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天然产物研究与开发 2024年第5期36卷 798-804,770页

作者：曾玲芝王春林刘务玲杨奕樱李艳梅宋佳蕾贵州中医药大学药学院贵州中医药大学基础医学院贵州中医药大学分子生物学重点实验室贵阳550025 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014

本研究旨在探讨糖酵解参与楝酰胺的抗慢性粒细胞白血病细胞活性及机制。研究发现,楝酰胺以时间和浓度依赖性抑制K562细胞的生长增殖,其作用于K562细胞3 d的IC 50为21.70±5.68 nmol/L。楝酰胺阻滞K562细胞于G2/M期,诱导出现凋亡。... 详细信息

本研究旨在探讨糖酵解参与楝酰胺的抗慢性粒细胞白血病细胞活性及机制。研究发现,楝酰胺以时间和浓度依赖性抑制K562细胞的生长增殖,其作用于K562细胞3 d的IC 50为21.70±5.68 nmol/L。楝酰胺阻滞K562细胞于G2/M期,诱导出现凋亡。楝酰胺降低了K562细胞的葡萄糖消耗量和乳酸生成水平,抑制c-Myc和己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)的蛋白表达。K562细胞在进行去葡萄糖处理后生长减慢,乳酸生成水平降低,c-Myc蛋白表达下调。楝酰胺在无葡萄糖培养下K562细胞上的抑制率明显低于含葡萄糖培养下K562细胞上的抑制率。以上结果说明楝酰胺具有抗慢性粒细胞白血病细胞活性,其作用机制可能是抑制c-Myc和HK2介导的糖酵解。

关键词：楝酰胺慢性粒细胞白血病糖酵解 c-Myc HK2

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GC-MS同时测定大果木姜子油中11种挥发性成分的含量

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中国中药杂志 2023年第6期48卷 1568-1577页

作者：周杨晏婷郑林迟明艳巩仔鹏李月婷潘洁黄勇杨青波贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州益佰制药股份有限公司贵州贵阳550008

建立气相色谱-三重四极杆质谱(GC-MS)同时测定大果木姜子油中11种挥发性成分的方法,并结合化学模式识别法对不同产地大果木姜子药材提取的精油进行质量评价。采用内标法,药材经水蒸气蒸馏后,GC-MS测定,选择离子模式(selective ion monit... 详细信息

建立气相色谱-三重四极杆质谱(GC-MS)同时测定大果木姜子油中11种挥发性成分的方法,并结合化学模式识别法对不同产地大果木姜子药材提取的精油进行质量评价。采用内标法,药材经水蒸气蒸馏后,GC-MS测定,选择离子模式(selective ion monitoring,SIM)检测;使用层次聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)和主成分分析(principal component analysis,PCA),并结合正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)对多批次大果木姜子油含量测定结果进行统计分析。11种成分在各自浓度范围内线性关系良好(R^(2)>0.9997);平均加样回收率为92.41%~102.1%,RSD为1.2%~3.2%(n=6);HCA、PCA 2种方法均把样品分为了3类,结合OPLS-DA筛选出了导致各批次之间产生差异的差异性标志物为2-壬酮。该方法专属性强、灵敏度高、测定方法简便结果准确,所筛选的成分可为大果木姜子油的质量控制提供检验依据。

关键词：大果木姜子油 GC-MS 含量测定层次聚类分析主成分分析正交偏最小二乘-判别分析

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骨康胶囊对大鼠肝细胞色素P450酶活性及蛋白表达的影响

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中国中药杂志 2022年第21期47卷 5936-5943页

作者：杨畅李靖孙佳陆定艳陈帅帅李勇军王永林刘亭贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

骨康胶囊常与药物联用用于治疗骨折、骨性关节炎及骨质疏松。细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)主要存在于肝脏中,参与多种内源和外源性物质的氧化代谢,是产生药物代谢性相互作用,导致不良反应发生的重要原因。因此,研究骨康胶囊对C... 详细信息

骨康胶囊常与药物联用用于治疗骨折、骨性关节炎及骨质疏松。细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)主要存在于肝脏中,参与多种内源和外源性物质的氧化代谢,是产生药物代谢性相互作用,导致不良反应发生的重要原因。因此,研究骨康胶囊对CYP450活性和表达的影响,对增加其临床合理用药、提高药物联合应用的安全性具有重要意义。该文通过Cocktail探针药物法检测高、中、低剂量骨康胶囊对大鼠肝脏CYP1A2、CYP3A2、CYP2C11、CYP2C19、CYP2D4、CYP2E1活性的变化;利用氯化钙法提取大鼠肝微粒体,通过Western blot技术检测上述6个CYP亚型酶的蛋白表达。结果显示低剂量骨康胶囊可诱导大鼠CYP3A2、CYP2D4,中剂量骨康胶囊不对其产生影响,高剂量骨康胶囊可抑制大鼠CYP3A2、CYP2D4;高剂量骨康胶囊不影响大鼠CYP2C11,但低、中剂量的骨康胶囊可诱导大鼠CYP2C11;骨康胶囊可非剂量依赖性地抑制大鼠CYP2C19,诱导大鼠CYP1A2,但不影响大鼠CYP2E1。如果骨康胶囊与CYP1A2、CYP2C19、CYP3A2、CYP2C11和CYP2D4底物共同给药,则应调整剂量,避免药物相互作用。

关键词：骨康胶囊细胞色素P450 Cocktail探针药物法肝微粒体 Western blot

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基原为杜鹃兰的山慈菇质量控制研究

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中药材 2023年第11期46卷 2760-2766页

作者：肖秋肖韦迪仁莎莎张元现陈轻轻黄勇李月婷贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州益佰制药股份有限公司贵州贵阳550008

目的:建立山慈菇UHPLC指纹图谱,并同时测定2个成分的含量。方法:采用CORTECS T3(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;以0.1%甲酸溶液-甲醇∶乙腈(1∶2)溶液为流动相,梯度洗脱;柱温为40℃;流速为0.3 mL/min;进样量为2μL;检测波长为260 n... 详细信息

目的:建立山慈菇UHPLC指纹图谱,并同时测定2个成分的含量。方法:采用CORTECS T3(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;以0.1%甲酸溶液-甲醇∶乙腈(1∶2)溶液为流动相,梯度洗脱;柱温为40℃;流速为0.3 mL/min;进样量为2μL;检测波长为260 nm。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”进行相似度评价,并进行系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),筛选质量差异成分,并对其进行含量测定。结果:35批山慈菇指纹图谱共标定了11个共有峰,指认了色谱峰6、7分别为4-甲氧基菲-2,7-二醇、blestriarene C。35批样品与对照图谱的相似度为0.739~0.998。HCA及PCA分析均将35批样品分为5类,通过OPLS-DA确定4-甲氧基菲-2,7-二醇、blestriarene C对区分不同产地山慈菇的贡献较大。35批山慈菇中上述2个成分含量分别为0.7329~69.4868μg/g、2.3272~81.6388μg/g。结论:该研究建立的指纹图谱结合化学模式识别分析及含量测定方法准确可靠,能够较全面的评价山慈菇的质量,为其质量控制提供参考。

关键词：杜鹃兰山慈菇指纹图谱化学模式识别含量测定

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4-氨基-2-三氟甲基喹唑啉衍生物的合成及其体外抗肿瘤活性研究

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中国药学杂志 2022年第17期57卷 1430-1437页

作者：刘锟余佳余刚曾晓萍徐广灿孟雪玲徐必学贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵阳550014

目的基于喹唑啉为母核设计发现新型抗肿瘤活性化合物。方法以邻氨基苯甲酰胺和三氟乙酸酐为起始原料采用缩合、环化、氯代和偶联反应等合成了一系列4-氨基-2-三氟甲基喹唑啉衍生物(5a~5u)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法评价所得目标化... 详细信息

目的基于喹唑啉为母核设计发现新型抗肿瘤活性化合物。方法以邻氨基苯甲酰胺和三氟乙酸酐为起始原料采用缩合、环化、氯代和偶联反应等合成了一系列4-氨基-2-三氟甲基喹唑啉衍生物(5a~5u)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法评价所得目标化合物对人肺癌细胞A549、人宫颈癌细胞Hela、人白血病细胞K562、人前列腺癌细胞PC-3、人前列腺癌细胞LNCaP这5种肿瘤细胞的体外增殖抑制活性。结果化合物5c在5μmol·L^(-1)时对PC-3肿瘤细胞的抑制率为49.3%,化合物6a对LNCaP和K562、以及6b对PC-3的抑制率超过了50.0%。结论本实验设计合成的4-氨基-2-三氟甲基喹唑啉类化合物多数具有一定的抗肿瘤活性,特别是4-氨基的N-甲基化产物6a、6b的体外抗肿瘤活性较原型化合物(5n与5u)显著增强,为该类化合物的进一步研究提供参考。

关键词：喹唑啉三氟甲基化学合成抗增殖活性四甲基偶氮唑盐法

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4H-3,1-苯并噁嗪-4-酮衍生物的合成及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

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化学通报 2023年第2期86卷 222-232,243页

作者：张鹏陈佳林安巧邹吉斌张吉胡占兴郝小江贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵阳550002 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳5550014 贵州中医药大学药学院贵阳550025

为了探索高效低毒的新型α-葡萄糖苷酶抑制剂,设计并合成了一系列4H-3,1-苯并噁嗪-4-酮衍生物,其结构经过1H NMR、13C NMR和HRMS鉴定。体外α-葡萄糖苷酶抑制活性测定结果表明,化合物3a、4a、5a和4j的IC50值分别为68.3、76.1、99.3和51.... 详细信息

为了探索高效低毒的新型α-葡萄糖苷酶抑制剂,设计并合成了一系列4H-3,1-苯并噁嗪-4-酮衍生物,其结构经过1H NMR、13C NMR和HRMS鉴定。体外α-葡萄糖苷酶抑制活性测定结果表明,化合物3a、4a、5a和4j的IC50值分别为68.3、76.1、99.3和51.9μmol/L,明显优于阳性对照阿卡波糖(IC50=421.7μmol/L)。此外,分子对接研究结果表明化合物3a和4j与α-葡萄糖苷酶存在较强的亲和力。

关键词： 4H-3,1-苯并噁嗪-4-酮 α-葡萄糖苷酶抑制剂分子对接糖尿病

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十大功劳叶HPLC指纹图谱的建立及多基原模式识别研究

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中药材 2024年第11期47卷 2800-2806页

作者：徐明珠祝清灿吴秀平孙宜春李慧馨高秀丽省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室/贵州医科大学药学院贵州贵阳550025 贵州医科大学微生物与生化药学工程中心贵州贵阳550025 国药集团同济堂(贵州)制药有限公司贵州贵阳550026

目的:建立十大功劳叶HPLC指纹图谱,应用化学模式识别技术鉴别不同基原药材的差异性。方法:采用HPLC法,色谱柱为JADE-PAK^(®)KP-C_(18)-AQ(250 mm×4.6 mm,5μm)柱;流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH为3.0),梯度... 详细信息

目的:建立十大功劳叶HPLC指纹图谱,应用化学模式识别技术鉴别不同基原药材的差异性。方法:采用HPLC法,色谱柱为JADE-PAK^(®)KP-C_(18)-AQ(250 mm×4.6 mm,5μm)柱;流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH为3.0),梯度洗脱;检测波长为336 nm。通过聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析和方差分析等对十大功劳叶5个主流品种的化学成分差异性进行研究。结果:建立了十大功劳叶HPLC指纹图谱,细叶、长柱、阔叶、小果、宽苞十大功劳叶分别确定了13、17、11、14、10个共有峰,指认了其中8个成分。通过化学模式识别技术可将不同基原的十大功劳叶进行准确区分,各基原样品间化学成分差异明显,并发现7个种间显著差异成分。结论:该研究建立的指纹图谱方法稳定、可靠,能有效区分不同基原的十大功劳叶,可为其质量控制和基原鉴别提供参考。

关键词：十大功劳叶 HPLC 指纹图谱化学模式识别基原种间差异

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灯盏花乙素通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路改善LPS+ATP诱导内皮细胞炎症反应和细胞焦亡

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中国药理学通报 2022年第8期38卷 1196-1201页

作者：杨佳乐沈祥春贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州省特色天然药物资源高效利用工程研究中心贵州贵阳550025

目的探讨灯盏花乙素(scutellarin,Scu)能否对LPS+ATP诱导内皮细胞炎症反应和细胞焦亡发挥改善作用,并初步研究其作用机制。方法用不同浓度Scu预处理原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)1 h后,2.5 mg&#... 详细信息

目的探讨灯盏花乙素(scutellarin,Scu)能否对LPS+ATP诱导内皮细胞炎症反应和细胞焦亡发挥改善作用,并初步研究其作用机制。方法用不同浓度Scu预处理原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)1 h后,2.5 mg·L^(-1) LPS处理5.5 h,再用2.5μmol·L^(-1) ATP活化0.5 h。MTT法检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)法分析细胞毒性损伤,ELISA法测定上清IL-1β、IL-18、HMGB-1含量。WB法检测炎症小体相关蛋白NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1p20和细胞焦亡相关蛋白GSDMD-NT表达。通过Scu和pan-caspase抑制剂Z-YVAD-FMK联用,检测pro-caspase-1、caspase-1p20、GSDMD-NT蛋白表达和上清IL-1β、IL-18、HMGB-1含量的变化,进一步分析Scu对pro-caspase-1活化的抑制作用。结果与LPS+ATP组比较,Scu可浓度依赖性改善LPS+ATP诱导的细胞毒性损伤,增加细胞活性,减少IL-1β、IL-18、HMGB-1的释放,下调NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1、GSDMD-NT蛋白水平,从而有效抑制pro-caspase-1的活化和改善细胞焦亡。Scu对pro-caspase-1活化的抑制作用与Scu/Z-YVAD-FMK联用组比较无明显差异,但明显抑制pro-caspase-1蛋白生成。结论Scu可减少NLRP3炎症小体组成蛋白的生成和抑制pro-caspase-1活化,从而改善LPS+ATP诱导的内皮细胞炎症损伤,并通过降低GSDMD-NT蛋白表达减轻细胞焦亡。

关键词：动脉粥样硬化灯盏花乙素 caspase-1 NLRP3炎症小体细胞焦亡人脐静脉内皮细胞

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高粱根活性流分抗血小板聚集作用机制

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中国药理学通报 2022年第11期38卷 1753-1759页

作者：许婉婷周飞陈发菊彭梅罗忠圣王丽杨克铃杨小生杨娟贵州医科大学药学院贵州贵阳550025 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014

目的研究高粱根活性流分抗血小板聚集的作用机制。方法采用体外实验,考察高粱根水提醇沉上清液经MCI柱层析,30%乙醇洗脱流分(WEAE-M 30%)对胶原蛋白(collagen)、凝血酶(thrombin)、二磷酸腺苷(ADP)等激动剂诱导大鼠血小板聚集作用的影响... 详细信息

目的研究高粱根活性流分抗血小板聚集的作用机制。方法采用体外实验,考察高粱根水提醇沉上清液经MCI柱层析,30%乙醇洗脱流分(WEAE-M 30%)对胶原蛋白(collagen)、凝血酶(thrombin)、二磷酸腺苷(ADP)等激动剂诱导大鼠血小板聚集作用的影响;进一步以Collagen为激动剂,采用Western blot技术、酶联免疫法、流式细胞术、荧光技术探讨WEAE-M 30%抗血小板聚集作用机制。结果WEAE-M 30%对3种激动剂诱导的血小板聚集有明显抑制作用,其中对Collagen诱导的血小板聚集抑制作用最为明显,抑制率可达(72.91±2.42)%。WEAE-M 30%对Collagen介导的血小板GPVI信号通路蛋白Src,MAPK信号通路蛋白p38、ERK的磷酸化水平有明显下调作用;对血小板内颗粒释放物ATP、P-selection、Ca^(2+)水平有明显抑制作用。结论WEAE-M 30%抗血小板聚集作用机制可能与抑制血小板活化通路GPVI、MAPK及血小板典型代表颗粒释放有关。

关键词：高粱根抗血小板聚集胶原蛋白 Western blot技术作用机制血小板内颗粒释放物

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宽叶缬草水提物镇痛作用谱效关系研究

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中国药理学通报 2023年第5期39卷 998-1000页

作者：梁芳瑜何茂秋徐昌艳张环罗忠圣覃容贵贵州医科大学药学院贵州贵阳550025 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550025 省部共建植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014

疼痛是机体组织潜在或实际受损后所产生的不愉快的感觉,属于人体预警机制,而长期疼痛和过度伤害性刺激会造成机体生理功能紊乱,影响人们的正常生活,降低生活质量[1]。宽叶缬草(Valerian radix et rhizoma,VRR)为败酱科缬草属植物宽叶缬... 详细信息

疼痛是机体组织潜在或实际受损后所产生的不愉快的感觉,属于人体预警机制,而长期疼痛和过度伤害性刺激会造成机体生理功能紊乱,影响人们的正常生活,降低生活质量[1]。宽叶缬草(Valerian radix et rhizoma,VRR)为败酱科缬草属植物宽叶缬草Valetiana officinalis *** Miq.的干燥根及根茎,其性辛、苦、温,主治脘腹胀痛、风湿痹痛、腰膝酸软、失眠[2-4],民间治疗疼痛及失眠多以水煎入药主,故将宽叶缬草水提物作为研究对象。

关键词：宽叶缬草镇痛作用热板实验醋酸扭体实验:高效液相色谱 AHP-CRITIC 谱效关系

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