.35%、0.88%±0.47%），与肾功能稳定组、CMV阳性组差异均有统计学意义（均P〈0.01）；而在CMV阳性组（CMV活动性感染时），T、B淋巴细胞mHLA－G的表达率最高（1.31%±0.69%、2.01%±0.91%），与排斥反应组差异有统计学意义（均P〈0.001）；B淋巴细胞mHLA－G的表达率在CMV阳性组与CMV阴性组差异有统计学意义（P〈0.05）。B淋巴细胞ILT2表达率在4组间差异无统计学意义（P〉0.05），T细胞ILT2的表达率在CMV阳性组较高（36.91%±14.91%），与其余3组间差异有统计学意义（均P〈0.01）。结论肾移植受者术后mHLA－G在T、B淋巴细胞的表达过低容易发生排斥反应。mHLA－G和ILT2在淋巴细胞表达过高容易发生CMV活动性感染。

关键词：肾移植 HLA抗原移植物排斥巨细胞病毒感染免疫球蛋白样转录物

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体外光化学疗法处理的调节性树突细胞对T细胞增殖的影响

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解放军医学杂志 2017年第8期42卷 698-701页

作者：杜国盛杨绍臻魏玉香索龙龙封立魁宋继勇朱志东解放军309医院全军器官移植研究所肝胆外科北京100091 解放军309医院器官移植与免疫调节北京市重点实验室北京100091

目的探讨体外光化学疗法处理的调节性树突细胞对T细胞增殖的影响。方法获取人外周血单个核细胞(PBMC),利用白介素-4重组人粒细、巨噬细胞集落刺激因子诱导生成未成熟的树突细胞(im DC)。分离获取人脾脏淋巴细胞(SP),经光化学疗法(PUVA)... 详细信息

目的探讨体外光化学疗法处理的调节性树突细胞对T细胞增殖的影响。方法获取人外周血单个核细胞(PBMC),利用白介素-4重组人粒细、巨噬细胞集落刺激因子诱导生成未成熟的树突细胞(im DC)。分离获取人脾脏淋巴细胞(SP),经光化学疗法(PUVA)处理后获得PUVA-SP;将im DC与PUVA-SP共培养得到体外光化学治疗性树突细胞(ecp DC);将im DC与SP共培养得到SPDC;im DC加入10ng/ml的脂多糖(LPS),培养1d后得到DC。收集4组细胞,检测其表面抗体CD11c、CD83、CD86的表达。采用混合淋巴细胞培养的方法检测吞噬了供者凋亡的脾淋巴细胞后的受者im DC对受者T细胞增殖的影响。结果经PUVA处理后细胞早期凋亡率为91.33%。表面分子CD83、CD86在ecp DC的阳性表达率为分别为22.83%±5.26%、22.06%±4.37%,与在im DC的阳性表达率(分别为15.06%±0.59%、15.19%±1.83%)相近(P>0.05),但明显低于在DC的阳性表达率(分别为99.79%±0.36%、99.85%±0.19%),差异有统计学意义(P<0.01)。吞噬了供者凋亡的脾淋巴细胞后的受者im DC细胞可明显抑制受者T细胞的增殖。结论体外光化学疗法诱导的凋亡脾淋巴细胞可抑制树突细胞的成熟,并可抑制受者T淋巴细胞的增殖。

关键词：体外光化学疗法树突细胞移植免疫

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国内外肾移植领域近期研究热点

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中华医学杂志 2017年第2期97卷 81-84页

作者：石炳毅袁清解放军第三〇九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

1954年美国外科医师Murry成功完成了世界上第一例肾移植手术，开辟了器官移植的新纪元。1960年我国吴阶平院士率先实施了中国第一例人体肾移植。在这60多年的发展历程中，国内外肾移植取得了许多突破性进展，但仍然存在诸多领域有待肾... 详细信息

1954年美国外科医师Murry成功完成了世界上第一例肾移植手术，开辟了器官移植的新纪元。1960年我国吴阶平院士率先实施了中国第一例人体肾移植。在这60多年的发展历程中，国内外肾移植取得了许多突破性进展，但仍然存在诸多领域有待肾移植同道们的深入探究。本文就肾移植近期的研究热点进行概述。

关键词：肾移植手术国内外外科医师器官移植吴阶平

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肾移植受者外周血巨细胞病毒特异性CTL的比例及其意义探讨

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中华医学杂志 2014年第42期94卷 3289-3292页

作者：肖漓石炳毅黄海燕王新颖樊文梅魏玉香高钰周文强何秀云许晓光韩永解放军第三○九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的建立检测巨细胞病毒（CMV）特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的新方法,探讨其在肾移植受者外周血的比例及其意义.方法筛选2009年1月至2010年12月期间在解放军第三○九医院全军器官移植研究所接受初次肾移植受者共计30例入组,健康... 详细信息

目的建立检测巨细胞病毒（CMV）特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的新方法,探讨其在肾移植受者外周血的比例及其意义.方法筛选2009年1月至2010年12月期间在解放军第三○九医院全军器官移植研究所接受初次肾移植受者共计30例入组,健康体检志愿者10名作为健康对照组.采用四聚体技术（tetramer technology）,在流式细胞仪上直接检测各组的CMV抗原特异性CTL的表达比例.结果移植组和健康对照组外周血CMV抗原特异性CTL（CMV-pp65特异性CD8＋T细胞）的阳性率在0.16％～7.21％.移植患者根据是否发生CMV活动性感染,分为巨细胞病毒阳性组（CMV＋组,n=15）和巨细胞病毒阴性组（CMV-组,n=15）.CMV＋组患者的CMV抗原特异性CTL的比例（2.95％ ±0.62％）显著高于CMV-组患者（1.17％±0.45％）和健康对照组（0.65％±0.17％）,差异具有统计学意义（P=0.003、0.006）.CMV＋组患者在CMV抗原（CMV-pp65）阳性期,其CMV抗原特异性CTL的比例为（2.95％±0.62％）,转阴后,比例明显下降至（1.50％±0.32％）.CMV＋组患者的CMV抗原特异性CTL比例与CMV-pp65阳性细胞数呈显著正相关（Pearson检验,r=0.871,P＜0.01）.结论肾移植受者外周血CMV特异性CTL比例对于判断CMV预后具有重要评价指导意义,为今后肾移植术后CMV感染靶向治疗提供依据.

关键词：肾移植巨细胞病毒细胞毒性T淋巴细胞四聚体技术

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肾移植术后病毒感染对外泌体研究影响的初步探索

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中华医学杂志 2018年第3期98卷 171-175页

作者：黄海燕肖漓毕丽丽高钰孔祥瑞杜若李彬钰韩永张文慧石炳毅解放军第三0九医院全军器官移植研究所器官移植与免疫调节北京市重点实验室 100091

目的探讨移植后病毒感染患者人群体液中存在的病毒颗粒和核酸物质是否会存在于提取的外泌体样品中。方法选取2015年1月至2017年7月于解放军第三。九医院全军器官移植中心行同种异体肾脏移植手术的受者10例，其中白细胞人巨细胞病毒（HCM... 详细信息

目的探讨移植后病毒感染患者人群体液中存在的病毒颗粒和核酸物质是否会存在于提取的外泌体样品中。方法选取2015年1月至2017年7月于解放军第三。九医院全军器官移植中心行同种异体肾脏移植手术的受者10例，其中白细胞人巨细胞病毒（HCMV）-pp65抗原检测阳性，同时血浆HCMVDNA检测结果为阳性或可疑阳性的病例5例，血浆BK病毒（BKV）DNA检测结果为阳性的病例5例。用试剂盒法提取血浆外泌体，电镜和纳米颗粒粒度分析仪（NTA）观察和分析外泌体。用实时荧光定量PCR分别检测并比较血浆、外泌体和流出液中的病毒DNA拷贝数。结果电镜下可见样本中的外泌体样囊泡结构，NTA检测样品浓度为（1．2～4．5）X10^11颗粒／Ⅱd，颗粒直径30～200nm。外泌体与血浆病毒DNA定量结果基本在同一数量级，而流出液中急遽降低。结论病毒DNA在移植后病毒感染患者外泌体样品中被大量检测出来，不仅提示了病毒传播可能利用了外泌体的生物形成过程，更提醒了现有的外泌体提取方式的局限性可能是病毒感染患者人群中外泌体研究的瓶颈。

关键词：肾移植巨细胞病毒 BK病毒外泌体

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NLRP3炎症小体在肾缺血再灌注损伤中的作用

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解放军医学杂志 2017年第12期42卷 1102-1105页

作者：武康蔡明解放军309医院器官移植研究所泌尿外科、器官移植与免疫调节北京市重点实验室北京100091

缺血再灌注损伤是一个涉及多种因素相互作用的炎症级联反应过程,与肾移植术后早期的移植肾功能延迟恢复和急性排斥反应等密切相关,目前尚不明确其机制。最近研究发现,NLRP3炎症小体作为炎症级联反应的关键分子在肾缺血再灌注损伤的发生... 详细信息

缺血再灌注损伤是一个涉及多种因素相互作用的炎症级联反应过程,与肾移植术后早期的移植肾功能延迟恢复和急性排斥反应等密切相关,目前尚不明确其机制。最近研究发现,NLRP3炎症小体作为炎症级联反应的关键分子在肾缺血再灌注损伤的发生发展中发挥重要作用,并有望成为肾缺血再灌注损伤新的治疗靶点。本文对NLRP3炎症小体在肾缺血再灌注损伤中的作用进行综述。

关键词：肾移植缺血再灌注损伤 NLRP3炎症小体

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巨细胞病毒感染的肾移植受者中性粒细胞表面黏附分子的表达及意义

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中华医学杂志 2016年第20期96卷 1562-1565页

作者：肖漓白剑何秀云韩永许晓光樊文梅毕丽丽高钰孔祥瑞魏玉香石炳毅解放军第三0九医院全军器官移植研究所移植研究室北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨肾移植术后巨细胞病毒（CMV）感染受者体内中性粒细胞表面黏附分子CD11b、CD15和CD62L的表达及诊断价值。方法收集2009年9月至2015年1月在解放军第三。九医院全军器官移植研究所进行同种异体肾移植手术的142例受者的血液样本，... 详细信息

目的探讨肾移植术后巨细胞病毒（CMV）感染受者体内中性粒细胞表面黏附分子CD11b、CD15和CD62L的表达及诊断价值。方法收集2009年9月至2015年1月在解放军第三。九医院全军器官移植研究所进行同种异体肾移植手术的142例受者的血液样本，其中男95例，女47例；选取2009年9月至2015年1月在解放军第三。九医院体检中心年龄匹配的健康志愿者男22名、女9名作为健康对照组。通过外周血CMV-pp65抗原检测将肾移植受者分为CMV高活动性感染组、CMV活动性感染组和CMV阴性对照组。采用流式细胞术检测各组外周血中性粒细胞表面黏附分子CD11b、CD15和CD62L的平均荧光强度，并进行比较。绘制CD11b、CD15和CD62L在诊断肾移植受者CMV感染的受试者工作特征（ROC）曲线。结果肾移植受者中CMV高活动性感染组（n=17）和CMV活动性感染组（n=65）的中性粒细胞CD15的平均荧光强度分别为776．31±89．53和554．39±67．89，高于CMV阴性对照组（n=60）的334．92±44．69和健康对照组（n=31）的310，56±39．67，差异有统计学意义（均P〈0．05）；CMV高活动性感染组中性粒细胞表达CD11b和CD62L的比例为42．31％±6．11％和40．35％±6．47％，低于CMV活动性感染组（62．45％±5．67％和65．65％±5．33％）、CMV阴性对照组（70．74％±6．55％和70．37％±6．71％）和健康对照组（72．52％±6．48％和72．43％±6．51％），差异有统计学意义（均P〈0．05）。CD11b和CD62L表达率在诊断CMV活动性感染时的最佳临界值分别为56．61％和44．35％，敏感度均为***％，特异度为76．67％和58．06％，ROC曲线下面积为0．851和0．628；CD11b和CD62L表达率在诊断CMV高活动性感染时的最佳临界值分别为66．57％和69．56％，敏感度为81．54％和87．69％，特异度为100．00％和98．33％，ROC曲线下面积为1．000和0．991。CD15荧光强度在诊断CMV高活动性感染和CMV活动性感染时的最佳临界值分别为542．71和408．03，敏感度为100．00％和98．460，特异度均为100．00％，ROC曲线下面积为1．000和0．999。结论肾移植受者CMV感染后中性粒细胞CD15表达上调，CD11b和CD62L表达下调，可以作为辅助诊断CMV活动性感染的实验室依据。

关键词：巨细胞病毒感染肾移植抗原 CD11b 抗原 CD15 抗原 CD62L

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