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OAT1/3在肾小管表达差异及竞争性抑制对急性马兜铃酸Ⅰ肾小管损伤的影响

药物评价研究 2024年第10期47卷 2301-2308页

作者：杨心怡黄春华李小芬李茂娟夏铭汤海明刘德芳艾兴辉楼迪栋贵州中医药大学基础医学院法医学教研室贵州贵阳550000 贵州中医药大学司法鉴定所贵州贵阳550000 贵州中医药大学贵州省法医中药毒理学特色重点实验室贵州贵阳550000

目的通过丙磺舒(PRB)抑制有机阴离子转运蛋白(OAT)1和3,观察马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)对大鼠肾小管上皮细胞的急性损伤,以探究AAⅠ进入肾小管上皮细胞的途径。方法雄性SD大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照(PEG300)组、PRB(150 mg·kg^(-1)... 详细信息

目的通过丙磺舒(PRB)抑制有机阴离子转运蛋白(OAT)1和3,观察马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)对大鼠肾小管上皮细胞的急性损伤,以探究AAⅠ进入肾小管上皮细胞的途径。方法雄性SD大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照(PEG300)组、PRB(150 mg·kg^(-1))组、AAⅠ(80 mg·kg^(-1))组、AAⅠ(80 mg·kg^(-1))+PRB(150mg·kg^(-1))组,每2天ig给药1次,连续给药4次。观察大鼠肾脏指数;生化仪检测血清肌酐(CREA)和尿素氮(BUN)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理学变化;免疫组化染色观察OAT1和OAT3在肾小管的组织定位和蛋白表达水平;免疫透射电镜观察OAT1和OAT3在肾小管上皮细胞的亚细胞定位和表达水平。结果与溶剂对照组相比,AAⅠ组肾脏指数、CREA和BUN水平显著增加(P<0.01、0.001);AAⅠ+PRB组与AAⅠ组相比,肾脏指数、CREA和BUN水平显著降低(P<0.05、0.001)。HE染色结果显示,与溶剂对照组相比,AAⅠ组肾近端小管上皮细胞(PCTEC)出现空泡样变性、微绒毛脱落以及片状坏死脱落,而AAⅠ+PRB组与AAⅠ组相比,PCTEC空泡样变性率下降,无其他类型病理学变化;另外,肾远端小管上皮细胞(DCTEC)AAⅠ组与AAⅠ+PRB组呈现少量空泡样变性。免疫组化和电镜结果显示,OAT1主要在PCTEC基底膜侧表达,OAT3主要在DCTEC基底膜侧表达,且AAⅠ暴露后,与溶剂对照组比较,前者在近端小管(PCT)表达有下降趋势(P<0.05),后者在远端小管(DCT)表达有上升趋势(P<0.05)。结论 AAⅠ能够导致PCT和DCT的损伤,PRB抑制OAT1和OAT3后,能够改善肾脏功能,并减少肾小管上皮细胞的病理学损害;OAT1可能是AAⅠ进入PCTEC的主要通道,而OAT3则可能是其进入DCTEC的主要通道。

关键词：马兜铃酸I 有机阴离子转运蛋白1 有机阴离子转运蛋白3 丙磺舒肾小管损伤

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肾小管上皮细胞特异性转运马兜铃酸机制研究进展

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药物评价研究 2024年第2期47卷 401-408页

作者：杨心怡黄春华李小芬汤海明楼迪栋贵州中医药大学基础医学院法医学教研室贵州贵阳550000 贵州省法医中药毒理学特色重点实验室贵州贵阳550000 贵州中医药大学司法鉴定所贵州贵阳550000

因应用不当或饮食污染摄入马兜铃酸I所引起的、以进展性间质纤维化为特征的急慢性肾炎称为马兜铃酸肾病或巴尔干地方性肾病。马兜铃酸I特异性损伤近端小管,而对肾脏其他组织细胞未表现出明显的直接损伤作用。因此,近曲小管上皮细胞通过... 详细信息

因应用不当或饮食污染摄入马兜铃酸I所引起的、以进展性间质纤维化为特征的急慢性肾炎称为马兜铃酸肾病或巴尔干地方性肾病。马兜铃酸I特异性损伤近端小管,而对肾脏其他组织细胞未表现出明显的直接损伤作用。因此,近曲小管上皮细胞通过有机阴离子蛋白1和3特异性摄入马兜铃酸I,是马兜铃酸I发挥特异性肾毒性作用的关键。近年来对肾小管摄取马兜铃酸I的机制已明确,但参与其在肾小管上皮细胞顶膜侧转运的蛋白鲜有报道。通过综述马兜铃酸I在肾小管的消除机制,以期为预防和治疗马兜铃酸肾病提供新靶点。

关键词：马兜铃酸马兜铃酸I 马兜铃酸肾病有机阴离子转运蛋白肾毒性近端小管

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斑马鱼肾损伤造模方法及评价指标的研究进展

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中国比较医学杂志 2023年第12期33卷 123-126页

作者：兰爱琳黄春华夏铭李茂娟汪思齐楼迪栋贵州省法医中药毒理学特色重点实验室贵州中医药大学司法鉴定所贵阳550000

肾容易受到体内外各种物理、化学和生物因素的影响,致使肾功能损害,造成急慢性肾疾病。预防和治疗各种因素引起的肾功能损害是泌尿系统研究的重要内容。斑马鱼幼鱼通体透明、产卵量大、易于基因编辑,在肾的形态、生理、功能等方面以及... 详细信息

肾容易受到体内外各种物理、化学和生物因素的影响,致使肾功能损害,造成急慢性肾疾病。预防和治疗各种因素引起的肾功能损害是泌尿系统研究的重要内容。斑马鱼幼鱼通体透明、产卵量大、易于基因编辑,在肾的形态、生理、功能等方面以及对化合物的反应也与人类具有很高的相似性,是理想的动物模型。本文将对斑马鱼肾损伤造模方法及评价指标进行综述。

关键词：斑马鱼肾损伤动物模型

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急性马兜铃酸中毒小鼠肾损伤及Wnt7b/β-catenin/MMP-7的表达变化

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中国医科大学学报 2023年第6期52卷 505-511页

作者：王一凡刘爽汪思齐李茂娟黄春华楼迪栋贵州中医药大学基础医学院法医学教研室/贵州中医药大学司法鉴定所贵阳550000 贵州省法医中药毒理学特色重点实验室贵阳550000

目的连续观察急性马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)中毒小鼠肾损伤的病理改变和Wnt通路相关蛋白的表达,探讨Wnt7b信号通路参与马兜铃酸肾病(AAN)损伤修复的机制。方法观察小鼠暴露于AAⅠ后不同时间肾功能的变化,HE和Masson染色观察肾脏病理改变及纤维... 详细信息

目的连续观察急性马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)中毒小鼠肾损伤的病理改变和Wnt通路相关蛋白的表达,探讨Wnt7b信号通路参与马兜铃酸肾病(AAN)损伤修复的机制。方法观察小鼠暴露于AAⅠ后不同时间肾功能的变化,HE和Masson染色观察肾脏病理改变及纤维化情况,免疫组化和电镜观察Wnt7b信号通路相关蛋白的组织和亚细胞的定位和表达。结果小鼠暴露于AAⅠ后血肌酐和尿素氮增多;肾近端小管上皮细胞(PCTEC)刷状缘绒毛脱落、细胞水肿、坏死,小管基底膜裸露、纤维化加重;免疫组化和电镜结果显示,小鼠暴露于AAⅠ后,Wnt7b蛋白在PCTEC的刷状缘聚集,β-catenin的表达从细胞膜下转移至胞质和细胞核内,基质金属蛋白酶-7(MMP-7)表达增多,改变呈时间依赖性(P<0.05)。结论小鼠暴露于AAⅠ后肾脏生理功能异常,PCTEC坏死脱落,在此过程中Wnt7b信号通路被启动,β-catenin和MMP-7蛋白表达量增高。

关键词：急性马兜铃酸肾病近端小管 Wnt7b/β-catenin 基质金属蛋白酶-7 损伤与修复

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从气血虚实及生活饮食情志论治胃脘痛

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现代养生 2025年第2期25卷 153-156页

作者：缪华楼迪栋贵州中医药大学基础医学院、贵州省法医中药毒理学特色重点实验室贵州中医药大学司法鉴定所

胃脘痛在临床上又称为胃痛，它并不是一种单独的一个疾病，而是一种症状，通常还可能伴随着其他症状，本病由多种原因引起，它具有高发病率、高反复率的特点，其主要病因病机是由气血失调导致，是临床上最为常见疾病症状之一，治疗方法... 详细信息

胃脘痛在临床上又称为胃痛，它并不是一种单独的一个疾病，而是一种症状，通常还可能伴随着其他症状，本病由多种原因引起，它具有高发病率、高反复率的特点，其主要病因病机是由气血失调导致，是临床上最为常见疾病症状之一，治疗方法多种多样,但病情反复易变化,影响了患者日常生活质量。在现代医学中主要见于急慢性胃炎，消化性溃疡、胃肠道痉挛、功能性消化不良等病，治疗方法主要包括保护胃黏膜、中和胃酸、促进胃动力、解痉止痛等治疗。胃脘痛病名最早记载于黄帝内经，古代医学认为其病因病机主要与气血关系密切，认为气为血之帅，血为气之母，气与血的关系十分密切，气不能运行，则血不能通达全身，不通则痛，故治气每可和血，治血亦须调气。六腑以通为用，胃气主降，胃的通降失职，从而变生胃脘疼痛诸症。对胃脘痛的治疗，古代医学认为首先应着重在气在血的调治，并根据症候辨病的主症及兼症分清气实、气虚、血实、血虚四种证型，按照证型辨证论治。通过从中医气血虚实、生活起居、饮食、情志等方面结合对胃脘痛治疗进行论述。

关键词：胃脘痛中医气血虚实饮食情志

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线粒体自噬与肾损伤理论探讨

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医学信息 2025年第3期38卷 179-183页

作者：缪华楼迪栋贵州中医药大学基础医学院贵州省法医中药毒理学特色重点实验室贵州中医药大学司法鉴定所

目前不明原因肾损伤患病率逐年上升，其死亡率也逐年增加，已经成为高度流行的疾病，不仅影响患者的生存质量，也给社会造成严重负担，而受损伤线粒体发生自噬时在肾疾病中也起重要调控作用并且极为关键。线粒体自噬通过清除受损、功能... 详细信息

目前不明原因肾损伤患病率逐年上升，其死亡率也逐年增加，已经成为高度流行的疾病，不仅影响患者的生存质量，也给社会造成严重负担，而受损伤线粒体发生自噬时在肾疾病中也起重要调控作用并且极为关键。线粒体自噬通过清除受损、功能障碍的线粒体，同时减少活性氧积累达到保护肾小管上皮细胞作用，是生理和病理条件下线粒体质量控制的重要机制。因此，清除受损的线粒体对机体稳态和生存极为重要。本文旨在通过线粒体自噬相关途径寻求靶点调控以期为防治肾损伤、延缓其进入慢性肾脏病提供思路和策略。

关键词：线粒体自噬肾疾病肾损伤细胞死亡 PINK1/Parkin通路

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绿化银杏树的外种皮、果仁及叶中银杏酸含量的研究

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人参研究 2025年第1期37卷 21-25页

作者：薛海强黄春华楼迪栋徐文芬贵州中医药大学药学院贵阳550025 贵州中医药大学司法鉴定所贵阳550000 贵州中医药大学贵州省法医中药毒理学特色重点实验室贵阳550000

目的采用100%的乙醇对绿化银杏树的外种皮、果仁、叶进行超声提取,分析3个部位中银杏酸的分布与含量,为银杏酸分布与含量的差异提供参考。方法外种皮粉碎成浆状,果仁粉碎烘干过筛,银杏叶粉碎过筛,分别用100%乙醇超声提取30min,离心分离... 详细信息

目的采用100%的乙醇对绿化银杏树的外种皮、果仁、叶进行超声提取,分析3个部位中银杏酸的分布与含量,为银杏酸分布与含量的差异提供参考。方法外种皮粉碎成浆状,果仁粉碎烘干过筛,银杏叶粉碎过筛,分别用100%乙醇超声提取30min,离心分离上清与沉淀,沉淀加入相同浓度乙醇进行超声提取,然后用建立的HPLC方法(流动相为乙腈-0.1%三氟乙酸,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长310 nm,柱温40℃)进行检测。结果这3个部位均含有银杏酸,其中外种皮中含量最高,其次是叶,果仁中含量相对较低。结论外种皮中银杏酸含量最高为45.9693mg·g^(-1),其次是银杏叶,银杏酸含量为14.0550mg·g^(-1);果仁中银杏酸的含量最低,为1.2246mg·g^(-1).

关键词：银杏酸银杏叶银杏果仁银杏外种皮 HPLC

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三种造模方法诱导小鼠肺炎的组织学及病理特征比较

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贵州医科大学学报 2024年第5期49卷 652-657,671页

作者：张颖汪思齐兰爱琳黄春华楼迪栋夏铭贵州中医药大学基础医学院法医学教研室贵州贵阳550000 贵州省法医中药毒理学特色重点实验室贵州贵阳550000 贵州中医药大学司法鉴定所贵州贵阳550000

目的比较硫磺烟熏结合冷水浴、香烟烟熏及脂多糖(LPS)雾化3种方法诱导小鼠肺炎的组织学改变及病理特征。方法雄性昆明小鼠40只随机均分为对照组(正常喂养,不做其他处理)、SO_(2)组(硫磺烟熏结合冷水浴,烟熏2.4 g/d)、香烟烟熏(XY)组(烟... 详细信息

目的比较硫磺烟熏结合冷水浴、香烟烟熏及脂多糖(LPS)雾化3种方法诱导小鼠肺炎的组织学改变及病理特征。方法雄性昆明小鼠40只随机均分为对照组(正常喂养,不做其他处理)、SO_(2)组(硫磺烟熏结合冷水浴,烟熏2.4 g/d)、香烟烟熏(XY)组(烟熏30根/d)及LPS组(LPS雾化10 mg/d),持续15 d;造模结束后,观察各组小鼠精神状态等一般情况及呼吸系统症状,麻醉处死小鼠取肺组织称肺湿重以计算肺脏系数,同时制作切片采用苏木精-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色及阿利新蓝-过碘酸雪夫氏(Ab-pas)染色检测肺组织形态学特征,采用免疫组织化学染色法检测肺组织白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白、核因子-κBp65(NF-κB p65)蛋白及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ(Collagen-Ⅰ)分别评估炎症病理改变及胶原增殖、纤维化情况。结果与对照组相比,其余各组小鼠均出现不同程度活动度减少、饮食减少、体质量下降、毛发枯黄无光泽且伴有咳嗽、打喷嚏和痰鸣音等呼吸系统症状;与对照组比较,SO_(2)组和LPS组小鼠肺脏系数升高(P<0.05);HE、Masson和Ab-pas染色结果显示,SO_(2)组和XY组小鼠肺组织中部分肺泡腔内和支气管周围见炎症细胞浸润、肺间质轻度纤维化增生,LPS组小鼠肺泡腔内见大量炎症细胞浸润、支气管周围及肺间质酸性黏蛋白分泌、肺间质明显纤维化增生;免疫组织化学染色结果显示,与对照组相比,SO_(2)组、XY组及LPS组小鼠肺组织IL-1β蛋白表达均增加(P<0.05),LPS组小鼠肺组织NF-κB p65、α-SMA及Collagen-Ⅰ蛋白表达增加(P<0.05)。结论与其它方法相比,脂多糖雾化诱导小鼠肺组织病理形态学改变最接近人类肺炎的疾病特点,是较为理想的肺炎小鼠造模方法。

关键词：脂多糖类肺炎肺纤维化香烟硫磺动物模型

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鹿血鉴定技术研究现状

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药物资讯 2023年第3期12卷 202-208页

作者：刘爽王一凡杨心怡刘德芳黄春华张书环楼迪栋贵州中医药大学法医学教研室贵州贵阳贵州省法医中药毒理学特色重点实验室贵州贵阳贵州中医药大学司法鉴定所贵州贵阳

鹿血是十分珍贵的中药材,具有促进新陈代谢、增强体质和抗衰老等作用,在我国作为药用已有一千多年的历史,由于鹿血来源稀少且药用价值珍贵,在经济利益驱使下,市场上出现假冒(猪、牛、羊等)或伪劣的鹿血制品,由于传统中药鉴定方法在鹿血... 详细信息

鹿血是十分珍贵的中药材,具有促进新陈代谢、增强体质和抗衰老等作用,在我国作为药用已有一千多年的历史,由于鹿血来源稀少且药用价值珍贵,在经济利益驱使下,市场上出现假冒(猪、牛、羊等)或伪劣的鹿血制品,由于传统中药鉴定方法在鹿血的鉴定中具有较大的局限性,因此为确保鹿血质量,用于开发鉴别鹿血及常见家畜的血液制品的现代分子生物学检测技术,将为鹿血及其制品的质量保证和产业高质量发展提供坚实的技术基础,故开展本课题的研究。

关键词：鹿血伪品微卫星序列鉴别技术

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四组化痰类方剂对LPS致小鼠急性肺损伤的作用研究

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临床医学进展 2023年第5期13卷 8675-8681页

作者：兰爱琳张颖汪思齐楼迪栋贵州省法医中药毒理学特色重点实验室贵州贵阳贵州中医药大学司法鉴定所贵州贵阳贵州中医药大学基础医学院法医学教研室贵州贵阳

为研究四组化痰类中药方剂对LPS致小鼠急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的疗效,本实验拟通过脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)刺激KM小鼠模拟肺部损伤,模型建立后采用桔梗甘草汤、贵州新冠痰湿质推荐方、五苓散、小柴胡汤进行灌胃处... 详细信息

为研究四组化痰类中药方剂对LPS致小鼠急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的疗效,本实验拟通过脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)刺激KM小鼠模拟肺部损伤,模型建立后采用桔梗甘草汤、贵州新冠痰湿质推荐方、五苓散、小柴胡汤进行灌胃处理,结果显示,通过LPS雾化处理成功构建小鼠ALI模型,四组方剂均可改善LPS诱导的小鼠ALI和肺部炎症反应情况。

关键词： LPS ALI 桔梗甘草汤贵州新冠痰湿质推荐方五苓散小柴胡汤

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