检索结果-内蒙古大学图书馆

陆军军医大学学报 2024年第21期46卷 2369-2382页

作者：孙凤琼张国伟王灵巧徐桂勇郭成威孙燕杨芮张露杨光红周紫垣游明丹贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳561113 陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系环境卫生学教研室重庆400038

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)诱导睾丸间质细胞铁死亡中RNA去甲基化酶脂肪量和肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)的作用及机制。方法40只3周龄C57BL/6雄性小鼠通过随机数字表法分为对照组(玉米油)和3组DEHP染毒组(5、250、500 mg/kg体质量),连续灌胃35 d;TM3小鼠睾丸间质细胞以0、100、200、400μmol/L邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(mono-2-ethylhexyl phthalate,MEHP)处理24 h,质粒转染构建Fto过表达TM3细胞。ELISA检测血清睾酮水平,免疫组化检测睾丸组织中蛋白表达,比色法检测睾丸中Fe 2+、丙二醛和脂质过氧化物水平。甲基化RNA免疫共沉淀、RT-PCR和Western blot检测N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)修饰水平。结果250、500 mg/kg DEHP染毒组小鼠的血清睾酮水平显著降低(P<0.01),睾丸组织Fe 2+、丙二醛、脂质过氧化物水平显著升高(P<0.01),RNA去甲基化酶FTO、铁死亡相关分子铁蛋白重链1(ferritin heavy chain 1,FTH1)和谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)蛋白水平显著下调(P<0.05),转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFRC)、膜铁转运蛋白(ferroportin,FPN)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4)蛋白水平显著上调(P<0.05)。MEHP处理TM3细胞24 h后,细胞活力下降、胞内活性氧(ROS)含量升高,线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)显著降低(P<0.01),Fto的mRNA和蛋白水平均显著下调(P<0.01),其余铁死亡相关蛋白的变化也与睾丸组织中趋势一致,提示睾丸间质细胞发生了铁死亡。以铁死亡抑制剂Fer-1干预或过表达Fto均能显著抑制MEHP诱导的TM3细胞毒性和铁死亡(P<0.05),同时过表达Fto使Gpx4和Fth1 mRNA的m6A修饰水平降低(P<0.05)。结论FTO表达抑制引起Gpx4、Fth1的m6A修饰异常可能是DEHP诱导睾丸间质细胞铁死亡的机制。

关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯铁死亡肥胖相关基因睾丸间质细胞

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Sertoli细胞在围青春期DEHP暴露所致雄性生殖毒性中的作用及机制研究

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陆军军医大学学报 2025年

作者：徐桂勇张露孙凤琼杨芮周紫垣杨光红贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系军队环境卫生学教研室

目的探讨围青春期邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（di-2-ethylhexyl phthalate，DEHP）暴露对成年后雄性小鼠生殖功能损伤的影响和作用机制。方法 180只4周龄雄性C57BL/6J小鼠通过随机数字表法分为玉米油组（对照组）、5 mg/（kg·d... 详细信息

目的探讨围青春期邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（di-2-ethylhexyl phthalate，DEHP）暴露对成年后雄性小鼠生殖功能损伤的影响和作用机制。方法 180只4周龄雄性C57BL/6J小鼠通过随机数字表法分为玉米油组（对照组）、5 mg/（kg·d）DEHP暴露组（低剂量组）、25和125 mg/（kg·d）DEHP暴露组（中剂量组）、250和500 mg/（kg·d）DEHP暴露组（高剂量组），连续灌胃5周，并于14周龄时按雄雌比1:2交配评估DEHP暴露对雄性生殖力的影响；以计算机辅助分析系统检测9周龄和16周龄雄鼠精子质量；ELISA检测血清中激素水平；免疫荧光检测睾丸组织中血睾屏障相关的紧密连接蛋白1（zonula occludens-1，ZO-1）和缝隙连接蛋白43（connexin43，Cx43），以及细胞凋亡相关分子cleaved-Caspase3的蛋白表达；免疫组化检测睾丸组织中Sertoli细胞标志物SOX9蛋白的表达。通过比较毒理基因组学数据库（Comparative Toxicogenomics Database，CTD）筛选并结合GO/KEGG和Reactome富集分析预测可能信号通路。以邻苯二甲酸单（2-乙基己基）酯（mono-2-ethylhexyl phthalate，MEHP）0、50、100、200和400 μmol/L 处理TM4细胞株建立体外暴露模型；检测不同剂量MEHP处理组中TM4细胞活力；采用流式细胞术检测细胞凋亡；通过Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2，及血睾屏障相关蛋白ZO-1和Cx43蛋白的表达水平。结果与对照组相比，500 mg/（kg·d）DEHP暴露组使雌性小鼠的怀孕率从80%降低到52.5%，总产仔数从212只减少到125只。且与对照组相比，9周龄DEHP暴露组小鼠精子密度和活力显著降低，精子总畸形率显著增加（P<0.05），16周龄小鼠的精子活力仍然呈剂量依赖性下降趋势（P<0.05）。中、高剂量DEHP暴露组小鼠曲细精管生精上皮高度显著下降，细胞空泡化增加，上皮萎缩和退化明显。免疫荧光结果显示，与对照组比较，高剂量DEHP暴露组睾丸组织中的细胞凋亡增加，而血睾屏障相关的ZO-1和Cx43蛋白表达减少。血清中雄激素结合蛋白（ABP）、促性腺激素释放激素（GnRH）和睾酮（T）水平呈剂量依赖性降低（P<0.05），而黄体生成素（LH）和血清中促卵泡激素（FSH）的水平均呈剂量依赖性升高（P<0.05）。生物信息学分析，通过CTD分别筛选出与MEHP相关的男性系统疾病基因153个。基于153个基因结合GO富集分析、KEGG通路和Reactome富集分析，凋亡信号通路明显富集（P<0.01）。CCK8结果显示，与对照组相比，MEHP处理组TM4细胞活力呈剂量依赖性降低（P<0.05）；Western blot结果显示，与对照组相比，MEHP处理组中Bcl-2、ZO-1和Cx43蛋白的表达水平明显降低（P<0.05），而Bax蛋白的表达水平明显增加（P<0.05）。结论围青春期DEHP暴露可能通过破坏血睾屏障和激活Sertoli细胞凋亡而导致成年小鼠的精子质量降低及生殖力损伤。

关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯围青春期 Sertoli细胞血睾屏障男性生殖损伤

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白细胞介素6和病毒感染与免疫

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病毒学报 2023年第1期39卷 287-294页

作者：郭美君李昊杜珊珊杨晓艺谢春李建东中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 贵州医科大学公共卫生与健康学院职业卫生与环境卫生学系贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025

白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)是一种多效性细胞因子,对机体免疫系统和非免疫系统的细胞均有较大影响,可发挥促炎或抗炎作用,影响机体生理平衡。病毒感染致病往往包括直接损伤和免疫病理机制,免疫调节是影响疾病进程和临床结果的重... 详细信息

白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)是一种多效性细胞因子,对机体免疫系统和非免疫系统的细胞均有较大影响,可发挥促炎或抗炎作用,影响机体生理平衡。病毒感染致病往往包括直接损伤和免疫病理机制,免疫调节是影响疾病进程和临床结果的重要干预靶点。IL-6拮抗剂的临床应用经验提示,靶向该细胞因子可改善疾病结局,但如何以及何时阻断是仍需进一步研究的重要领域。为增加对IL-6在疾病进程中的作用机制的理解,我们对IL-6主要功能、信号转导途径以及在病毒感染与免疫中的作用进行了初步的综述分析。

关键词：白细胞介素6(IL-6) 白细胞介素受体(IL-6R) 病毒感染免疫

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139名跨境工作人员淋巴脉络丛脑膜炎病毒和汉坦病毒感染调查分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2023年第1期37卷 45-49页

作者：李昊郭美君黄晓霞杜姗姗芜为李阿茜王芹李川刘铁柱田婷婷孙丽娜王世文梁米芳李德新李建东中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、卫生部医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系、贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025

目的调查跨境务工人员经鼠传播淋巴脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus, LCMV )和汉坦病毒(hantavirus, HV)的感染状况, 初步评估鼠传病毒感染风险。方法本研究于2019—2020年间, 针对常年在境外从事户外工程工作的... 详细信息

目的调查跨境务工人员经鼠传播淋巴脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus, LCMV )和汉坦病毒(hantavirus, HV)的感染状况, 初步评估鼠传病毒感染风险。方法本研究于2019—2020年间, 针对常年在境外从事户外工程工作的务工人员开展调查, 采集血清样本, 通过基于LCMV重组核蛋白的间接ELISA方法、免疫印迹法和基于LCMV重组糖蛋白的间接免疫荧光法检测样品血清中LCMV特异性IgG抗体, 采用检测汉坦病毒IgG抗体的商业化ELISA试剂盒和汉坦病毒感染抗原片检测血清中HV IgG抗体情况。结果共调查了139名跨境工作者, 年龄在25~57岁之间, 64%(89/139)有多个国家工作经历, 涉及26个国家, 包括14个亚洲国家和12个非洲国家, LCMV IgG抗体检出率11.51%(16/139), 阳性样本经免疫印迹法和间接免疫荧光法核实, 抗体检出率略高于类似调查中发现的人群感染率;HV抗体检出率0.72%(1/139), 但尚不能确定获得感染的时间和地区。结论本研究揭示了境外务工人员中LCMV和HV病毒感染状况和存在风险, 提示户外工程场所加强鼠传疾病防控的必要性。

关键词：淋巴脉络丛脑膜炎病毒汉坦病毒流动人员动物啮齿类

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《职业卫生与职业医学》课程思政的教学改革

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医学教育研究与实践 2022年第5期30卷 601-605页

作者：王文娟李军曾奇兵王士然游明丹喻馨兰杨光红贵州医科大学公共卫生与健康学院职业卫生与环境卫生学系环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳550025

《职业卫生与职业医学》学科的形成和发展,是人类生存、社会发展和美好生活追求的需要和必然,而课程思政作为立德树人的中心环节,是新形势下高等教育改革的重要内容。本研究遵循《职业卫生与职业医学》的教学要点和课程内容,融入多种思... 详细信息

《职业卫生与职业医学》学科的形成和发展,是人类生存、社会发展和美好生活追求的需要和必然,而课程思政作为立德树人的中心环节,是新形势下高等教育改革的重要内容。本研究遵循《职业卫生与职业医学》的教学要点和课程内容,融入多种思政元素,结合相应的教学设计及案例,旨在构建职业卫生与职业医学课程思政教学新模式,实现全程育人、全方位育人。

关键词：课程思政职业卫生与职业医学教学改革

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线上团体心理干预方式对改善产妇不良情绪的效果研究

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湘南学院学报（医学版） 2023年第2期25卷 24-26页

作者：李玉刘艺王文娟薛玲张梦琪田洪园贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳550025 贵阳市妇幼保健院产科贵州贵阳550004 贵州医科大学公共卫生学院环境与职业卫生教研室贵州贵阳550081 贵阳市南明区妇幼保健院贵州贵阳550002

目的探讨不同心理干预方式对于改善产妇不良情绪的效果,以探索最佳的干预方式。方法以本院住院的产妇42例为研究对象,按住院时间的先后顺序分为3个干预组。第1组10例,采用正念疗法(正念组);第2组12例,采用认知行为疗法(认知组);第3组20... 详细信息

目的探讨不同心理干预方式对于改善产妇不良情绪的效果,以探索最佳的干预方式。方法以本院住院的产妇42例为研究对象,按住院时间的先后顺序分为3个干预组。第1组10例,采用正念疗法(正念组);第2组12例,采用认知行为疗法(认知组);第3组20例,采用精神分析疗法(精神组)。利用爱丁堡产后抑郁量表(EPDS)评价3组产妇干预前后的心理状况,自行设计的社会支持量表评价产妇干预前后的社会支持情况,心理弹性量表(CD-RISC)评价3组干预后的心理弹性。结果干预后3组CD-RISC自评得分比较差异无统计学意义(P>0.05);精神组在干预前后的EPDS评分有统计学意义(P<0.05);干预前后3组社会支持量表自评得分比较差异无统计学意义(P>0.05);3组对于线上干预方式的满意率分别为正念组(100%)、认知组(91.66%)、精神组(95.00%)。结论线上团体干预可作为一种改善产后妇女心理状况的新模式,且产后妇女对于线上团体干预模式有较高的满意率。

关键词：线上心理干预产妇焦虑抑郁效果评价

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双酚S和双酚F对雄性生殖系统损伤信号通路的生物信息学分析及其实验验证

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吉林大学学报(医学版) 2025年第2期51卷 460-470页

作者：石雨李景芝陈洪强周诗梦王娜曹佳尹俐刘文斌重庆理工大学药学与生物工程学院药学系重庆400054 重庆市巴南区疾病预防控制中心传染病防控与免疫规划科重庆401320 陆军军医大学军事预防医学系军队环境卫生学教研室重庆400038 陆军军医大学西南医院乳腺甲状腺外科重庆400038 贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳561113 陆军军医大学军事预防医学系毒理学研究所重庆400038

目的:通过生物信息学方法和实验验证,探讨新型双酚类污染物双酚S(BPS)和双酚F(BPF)诱导男性生殖系统损伤的信号通路。方法:生物信息学分析,从比较毒理基因组学数据库(CTD)筛选出与BPF和BPS相关的男性生殖系统疾病基因,并通过基因本体论(... 详细信息

目的:通过生物信息学方法和实验验证,探讨新型双酚类污染物双酚S(BPS)和双酚F(BPF)诱导男性生殖系统损伤的信号通路。方法:生物信息学分析,从比较毒理基因组学数据库(CTD)筛选出与BPF和BPS相关的男性生殖系统疾病基因,并通过基因本体论(GO)的功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,预测可能的信号通路及关键基因。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测不同浓度(1×10^(-3)、1×10^(-2)、1×10^(-1)、1×10^(0)、1×10^(1)和1×10^(2)μmol·L^(-1))BPS和BPF作用下各组细胞活力;将TM3细胞分为对照组(0.1%DMSO)、不同剂量BPS和不同剂量BPF组,采用20、40和80μmol·L^(-1)BPS及BPF分别处理细胞72 h后,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测各组细胞中关键基因mRNA及蛋白表达水平。结果:生物信息学分析,通过CTD筛选出的分别与BPS及BPF相关的男性系统疾病基因数为507及447个。GO富集分析,筛选出的基因主要富集于生殖系统发育和生殖结构发育等生物过程(BP)。KEGG通路分析,这些基因主要富集于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、缺氧诱导因子1(HIF-1)和细胞衰老等信号通路(P<0.001)中。实验验证,与对照组比较,1×10^(2)μmol·L^(-1)BPF和BPS组细胞活力明显降低(P<0.05),1×10^(-3)~1×10^(1)μmol·L^(-1)BPF和BPS组细胞活力无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。BPS处理后,与对照组比较,低、中和高剂量BPS组细胞中PI3K、AKT、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)及CREB结合蛋白(CBP)mRNA表达水平降低(P<0.05),PI3K蛋白表达水平降低(P<0.05),B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平升高(P<0.05),丝氨酸蛋白酶肽酶抑制因子B支成员10(SERPINB10)mRNA表达水平升高(P<0.01);中和高剂量BPS组细胞中Bax及细胞纤毛内转运同源蛋白80(IFT80)mRNA表达水平升高(P<0.05);低和高剂量BPS组细胞中Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05);低和中剂量BPS组细胞中附加性梳基因2(ASXL2)mRNA表达水平降低(P<0.01)。BPF处理后,与对照组比较,低、中和高剂量BPF组细胞中Bcl-2、HIF-1α及染色体结构维持蛋白质1B(SMC1B)mRNA表达水平降低(P<0.05),IFT80 mRNA表达水平升高(P<0.01),Bax蛋白表达水平升高(P<0.01);低和高剂量BPF组细胞中PI3K、AKT及环指蛋白130(RNF130)mRNA表达水平降低(P<0.05);中剂量组BPF细胞中CBP mRNA表达水平降低(P<0.05),RNF130 mRNA表达水平升高(P<0.05);高剂量BPF组细胞中PI3K和Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:BPF和BPS可通过PI3K/AKT以及HIF-1信号通路产生生殖细胞毒性,损害男性生殖健康,RNF130和SMC1B可能是其诱导生殖毒性的重要靶点。

关键词：双酚S 双酚F 比较毒理基因组学数据库男性生殖损伤睾丸间质细胞

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宫内甲基汞暴露对子代大鼠学习记忆及海马区FOXP2表达的影响

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环境与健康杂志 2020年第7期37卷 585-589页

作者：邓彩云孙宝飞黎健王雪张爱华王文娟贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系

目的探讨宫内暴露甲基汞对子代大鼠神经行为发育、学习记忆及海马区叉头框P2(FOXP2)表达的影响。方法将24只妊娠SD大鼠随机分为对照组(生理盐水)、0.6、1.2、2.4 mg/kg甲基汞染毒组,从受孕当天灌胃染毒至分娩,共染毒21 d;检测母鼠血液... 详细信息

目的探讨宫内暴露甲基汞对子代大鼠神经行为发育、学习记忆及海马区叉头框P2(FOXP2)表达的影响。方法将24只妊娠SD大鼠随机分为对照组(生理盐水)、0.6、1.2、2.4 mg/kg甲基汞染毒组,从受孕当天灌胃染毒至分娩,共染毒21 d;检测母鼠血液、小脑、肾脏等总汞含量;观察仔鼠神经行为发育情况;采用Morris水迷宫、穿梭实验检测仔鼠学习记忆能力;以免疫组化法检测仔鼠海马FOXP2蛋白表达情况。结果各剂量染毒组母鼠各脏器总汞含量均高于对照组,且各脏器总汞含量与血总汞含量呈正相关(P<0.05)。随染毒剂量的增加,仔鼠身长、体重均降低(均P<0.05)。各染毒剂量组仔鼠平面翻正反射时间、负趋地性反射时间均长于对照组。2.4 mg/kg剂量染毒组仔鼠定位航行潜伏期[M(P25~P75):58.10(32.89~101.36)s]长于对照组[M(P25~P75):19.29(11.95~26.19)s],差异有统计学意义(P<0.05);各剂量染毒组穿台时间较对照组延长(均P<0.05),2.4 mg/kg剂量染毒组穿台次数明显少于对照组(P<0.05);与对照组相比,2.4 mg/kg剂量染毒组穿梭实验正确次数降低,错误次数增加(均P<0.05)。免疫组化结果显示,各剂量染毒组海马组织FOXP2蛋白表达组间差异有统计学意义(F=11.24,P<0.05);与对照组相比,1.2、2.4 mg/kg剂量染毒组仔鼠FOXP2蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论宫内甲基汞暴露可抑制仔鼠神经行为发育、学习记忆能力,仔鼠海马组织FOXP2蛋白可能是甲基汞致神经损伤的分子靶点。

关键词：甲基汞宫内暴露大鼠仔鼠神经行为学习记忆 FOXP2

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瑞香狼毒素亚慢性染毒对大鼠胃组织的影响

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贵州医科大学学报 2021年第11期46卷 1283-1288页

作者：李昌哲洪秋月李军杨光红赵华胡婷贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室毒性检测中心贵州贵阳550025 贵州医科大学公共卫生学院贵州贵阳550025 贵州医科大学公共卫生学院环境卫生与职业卫生教研室贵州贵阳550025

目的探讨瑞香狼毒素亚慢染毒对大鼠胃组织的损害作用及可能机制。方法50只SPF级SD大鼠,雌雄各半,随机分为对照组(去离子水灌胃90 d)、(低、中、高)剂量组(分别以31.25、125、500 mg/kg瑞香狼毒素水溶液灌胃90 d)以及恢复组(以500 mg/kg... 详细信息

目的探讨瑞香狼毒素亚慢染毒对大鼠胃组织的损害作用及可能机制。方法50只SPF级SD大鼠,雌雄各半,随机分为对照组(去离子水灌胃90 d)、(低、中、高)剂量组(分别以31.25、125、500 mg/kg瑞香狼毒素水溶液灌胃90 d)以及恢复组(以500 mg/kg染毒剂量灌胃90 d后,自然恢复7d);每周观测大鼠体质量,采用胶乳增强免疫比浊法检测血清胃蛋白酶原(PG)Ⅰ和Ⅱ的含量,采用石蜡切片观察胃组织的病理组织学变化,免疫印迹法测胃组织匀浆缝隙连接蛋白43(CX43)的蛋白表达。结果与对照组相比,中剂量组大鼠血清PGI含量、胃组织匀浆中CX43蛋白表达量降低(P<0.05),高剂量组大鼠体质量、血清PGI和PGII含量、胃组织匀浆中CX43蛋白表达量降低(P<0.05);高剂量组PGI含量、CX43蛋白表达量低于低剂量组(P<0.05);高剂量组大鼠的胃黏膜上皮缺损,有不典型增生,胃腺萎缩和纤维化;与高剂量组相比,恢复组大鼠血清PGI和PGII含量、胃组织匀浆中CX43蛋白表达量以及胃组织病理观察基本无变化。结论瑞香狼毒素较长时期暴露可引起胃组织损伤,这可能与CX43的表达受抑制有关。

关键词：大鼠瑞香狼毒素胃损伤缝隙连接蛋白43 亚慢性染毒胃蛋白酶原

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MiR-96-5p对UMR-106细胞腺苷酸环化酶的靶向调控及生物信息学分析

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毒理学杂志 2020年第1期34卷 56-61页

作者：陈宣好杨璐珲代佑罡吴彦秋王楠兰韦艳贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系贵州贵阳550025 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学系贵州贵阳550025

目的研究miR-96-5p对UMR-106腺苷酸环化酶6(Adenylate Cyclase 6,ADCY6)的靶向调控关系及生物信息学分析。方法通过在线数据库及前期芯片结果对以ADCY6为靶基因的microRNA(miRNA)进行筛选,构建miR-96-5p表达质粒,分别转染质粒及miR-96-5... 详细信息

目的研究miR-96-5p对UMR-106腺苷酸环化酶6(Adenylate Cyclase 6,ADCY6)的靶向调控关系及生物信息学分析。方法通过在线数据库及前期芯片结果对以ADCY6为靶基因的microRNA(miRNA)进行筛选,构建miR-96-5p表达质粒,分别转染质粒及miR-96-5p抑制剂,于大鼠骨肉瘤细胞(UMR-106)中检测miR-96-5p基因变化及ADCY6基因、蛋白变化,并通过双荧光素酶报告确定两者关系;对miR-96-5p靶基因进行预测,再通过David数据库及Cytoscape等软件对数据集进行KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)信号转导通路分析和GO(gene ontology)功能注释,筛选与ADCY6相关的通路和功能注释。结果通过在线数据库及芯片联合分析得出miR-96-5p可能为ADCY6的调控基因;rno-mir-96-5p在各物种间具有较高保守性和一致性;转染miR-96-5p质粒后UMR-106细胞中miR-96-5p mRNA表达水平较空载组升高(P<0.05),ADCY6 mRNA表达水平未见明显变化(P>0.05),ADCY6蛋白表达水平较空载组下降(P<0.05);转染抑制剂后miR-96-5p表达水平较抑制剂对照组下降(P<0.05),ADCY6 mRNA表达水平无明显变化(P>0.05),ADCY6蛋白表达水平较抑制剂对照组表达升高(P<0.05);与ADCY6野生型对照组比较,ADCY6野生型miR-96-5p组海肾/荧光比值降低(P<0.05),与ADCY6突变型对照组相比,ADCY6突变型miR-96-5p组海肾/荧光比值未观察到明显变化;miR-96-5p可能通过ADCY6参与催产素、促性腺激素释放激素(GnRH)等7条信号通路,主要发挥蛋白结合、胞内信号转导等多个生理学功能。结论ADCY6是miR-96-5p靶基因。Rno-mir-96-5p可能通过ADCY6参与调控催产素等信号通路和发挥蛋白结合等功能。

关键词： microRNA-96-5p 腺苷酸环化酶双荧光素酶报告生物信息学

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