检索结果-内蒙古大学图书馆

应用LC-MS/MS技术研究健脾滋肾方对系统性红斑狼疮鼠血清代谢物及代谢通路的影响

中国医院药学杂志 2025年第4期45卷 368-377页

作者：庞利君黄传兵李明李云飞束龙武安徽中医药大学第一附属医院第一临床医学院安徽合肥230031 安徽中医药大学第一附属医院风湿科安徽合肥230031

目的:探究健脾滋肾方对系统性红斑狼疮鼠(MRL/lpr)血清差异代谢物及代谢通路的影响。方法:将12只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为模型组、中药组,以6只C57BL/6小鼠为对照组,运用LC-MS/MS分析技术,在主成分分析(principal component analysis,P... 详细信息

目的:探究健脾滋肾方对系统性红斑狼疮鼠(MRL/lpr)血清差异代谢物及代谢通路的影响。方法:将12只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为模型组、中药组,以6只C57BL/6小鼠为对照组,运用LC-MS/MS分析技术,在主成分分析(principal component analysis,PCA)、偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)、正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)分析的基础上,以变量重要性投影值>1、t检验P<0.05及差异倍数(fold change,FC)≥1.5或FC≤0.5筛选健脾滋肾方治疗SLE的差异代谢物质。采用公共数据库HMDB、massbank、LipidMaps、mzcloud、KEGG及诺米代谢自建标准品库进行物质鉴定,采用MetaboAnalyst软件包对筛选的差异代谢物进行功能通路富集和拓扑学分析。富集得到的通路采用KEGG Mapper可视化工具进行差异代谢物与通路图展示。结果:检测出代谢产物共338种,模型组与正常组相比,代谢物差异33个,其中22个代谢物含量上调,11个代谢物含量下调。在模型组、中药组比较中共发现31个差异代谢物,其中18个代谢物含量上调,13个代谢物含量下调。经健脾滋肾方治疗后,3-羟基-2-氨基苯甲酸、鞘氨醇1-磷酸、豆蔻酸差异代谢物含量均明显上调,棉子糖、4-乙酰基丁酸乙酯均明显下调。KEEG代谢通路分析结果表明,差异显著的代谢通路有49条,排在前5位的通路是胞葬作用、磷酸戊糖途径、黑色素生成、半乳糖代谢、Fcγ受体介导的吞噬作用通路。结论:健脾滋肾方对MRL/lpr小鼠的治疗作用可能与3-羟基-2-氨基苯甲酸、鞘氨醇1-磷酸、豆蔻酸、棉子糖、4-乙酰基丁酸乙酯等显著差异代谢物相关,以上代谢物通过参与调控胞葬作用、磷酸戊糖途径、黑色素生成、半乳糖代谢、Fcγ受体介导的吞噬作用代谢通路实现。

关键词：健脾滋肾方系统性红斑狼疮高效液相色谱串联质谱差异代谢物代谢途径

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脑卒中痉挛性瘫痪中西医康复策略及临床应用专家共识

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中华全科医学 2025年第2期23卷 179-185页

作者：脑卒中中西医康复专家共识编写组李飞汪美霞徐磊不详安徽中医药大学第二附属医院安徽中医药大学第一附属医院蚌埠医科大学第一附属医院

脑卒中为“四高”疾病,即发病率高、致死率高、致残率高、复发率高。脑卒中后痉挛性瘫痪的发生率达到50%,如果误治或失治,会使痉挛状态被永久地固定下来,不但会引起患侧肢体的疼痛、僵硬,而且会造成肌肉萎缩、关节挛缩变形和活动度受限... 详细信息

脑卒中为“四高”疾病,即发病率高、致死率高、致残率高、复发率高。脑卒中后痉挛性瘫痪的发生率达到50%,如果误治或失治,会使痉挛状态被永久地固定下来,不但会引起患侧肢体的疼痛、僵硬,而且会造成肌肉萎缩、关节挛缩变形和活动度受限,最终造成残疾(致残率高达75%)。解除痉挛是脑卒中偏瘫康复的重点和难点,其可直接影响中风偏瘫康复的疗效。为解决这一重点和难点,脑卒中中西医康复专家共识编写组基于临床实际,通过整体论治与个体化康复相结合,制定了本项专家共识。脑卒中后肢体痉挛性瘫痪应以中西医结合康复为核心,联合康复医学科、针灸科等多学科团队,从诊断、西医治疗、中药治疗、针灸治疗、推拿治疗、康复治疗、评价指标、预防调摄等方面予以综合管理,充分借鉴国内外临床实践经验,发挥中医药特色和优势,临床疗效确切、发展潜力巨大。

关键词：脑卒中痉挛性瘫痪中西医康复临床应用专家共识

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PCOS中的自噬异常及中医药靶向干预的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2025年第3期31卷 313-322页

作者：杨鑫鑫贾志诚石梦雨李永谦王培璇郭颖山东中医药大学第一临床医学院济南250014 山东中医药大学附属医院济南250011

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种常见的妇科内分泌和生殖功能障碍性疾病,主要临床表现为排卵障碍、胰岛素抵抗、高雄激素血症、肥胖等,该病的发生发展与细胞凋亡、自噬、氧化应激、炎症反应等生物调控过程密切相关。自噬作为一种维持细胞稳... 详细信息

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种常见的妇科内分泌和生殖功能障碍性疾病,主要临床表现为排卵障碍、胰岛素抵抗、高雄激素血症、肥胖等,该病的发生发展与细胞凋亡、自噬、氧化应激、炎症反应等生物调控过程密切相关。自噬作为一种维持细胞稳态的清除机制,在维持卵母细胞生长、发育和成熟过程中发挥着关键作用,探究疾病发生发展过程中的自噬机制,有助于设计通过调控自噬干预PCOS的治疗方法。现有研究表明,自噬在PCOS的发病过程中起着重要作用,能够多层次、多途径、多靶点影响疾病进展。中医药通过靶向自噬信号通路、调控因子及非编码单链RNA分子的表达,来调控PCOS患者卵巢颗粒细胞自噬或子宫内膜自噬,从而缓解炎症、调节PCOS代谢障碍、平衡激素水平,有效改善PCOS胰岛素抵抗、高雄激素血症、排卵障碍等病理状态。该文章对治疗PCOS的中药复方和中药提取物及涉及的主要自噬通路和调控因子进行归纳总结,以期从中医药调控自噬的角度为今后PCOS的治疗提供相关参考和建议。

关键词：多囊卵巢综合征自噬信号通路调控因子机制中药复方中药提取物

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基于转录组学与网络药理学探讨四妙散治疗膝骨关节炎的作用机制

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中药新药与临床药理 2025年第3期36卷 425-434页

作者：伍搏宇杨雷张志刚熊辉王海彬卢国樑广州中医药大学东莞医院广东东莞523000 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007

目的基于转录组学与网络药理学探讨四妙散治疗膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法将32只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(硫酸氨基葡萄糖0.135 g·kg^(-1))及四妙散组(8.640 g·kg^(-1)),每组8只。通过膝关节腔注... 详细信息

目的基于转录组学与网络药理学探讨四妙散治疗膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法将32只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(硫酸氨基葡萄糖0.135 g·kg^(-1))及四妙散组(8.640 g·kg^(-1)),每组8只。通过膝关节腔注射碘乙酸钠溶液复制KOA大鼠模型。各组大鼠灌胃给药,每日1次,持续给药4周。采用Lequesne MG评分,HE及番红-固绿染色法观察软骨及滑膜组织病理变化,ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,评估四妙散治疗KOA的疗效。提取大鼠膝关节软骨组织总RNA进行转录组学测序,筛选差异表达基因并进行GO功能及KEGG通路富集分析。通过网络药理学方法预测四妙散治疗KOA的潜在作用靶点,并通过网络拓扑分析筛选核心成分及核心靶点。对四妙散治疗KOA的潜在作用靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。整合转录组学与网络药理学分析的KEGG通路富集结果,采用Western Blot法检测大鼠软骨组织中AMPK/mTOR通路相关蛋白的表达水平。结果(1)与模型组比较,四妙散能显著降低KOA大鼠的Lequesne MG评分(P<0.01),减轻关节软骨损伤和滑膜炎症,并显著降低血清中炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α水平(P<0.01)。(2)与正常对照组比较,KOA大鼠软骨组织中有876个差异表达基因,四妙散干预后能够有效逆转其中141个差异表达基因,包括69个上调基因、72个下调基因。141个差异表达基因主要涉及AMPK信号通路、钙离子信号通路和Apelin信号通路。(3)获得四妙散的活性成分共42个,预测得到224个作用靶点,2864个KOA疾病相关靶点,取交集得到128个四妙散治疗KOA的潜在作用靶点。四妙散治疗KOA的核心成分包括槲皮素、山柰酚、汉黄芩素、黄芩素及β-谷甾醇等;核心靶点为IL-6、TNF、AKT1、IL-1β、MMP-9等;潜在作用靶点主要参与调控PI3K-AKT信号通路、MAPK信号通路以及mTOR信号通路等。(4)与正常对照组比较,模型组大鼠软骨组织中p-AMPK/AMPK蛋白相对表达比值显著下调(P<0.01),p-mTOR/mTOR蛋白相对表达比值显著上调(P<0.01)。与模型组比较,四妙散组大鼠软骨组织中p-AMPK/AMPK蛋白相对表达比值明显上调(P<0.05),p-mTOR/mTOR蛋白相对表达比值显著下调(P<0.01)。结论四妙散可能通过槲皮素、山柰酚、汉黄芩素等活性成分,作用于TNF、IL-1β、MMP-9等核心靶点,调控AMPK/mTOR等关键信号通路,改善KOA大鼠关节功能,减轻软骨损伤和滑膜炎症,从而发挥抗KOA作用。

关键词：四妙散膝骨关节炎转录组学网络药理学 AMPK/mTOR信号通路大鼠

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补阳还五汤含药血清对高糖诱导小鼠足细胞的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年第1期31卷 64-73页

作者：郑琳琳郭登洲河北中医药大学研究生学院石家庄050091 河北中医药大学第一附属医院石家庄050011

目的:观察补阳还五汤含药血清对高糖诱导小鼠足细胞损伤的影响,并探讨其潜在作用机制。方法:体外培养小鼠足细胞(MPC5),筛选补阳还五汤含药血清的最佳干预浓度与干预时间;将细胞分为正常组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖)、等渗组(5.5 mmo... 详细信息

目的:观察补阳还五汤含药血清对高糖诱导小鼠足细胞损伤的影响,并探讨其潜在作用机制。方法:体外培养小鼠足细胞(MPC5),筛选补阳还五汤含药血清的最佳干预浓度与干预时间;将细胞分为正常组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖)、等渗组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖+24.5 mmol·L^(-1)甘露醇)、高糖组(30 mmol·L^(-1)葡萄糖)、空白血清组(30 mmol·L^(-1)葡萄糖+20%空白血清)、补阳还五汤含药血清组(30 mmol·L^(-1)葡萄糖+10%补阳还五汤含药血清)、铁死亡抑制剂Fer-1组(30 mmol·L^(-1)葡萄糖+Fer-11μmol·L^(-1)),干预24 h。FerroOrange荧光探针检测细胞二价铁(Fe^(2+))水平;荧光染核(Hoechst)染色检测细胞内活性氧(ROS)水平;试剂盒检测细胞内微量还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞结蛋白(Desmin)、足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)、足萼蛋白(Podocalyxin)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞Desmin、Nephrin、Podocalyxin、ACSL4、SLC7A11、GPX4、Nrf2、HO-1的mRNA表达水平。结果:与正常组比较,高糖组Desmin、ACSL4表达明显增加,Fe^(2+)及ROS水平升高,MDA、4-HNE含量增加,GSH活性降低,Nephrin、Podocalyxin、SLC7A11、GPX4、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA表达减少(P<0.05,P<0.01);等渗组上述结果无明显变化。与高糖组比较,补阳还五汤含药血清组与Fer-1组Desmin、ACSL4表达明显下降,Fe^(2+)及ROS水平降低,MDA、4-HNE含量减少,GSH活性增加,Nephrin、Podocalyxin、SLC7A11、GPX4、Nrf2、HO-1的蛋白及mRNA表达增加(P<0.05,P<0.01);空白血清组上述结果无明显变化。结论:补阳还五汤含药血清可减轻高糖诱导的足细胞损伤,其机制与调控Nrf2/HO-1通路,抑制铁死亡有关。

关键词：补阳还五汤糖尿病肾病足细胞铁死亡

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逍遥散加减方及有效成分治疗甲状腺疾病的临床及作用机制研究进展

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中国实验方剂学杂志 2025年第6期31卷 302-310页

作者：李闪闪符宇魏丹丹王菲徐梦娇王婷燕树勋河南中医药大学第一附属医院郑州450000 河南中医药大学第一临床医学院郑州450000

甲状腺疾病是临床常见的内分泌疾病,其发病机制多认为与遗传易感因素、免疫系统失调、激素水平等密切相关。逍遥散广泛用于各种甲状腺疾病的治疗,效果颇佳。该文从理论探析、临床研究、机制研究等方面总结逍遥散加减方及有效成分治疗甲... 详细信息

甲状腺疾病是临床常见的内分泌疾病,其发病机制多认为与遗传易感因素、免疫系统失调、激素水平等密切相关。逍遥散广泛用于各种甲状腺疾病的治疗,效果颇佳。该文从理论探析、临床研究、机制研究等方面总结逍遥散加减方及有效成分治疗甲状腺疾病的相关文献。理论探析发现逍遥散既疏肝气之郁滞,又补脾气之空虚,与甲状腺疾病的病因病机相契合。临床研究发现,逍遥散及加减方可广泛用于甲状腺功能亢进、桥本氏甲状腺炎、甲状腺结节等多个甲状腺疾病的治疗,无论是单用逍遥散加减方治疗,还是联合甲巯咪唑、丙硫氧嘧啶、优甲乐治疗等,均可以较好地改善患者临床症状。在机制研究中,本研究发现逍遥散全方及加减方治疗甲状腺疾病可以抑制炎症反应,调节免疫平衡及延缓肝损伤。逍遥散的单味中药治疗甲状腺疾病的研究主要以甲状腺癌、自身免疫性甲状腺炎、甲状腺功能亢进、甲状腺功能减退为主,作用机制主要为促进细胞凋亡,抑制细胞增殖及迁移,阻滞细胞周期,调整甲状腺激素水平。总之,该研究通过检索文献,系统梳理、归纳总结了逍遥散治疗甲状腺疾病的研究现状,以期为中医药防治甲状腺疾病提供新视角、新思路。

关键词：逍遥散甲状腺疾病临床研究作用机制

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固本防哮饮对IL-4联合IL-13诱导的人支气管上皮细胞中CGRP/ILC2及GABA表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年第2期31卷 93-100页

作者：欧炜莹袁雪晶纪建建南京中医药大学附属医院南京210029 南京中医药大学第一临床医学院南京210023

目的:观察固本防哮饮含药血清对白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-13(IL-13)刺激的人支气管上皮细胞(BEAS-2B)中降钙素相关基因肽(CGRP)、γ-氨基丁酸(GABA)及Ⅱ型固有淋巴细胞(ILC2)相关转录因子、细胞因子的表达,探究其改善支气管上皮... 详细信息

目的:观察固本防哮饮含药血清对白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-13(IL-13)刺激的人支气管上皮细胞(BEAS-2B)中降钙素相关基因肽(CGRP)、γ-氨基丁酸(GABA)及Ⅱ型固有淋巴细胞(ILC2)相关转录因子、细胞因子的表达,探究其改善支气管上皮细胞Ⅱ型炎症的可能机制。方法:用含有高(20%)、中(15%)、低(10%)体积分数的固本防哮饮含药血清及孟鲁斯特钠(10%)含药血清对IL-4和IL-13联合刺激的BEAS-2B细胞进行干预,实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)检测各组细胞中CGRP、GABA、黏蛋白(MUC)5AC、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、白细胞介素-25(IL-25)、白细胞介素-33(IL-33)、白细胞介素-5(IL-5)、GATA结合蛋白3(GATA3)、B细胞淋巴瘤-11B(Bcl-11B)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞CGRP、MUC5AC蛋白相对表达;免疫荧光技术检测CGRP和GABA在细胞中的相对表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测培养基上清和细胞上清中IL-33、MUC5AC、IL-5的蛋白含量;过碘酸-雪夫反应(PAS)染色检测黏蛋白的分泌情况。结果:IL-4联合IL-13刺激细胞后,与正常组比较,各给药组CGRP、GABA、MUC5AC、TSLP、IL-25、IL-33 mRNA表达量明显上升(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,固本防哮饮含药血清各剂量组可显著降低造模后细胞中CGRP、GABA、MUC5AC、IL-5、GATA3、Bcl-11B mRNA表达(P<0.05,P<0.01),并表现出剂量依赖性。与正常组比较,模型组CGRP、GABA、MUC5AC、IL-33和IL-5蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,固本防哮饮含药血清各剂量组细胞中CGRP、GABA、MUC5AC、IL-33和IL-5的蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组CGRP和GABA的平均荧光强度显著升高(P<0.01);与模型组比较,固本防哮饮含药血清各剂量组中CGRP和GABA的平均荧光强度显著降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组中黏蛋白分泌增多;与模型组比较,固本防哮饮含药血清各剂量组中黏蛋白的分泌减少。结论:固本防哮饮通过减轻Ⅱ型免疫性气道炎症和减少气道黏液分泌,达到防治支气管哮喘的目的,其可能的机制是固本防哮饮降低了CGRP、GABA、MUC5AC及ILC2相关转录因子的表达。

关键词：支气管哮喘固本防哮饮降钙素相关基因肽 γ-氨基丁酸 Ⅱ型固有淋巴细胞

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雷火灸联合脉冲磁场对原发性骨质疏松症患者运动功能和骨代谢的影响

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中国康复医学杂志 2025年第2期40卷 231-236,247页

作者：刘静黄驰欢季发权张迪柏凌王彤王尊王胜韦理钰徐道明南京中医药大学附属医院江苏省南京市210029 南京医科大学第一附属医院南京中医药大学

目的:观察雷火灸联合脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields,PEMFs)对原发性骨质疏松症患者骨代谢和运动功能的影响。方法:本研究入组原发性骨质疏松症患者90例,采用信封法分为PEMFs组、雷火灸组和PEMFs+雷火灸组,每组30例。PEMFs... 详细信息

目的:观察雷火灸联合脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields,PEMFs)对原发性骨质疏松症患者骨代谢和运动功能的影响。方法:本研究入组原发性骨质疏松症患者90例,采用信封法分为PEMFs组、雷火灸组和PEMFs+雷火灸组,每组30例。PEMFs治疗频率为16Hz,强度为20mT;雷火灸选取双侧肝俞、肾俞部位施灸。治疗时间均为30min,每周3次,连续3个月。在治疗前、治疗3个月及入组6个月随访时评估计时起立-走(TUG)、血清I型前胶原氨基末端肽(PINP)和血清Ⅰ型胶原交联C-末端肽(CTX-I),并在入组6个月随访时进行骨密度(BMD)检测。结果:(1)组间比较:与PEMFs组比较,PEMFs+雷火灸组治疗3个月降低TUG用时和血清CTX-Ⅰ水平显著(P<0.05),血清PINP水平降低更显著(P<0.01)。入组6个月随访时,PEMFs+雷火灸组降低TUG用时较PEMFs组显著(P<0.01)。与雷火灸组比较,PEMFs+雷火灸组治疗3个月降低血清CTX-Ⅰ水平显著(P<0.05)。(2)组内比较:治疗3个月与治疗前比较,PEMFs组降低TUG用时和血清CTX-Ⅰ水平显著(P<0.05);雷火灸组和PEMFs+雷火灸组TUG用时和血清PINP与CTX-Ⅰ水平显著降低(P<0.01)。入组6个月随访时与治疗前比较,PEMFs组降低TUG用时显著(P<0.05);PEMFs+雷火灸组TUG用时和血清PINP水平显著降低(P<0.01)。三组患者腰总和髋总BMD在入组6个月随访和治疗前比较均无显著差异(P>0.05)。结论:雷火灸联合PFMFs可提高原发性骨质疏松症患者运动功能、改善骨代谢指标;骨密度值呈好转趋势。

关键词：原发性骨质疏松症脉冲电磁场雷火灸计时起立-走骨代谢

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基于PI3K/Akt信号通路探讨中药促进缺血性脑卒中后血管新生的作用机制研究进展

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中国实验方剂学杂志 2025年第7期31卷 265-274页

作者：王晓娅刘昊飞刘向哲河南中医药大学第一附属医院郑州450000 河南中医药大学第一临床医学院郑州450000

缺血性脑卒中是一种常见的脑血管疾病,其主要病理特征是由于局部脑组织因血液供应不足而导致的缺氧和营养缺乏。血管新生,即在已有血管基础上形成新的血管网络,对于增加脑组织缺血区域的血流量、恢复血供和氧供、改善疾病预后具有重要... 详细信息

缺血性脑卒中是一种常见的脑血管疾病,其主要病理特征是由于局部脑组织因血液供应不足而导致的缺氧和营养缺乏。血管新生,即在已有血管基础上形成新的血管网络,对于增加脑组织缺血区域的血流量、恢复血供和氧供、改善疾病预后具有重要意义。这一复杂过程受到多种因素的调控,包括细胞因子、生长因子及信号通路等,其中,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路被认为是一个关键的调节通路,不仅在抗细胞凋亡和促细胞存活中发挥重要作用,调控着细胞生长、分化、迁移和存活等过程,还深度参与调控血管新生的过程。中药对治疗脑卒中具有多成分、多靶点、多通路的独特优势,在治疗缺血性脑卒中方面展现出显著潜力,近年来研究发现中药可以通过PI3K/Akt信号通路促进缺血性脑卒中后的血管新生,该文以PI3K/Akt信号通路为研究切入点,从调控微小RNA(miRNA)、内皮祖细胞(EPCs)、细胞凋亡、通路上游促血管生成因子及下游靶分子方面深入探讨了中药单体活性成分、提取物、衍生物、药对和中药复方在缺血性脑卒中后促进血管新生的机制,并详细阐述了相关研究进展,旨在揭示中药如何通过这一关键信号通路,发挥其在缺血性脑卒中治疗中的潜在效用,为临床治疗提供理论依据。

关键词：磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路缺血性脑卒中中药血管新生作用机制研究进展

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雷公藤治疗类风湿关节炎作用机制的生物信息学分析及实验验证

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中医杂志 2025年第7期66卷 724-733页

作者：杨豫正姚晓玲罗丰马武开贵州中医药大学贵州省贵阳市550025 贵州中医药大学第二附属医院

目的运用生物信息学方法及试验验证探讨雷公藤治疗类风湿关节炎(RA)的可能作用机制。方法通过基因表达综合数据库(GEO)、中药系统药理数据库及分析平台(TCMSP),采用基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集、蛋白质-... 详细信息

目的运用生物信息学方法及试验验证探讨雷公藤治疗类风湿关节炎(RA)的可能作用机制。方法通过基因表达综合数据库(GEO)、中药系统药理数据库及分析平台(TCMSP),采用基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集、蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络、分子对接、受试者工作特征曲线(ROC)、免疫浸润分析等生物信息学分析方法对雷公藤主要成分及作用于RA的靶点进行分析预测,并对分析获得的靶基因进行实验验证。体外实验选择人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA),并以甲氨蝶呤为阳性对照,划痕实验检测培养24 h后细胞迁移率,Western Blot法检测蛋白水平、qPCR法检测靶基因mRNA水平,ELISA法检测炎症因子水平[包括白细胞介素1β (IL-1β)、白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素10 (IL-10)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)]。结果将雷公藤有效化合物获得的117个有效靶基因与RA发病相关基因取交集,共得到55个交集基因并将其看作关键基因。对55个关键基因进行筛选,最终获得3个核心基因(即PTGS2、CXCR4、TIMP1)。根据潜在药物靶点和雷公藤主要成分的对应关系,得出雷公藤甲素和川陈皮素2个主要成分。分子对接结果显示,雷公藤甲素和川陈皮素与相应靶蛋白结合能<-5,说明其与潜在药物靶点结合强烈。体外试验结果显示,与空白对照组比较,雷公藤甲素组、川陈皮素组、阳性对照组在培养24 h后细胞迁移率均降低(P<0.01),各给药组PTGS2、CXCR4 mRNA表达及其蛋白水平均降低,TIMP1 mRNA表达及其蛋白水平均升高,IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,IL-10水平升高(P<0.01)。与阳性对照组比较,雷公藤甲素组和川陈皮素组细胞在培养24 h后细胞迁移率升高,PTGS2、CXCR4 mRNA表达及其蛋白水平升高,TIMP1 mRNA表达及其蛋白水平降低,IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高,IL-10水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论雷公藤的主要有效成分雷公藤甲素和川陈皮素可以抑制PTGS2、CXCR4和提高TIMP1表达,从而抑制炎症反应以达到缓解RA的作用。

关键词：类风湿关节炎雷公藤生物信息学雷公藤甲素川陈皮素

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