检索结果-内蒙古大学图书馆

时珍国医国药 2025年第08期 1580-1586页

作者：蔡雨若杨硕张荣周雨雨方利莫倩贵州中医药大学贵州中医药大学第二附属医院

目的观察膀胱神经节段相关腧穴和膀胱传入神经的传导分布规律。方法将霍乱毒素亚单位B结合荧光素488和594分别注入腧穴与膀胱，使用荧光显微镜观察并记录神经元标记情况。结果次髎、中极、三阴交、肾俞组在盆神经节、L4-S1节段背根... 详细信息

目的观察膀胱神经节段相关腧穴和膀胱传入神经的传导分布规律。方法将霍乱毒素亚单位B结合荧光素488和594分别注入腧穴与膀胱，使用荧光显微镜观察并记录神经元标记情况。结果次髎、中极、三阴交、肾俞组在盆神经节、L4-S1节段背根神经节与脊髓、脑干各个区可见被AF594/488-CTB单独或共同标记的神经元，数量上次髎组最多；合谷组在C4-C5节段背根神经节和脊髓、脑干中可见被AF488-CTB标记的神经元。结论中/次髎穴与膀胱感觉传入盆神经联系紧密，中极、三阴交、肾俞穴与盆神经有一定关联，中/次髎穴可能通过介导盆神经传导达到调节膀胱功能。

关键词：神经通路膀胱神经示踪膀胱神经节段腧穴

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基于维生素D调控树突状细胞表型探讨淫羊藿苷对心肌重塑大鼠心脏的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年第5期31卷 76-85页

作者：李倩陈雨佳周艳李文管连城王焕珍陈云志贵州中医药大学贵阳550025 贵州中医药大学第二附属医院贵阳550001 德江县民族中医院铜仁565200

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对Dahl盐敏感大鼠心肌重塑模型心脏组织树突状细胞(DCs)表型的影响及对维生素D系统的调控。方法:将雄性Dahl盐抵抗大鼠分为正常组,雄性Dahl盐敏感大鼠分为模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组(30、60、120 mg·k... 详细信息

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对Dahl盐敏感大鼠心肌重塑模型心脏组织树突状细胞(DCs)表型的影响及对维生素D系统的调控。方法:将雄性Dahl盐抵抗大鼠分为正常组,雄性Dahl盐敏感大鼠分为模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组(30、60、120 mg·kg^(-1)·d^(-1)),维生素D组(3×10^(-5) mg·kg^(-1)·d^(-1));除正常组外,其余各组均给予8%高盐饲料喂养建立心肌重塑模型,并于造模成功后进行灌胃给药,1次/d,连续6周。进行尾动脉血压动态变化监测;大鼠心脏超声功能检测;苏木素-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色观察大鼠心脏组织形态变化;流式细胞术检测心脏树突状细胞表型成熟和辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)值;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心脏组织中维生素D受体(VDR)、1α-羟化酶(CYP27B1)、24-羟化酶(CYP24A1)、叉头框蛋白P3(FoxP3)、孤核受体γ(t RORγt)、心肌Ⅰ型胶原(ColⅠ)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)mRNA和蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组心肌细胞排列紊乱并出现断裂,细胞核固缩,心肌组织明显水肿,胶原纤维明显增生呈网状分布,尾动脉血压、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)明显上升(P<0.05),心脏DCs表型CD40、CD80、CD86、主要组织相容性复合体-Ⅱ(MHC-Ⅱ)和Th17细胞、Th17/Treg明显上升(P<0.05),心脏CYP24A1、RORγt mRNA和蛋白表达及ColⅠ、ColⅢmRNA表达均明显上升(P<0.05),心脏左室射血分数(LVEF)、室间隔厚度(IVSD)、左室后壁厚度(LVPWD)明显下降(P<0.05),心脏DCs表型CD11、CD11b、Treg细胞明显减少(P<0.05),心脏VDR、CYP27B1、FoxP3 mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.05)。与模型组比较,淫羊藿苷低、中、高剂量组和维生素D组大鼠心肌细胞断裂和核固缩情况明显减轻,淫羊藿苷高剂量组和维生素D组心肌细胞少部分出现断裂、核固缩的现象,不同程度改善心肌纤维排列,心肌纤维断裂和增生明显减少,淫羊藿苷低、中、高剂量组和维生素D组尾动脉血压、LVEDD、LVESD明显下降(P<0.05),心脏DCs表型CD40、CD80、CD86、MHC-Ⅱ和Th17细胞、Th17/Treg明显下降(P<0.05),淫羊藿苷中、高剂量组和维生素D组心脏CYP24A1、RORγt mRNA和蛋白表达及ColⅠ、ColⅢmRNA表达明显下降(P<0.05),淫羊藿苷低、中、高剂量组和维生素D组心肌重塑模型大鼠LVEF、IVSD、LVPWD明显上升(P<0.05);淫羊藿苷中、高剂量组和维生素D组心脏DCs表型CD11、CD11b、Treg细胞明显增加(P<0.05);淫羊藿苷中、高剂量组和维生素D组心脏VDR、CYP27B1、FoxP3 mRNA和蛋白表达明显上升(P<0.05)。结论:淫羊藿苷可调节Dahl盐敏感大鼠心肌重塑模型尾动脉血压、心脏结构和功能损伤、心肌组织纤维化,还可抑制心脏组织DCs表型和功能成熟,影响VDR、CYP24A1、CYP27B1 mRNA和蛋白表达,实现其对心肌重塑免疫过程中Th17/Treg平衡的干预,可能是通过调节心脏组织中维生素D/VDR发挥作用。

关键词：淫羊藿苷维生素D 树突状细胞心脏心肌重塑

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刘尚义运用自拟阴痒方治疗阴痒经验

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中医杂志 2025年第10期 992-995页

作者：刘晓华诏召周意园张泰魏李燕黄爽高强薛凯阳刘尚义贵州中医药大学贵州中医药大学第二附属医院贵州中医药大学第一附属医院优生研究中心甘肃中医药大学贵州中医药大学第一附属医院

总结刘尚义教授治疗阴痒的临证经验。认为女性具有肝肾为本的生理特点，其阴部易遭风湿邪气侵袭，故提出阴痒的核心病机为风湿蕴结、肝肾亏虚。临证主张以祛风除湿、调养肝肾为核心治法，化裁当归饮子形成自拟阴痒方，作为治疗阴痒的基... 详细信息

总结刘尚义教授治疗阴痒的临证经验。认为女性具有肝肾为本的生理特点，其阴部易遭风湿邪气侵袭，故提出阴痒的核心病机为风湿蕴结、肝肾亏虚。临证主张以祛风除湿、调养肝肾为核心治法，化裁当归饮子形成自拟阴痒方，作为治疗阴痒的基本方。

关键词：阴痒肝肾亏虚风湿蕴结名医经验刘尚义

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雷公藤治疗类风湿关节炎作用机制的生物信息学分析及实验验证

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中医杂志 2025年第7期66卷 724-733页

作者：杨豫正姚晓玲罗丰马武开贵州中医药大学贵州省贵阳市550025 贵州中医药大学第二附属医院

目的运用生物信息学方法及试验验证探讨雷公藤治疗类风湿关节炎(RA)的可能作用机制。方法通过基因表达综合数据库(GEO)、中药系统药理数据库及分析平台(TCMSP),采用基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集、蛋白质-... 详细信息

目的运用生物信息学方法及试验验证探讨雷公藤治疗类风湿关节炎(RA)的可能作用机制。方法通过基因表达综合数据库(GEO)、中药系统药理数据库及分析平台(TCMSP),采用基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集、蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络、分子对接、受试者工作特征曲线(ROC)、免疫浸润分析等生物信息学分析方法对雷公藤主要成分及作用于RA的靶点进行分析预测,并对分析获得的靶基因进行实验验证。体外实验选择人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA),并以甲氨蝶呤为阳性对照,划痕实验检测培养24 h后细胞迁移率,Western Blot法检测蛋白水平、qPCR法检测靶基因mRNA水平,ELISA法检测炎症因子水平[包括白细胞介素1β (IL-1β)、白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素10 (IL-10)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)]。结果将雷公藤有效化合物获得的117个有效靶基因与RA发病相关基因取交集,共得到55个交集基因并将其看作关键基因。对55个关键基因进行筛选,最终获得3个核心基因(即PTGS2、CXCR4、TIMP1)。根据潜在药物靶点和雷公藤主要成分的对应关系,得出雷公藤甲素和川陈皮素2个主要成分。分子对接结果显示,雷公藤甲素和川陈皮素与相应靶蛋白结合能<-5,说明其与潜在药物靶点结合强烈。体外试验结果显示,与空白对照组比较,雷公藤甲素组、川陈皮素组、阳性对照组在培养24 h后细胞迁移率均降低(P<0.01),各给药组PTGS2、CXCR4 mRNA表达及其蛋白水平均降低,TIMP1 mRNA表达及其蛋白水平均升高,IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,IL-10水平升高(P<0.01)。与阳性对照组比较,雷公藤甲素组和川陈皮素组细胞在培养24 h后细胞迁移率升高,PTGS2、CXCR4 mRNA表达及其蛋白水平升高,TIMP1 mRNA表达及其蛋白水平降低,IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高,IL-10水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论雷公藤的主要有效成分雷公藤甲素和川陈皮素可以抑制PTGS2、CXCR4和提高TIMP1表达,从而抑制炎症反应以达到缓解RA的作用。

关键词：类风湿关节炎雷公藤生物信息学雷公藤甲素川陈皮素

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艾灸对ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠沉默信息调节因子1/内皮型一氧化氮合酶信号通路的影响

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针刺研究 2025年

作者：伍先明张宁朱洲杨孝芳贵州中医药大学第二临床医学院贵州中医药大学第二附属医院贵州中医药大学针灸推拿学院

目的：观察艾灸对ApoE-/-动脉粥样硬化（AS）小鼠胸主动脉病理结构、超微结构变化、沉默信息调节因子1(SIRT1)、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）蛋白及mRNA表达的影响，探讨艾灸防治AS的可能作用机制。方法：雄性ApoE-/-小鼠随机分为模型组... 详细信息

目的：观察艾灸对ApoE-/-动脉粥样硬化（AS）小鼠胸主动脉病理结构、超微结构变化、沉默信息调节因子1(SIRT1)、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）蛋白及mRNA表达的影响，探讨艾灸防治AS的可能作用机制。方法：雄性ApoE-/-小鼠随机分为模型组、艾灸组、艾灸+EX527组，每组10只；C57BL/6J小鼠10只作为对照组。高脂饲料饲养复制AS模型。艾灸组在“膻中“”神阙”及双侧“内关“”血海”进行艾灸，每次30 min，艾灸+EX527组在艾灸前30 min腹腔注射SIRT1阻断剂EX527(10 mg/kg)，各组均每日治疗1次，每周5次，连续干预12周。ELISA法检测小鼠血清一氧化氮（NO）、内皮素-1(ET-1)含量；HE染色、透射电镜观察小鼠胸主动脉病理形态结构和超微结构变化；免疫荧光染色观察小鼠胸主动脉内皮粘蛋白EMCN抗体（Endomucin）表达；Western blot法及实时荧光定量PCR法分别检测小鼠胸主动脉SIRT1和eNOS蛋白和mRNA的表达水平。结果：与对照组比较，模型组血清NO含量降低（P<0.05）,ET-1含量升高（P<0.05）；胸主动组织结构不完整，血管内壁不平整，中膜变性，内皮细胞变性、肿胀；内皮细胞少数线粒体肿胀，多数粗面内质网扩张，还可见少量自噬；胸主动脉Endomucin荧光强度、SIRT1和eNOS的蛋白及mRNA表达量均降低（P<0.05）。与模型组和艾灸+EX527组比较，艾灸组血清NO含量升高（P<0.05）,ET-1含量降低（P<0.05）；胸主动脉组织结构较为完整，管腔较规则，内膜可见少量的内皮细胞变性；透射电镜显示血管内皮细胞核周隙增宽，部分线粒体轻度肿胀；胸主动脉Endomucin荧光强度、SIRT1和eNOS的蛋白及mRNA表达量均升高（P<0.05）。结论：艾灸可减轻AS模型小鼠血管内皮损伤，改善内皮功能，促进内皮修复，其作用机制可能与调控SIRT1/eNOS信号通路有关。

关键词：动脉粥样硬化艾灸沉默信息调节因子1 内皮型一氧化氮合酶内皮功能

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中医药治疗慢性粒细胞白血病临床研究综述

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中华中医药杂志 2025年第3期40卷 1341-1345页

作者：彭名行朱国庆陈涛姚宇红黄礼明贵州中医药大学贵阳550025 贵州中医药大学第二附属医院贵阳550003

慢性粒细胞白血病(CML)属于中医“慢髓毒病”范畴。根据古今的阐述,其病因病机主要归纳为正气不足、热毒炽盛、痰瘀互结3个方面,治疗上以扶助正气、清热解毒、化痰祛瘀为主,且在此基础上加用具有确切抗癌作用的中药。通过对中医药治疗CM... 详细信息

慢性粒细胞白血病(CML)属于中医“慢髓毒病”范畴。根据古今的阐述,其病因病机主要归纳为正气不足、热毒炽盛、痰瘀互结3个方面,治疗上以扶助正气、清热解毒、化痰祛瘀为主,且在此基础上加用具有确切抗癌作用的中药。通过对中医药治疗CML临床研究的归纳总结发现,中医药在提高CML患者临床疗效、改善生活质量和降低不良反应等方面效果突出。文章在总结中医药治疗CML的临床研究现状基础上,从完善中医药临床研究方案、加强中医药逆转酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)耐药和降低TKIs不良反应的机制研究、深入研究TKIs耐药和TKIs不良反应的中医证候本质,以及规范中医诊疗方案等方面提出建议,希望通过开展科学合理严谨的临床研究,结合中医特色化的基础实验研究,深入探索TKIs耐药和TKIs不良反应中医证候本质以及规范中医治疗方案来推动中医药治疗CML的现代化发展。

关键词：慢性粒细胞白血病中医药临床研究酪氨酸激酶抑制剂综述

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鱼腥草总黄酮对肝癌细胞耐药性的逆转作用及机制研究

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海南医学院学报 2025年

作者：司维群刘静吴佳龙张琳蔡晓菁徐静贵州中医药大学第二临床医学院贵州中医药大学第二附属医院

目的：通过观察鱼腥草总黄酮对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402/ADM及P-糖蛋白（P-gp）表达的影响，探讨鱼腥草总黄酮对Bel-7402/ADM细胞的作用及可能逆转肝癌多药耐药（MDR）的作用机制。方法：CCK8法检测肝癌细胞耐药情况和抑制率；将实... 详细信息

目的：通过观察鱼腥草总黄酮对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402/ADM及P-糖蛋白（P-gp）表达的影响，探讨鱼腥草总黄酮对Bel-7402/ADM细胞的作用及可能逆转肝癌多药耐药（MDR）的作用机制。方法：CCK8法检测肝癌细胞耐药情况和抑制率；将实验分为亲本组（Bel-7402）、耐药组（Bel-7402/ADM）、亲本阿霉素组（Bel-7402+ADM）、耐药阿霉素组（Bel-7402/ADM+ADM）、鱼腥草总黄酮组（Bel-7402/ADM+ADM+EAT）、阳性对照组（Bel-7402/ADM+ADM+VRP）；通过流式和荧光观察检测处理后各组细胞内的阿霉素（ADM）蓄积量；将实验分为亲本组（Bel-7402）、耐药组（Bel-7402/ADM）、鱼腥草总黄酮组（Bel-7402/ADM+EAT）、阳性对照组（Bel-7402/ADM+VRP），通过流式和免疫组化检测各组细胞中P-gp蛋白的表达情况。结果：ADM对Bel-7402细胞及Bel-7402/ADM细胞的增殖均有抑制作用，但对Bel-7402细胞增殖的影响较大，Bel-7402/ADM细胞对ADM的耐药倍数为8.63倍；荧光结果显示，亲本组无荧光表现，耐药组有少量荧光；亲本阿霉素组及耐药阿霉素组荧光强度均增加且耐药阿霉素组强于亲本阿霉素组；鱼腥草总黄酮组及阳性对照组荧光强度较亲本组、耐药组及亲本阿霉素组明显增强，较耐药阿霉素组稍减弱；流式结果显示各组ADM的荧光强度为阳性对照组>耐药阿霉素组>亲本阿霉素组>鱼腥草总黄酮组>耐药组>亲本组（P<0.05）；流式结果显示，亲本组与耐药组中P-gp的MFI无明显差异（P=0.671），鱼腥草总黄酮组及阳性对照组显著低于亲本组及耐药组（P<0.001），鱼腥草总黄酮组与阳性对照组相比无差异（P=0.367）；免疫组化结果显示亲本组P-gp蛋白的阳性率为（15.34±2.15）%、与耐药组（99.94±0.02）%、鱼腥草总黄酮组（10.45±0.73）%及阳性对照组（1.08±0.13）%相比，差异均具有显著性（P<0.001）。结论：鱼腥草总黄酮可抑制Bel-7402/ADM细胞的增殖并增加细胞内ADM的蓄积，从而增强ADM的抗肿瘤作用并逆转肝癌的MDR，其机制可能与下调P-gp的表达有关。

关键词：鱼腥草总黄酮肝癌多药耐药 P-gp耐药蛋白阿霉素

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基于指纹图谱的医院制剂疏肝胃安颗粒工艺及质量一致性评价

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中国医院药学杂志 2025年第1期45卷 29-36页

作者：柯媛媛周训蓉杨元凤杨仁惠罗玉玲张强高永跃贵州中医药大学药学院贵州贵阳550025 贵州中医药大学第二附属医院药学部贵州贵阳550003

目的:建立疏肝胃安颗粒的化学和物理指纹图谱,构建工艺及质量的一致性评价方法。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)法建立12批疏肝胃安颗粒的化学指纹图谱,利用相似度评价软件计算各个批次间的相关性,并结合主成分分析对12批颗粒进行降维,... 详细信息

目的:建立疏肝胃安颗粒的化学和物理指纹图谱,构建工艺及质量的一致性评价方法。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)法建立12批疏肝胃安颗粒的化学指纹图谱,利用相似度评价软件计算各个批次间的相关性,并结合主成分分析对12批颗粒进行降维,通过矩阵变换,获得主成分的载荷矩阵;以颗粒的休止角、水分、松密度、振实密度、豪斯纳比、吸湿率、相对均齐指数7个物理参数构建物理指纹图谱,结合主成分分析法(PCA)和聚类分析法对不同批次间的颗粒进行类别分析。结果:12批疏肝胃安颗粒的化学指纹图谱相似度大于0.95,将12批颗粒按照PCA中的成分贡献率聚为2类,S1~S4聚为一类,S5~S12聚为一类;并指认了5个共有峰,分别为绿原酸、芍药苷、柚皮苷、新橙皮苷、黄芩苷。12批颗粒物理指纹图谱相似度大于0.98,经PCA提取两个成分,PC1主要贡献率为55.8%,PC2主要贡献率为22.3%。聚类分析将12批颗粒聚为3类。结论:构建了疏肝胃安颗粒的指纹图谱,可用于工艺及质量的一致性评价中,为院内制剂质量标准提升提供新思路。

关键词：疏肝胃安颗粒化学指纹图谱物理指纹图谱主成分分析聚类分析

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红蝴蝶疮与阴阳毒、痹病患者淋巴细胞亚群和细胞因子差异表达的回顾性研究

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世界科学技术-中医药现代化 2025年第2期27卷 556-563页

作者：倪媛媛崔丽丽侯雷姚血明马武开杨鹏贵州中医药大学贵阳550002 贵州中医药大学第二附属医院贵阳550003

目的“红蝴蝶疮”“阴阳毒”和“痹病”是系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)的不同中医诊断,目前尚不清楚这3种类型的中医诊断在生物学上是否存在差异。本研究旨在从淋巴细胞亚群和细胞因子角度比较SLE患者的不同中医... 详细信息

目的“红蝴蝶疮”“阴阳毒”和“痹病”是系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)的不同中医诊断,目前尚不清楚这3种类型的中医诊断在生物学上是否存在差异。本研究旨在从淋巴细胞亚群和细胞因子角度比较SLE患者的不同中医诊断。方法回顾性收集2021年6月1日至2023年12月1日经我院确诊SLE的患者,通过单因素方差分析或非参数检验比较不同组之间T细胞亚群、NK细胞、B淋巴细胞及其Th1类、Th2类、Th17类细胞因子差异,以及红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、免疫球蛋白、补体等实验室检测指标的差异,以受试者操作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC curve)分析这些指标对不同类型的SLE鉴别诊断价值。结果收集2021年6月1日至2023年12月1日经我院确诊SLE的首次住院患者291例,纳入符合本研究纳排标准的病例104例,其中红蝴蝶疮31例、阴阳毒30例、痹病43例。三组SLE不同中医诊断患者组间CD8^(+)T细胞绝对数量和百分比、白介素-10(IL-10)含量、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量相比有所差异,并且红蝴蝶疮组CD8^(+)T细胞绝对数量显著高于阴阳毒组(P=0.039)与痹病组(P=0.008),红蝴蝶疮组CD8^(+)T细胞百分比显著高于阴阳毒组(P=0.014)与痹病组(P=0.004),红蝴蝶疮组IL-10及TNF-α水平显著低于痹病组(P=0.015,P=0.036),且ROC曲线分析显示,CD8^(+)T细胞绝对数量和百分比能有效区别红蝴蝶疮与阴阳毒(AUC=0.65,AUC=0.61,P<0.05),CD8^(+)T细胞绝对数量和百分比、IL-10,TNF-α能有效区别红蝴蝶疮与痹病(AUC=0.68,AUC=0.66,P<0.01;AUC=0.67,AUC=0.64,P<0.05)。结论免疫淋巴细胞亚型,细胞因子,特别是CD8^(+)T细胞绝对数量和百分比、IL-10及TNF-α可能在鉴定SLE不同中医诊断中具有重要作用。

关键词：系统性红斑狼疮中医诊断淋巴细胞亚群细胞因子 CD8^(+)T细胞白介素-10 肿瘤坏死因子α

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复方苗药九仙罗汉接骨汤通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控成骨细胞自噬影响细胞活力及凋亡的研究

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中药材 2025年 217-223页

作者：余梁王洪发谢正兴殷天坪宁众李娜唐良华贵州中医药大学浙江大学第二附属医院台江分院骨外科贵州中医药大学第二附属医院关节骨科

目的:研究复方苗药九仙罗汉接骨汤含药血清对PI3K/AKT/mTOR信号通路的调控作用及对成骨细胞MC3T3-E1Subclone14自噬、细胞活力和凋亡过程的影响。方法:制备空白血清及复方苗药九仙罗汉接骨汤含药血清,采用CCK-8法筛选最佳含药血清浓度... 详细信息

目的:研究复方苗药九仙罗汉接骨汤含药血清对PI3K/AKT/mTOR信号通路的调控作用及对成骨细胞MC3T3-E1Subclone14自噬、细胞活力和凋亡过程的影响。方法:制备空白血清及复方苗药九仙罗汉接骨汤含药血清,采用CCK-8法筛选最佳含药血清浓度进行后续实验。将MC3T3-E1Subclone14细胞分为空白血清组、3-MA组、复方苗药九仙罗汉接骨汤含药血清组、复方苗药九仙罗汉接骨汤含药血清+3-MA组,CCK-8法检测各组成骨细胞活力;流式细胞仪检测各组成骨细胞凋亡率;茜素红染色检测各组成骨细胞矿化情况及矿化结节数量;透射电镜观察自噬小体数量;免疫荧光染色检测Bax、Caspase-3在细胞中的表达;Real-time PCR法检测各组细胞Bax、Caspase-3、BALP m RNA表达;Western Blot检测各组细胞p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、Beclin-1、ATG5、Bax、Caspase-3、Pinp、BALP蛋白表达。结果:CCK-8法结果显示10%浓度的含药血清提升细胞活力的作用最佳(P<0.01),故选择其为最佳浓度进行后续实验。与空白血清组比较,复方苗药九仙罗汉接骨汤含药血清组细胞活力及矿化能力显著升高,凋亡率显著降低(P<0.05或P<0.01),自噬小体数量明显增多,Bax、Caspase-3 m RNA和蛋白表达显著降低,BALP m RNA和p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、Beclin-1、ATG5、Pinp、BALP蛋白表达显著上述升高(P<0.05或P<0.01)。3-MA可逆转复方苗药九仙罗汉接骨汤含药血清的上述作用(P<0.05或P<0.01)。结论:复方苗药九仙罗汉接骨汤可通过调控成骨细胞自噬进而提升其细胞活力和矿化能力,抑制凋亡过程,其机制可能与激活PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

关键词：复方苗药九仙罗汉接骨汤成骨细胞细胞活力凋亡细胞自噬 PI3K/AKT/mTOR信号通路

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