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基于miRNA-134-5p/BDNF/Akt信号通路探讨X线辐射致大鼠心肌细胞凋亡的机制

海军军医大学学报 2024年第11期45卷 1352-1361页

作者：顾静付力文韩晓斐方丹金戈董晓丽颉亚辉侯敏甘肃中医药大学基础医学院生理学教研室兰州730000 甘肃中医药大学公共卫生学院数学与卫生统计学教研室兰州730000 甘肃中医药大学基础医学院解剖学与组织胚胎学教研室兰州730000

目的探讨X线辐射对大鼠心肌细胞凋亡的影响及相关机制。方法将大鼠H9C2心肌细胞分为空白对照组、X线照射组(X-ray组)、X线照射miRNA-134-5p抑制剂组(X-inhibitor组)、X线照射miRNA-134-5p抑制剂阴性对照组(X-NC组)。最终选择以6 Gy X线... 详细信息

目的探讨X线辐射对大鼠心肌细胞凋亡的影响及相关机制。方法将大鼠H9C2心肌细胞分为空白对照组、X线照射组(X-ray组)、X线照射miRNA-134-5p抑制剂组(X-inhibitor组)、X线照射miRNA-134-5p抑制剂阴性对照组(X-NC组)。最终选择以6 Gy X线辐照大鼠H9C2心肌细胞,48 h后检测各项指标变化。采用CCK-8法检测细胞存活率,用流式细胞术和Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率,用DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平,用JC-1法检测细胞线粒体膜电位变化,用超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)检测试剂盒分别测定细胞中SOD活性、MDA水平,用qPCR法检测细胞中miRNA-134-5p表达,用蛋白质印迹法检测细胞中脑源性神经营养因子(BDNF)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、Bcl2、Bax蛋白的表达。结果与空白对照组相比,X-ray组大鼠心肌细胞中ROS和MDA水平上升、SOD活性下降、线粒体膜电位下降百分比增加、DNA损伤微核形成数增加、细胞凋亡率升高(均P<0.01);与X-ray组相比,X-inhibitor组上述各项指标均有所逆转(P<0.05或P<0.01),而X-NC组的以上各指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。与空白对照组相比,X-ray组大鼠心肌细胞中miRNA-134-5p水平上调,BDNF表达及Bcl2/Bax、p-Akt/Akt比值下降(均P<0.01);与X-ray组相比,X-inhibitor组大鼠心肌细胞中miRNA-134-5p水平下降,BDNF表达及Bcl2/Bax、p-Akt/Akt比值升高(均P<0.01),X-NC组各项指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论X线照射诱导了大鼠心肌细胞发生氧化应激、线粒体损伤及DNA损伤,最终导致细胞凋亡,其发生机制可能涉及miRNA-134-5p/BDNF/Akt信号通路。

关键词：放射性心脏损伤辐射心肌细胞微RNA-134-5p 细胞凋亡

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慢病毒载体介导Gag-Caspase-8诱导三阴性乳腺癌原代细胞凋亡及S期阻滞

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山东大学学报(医学版) 2025年第1期63卷 25-34页

作者：王敏李习平檀军邱梅侯泽宇田莹罗鸿莹范超文齐玲俞琦谢薇贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州中医药大学第一附属医院急诊科贵州贵阳550001 遵义医科大学组织胚胎学教研室贵州遵义563006 贵州中医药大学护理学院贵州贵阳550025 遵义医科大学附属医院甲乳外科贵州遵义563099 贵州中医药大学第一附属医院重症医学科贵州贵阳550001

目的探讨携Gag-Caspase-8慢病毒样颗粒对三阴性乳腺癌原代细胞增殖、迁移、周期和凋亡的影响及作用机制。方法收集临床人乳腺癌标本3例,通过改良组织块培养法培养人乳腺癌原代细胞,通过HE染色、免疫组化及免疫荧光鉴定所培养的细胞是否... 详细信息

目的探讨携Gag-Caspase-8慢病毒样颗粒对三阴性乳腺癌原代细胞增殖、迁移、周期和凋亡的影响及作用机制。方法收集临床人乳腺癌标本3例,通过改良组织块培养法培养人乳腺癌原代细胞,通过HE染色、免疫组化及免疫荧光鉴定所培养的细胞是否为高纯度三阴性人乳腺癌原代细胞;慢病毒转染构建携Gag-Caspase-8慢病毒样颗粒,细胞分为PBS组、Gag-VLPs组和Gag-CASP8-VLPs组。采用MTT法评估细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移能力,AO/EB染色检测细胞凋亡,流式细胞术分析细胞周期和凋亡,蛋白质免疫印迹考察凋亡相关蛋白表达。结果临床肿瘤标本经HE染色确定为乳腺癌病理组织,免疫组化鉴定乳腺癌原代细胞特异性分子标记物CA153阳性高表达,并通过计算阳性细胞比例评估细胞纯度约为98%,免疫荧光检测结果显示,HER2、ER、PR均阴性表达,证明所培养的细胞为高纯度三阴性人乳腺癌原代细胞;Western blotting检测发现构建的Gag-VLPs和Gag-CASP8-VLPs内有慢病毒载体特异性分子标志物P24表达,证明慢病毒样颗粒包装成功。Gag-CASP8-VLPs干预三阴性人乳腺癌原代细胞24、48 h后,与对照组PBS和Gag-VLPs相比,倒置显微镜下观察到细胞皱缩、体积减小、贴壁能力下降且漂浮细胞增多;MTT检测显示,Gag-CASP8-VLPs组显著抑制了人乳腺癌原代细胞的生长(P<0.01),并呈时间依赖性;细胞划痕实验观察到,Gag-CASP8-VLPs组可显著抑制人乳腺癌原代细胞的迁移能力(P<0.05);流式细胞术检测发现,Gag-CASP8-VLPs组S期细胞数量显著增高(P<0.01),细胞阻滞于S期;AO/EB染色及流式细胞术检测发现,Gag-CASP8-VLPs组可诱导细胞发生凋亡(P<0.01);Western blotting结果显示,Gag-CASP8-VLPs组三阴性乳腺癌原代细胞内Gag-Caspase-8、Pro caspase-8、Activecaspase-8和Caspase-3凋亡相关蛋白表达显著增高(P<0.01)。结论慢病毒介导Gag-Caspase-8将活化的Caspase-8导入三阴性乳腺癌原代细胞,通过激活下游Caspase-3,诱导细胞凋亡,并使细胞停滞在S期,从而抑制细胞增殖和迁移。

关键词：慢病毒载体 Gag-Caspase-8 三阴性人乳腺癌原代细胞 Caspase-8 S期阻滞

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过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型的建立

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生物学杂志 2024年第4期41卷 24-29页

作者：徐菁何柳周芳婷潘勤陈姗罗靓湖北中医药大学、药学院、药物分析教研室武汉430071 武汉大学泰康医学院(基础医学院)人体解剖学与组织胚胎学系武汉430071 武汉市蔡甸区人民医院检验科武汉430100

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳... 详细信息

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳定表达TLR2分子的Nalm-6细胞(TLR2^(+))。利用倒置荧光显微镜观察细胞状态和绿色荧光表达情况,通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测相关蛋白表达水平,采用CCK-8以及流式细胞术检测细胞存活率和细胞增殖水平。结果显示:倒置荧光显微镜下可见成功转染慢病毒的Nalm-6细胞表达绿色荧光和嘌呤霉素抗性。Western Blot检测到TLR2在Nalm-6细胞中成功表达,且TLR2信号的激活明显增强PI3K-AKT信号轴分子的磷酸化水平。CCK-8和流式细胞术发现TLR2活化可提升细胞存活率,促进细胞增殖。研究成功构建了过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型,并在此基础上验证TLR2活化不仅能够增强B细胞PI3K-AKT信号通路传导,还可促进细胞增殖。此模型为进一步探究TLR2通路对B细胞抗感染免疫功能的影响奠定基础。

关键词： TLR2 慢病毒载体 B淋巴细胞 PI3K-AKT信号通路细胞增殖

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巧用思维导图易化形态学课程教学

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四川解剖学杂志 2023年第3期31卷 187-189页

作者：谢璐霜龚艳菊史良琴李敏陈雄斌易晓红钟占琼龚圆渊钟铧杨岚姜岑成都中医药大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室成都611175

形态学是医学基础课程的重要组成部分,内容多而繁,学习难度大是其特点.思维导图是图形思维工具的重要表现形式.能够较好地反映各主题节点间的层次关系.巧妙地使用思维导图能提高形态学的学习效率.本文介绍了我们探索和应用多种思维导图... 详细信息

形态学是医学基础课程的重要组成部分,内容多而繁,学习难度大是其特点.思维导图是图形思维工具的重要表现形式.能够较好地反映各主题节点间的层次关系.巧妙地使用思维导图能提高形态学的学习效率.本文介绍了我们探索和应用多种思维导图开展基础课形态学教学的情况.

关键词：形态学教学思维导图

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基于4D-Label-free技术慢性弥漫性轴索损伤大鼠海马组织的蛋白质组学分析

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解剖学报 2024年第5期55卷 515-523页

作者：张丽熊红丽朱士胜重庆中医药学院基础医学院人体解剖学与组织胚胎学教研室重庆402760 重庆市中医院博士后科研工作站重庆400021 重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆400016 重庆医药高等专科学校基础部解剖学教研室重庆401331

目的筛选慢性弥漫性轴索损伤(DAI)大鼠海马组织差异表达蛋白(DEPs),为探索慢性DAI潜在发病机制以及临床诊断、筛选药物治疗靶点、评估预后等提供实验依据。方法实验动物分为模型组(DAI组,n=20)和对照组(CON组,n=20),采用改良的Marmarou... 详细信息

目的筛选慢性弥漫性轴索损伤(DAI)大鼠海马组织差异表达蛋白(DEPs),为探索慢性DAI潜在发病机制以及临床诊断、筛选药物治疗靶点、评估预后等提供实验依据。方法实验动物分为模型组(DAI组,n=20)和对照组(CON组,n=20),采用改良的Marmarou法建立SD大鼠DAI模型,模型建立3周后利用4D-Label-free技术检测慢性DAI组脑海马组织中的蛋白图谱变化,以DAI组/CON组表达量变化倍数(FC)>1.2或<0.83且P<0.05筛选DEPs,运用基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因百科全书(KEGG)通路富集分析方法对筛选的DEPs进行生物信息学分析。结果共筛选出92个DEPs,上调52个,下调40个。GO分析结果显示,DEPs主要涉及去磷酸化,ATP合成耦合电子传递,过氧化氢介导的细胞程序性死亡的正向调节及神经递质受体内化等生物过程功能。KEGG通路分析结果提示,DEPs主要参与代谢途径、活性氧、神经变性途径-多种疾病、逆行内源性大麻素信号传导、谷胱甘肽代谢等信号通路。结论通过4D-Label-free技术筛选出了慢性DAI组大鼠海马组织中的DEPs。所筛选出的DEPs及其所富集的生物过程和信号通路为慢性DAI的深入研究提供依据。

关键词：弥漫性轴索损伤蛋白质组学 4D-Label-free技术生物信息学分析大鼠

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绘图教学法在留学生局部解剖学教学中的应用

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解剖学杂志 2024年第2期47卷 175-177页

作者：张建平林家骅浙江中医药大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学教研室杭州310053

Regional Anatomy是留学生医学教育的核心课程,2017年浙江中医药大学已初步完成留学生的Regional Anatomy全英文授课,但在教学过程中存在留学生对知识点理解、掌握困难与纯语言授课难懂的两难问题,目前分析主要源于以下3点:①Regional A... 详细信息

Regional Anatomy是留学生医学教育的核心课程,2017年浙江中医药大学已初步完成留学生的Regional Anatomy全英文授课,但在教学过程中存在留学生对知识点理解、掌握困难与纯语言授课难懂的两难问题,目前分析主要源于以下3点:①Regional Anatomy的特点是结构复杂、名词术语相当多,可能胜过英语GRE考试词汇;②传统多媒体教学模式使用大量文字描述,使学生感到难记忆、易遗忘;③本校招收的留学生来自亚非拉多个国家,增加了Regional Anatomy授课过程中专业术语交流的难度。图形是一种形象语言,克服了以往教师与留学生之间的医学专业语言交流障碍,有助于留学生对课程内容的理解掌握。目前,绘图教学法在中国学生的系统解剖学、局部解剖学中的效果获得较广泛认可[1-2]。笔者既往研究显示,在留学生Systematic Anatomy的授课过程穿插以绘图教学法,能明显提高留学生的自学能力、合作学习能力,增强理解记忆、学习兴趣,提高学习成绩[3]。然而,绘图教学法在留学生Regional Anatomy教学中的效果尚未见报道。笔者通过实施绘图教学法在本校留学生该课程中应用效果的研究,达到解决留学生Regional Anatomy教学中的两难问题的目的,为留学生Regional Anatomy教学积累一定的经验。

关键词：局部解剖学系统解剖学全英文授课医学专业留学生文字描述多媒体教学模式形象语言

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组织学与胚胎学课程形成性评价改革的探索

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医学理论与实践 2023年第24期36卷 4313-4315页

作者：杨桃梅陈向云褚春薇蒋德梅汤小芳黄朝霞贵州中医药大学基础医学院组织学与胚胎学教研室贵州省贵阳市550025

在组织学与胚胎学教学中,结合形态学课程的特点和教育目标,通过看图说话、在线识图与讨论、学习笔记分享、线上作业、自主学习和实验报告等丰富多样的方式对学生的学习过程进行动态追踪与评价。从课程特点出发、立足学生需求建立以“学... 详细信息

在组织学与胚胎学教学中,结合形态学课程的特点和教育目标,通过看图说话、在线识图与讨论、学习笔记分享、线上作业、自主学习和实验报告等丰富多样的方式对学生的学习过程进行动态追踪与评价。从课程特点出发、立足学生需求建立以“学生为中心”的课堂教学,不断提升学生学习的能动性与热情,让教与学有效互动,构建和谐课堂。

关键词：组织学与胚胎学形成性评价改革

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中医院校组织学与胚胎学课程教学策略

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解剖学杂志 2024年第3期47卷 263-264页

作者：袁瑶薇李健王晓慧姜国华刘洋黑龙江中医药大学基础医学院解剖学与组胚学教研室哈尔滨150040 北京中医药大学中医学院组织学与胚胎学教研室北京102488

组织学与胚胎学(简称“组胚”)为一门重要的医学基础课程。该课程教学内容较多,所阐述的人体微细结构是学习生理学和病理学等课程的基础^([1]),但在中医院校学时一般较短。为了满足中医院校人才培养需求,在有限的学时内实现高质量组胚教... 详细信息

组织学与胚胎学(简称“组胚”)为一门重要的医学基础课程。该课程教学内容较多,所阐述的人体微细结构是学习生理学和病理学等课程的基础^([1]),但在中医院校学时一般较短。为了满足中医院校人才培养需求,在有限的学时内实现高质量组胚教学,需要实施有效的教学策略。教学策略是为了达成教学目标而采用的综合性教学方案,包括教学设计、教学模式、教学评价等多方面要素^([2-3])。目前,关于组胚教学策略的研究主要集中在西医院校,研究内容较为分散,大多是针对某一方面的教学策略而进行的改革实践。近年来,黑龙江中医药大学(简称“龙中医”)和北京中医药大学(简称“北中医”)根据中医院校组胚教学特点和需要解决的问题,对教学策略进行了探索和优化,现以此为依据,系统、全面地阐述中医院校提升组胚教学效果的教学策略,希望为同行提供参考。

关键词：组织学与胚胎学中医院校医学基础课程综合性教学西医院校组胚教学北京中医药大学微细结构

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特发性膜性肾病的损伤机制及中医药诊疗

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生命的化学 2024年第3期44卷 465-476页

作者：郭敏王羽于梅姜国华周旋刘庆燕董云英薄颖迪王乾黑龙江中医药大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学教研室哈尔滨150000 黑龙江省中医药科学院内科哈尔滨150001

足细胞又称为肾小球上皮细胞,是肾小球滤过屏障(glomerular filtration barrier,GFB)的最后一道关卡。作为蛋白尿的主要诱因,足细胞损伤可以由特发性膜性肾病引发,而且如果损伤不断加重将会进展为终末期肾病。目前认为,特发性膜性肾病... 详细信息

足细胞又称为肾小球上皮细胞,是肾小球滤过屏障(glomerular filtration barrier,GFB)的最后一道关卡。作为蛋白尿的主要诱因,足细胞损伤可以由特发性膜性肾病引发,而且如果损伤不断加重将会进展为终末期肾病。目前认为,特发性膜性肾病破坏足细胞的机制主要包括凋亡、自噬失调、氧化应激、炎症、足细胞肌动蛋白骨架异常等。现阶段,我国西医对其的治疗药物主要有肾素-血管紧张素系统抑制剂、皮质类固醇单药、环磷酰胺、钙调磷酸酶抑制剂以及利妥昔单抗等生物制剂,但是存在成本较高和不良反应严重的问题。中药具有多成分、多靶点的特点,治疗疾病时可以作用于多条途径缓解症状、防治并发症、延缓疾病进展。本文综述了特发性膜性肾病足细胞损伤的相关机制,并从中药以及针灸方面对干预相关信号通路治疗特发性膜性肾病进行了总结,旨在为中医药抗特发性膜性肾病的作用机制及靶向药物的研发提供一定的参考依据。

关键词：特发性膜性肾病足细胞中医药

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课程思政元素融入医学专业人体解剖学"第一堂课"的初探

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四川解剖学杂志 2022年第4期30卷 179-181页

作者：陈雄斌龚圆渊谢璐霜游茂春杨岚李敏成都中医药大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室成都611175

"课程思政"是新时代中国高校落实大学生思想政治教育、"立德树人""三全育人"的重要途径.因此,在完成专业课程教学内容,实现专业教学目标的同时开展课堂课程思政,不仅有利于大学生专业技术能力的培养,还... 详细信息

"课程思政"是新时代中国高校落实大学生思想政治教育、"立德树人""三全育人"的重要途径.因此,在完成专业课程教学内容,实现专业教学目标的同时开展课堂课程思政,不仅有利于大学生专业技术能力的培养,还可以通过"融物细无声"的方式培养具有社会主义核心价值观的大学生.《人体解剖学》作为医学院校医学生的必修课,为医学生专业基础课的"第一堂课".由于学科特点,解剖学的发展中有众多涉及爱国主义、医者仁心等的感人事迹,这些事迹为解剖学课堂开展课程思政教育提供了丰富的素材.因此,基于解剖学的学科特点在新生中开展课程思政具有巨大的优势,并且尤为必要.本文以人体解剖学绪论部分为例,对如何结合教学内容开展课程思政进行了初探,希望为培养"有红又专"的医学人才提供参考.

关键词：课程思政人体解剖学教育改革课程教学

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