检索结果-内蒙古大学图书馆

沉默BLM DNA解旋酶基因对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响

贵州医科大学学报 2022年第8期47卷 869-878页

作者：黄亚兰张望明刘小花余晓静安丽君吴介恒杨留启刘杰麟贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014

目的探讨沉默BLM DNA解旋酶基因对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响。方法利用数据库分析BLM DNA解旋酶在乳腺癌组织中的表达情况及后评估价值,免疫组织化学技术检测三阴性乳腺癌、乳腺纤维腺瘤和癌旁组织中BLM DNA解旋酶表... 详细信息

目的探讨沉默BLM DNA解旋酶基因对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响。方法利用数据库分析BLM DNA解旋酶在乳腺癌组织中的表达情况及后评估价值,免疫组织化学技术检测三阴性乳腺癌、乳腺纤维腺瘤和癌旁组织中BLM DNA解旋酶表达,Western blot检测MCF-10A细胞、MCF-7细胞、MDA-MB-468细胞中BLM DNA解旋酶蛋白表达水平;合成siRNA序列沉默MDA-MB-468细胞中BLM DNA解旋酶基因的表达,选取沉默效率最高的siRNA-BLM 3序列构建shRNA干扰载体慢病毒;将慢病毒感染MDA-MB-468细胞分为shRNA-NC组和shRNA-BLM组,MTT、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,单细胞凝胶电泳技术检测与DNA损伤相关的细胞尾部DNA含量,免疫细胞化学检测DNA损伤标志物γ-H2AX表达情况,Western blot检测凋亡相关蛋白及DNA损伤修复蛋白表达情况。结果生物信息学分析显示BLM DNA解旋酶在乳腺癌组织中高表达,且与乳腺癌患者不良预后密切相关;三阴性乳腺癌组织BLM DNA解旋酶表达水平高于乳腺纤维腺瘤和癌旁组织(P<0.001);与MCF-10A细胞、MCF-7细胞比较,MDA-MB-468细胞中BLM DNA解旋酶蛋白表达水平升高(P<0.01);与未转染组比较,siRNA-BLM 3组BLM DNA解旋酶蛋白表达下调(P<0.05);与shRNA-NC组比较,shRNA-BLM组细胞增殖能力被抑制、凋亡率升高、尾部DNA含量增加、γ-H2AX阳性细胞比例升高(P<0.01)、凋亡相关蛋白Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-8表达上调,Bcl-2及DNA损伤修复蛋白BRCA1、Rad51、BLM表达下调(P<0.05)。结论沉默BLM DNA解旋酶基因表达抑制三阴性乳腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,凋亡机制可能与细胞DNA损伤增加,DNA损伤修复相关蛋白受抑制有关。

关键词：乳腺肿瘤细胞增殖细胞凋亡 BLM DNA解旋酶基因 RNA干扰

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黑骨藤对高表达表皮生长因子受体突变体Ⅲ的人胶质母细胞瘤细胞DKMG的影响及机制

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贵州医科大学学报 2023年第10期48卷 1137-1144页

作者：唐银彤官志忠陆定艳陈帅帅吴忠秀曹陶涛郭玮钰刘亭贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550001 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

目的探讨黑骨藤对高表达表皮生长因子(EGF)受体突变体Ⅲ(EGFRvⅢ)的人胶质母细胞瘤细胞DKMG的影响及其机制。方法取对数生长期的DKMG和不表达EGFRvⅢ的人脑星形胶质母细胞瘤细胞U87MG,各自分为空白(Con)组(DMEM培养液)、低浓度黑骨藤组(... 详细信息

目的探讨黑骨藤对高表达表皮生长因子(EGF)受体突变体Ⅲ(EGFRvⅢ)的人胶质母细胞瘤细胞DKMG的影响及其机制。方法取对数生长期的DKMG和不表达EGFRvⅢ的人脑星形胶质母细胞瘤细胞U87MG,各自分为空白(Con)组(DMEM培养液)、低浓度黑骨藤组(100 mg/L黑骨藤培养液)、中浓度黑骨藤组(200 mg/L黑骨藤培养液)及高浓度黑骨藤组(400 mg/L黑骨藤培养液),处理细胞24 h,采用细胞增殖与毒力检测试剂盒(MTS)检测各组DKMG、U87MG细胞的存活率,采用流式细胞术检测各组DKMG细胞凋亡率;实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qRT-PCR)检测各组DKMG细胞中EGFRvⅢ、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及BCL2-Associated X(Bax)的信使核糖核酸(mRNA)表达,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组DKMG细胞中EGFRvⅢ、Bcl-2、Bax、半胱氨酸蛋酶家族(Caspase-3、Cleaved caspase-3)蛋白的表达。结果MTS检测显示,与Con组相比,各浓度黑骨藤组DKMG细胞存活率明显降低(P<0.05),各浓度黑骨藤组U87MG细胞存活率比较、差异无统计学意义(P>0.05);流式细胞术结果表明,与Con组比较,各浓度黑骨藤组DKMG细胞凋亡率明显增加(P<0.05);qRT-PCR结果表明,与Con组比较,各浓度黑骨藤组DKMG细胞中EGFRvⅢ和Bcl-2 mRNA表达降低(P<0.05),Bax表达无变化(P>0.05);Western blot结果显示,各浓度黑骨藤组DKMG细胞中EGFRvⅢ、Bcl-2及Caspase-3蛋白表达下降(P<0.05),Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。结论黑骨藤可诱发DKMG细胞凋亡,产生细胞杀伤作用,其机制可能与下调EGFRvⅢ、Bcl-2、Caspase-3表达及上调Bax、Cleaved caspase-3表达有关。

关键词：细胞凋亡黑骨藤 DKMG细胞 U87MG细胞表皮生长因子受体突变体Ⅲ 细胞毒性

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杨梅素糖苷衍生物的合成及其抗菌活性研究

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中国抗生素杂志 2022年第8期47卷 798-807页

作者：吴光旭吴红林李吉顺李天磊吴松潘卫东贵州医科大学药学院/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550025 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵阳550014 中国医学科学院&北京协和医学院药物研究所天然产物活性物质与功能国家重点实验室北京100050

目的设计合成杨梅素类糖苷衍生物,并进行抗菌活性研究。方法以天然产物杨梅苷为起始原料,经过保护基策略、糖苷化反应、酯化反应制备得到一系列新型半乳糖苷衍生物,对杨梅素类衍生物进行了抑菌活性研究。结果以杨梅苷为原料,设计合成了1... 详细信息

目的设计合成杨梅素类糖苷衍生物,并进行抗菌活性研究。方法以天然产物杨梅苷为起始原料,经过保护基策略、糖苷化反应、酯化反应制备得到一系列新型半乳糖苷衍生物,对杨梅素类衍生物进行了抑菌活性研究。结果以杨梅苷为原料,设计合成了14个杨梅素类衍生物,其中包含有8个未见文献报道的新型糖苷化合物,其结构经核磁、ESI-MS进行了确证。体外抗菌活性结果显示,8个杨梅素衍生物具有较杨梅素和杨梅苷更强的抗菌活性,其中,化合物9a-1~9a-4对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的抗菌活性MIC值为1~8μg/mL。结论本研究首次以杨梅苷作为原料,设计了新的合成路线,并对合成中的关键反应条件进行了优化,构建了一条高效快捷的杨梅素衍生物的制备方法。化合物的初步活性结果显示,黄酮醇3位羟基半乳糖修饰可以显著提高杨梅素的抗菌活性,为杨梅素的进一步抗菌化合物的寻找提供了新的线索。

关键词：黄酮杨梅素糖苷衍生物合成与设计抗菌活性

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李子发酵前后挥发性成分及游离氨基酸的变化分析

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理化检验（化学分册） 2021年第3期57卷 210-217页

作者：周美王瑜李春燕张明李青魏福晓王道平贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014 中国科学院贵州省天然产物化学重点实验室贵阳550014

为探究李子发酵为李子酵素前后挥发性成分及游离氨基酸的变化规律,采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法(HS-SMPE-GC-MS)和氨基酸分析仪分析了其中的挥发性成分和游离氨基酸。将新鲜的李子样品去核、匀浆、熟化后,加入白砂糖和发酵剂发酵... 详细信息

为探究李子发酵为李子酵素前后挥发性成分及游离氨基酸的变化规律,采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法(HS-SMPE-GC-MS)和氨基酸分析仪分析了其中的挥发性成分和游离氨基酸。将新鲜的李子样品去核、匀浆、熟化后,加入白砂糖和发酵剂发酵3个月制备李子酵素。发酵前后的样品用顶空固相微萃取仪提取挥发性成分,然后通过HP-5MS色谱柱在程序升温条件下分离,用带有电子轰击(EI)离子源的质谱仪测定;通过质谱碎片信息、保留指数、保留时间等进行定性分析。选择LCAK07/Li型标准分析阳离子型交换树脂为固定相,用pH分别为2.90,4.20,8.00的柠檬酸-柠檬酸锂缓冲溶液和0.5mol·L^(-1)的氢氧化锂再生液的混合溶液为流动相进行梯度洗脱,分别在440nm(脯氨酸)和570nm(其他30种氨基酸)检测波长处测定发酵前后样品中的游离氨基酸,定量方法为单点外标法。结果显示:李子酵素中的挥发性成分增加了20种,这是其香气浓郁,风味和口感得到显著改善的主要原因;李子酵素中的游离氨基酸总量降低,必需氨基酸的种类和总含量增加,且新增了牛磺酸、胱氨酸、蛋氨酸、3-甲基组氨酸、1-甲基组氨酸等共5种氨基酸。

关键词：顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法氨基酸分析法挥发性成分游离氨基酸李子李子酵素

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泌淋清胶囊对不同白血病细胞株增殖及凋亡的影响

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贵州医科大学学报 2023年第6期48卷 634-639,646页

作者：秦川霞黎中恒黄磊饶青宋晶睿黄裕兵李艳梅省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室&贵州医科大学基础医学院免疫教研室贵州贵阳550000 贵阳市公共卫生救治中心感染二科贵州贵阳550001

目的探讨泌淋清胶囊(MLQ)对不同白血病细胞株增殖及凋亡的影响。方法取适量MLQ,采用醇提旋蒸冻干方法配制成100 g/L MLQ母液备用;取对数生长期人红白血病细胞株HEL分为125、250及500 mg/L MLQ组及对照组,取对数生长期人慢性髓系白血病细... 详细信息

目的探讨泌淋清胶囊(MLQ)对不同白血病细胞株增殖及凋亡的影响。方法取适量MLQ,采用醇提旋蒸冻干方法配制成100 g/L MLQ母液备用;取对数生长期人红白血病细胞株HEL分为125、250及500 mg/L MLQ组及对照组,取对数生长期人慢性髓系白血病细胞K562分为62.5、125.0、250.0及500.0 mg/L MLQ组及对照组,取对数生长期的人急性淋巴细胞白血病细胞Jurkat分为62.5、125.0及250.0 mg/L MLQ组及对照组,3种细胞均培养不同时间及多个时间点、采用噻唑蓝比色法(MTT)测定各组细胞的存活率;取对数生长期Jurkat细胞,设置150、300及600 mg/L及对照组(600 mg/L浓度等量的溶剂),分别培养24和48 h,采用流式细胞仪检测Jurkat细胞24和48 h的细胞凋亡率。结果各浓度MLQ组于48 h时,细胞株HEL、K562的存活率均随MLQ浓度的增加而降低(P<0.0001),各浓度MLQ组Jurkat细胞的存活率随MLQ浓度的增加而降低、细胞活力随时间的延长而下降(P<0.005或P<0.001或P<0.0001);各浓度MLQ组Jurkat细胞的凋亡率随着MLQ浓度的增加而增高(P<0.0001)。结论MLQ可抑制不同类型白血病细胞(HEL、K562及Jurkat)增殖,促进Jurkat细胞凋亡。

关键词：白血病 Jurkat细胞 K562细胞增殖凋亡泌淋清胶囊 HEL细胞

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海州常山茎的化学成分研究(Ⅱ)

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中药材 2022年第4期45卷 857-861页

作者：张宇岑银芝陈亮李勇军孙建博李林珍贵州医科大学药学院贵州贵阳550025 贵州医科大学民族药中药开发应用教育部研究工程中心贵州贵阳550004 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 中国药科大学天然药物化学教研室江苏南京210009

目的:研究海州常山Clerodendrum trichotomum Thunb.茎的化学成分。方法:综合运用硅胶、凝胶、ODS等柱色谱技术进行分离纯化,结合MS、^(1)H-NMR、^(13)C-NMR等波谱技术鉴定化合物的结构。结果:从海州常山茎中分离得到14个化合物,分别鉴... 详细信息

目的:研究海州常山Clerodendrum trichotomum Thunb.茎的化学成分。方法:综合运用硅胶、凝胶、ODS等柱色谱技术进行分离纯化,结合MS、^(1)H-NMR、^(13)C-NMR等波谱技术鉴定化合物的结构。结果:从海州常山茎中分离得到14个化合物,分别鉴定为:弥罗松酚(1)、villoson A(2)、粘霉烯醇(3)、3-O-乙酰齐墩果醛(4)、teuvincenone E(5)、异地黄苷(6)、deacylisomartynoside(7)、毛蕊花糖苷(8)、异毛蕊花糖苷(9)、去咖啡酰基毛蕊花糖苷(10)、(+)-南烛木树脂酚-3α-O-β-D-葡萄糖苷(11)、(-)-南烛木树脂酚-3α-O-β-D-葡萄糖苷(12)、南烛木树脂酚(13)、3,12-O-β-D-二吡喃葡萄糖基-11,16-二羟基松香醇-8,11,13-三烯(14)。结论:其中,化合物11~13为首次从该属植物中分离得到,化合物1、7、14为首次从该植物中分离得到。

关键词：海州常山化学成分苯丙素类结构鉴定

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黔产黄苞大戟中1个新的megastigmane糖苷

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中草药 2021年第8期52卷 2205-2209页

作者：杜彩霞易平陈俊磊熊燕张嘉瑜黄烈军苑春茂郝小江顾玮贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 毕节医学高等专科学校贵州毕节551700

目的研究黔产黄苞大戟Euphorbia sikkimensis的化学成分。方法采用正相硅胶、RP-C18、HPLC、Sephadex LH-20等色谱技术对黄苞大戟化学成分进行分离纯化,并运用NMR、MS等现代谱学技术进行化学结构鉴定。结果从黄苞大戟80%乙醇提取物中分... 详细信息

目的研究黔产黄苞大戟Euphorbia sikkimensis的化学成分。方法采用正相硅胶、RP-C18、HPLC、Sephadex LH-20等色谱技术对黄苞大戟化学成分进行分离纯化,并运用NMR、MS等现代谱学技术进行化学结构鉴定。结果从黄苞大戟80%乙醇提取物中分离鉴定出5个化合物,分别鉴定为(6S,9S)-布卢姆醇-6′-O-没食子酸酯(1)、(6R,9S)-布卢姆醇-6′-O-没食子酸酯(2)、ent-kaurane-3-oxo-16β-17-diol(3)、ent-16α,17-dihydroxy-atisan-3-one(4)、短叶苏木酚酸甲酯(5)。结论化合物1为新的megastigmane糖苷类化合物,命名为黄苞大戟苷A;化合物2~5首次从黄苞大戟中分离得到。

关键词：黄苞大戟 megastigmane糖苷黄苞大戟苷A (6R 9S)-布卢姆醇-6′-O-没食子酸酯短叶苏木酚酸甲酯

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基于UHPLC-Orbitrap Exploris 240的云实皮化学成分分析

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贵州医科大学学报 2023年第12期48卷 1459-1467页

作者：陈伟杨帅肖金超郑林黄勇迟明艳贵州益佰制药股份有限公司贵州贵阳550008 国家苗药工程技术研究中心贵州贵阳550008 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室&贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004

目的采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Orbitrap Exploris 240)系统分析云实皮的化学成分。方法将云实皮药材进行提取并处理后,经UHPLC-Orbitrap Exploris 240分析,运用Compound Discoverer及Xcalibur软件处理... 详细信息

目的采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Orbitrap Exploris 240)系统分析云实皮的化学成分。方法将云实皮药材进行提取并处理后,经UHPLC-Orbitrap Exploris 240分析,运用Compound Discoverer及Xcalibur软件处理质谱数据,并与数据库中相应化合物的标准图谱和碎片信息进行比对,结合相关文献及对照品,对云实皮中的化学成分进行分析。结果从云实皮中共分析出59个化学成分,主要包括黄酮类、酚类、有机酸类及其他类化学成分。结论建立的方法可全面、快速地分析云实皮的化学成分,可为云实皮后续的药效物质基础及质量控制研究提供一定依据。

关键词：云实皮超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱化学成分黄酮类酚类有机酸类定性分析

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鄂西清风藤化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

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广西植物 2021年第7期41卷 1070-1076页

作者：丁同同邓颖邓璐璐李江穆淑珍贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵阳550014 贵州医科大学药学院贵阳550025

为了研究鄂西清风藤在降低血糖方面的物质基础,该研究采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备型高效液相色谱和重结晶等分离纯化方法从鄂西清风藤中提取分离化合物,并采用PNPG法筛选体外活性。结果表明:从鄂西清风藤95%乙醇... 详细信息

为了研究鄂西清风藤在降低血糖方面的物质基础,该研究采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备型高效液相色谱和重结晶等分离纯化方法从鄂西清风藤中提取分离化合物,并采用PNPG法筛选体外活性。结果表明:从鄂西清风藤95%乙醇提取物中分离得到10个单体化合物,分别为Pronuciferine(1)、(6R,6aS,P)-Isocorydine(2)、N-methylhernovine(3)、N-formyldehydroanonain(4)、Roemerine(5)、(-)-Tetrahydropalmatine(6)、N-feruloyltyramine(7)、N-p-coumaroyltyramine(8)、Quercetin(9)、Dibutylphthalate(10)。所有化合物均为首次从该植物中分离得到。采用PNPG法筛选体外活性,研究结果显示化合物7、8、9具有明显的α-葡萄糖苷酶抑制活性,IC 50值为6.1~38.8μmol·L^(-1),其中化合物7、8的活性是阳性药阿卡波糖的40倍。该研究结果丰富了鄂西清风藤化学成分研究,为该植物在降血糖方面的开发提供了科学依据。

关键词：鄂西清风藤物质基础生物碱体外活性 α-葡萄糖苷酶

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金骨莲胶囊HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

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中草药 2021年第14期52卷 4185-4192页

作者：刘慧肖金超张庆捷蒲健谭丹李勇军王爱民郑林黄勇贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州益佰制药股份有限公司贵州贵阳550008 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

目的建立金骨莲胶囊HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别方法对其进行质量一致性评价,为该制剂的质量控制提供参考。方法采用ACE Excel 5 C18-PFP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱进行检测;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,进行梯度洗脱;体积... 详细信息

目的建立金骨莲胶囊HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别方法对其进行质量一致性评价,为该制剂的质量控制提供参考。方法采用ACE Excel 5 C18-PFP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱进行检测;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,进行梯度洗脱;体积流量为0.8 mL/min;柱温为40℃;检测波长为210 nm;进样量为10μL;建立12批金骨莲胶囊指纹图谱。对12批金骨莲胶囊指纹图谱进行相似度评价、层次聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)和主成分分析(PCA),并结合正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)寻找不同批次金骨莲胶囊的差异成分。结果建立的金骨莲胶囊HPLC指纹图谱共标定了19个共有峰,其中2、8、11号峰归属于汉桃叶,5、7、10、12、15号峰归属于大血藤,16、17、19号峰归属于透骨香,1号峰为5味药材共有,3号峰归属于八角枫和大血藤,13号峰归属于大血藤和透骨香,4、9、14、18号峰归属于大血藤和汉桃叶,6号峰归属于大血藤、汉桃叶和透骨香。通过与对照品对比指认出2、3、6、7、9、12、13、15、16号峰分别为富马酸、没食子酸、原儿茶酸、红景天苷、绿原酸、香草酸、表儿茶素、鹅掌楸苷、滇白珠苷A。12批金骨莲胶囊指纹图谱相似度均在0.910以上,HCA、PCA 2种分析方法均把样品分为了3类,结合OPLS-DA筛选出了导致各批次之间产生差异的7个差异性标志物,分别为15(鹅掌楸苷)、14、6(原儿茶酸)18、16(滇白珠苷A)、19、9(绿原酸)号色谱峰。结论该分析方法简单可行、具有良好精密度、重复性和稳定性,建立的指纹图谱可为金骨莲胶囊的质量评价提供参考。

关键词：金骨莲胶囊 HPLC 指纹图谱相似度评价模式识别质量评价层次聚类分析主成分分析正交偏最小二乘法-判别分析汉桃叶大血藤透骨香八角枫富马酸没食子酸原儿茶酸红景天苷绿原酸香草酸表儿茶素鹅掌楸苷滇白珠苷A

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