检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞生物学杂志 2007年第2期29卷 282-290页

作者：李春娥金由辛史毅须丽清钟文伟申庆祥李云珠俞善昌夏振炜上海交通大学医学院附属瑞金医院儿科上海200025 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室上海200031 上海市计划生育研究所上海200032

拟通过RNA干扰技术特异下调人血红素加氧酶-1（human heme oxygenase-1，hHO-1）基因的表达，减少hHO-1的产量从而降低胆红素的产生，探讨在胆红素产生前就阻断其产生，为临床早期防治新生儿高胆红素血症及胆红素中毒性脑病探索一种新... 详细信息

拟通过RNA干扰技术特异下调人血红素加氧酶-1（human heme oxygenase-1，hHO-1）基因的表达，减少hHO-1的产量从而降低胆红素的产生，探讨在胆红素产生前就阻断其产生，为临床早期防治新生儿高胆红素血症及胆红素中毒性脑病探索一种新的有效手段。针对hHO-1基因设计并化学合成三对小分子干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）。采用脂质体转染法将siRNA转染入人肝脏细胞株HL-7702；荧光显微镜检测siRNA转染细胞的效率；转染siRNA1-2天后经RT—PCR和Western印迹方法检测hHO-1表达水平和蛋白质量；并采用HO-1诱导剂血红素诱导或hHO—1表达质粒转染细胞以上调hHO—1表达，检测siRNA干扰后hHO-1产量和酶活性。结果显示：设计的三对siRNA能不同程度的特异下调hHO-1表达，筛选获得抑制效果最佳的siRNA-3。siRNA-3抑制hHO—1呈现浓度与时间依赖性。与非特异对照siRNA及未处理组比较，血红素诱导和hHO-1表达质粒转染均能上调HL-7702细胞内hHO-1表达，提高hHO-1产量，但转染siRNA-3后hHO-1表达明显抑制，同时hHO-1活性随着基因表达下调而下降。实验表明设计合成的siRNA-3抑制效果明显。siRNA-3通过降解hHO—1，减少hHO-1产量，降低酶活性，最终减少胆红素产生，从而使RNA干扰技术成为降低新生儿高胆红素血症和胆红素中毒性脑病发生的一种候选方法。

关键词：血红素加氧酶 RNA干扰酶活力胆红素高胆红素血症

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用生物合成肽法的人卵透明带蛋白抗原表位扫描和最小基序鉴定

用生物合成肽法的人卵透明带蛋白抗原表位扫描和最小基序鉴定

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第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会

作者：徐万祥何亚萍孙志达季朝能顾少华谢彀上海市计划生育科学研究所生殖生物学研究室复旦大学生命科学院遗传工程国家重点实验室

自从1989年鉴定出小鼠 ZPC 第一个 B-细胞表位(BCE),并用其化学合成肽疫苗证明可无自身免疫卵巢炎地诱导明显的抗生育效果以来,相继用化学合成肽或基因亚克隆法扫描鉴定了小鼠、猪、帽猴和人等 ZP 蛋白的许多 BCEs 或表位肽。这些工作... 详细信息

自从1989年鉴定出小鼠 ZPC 第一个 B-细胞表位(BCE),并用其化学合成肽疫苗证明可无自身免疫卵巢炎地诱导明显的抗生育效果以来,相继用化学合成肽或基因亚克隆法扫描鉴定了小鼠、猪、帽猴和人等 ZP 蛋白的许多 BCEs 或表位肽。这些工作开拓了 ZP 避孕疫苗研究新的前沿领域, 为研制无卵巢疾病发生且抗生育完全有效的 ZP 多价嵌合肽免疫原制备莫定了基础.

关键词：抗原表位生物合成卵透明带蛋白合成肤合成肽

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多表位hCG嵌合肽(CP1和CP10)抗原的构建及其免疫原性

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分子细胞生物学报 2006年第5期39卷 414-422页

作者：徐万祥何亚萍邱德义廖矛川洪爱真季朝能顾少华陈金中谢毅上海市计划生育科学研究所生殖生物学研究室复旦大学生命科学院遗传所遗传工程国家重点实验室上海200433

本研究设计了CP1和CP10两种嵌合肽免疫原,它们由人绒毛膜促性腺激素β亚单位(β- hCG)3个线性B细胞表位(BCE)以及包括来自乙肝表面抗原和破伤风类毒素2个广谱性T细胞表位(TCE)的6个TCEs组合而成。编码CP1及其衍生物CP10的人工基因分别... 详细信息

本研究设计了CP1和CP10两种嵌合肽免疫原,它们由人绒毛膜促性腺激素β亚单位(β- hCG)3个线性B细胞表位(BCE)以及包括来自乙肝表面抗原和破伤风类毒素2个广谱性T细胞表位(TCE)的6个TCEs组合而成。编码CP1及其衍生物CP10的人工基因分别重组插入热诱导pBV221载体后,均能在大肠杆菌中以约占细菌总蛋白1％的比例被表达。在蛋白印迹试验中,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶上显示约为16．5 kD分子量的CP1和CP10表达蛋白,能被抗各插入表位单克隆或多克隆抗体识别。各表达蛋白可用制备性PAGE方法一步纯化,纯化产物均显示95％以上的电泳均一性,纯化得率可达到每升培养液1-2mg水平。以它们为抗原主动免疫小鼠,都能分别产生识别CP1或CP10和天然β-hCG的抗血清,并都能在它们的抗血清中检测到各插入抗原表位的抗体。hCG CPs的可获得性及其能诱导各表位抗体生成特征,有可能成为研制hCG抗生育和肿瘤治疗性疫苗的新的候选免疫原。

关键词：人毛膜促性腺激素β亚单位嵌合肽免疫原原核表达纯化免疫应答

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蒺藜果实化学成分研究

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中南药学 2006年第4期4卷 248-250页

作者：靳德军廖矛川王喆星王丽君海南医学院药学系海口571101 上海计划生育科学研究所计划生育药具国家重点实验室上海200032 沈阳药科大学中药学院沈阳110016

目的对蒺藜果实化学成分进行研究。方法聚酰胺柱及硅胶柱色谱分离,光谱分析鉴定结构。结果分离得到了5个化合物,鉴定为支脱皂苷元(Ⅰ)、海柯皂苷元(Ⅱ)、25R-螺甾-4-烯-3,12-二酮(Ⅲ)、酵母甾醇(Ⅳ)、7α-羟基谷甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(... 详细信息

目的对蒺藜果实化学成分进行研究。方法聚酰胺柱及硅胶柱色谱分离,光谱分析鉴定结构。结果分离得到了5个化合物,鉴定为支脱皂苷元(Ⅰ)、海柯皂苷元(Ⅱ)、25R-螺甾-4-烯-3,12-二酮(Ⅲ)、酵母甾醇(Ⅳ)、7α-羟基谷甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)。结论化合物Ⅳ、Ⅴ在本植物中首次分离获得。

关键词：蒺藜甾类蒺藜科

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兔抗hCG嵌合肽(CP22)抗血清体外抑制肿瘤细胞生长的研究

兔抗hCG嵌合肽(CP22)抗血清体外抑制肿瘤细胞生长的研究

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第六届全国生殖免疫学大会暨学术交流会

作者：何亚萍徐万祥廖矛川孙志达季朝能顾少华陈金中谢毅上海市计划生育科学研究所生殖生物学研究室上海200032 复旦大学生命科学院遗传所遗传工程国家重点实验室上海200433

目的:为建立供评价hCG生物合成嵌合肽CP22疫苗抑制分泌hCG肿瘤细胞生长效果的肿瘤移植小鼠模型提供实验依据. 方法:以抗化学合成β-hCG CTP37肽抗血清(AS CTP)为阳性对照,采用细胞免疫荧光染色和细胞生长光密度测定法,检测体外培养... 详细信息

目的:为建立供评价hCG生物合成嵌合肽CP22疫苗抑制分泌hCG肿瘤细胞生长效果的肿瘤移植小鼠模型提供实验依据. 方法:以抗化学合成β-hCG CTP37肽抗血清(AS CTP)为阳性对照,采用细胞免疫荧光染色和细胞生长光密度测定法,检测体外培养人胰腺癌BXPC-3等5株肿瘤细胞系的β-hCG表达以及抑制肿瘤细胞生长效应. 结果:BXPC-3、人卵巢癌HO-8910和结肠癌LOVO细胞株都能分泌β-hCG分子,而人前列腺癌PC-3和Du-145细胞中未检测到β-hCG表达;加入AS CP22和AS CTP抗血清都可明显抑制BXPC-3和HO-8910细胞生长,抑制效果以前者为最佳. 结论:以上实验结果为开展肿瘤治疗性hCGCP22疫苗的动物实验奠定了基础.

关键词： CP22疫苗生物合成嵌合肽肿瘤细胞体外抑制肿瘤治疗

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白藜芦醇和白藜芦醇苷的测定方法研究进展

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天然产物研究与开发 2005年第6期17卷 826-830页

作者：俸灵林包文芳廖矛川上海市计划生育科学研究所国家人口计生委计划生育药具重点实验室上海200032 沈阳药科大学沈阳110016

白藜芦醇和白藜芦醇苷具有抗肿瘤、保护心血管系统等多种显著的生物活性,国内外已经开始以其为指标性成分评定葡萄酒及相关中药的质量。本文综述了白藜芦醇和白藜芦醇苷等二苯乙烯类化合物的测定方法。

关键词：白藜芦醇白藜芦醇苷测定方法

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两种hCG嵌合肽CP12和CP22的免疫原性研究

两种hCG嵌合肽CP12和CP22的免疫原性研究

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第十届全国生殖生物学学术研讨会

作者：徐万祥何亚萍洪爱真廖矛川孙志达季朝能顾少华应康谢毅上海市计划生育科学研究所上海市计划生育科学研究所上海市计划生育科学研究所上海市计划生育科学研究所上海市计划生育科学研究所复旦大学遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传工程国家重点实验室

作为早先以靶抗原1或2个B细胞表位(B cell epitope,BCE)为主的化学合成肽,以及后期演化成掺入自身/外源T辅助细胞表位(ThCE)的化学合成嵌合肽(CP)疫苗研究的延伸,近年来以提高合成肽疫苗的有效性和克服现有疫苗普遍存在的“疫苗百家姓... 详细信息

作为早先以靶抗原1或2个B细胞表位(B cell epitope,BCE)为主的化学合成肽,以及后期演化成掺入自身/外源T辅助细胞表位(ThCE)的化学合成嵌合肽(CP)疫苗研究的延伸,近年来以提高合成肽疫苗的有效性和克服现有疫苗普遍存在的“疫苗百家姓”等问题为目标,出现了发展组合尽可能多的靶BCEs 和自身/外源ThCEs的重组(生物合成)多表位CP疫苗的需求和趋势。我们在此疫苗学界新分支领域开展了重组hCG多表位CP(r-hCG CP)的积极探索,并第一

关键词：免疫原性 hCG 抗血清合成肤抗体应答嵌合肽

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依立雄胺对激素非依赖型人前列腺癌细胞的体外抑制作用

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中国新药与临床杂志 2004年第8期23卷 485-488页

作者：钟恩宏孙祖越吴建辉朱焰上海市计划生育科学研究所计划生育药具国家重点实验室

目的 :观察依立雄胺在体外对激素非依赖型人前列腺癌细胞 (PC3)正常生长及Bcl 2蛋白表达的作用。方法 :用 5 ,15和 4 5 μmol·L- 1的依立雄胺作用PC3细胞 3d或 7d后 ,相差显微镜进行细胞形态学观察 ;苔盼蓝染色活细胞计数 ,绘制 7... 详细信息

目的 :观察依立雄胺在体外对激素非依赖型人前列腺癌细胞 (PC3)正常生长及Bcl 2蛋白表达的作用。方法 :用 5 ,15和 4 5 μmol·L- 1的依立雄胺作用PC3细胞 3d或 7d后 ,相差显微镜进行细胞形态学观察 ;苔盼蓝染色活细胞计数 ,绘制 7d的生长曲线 ;应用流式细胞仪分析依立雄胺对PC3细胞凋亡的影响 ;应用免疫组化比较经依立雄胺作用后PC3细胞Bcl 2的表达强度。结果 :依立雄胺在5 ,15和 4 5 μmol·L- 1作用PC3细胞 3d后 ,可使其有明显的皱缩脱壁 ,部分细胞膜破裂 ,并抑制PC3细胞的生长 ,抑制率依次为 19% ,2 6 %和 6 0 % ;流式细胞仪分析显示上述浓度的依立雄胺不诱导细胞凋亡 ,但可抑制细胞于DNA合成 (S)期 ,其百分率分别为 18% ,16 %和 11% ,而对照组为 33% ;免疫组化分析表明依立雄胺也不能降低PC3细胞中Bcl 2的表达。结论 :5 ,15和 4 5 μmol·L- 1的依立雄胺在体外可抑制PC3细胞的生长 ,机制可能为抑制细胞DNA的合成。

关键词：细胞凋亡免疫组织化学细胞系前列隙蛋白表达依立雄胺

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重金属与精液质量

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中国公共卫生 2004年第4期20卷 495-497页

作者：梁翠玲高尔生武俊青上海市计划生育科学研究所流行病室国家计划生育药具重点实验室上海200032

重金属与精液质量的关系以及确定的作用机制仍是本世纪初亟待解决的重要公共卫生问题,在此研究中的任何延迟都可能影响下一代的生育力.本文综述了该领域目前的研究进展并提出进一步的研究建议.

关键词：重金属精液质量染色体毒性机制公共卫生

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人卵透明带蛋白huZP3a^(22～176)和huZP3b^(177～348)肽段在大肠杆菌中的表达及其纯化

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生殖与避孕 2004年第3期24卷 143-148页

作者：徐万祥何亚萍洪爱真季朝能钱吉王曙谢毅 Elvira Hinsch Klaus-Dieter Hinsch 上海市计划生育科学研究所计划生育药具重点实验室上海200032 复旦大学生命科学院遗传所遗传工程国家重点实验室上海200433 Center of Dermatology and Andrology Justus Liebig University Giessen Germany

目的:探索将huZP3a22~348蛋白编码基因拆分成两段,分别表达的可行性,并研究表达产物的免疫原性。方法:用PCR技术, 将去N-端信号肽和C-端跨膜区的huZP322~348蛋白编码基因拆成大小相近的两段, 以完整阅读框的形式分别重组插入热诱导型pBV... 详细信息

目的:探索将huZP3a22~348蛋白编码基因拆分成两段,分别表达的可行性,并研究表达产物的免疫原性。方法:用PCR技术, 将去N-端信号肽和C-端跨膜区的huZP322~348蛋白编码基因拆成大小相近的两段, 以完整阅读框的形式分别重组插入热诱导型pBV221的多克隆区。结果:大肠杆菌分别特异地表达了可单独或复合应用的huZP3a22~176和huZP3b177~348,在经过抗人ZP3不同抗原区合成肽抗体的蛋白印迹鉴定后, 用改良的制备性PAGE方法分离纯化这两种表达产物。同时用兔抗猪ZP IgGs蛋白印迹试验表明, huZP3a和pZP3b的几个共同线性抗原表位都存在于其肽链的前半区域。结论:通过基因重组技术可获得足够量的huZP3a和huZP3b,这为开展huZP3a和huZP3b的免疫原性以及huZP3诱发人精子顶体胞吐的功能域等研究奠定了基础。

关键词：人透明带蛋白-3 基因表达免疫印迹纯化

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