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2017年中国器官移植大会暨第四届中国器官移植医师年会

作者：孔祥瑞肖漓高钰石炳毅解放军第309医院全军器官移植研究所移植研究室北京市器官移植与免疫调节重点实验室

目的探讨人红细胞表面分子CD35/CD58/CD59的表达与外周血T/B淋巴细胞亚群水平的相关性。方法采用流式细胞术对100例健康人样本红细胞表面分子CD35/CD58/CD59和T/B淋巴细胞亚群进行检测，用cell quest软件分析其几何平均荧光强度和百... 详细信息

目的探讨人红细胞表面分子CD35/CD58/CD59的表达与外周血T/B淋巴细胞亚群水平的相关性。方法采用流式细胞术对100例健康人样本红细胞表面分子CD35/CD58/CD59和T/B淋巴细胞亚群进行检测，用cell quest软件分析其几何平均荧光强度和百分比，以及细胞的绝对数，采用Pearson相关分析对其进行统计分析。

关键词：红细胞 T细胞 B细胞流式细胞术

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肾移植术后16年未经诱导形成免疫耐受1例

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器官移植 2017年第3期8卷 235-237页

作者：马锡慧肖漓高钰孙玉洁范宇石炳毅解放军第309医院器官移植研究所移植研究室北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091 解放军第309医院移植外科北京100091

肾移植是终末期肾病的有效治疗手段。但术后长期应用免疫抑制剂可能引起严重的不良反应、机会性感染或肿瘤。因此,肾移植术后最理想的状态是形成免疫耐受,以减少甚至停止应用免疫抑制剂。但肾移植术后患者未经诱导而形成免疫耐受的病例... 详细信息

肾移植是终末期肾病的有效治疗手段。但术后长期应用免疫抑制剂可能引起严重的不良反应、机会性感染或肿瘤。因此,肾移植术后最理想的状态是形成免疫耐受,以减少甚至停止应用免疫抑制剂。但肾移植术后患者未经诱导而形成免疫耐受的病例极其少见,现报道1例肾移植术后16年形成免疫耐受患者的资料,供临床参考。患者于1995年7月18日接受同种异体肾移植术。2011年8~9月因输尿管恶性肿瘤分别行左、右肾输尿管全长切除术+部分膀胱切除术。患者于2011年10月自行停用所有免疫抑制剂,随访至投稿日,移植肾功能良好。

关键词：免疫耐受免疫抑制剂淋巴细胞毒性试验群体反应性抗体肾移植终末期肾病淋巴细胞亚群调节性T细胞

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肝癌肝移植术后西罗莫司转换治疗的免疫学效应分析

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解放军医药杂志 2017年第4期29卷 24-28页

作者：周林郑永根杜国盛肖漓潘立超高钰孔祥瑞朱志东宋继勇史海达杨绍瑧索龙龙蒙轩解放军总医院肝胆外科北京100583 解放军309医院全军器官移植研究所肝胆外科北京100091 解放军309医院器官移植与免疫调节北京市重点实验室北京100091

目的探讨以西罗莫司为主的联合免疫治疗方案(SCTR)对肝癌肝移植受者体内调节性T细胞(Treg)和效应性T细胞表达的影响。方法对2010年1月—2015年6月收治的应用SCTR干预的肝癌肝移植28例的临床资料进行回顾性分析,观察术后不同时间点CD3、C... 详细信息

目的探讨以西罗莫司为主的联合免疫治疗方案(SCTR)对肝癌肝移植受者体内调节性T细胞(Treg)和效应性T细胞表达的影响。方法对2010年1月—2015年6月收治的应用SCTR干预的肝癌肝移植28例的临床资料进行回顾性分析,观察术后不同时间点CD3、CD8+的表达,并对其与Treg的表达进行相关性分析。结果 SCTR干预下,肝癌肝移植受者术后12个月内,Fox P3+Treg的比例从术前峰值降低到术后1个月谷值,随后逐渐升高,3个月时在正常值水平(P>0.05),术后12~18个月水平逐步维持在较低水平,与正常水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。术前、术后12和18个月Fox P3+Treg和CD3、CD8+T淋巴细胞的变化呈反向趋势。Fox P3+Treg与CD3和CD8的表达水平呈负相关(r=-6.37、-7.12,P<0.001)。肝癌肝移植术后白介素-10、β型转化生长因子和甲胎蛋白水平均较术前显著降低(P<0.05),且其变化与Treg呈正相关。结论 SCTR可降低肝癌肝移植术后Fox P3+Treg、IL-10、TGF-β的表达,并不增加排斥反应,临床应用安全、有效。

关键词：西罗莫司联合免疫治疗肝肿瘤肝移植

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神经生长因子增强间充质干细胞诱导CD4＋CD25＋Treg细胞分化和增殖的作用

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中华器官移植杂志 2017年第2期38卷 112-115页

作者：龙旺石炳毅肖漓谢续标彭风华蓝恭斌余少杰王彧代贺龙高陈彭龙开中南大学湘雅二医院泌外器官移植科长沙410000 解放军第三○九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京210009

目的研究神经生长因子（NGF）对间充质干细胞（MSC）诱导CD4＋ CD25＋调节性T淋巴细胞（Treg细胞）分化增殖能力的影响.方法于MSC中加入NGF直接进行刺激,检测白细胞介素10（IL-10）、转化生长因子-β（TGF-β）和HLA-G等含量分析NGF对... 详细信息

目的研究神经生长因子（NGF）对间充质干细胞（MSC）诱导CD4＋ CD25＋调节性T淋巴细胞（Treg细胞）分化增殖能力的影响.方法于MSC中加入NGF直接进行刺激,检测白细胞介素10（IL-10）、转化生长因子-β（TGF-β）和HLA-G等含量分析NGF对MSC的作用;直接共培养后采用流式细胞检测CD4和CD25表达;应用Transwell小室共培养后采用流式细胞检测淋巴细胞CD4、CD25、Foxp3的表达.所有检测以经NGF刺激的hBMSC作为NGF组,以未经NGF处理的hBMSC作为对照组.结果与对照组相比,NGF组hBMSC培养上清液中IL-10和TGF-β表达均显著增加,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.流式细胞检测结果显示,与对照组相比,NGF组hBMSC的HLA-G表达显著增加（P＜0.05）;共培养后,NGF组较对照组CD4＋ CD25＋ Treg细胞的数量显著增多（P＜0.05）.抑制IL-10和TGF-p能够阻断NGF的诱导作用（P＜0.05）.结论 NGF能够增强MSC诱导Treg细胞分化增殖的能力,这种能力与MSC表达IL-10和TGF-p的增多有关.

关键词：神经生长因子间质干细胞调节性T淋巴细胞免疫耐受

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巨细胞病毒感染的肾移植受者中性粒细胞表面黏附分子的表达及意义

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中华医学杂志 2016年第20期96卷 1562-1565页

作者：肖漓白剑何秀云韩永许晓光樊文梅毕丽丽高钰孔祥瑞魏玉香石炳毅解放军第三0九医院全军器官移植研究所移植研究室北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨肾移植术后巨细胞病毒（CMV）感染受者体内中性粒细胞表面黏附分子CD11b、CD15和CD62L的表达及诊断价值。方法收集2009年9月至2015年1月在解放军第三。九医院全军器官移植研究所进行同种异体肾移植手术的142例受者的血液样本，... 详细信息

目的探讨肾移植术后巨细胞病毒（CMV）感染受者体内中性粒细胞表面黏附分子CD11b、CD15和CD62L的表达及诊断价值。方法收集2009年9月至2015年1月在解放军第三。九医院全军器官移植研究所进行同种异体肾移植手术的142例受者的血液样本，其中男95例，女47例；选取2009年9月至2015年1月在解放军第三。九医院体检中心年龄匹配的健康志愿者男22名、女9名作为健康对照组。通过外周血CMV-pp65抗原检测将肾移植受者分为CMV高活动性感染组、CMV活动性感染组和CMV阴性对照组。采用流式细胞术检测各组外周血中性粒细胞表面黏附分子CD11b、CD15和CD62L的平均荧光强度，并进行比较。绘制CD11b、CD15和CD62L在诊断肾移植受者CMV感染的受试者工作特征（ROC）曲线。结果肾移植受者中CMV高活动性感染组（n=17）和CMV活动性感染组（n=65）的中性粒细胞CD15的平均荧光强度分别为776．31±89．53和554．39±67．89，高于CMV阴性对照组（n=60）的334．92±44．69和健康对照组（n=31）的310，56±39．67，差异有统计学意义（均P〈0．05）；CMV高活动性感染组中性粒细胞表达CD11b和CD62L的比例为42．31％±6．11％和40．35％±6．47％，低于CMV活动性感染组（62．45％±5．67％和65．65％±5．33％）、CMV阴性对照组（70．74％±6．55％和70．37％±6．71％）和健康对照组（72．52％±6．48％和72．43％±6．51％），差异有统计学意义（均P〈0．05）。CD11b和CD62L表达率在诊断CMV活动性感染时的最佳临界值分别为56．61％和44．35％，敏感度均为***％，特异度为76．67％和58．06％，ROC曲线下面积为0．851和0．628；CD11b和CD62L表达率在诊断CMV高活动性感染时的最佳临界值分别为66．57％和69．56％，敏感度为81．54％和87．69％，特异度为100．00％和98．33％，ROC曲线下面积为1．000和0．991。CD15荧光强度在诊断CMV高活动性感染和CMV活动性感染时的最佳临界值分别为542．71和408．03，敏感度为100．00％和98．460，特异度均为100．00％，ROC曲线下面积为1．000和0．999。结论肾移植受者CMV感染后中性粒细胞CD15表达上调，CD11b和CD62L表达下调，可以作为辅助诊断CMV活动性感染的实验室依据。

关键词：巨细胞病毒感染肾移植抗原 CD11b 抗原 CD15 抗原 CD62L

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体外膜肺氧合技术在器官捐献供体功能维护中的应用

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中华医学杂志 2016年第20期96卷 1553-1555页

作者：石炳毅陈文解放军第三O九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

器官移植是治疗各种器官终末期疾病最为有效的手段。然而近几年供移植器官的短缺日趋严重，使得扩展标准供体（expanded criteria donor，ECD）器官被越来越广泛地应用到临床。ECD器官热缺血损伤较严重、器官存活能力降低，移植后发生... 详细信息

器官移植是治疗各种器官终末期疾病最为有效的手段。然而近几年供移植器官的短缺日趋严重，使得扩展标准供体（expanded criteria donor，ECD）器官被越来越广泛地应用到临床。ECD器官热缺血损伤较严重、器官存活能力降低，移植后发生器官原发性无功能（primary non-function，PNF）的概率显著升高。

关键词：器官捐献体外膜肺氧合技术应用供体维护原发性无功能终末期疾病热缺血损伤

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外泌体在器官移植中作用的研究与展望

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中华器官移植杂志 2016年第12期37卷 705-708页

作者：石炳毅解放军第三0九医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

外泌体（exosomes）不是一个新的概念，30年前发现它的时候，认为它只不过是红细胞在发育过程中的生理性“废弃物”的囊状结构体。近期越来越多的研究结果提示，外泌体可以存在于各种体液中，通过从特定的细胞运送功能分子到另一个受体... 详细信息

外泌体（exosomes）不是一个新的概念，30年前发现它的时候，认为它只不过是红细胞在发育过程中的生理性“废弃物”的囊状结构体。近期越来越多的研究结果提示，外泌体可以存在于各种体液中，通过从特定的细胞运送功能分子到另一个受体细胞，实现细胞间的远程交流，并协助完成很多重要的生理性和病理性的生理进程，例如蛋白分泌、抗原提呈、病原体转移和肿瘤演进等。

关键词：外泌体器官移植生理性发育过程受体细胞远程交流蛋白分泌抗原提呈

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巨细胞病毒感染肾移植受者红细胞表面分子CD35、CD58、CD59表达的变化

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器官移植 2016年第6期7卷 473-478页

作者：孔祥瑞肖漓陈文樊文梅白剑高钰马锡慧毕丽丽石炳毅解放军第309医院全军器官移植研究室北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨巨细胞病毒(CMV)感染肾移植受者红细胞膜表面分子CD35、CD58、CD59表达的变化规律及其意义。方法选择同种异体肾移植术的受者82例,根据外周血CMV-pp65抗原检测定性结果将其分为CMV阴性组(21例)和CMV阳性组(61例),再根据CMV-pp65... 详细信息

目的探讨巨细胞病毒(CMV)感染肾移植受者红细胞膜表面分子CD35、CD58、CD59表达的变化规律及其意义。方法选择同种异体肾移植术的受者82例,根据外周血CMV-pp65抗原检测定性结果将其分为CMV阴性组(21例)和CMV阳性组(61例),再根据CMV-pp65(+)白细胞计数结果将活动性CMV阳性组分为低活动性感染亚组(55例)和高活动性感染亚组(6例);另外选取健康成人志愿者作为健康对照组(30名)。采用流式细胞术检测CMV-pp65抗原和红细胞膜表面分子CD35、CD58、CD59的表达情况。结果与健康对照组比较,CMV阳性组的肾移植受者红细胞表面分子CD35、CD58、CD59表达水平降低,CMV阴性组的CD35和CD59表达水平降低(均为P<0.05);与CMV阴性组比较,CMV阳性组的红细胞表面分子CD58和CD59表达水平明显降低(均为P<0.05)。高活动性感染亚组的红细胞表面分子CD35和CD59表达水平均低于低活动性感染亚组(均为P<0.05)。结论肾移植术后CMV活动性感染的程度越严重,患者红细胞表面免疫分子CD35、CD58、CD59的表达越低,提示红细胞免疫功能紊乱可能参与了CMV活动性感染。

关键词：肾移植巨细胞病毒活动性感染红细胞 CD35 CD58 CD59

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体外光化学疗法对皮肤移植小鼠产生调节性T细胞的影响

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器官移植 2016年第5期7卷 355-359页

作者：魏玉香杨绍臻肖漓蔡明钱叶勇于涛石炳毅解放军第309医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨输注体外光化学法处理的脾淋巴细胞对皮肤移植受体小鼠产生调节性T细胞(Treg)及移植物存活时间的影响。方法以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体,建立小鼠皮肤移植模型。分离C57BL/6和BALB/c小鼠脾淋巴细胞(CSP、BSP),制备经8... 详细信息

目的探讨输注体外光化学法处理的脾淋巴细胞对皮肤移植受体小鼠产生调节性T细胞(Treg)及移植物存活时间的影响。方法以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体,建立小鼠皮肤移植模型。分离C57BL/6和BALB/c小鼠脾淋巴细胞(CSP、BSP),制备经8-甲氧基补骨脂素联合长波紫外线(PUVA)处理的小鼠脾淋巴细胞(PUVA-SP)。根据受者静脉输注的成分将实验动物随机分为5组(每组12只):PUVA-BSP组、PUVA-CSP组、BSP组、CSP组及磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,每组受体分别于术前7 d、手术当日和术后7 d按组别从尾静脉注入PUVA-BSP、PUVA-CSP、BSP、CSP或PBS。观察受体移植物的存活时间,检测受体外周血中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达情况。结果皮肤移植术后,PUVA-BSP组和PUVA-CSP组的受体小鼠外周细胞CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg的比例明显高于输注BSP组、CSP组和PBS对照组;PUVA-CSP组高于PUVA-BSP,BSP组和CSP组低于PBS对照组。PUVA-BSP组和PUVA-CSP组的受者小鼠移植皮片存活时间明显长于BSP组、CSP组和PBS对照组(均为P<0.05)。结论输注足够数量的PUVA-SP可诱导受体体内产生较多的CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg,可以显著延长移植物的存活时间。

关键词：体外光化学疗法皮肤移植小鼠调节性T细胞

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肾脏固有树突状细胞在肾缺血-再灌注期间的变化

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器官移植 2016年第5期7卷 360-364页

作者：药晨李树欣于涛许小东石炳毅解放军第309医院全军器官移植研究所北京市器官移植与免疫调节重点实验室北京100091

目的探讨在肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)期间肾脏固有树突状细胞(rDC)的变化。方法采用C57BL/6J小鼠建立双侧肾脏热缺血模型,再灌注24、48 h后取肾组织制备单细胞悬液,流式细胞仪分析CD45^+细胞和CD11c^+rDC的比例变化;采用绿色荧光蛋白和... 详细信息

目的探讨在肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)期间肾脏固有树突状细胞(rDC)的变化。方法采用C57BL/6J小鼠建立双侧肾脏热缺血模型,再灌注24、48 h后取肾组织制备单细胞悬液,流式细胞仪分析CD45^+细胞和CD11c^+rDC的比例变化;采用绿色荧光蛋白和白喉毒素受体标记(CD11c^+GDTR)的小鼠肾组织制作单细胞悬液,流式细胞仪分析CD11c^+rDC的比例及表型;采用CD11c^+GDTR小鼠建立双侧肾脏热缺血模型,再灌注24 h后取肾组织制备单细胞悬液,MACS磁珠富集CD45^+细胞,经流式细胞仪分析rDC表面共刺激分子表达情况。结果再灌注24 h后C57BL/6J小鼠肾脏内CD45^+细胞比例明显增加,48 h后其比例进一步升高,再灌注24 h后CD11c^+rDC数量同样持续升高,但其占CD45^+细胞的比例出现明显下调,48 h后恢复并较Sham组轻度升高;CD11c^+GDTR小鼠正常肾脏CD45^+细胞比例低于1%,其中约40%为CD11c^+的肾脏rDC,主要呈CD11b^(int)F4/80^-MHCⅡ^+;再灌注24 h后CD11c^+F4/80^-亚群rDC表面共刺激分子CD40、CD80、CD86均显著升高。结论热IRI后rDC比例、数量及其表面共刺激分子表达均增加,提示热IRI后肾脏rDC浸润增多且表型成熟。

关键词：肾脏树突状细胞缺血-再灌注损伤小鼠流式细胞术

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