检索结果-内蒙古大学图书馆

Flexal和Whitewater Arroyo两种高致病沙粒病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立

病毒学报 2020年第2期36卷 230-235页

作者：赖丽金李阿茜张全福孙丽娜杜珊珊李川芜为王芹梁米芳李德新韦艳李建东贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

Flexal病毒(Flexal virus,FLEV)和Whitewater Arroyo病毒(Whitewater Arroyo virus,WWAV)属沙粒病毒,经鼠传播,可引起人类严重传染病,主要分布于美洲,有因野外工程而感染或国际物流和人员往来而输入的风险。本研究通过检索、分析FLEV和W... 详细信息

Flexal病毒(Flexal virus,FLEV)和Whitewater Arroyo病毒(Whitewater Arroyo virus,WWAV)属沙粒病毒,经鼠传播,可引起人类严重传染病,主要分布于美洲,有因野外工程而感染或国际物流和人员往来而输入的风险。本研究通过检索、分析FLEV和WWAV基因组序列,参照同科属病毒遗传进化特征,确定病毒基因组保守区,筛选分子检测靶基因,设计PCR扩增引物和检测探针,建立两种沙粒病毒的实时荧光RT-PCR检测方法,并进行灵敏性、特异性和重复性初步评价。结果表明,所建立的FLEV和WWAV检测方法与其他病毒无交叉反应,扩增效率大于95%,检出限分别为100copies/μL和20copies/μL,变异系数在2%以内。上述结果显示,本研究所建立的FLEV和WWAV检测方法的特异性强,灵敏性与重复性均处于常规病毒性传染病分子诊断可接受范围,可应用于疑似病例的快速检测和相关病原的筛查和流行病学调查。

关键词：沙粒病毒 Flexal病毒(FLEV) Whitewater Arroyo病毒(WWAV) 实时荧光RT-PCR

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氟化钠染毒致大鼠骨组织形态计量学及微小RNA-23a表达的变化

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环境与职业医学 2019年第3期36卷 254-260页

作者：代佑罡韦艳陈宣好祁忠达张华贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳550004

[目的]探讨氟化钠染毒致大鼠骨组织形态计量学变化及对微小RNA(miR NA)-23a表达的影响。[方法 ]将96只SD大鼠按体重随机分为对照组(0 mg/L)、低氟组(50 mg/L)、中氟组(150 mg/L)、高氟组(250 mg/L)。采取饮水染毒方式,染氟至2、4、6个... 详细信息

[目的]探讨氟化钠染毒致大鼠骨组织形态计量学变化及对微小RNA(miR NA)-23a表达的影响。[方法 ]将96只SD大鼠按体重随机分为对照组(0 mg/L)、低氟组(50 mg/L)、中氟组(150 mg/L)、高氟组(250 mg/L)。采取饮水染毒方式,染氟至2、4、6个月时分别处死每组8只SD大鼠,收集大鼠左下肢及牙齿,采用灰化-氟离子电极法测定大鼠骨氟、牙氟含量;取大鼠股骨干骺端固定后脱钙,进行苏木精-伊红染色,光镜观察骨组织骨小梁、骺板、成骨细胞的形态学改变;取左前肢,剔除多余结缔组织,用液氮反复研磨成骨粉,使用RNAiso Plus提取骨粉总RNA,采用实时荧光定量PCR法测定miRNA-23a基因表达水平。[结果 ]除2个月时的低氟组外,不同时间各染毒组大鼠氟斑牙检出率均高于对照组(P <0.05)。随染毒时间的延长,各染氟组大鼠骨氟、牙氟含量呈上升的趋势。不同时期中氟组、高氟组大鼠骨小梁和各剂量组骺板面积均大于对照组(P <0.05),低氟组骨小梁面积均低于对照组(P <0.05)。随着染氟剂量的增加,骨小梁和骺板面积呈上升趋势;在2、4、6个月时各剂量组间差异有统计学意义(P <0.01)。各时期染氟大鼠成骨细胞数量均低于对照组(P <0.05),且随着剂量升高呈下降趋势。随着染毒时间的延长,各染氟组骨小梁、骺板面积以及成骨细胞数量均呈下降趋势。染氟2、4、6个月时,各染氟组大鼠miRNA-23a表达量均高于对照组(P <0.05);染氟6个月时,各染氟组大鼠miRNA-23a表达量均较2个月和4个月时升高,呈上升趋势。[结论 ]过量、长期的氟摄入会影响骨的形成和发育,推测miRNA-23a参与了氟中毒致大鼠体内骨转换异常的过程,提示miRNA-23a与氟致全身性危害具有潜在的关联性,但其参与机制尚未明确,有待进一步研究。

关键词：氟化钠氟中毒骨形态计量学 miRNA-23a

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基于TMT质谱分析技术筛选水稻根尖响应汞胁迫差异表达蛋白

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生态学杂志 2019年第6期38卷 1792-1799页

作者：祁忠达韦艳龙水庭代佑罡仇广乐贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系贵阳550000 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550000 中国科学院地球化学研究所环境地球化学国家重点实验室贵阳550081

稻米是人群汞暴露的最主要途径之一,为了从蛋白质水平上揭示水稻(Oryza sativa L.)适应重金属汞胁迫的分子机制,本研究以拔节期金优431水稻品种为材料,对比分析对照组和50、150、300 mg·kg-1氯化汞胁迫组,采用同位素相对标记与绝... 详细信息

稻米是人群汞暴露的最主要途径之一,为了从蛋白质水平上揭示水稻(Oryza sativa L.)适应重金属汞胁迫的分子机制,本研究以拔节期金优431水稻品种为材料,对比分析对照组和50、150、300 mg·kg-1氯化汞胁迫组,采用同位素相对标记与绝对定量TMT(Tandem Mass Tag)技术,结合定量蛋白质组平行反应监测(parallel reaction monitoring,PRM)技术,鉴定水稻根尖部位响应汞胁迫差异表达蛋白,对所获得差异蛋白进行生物信息学分析,从而筛选出汞胁迫响应显著的潜在靶标蛋白。同时,选择20个差异表达蛋白通过平行反应监测试验进行了蛋白验证。结果表明,在变化倍数≥1.3、P<0.05条件下,共鉴定5253种定量蛋白,包含364种差异蛋白,其中258种表达上调,106种表达下调。基因本体分子功能提示,这些差异性蛋白主要参与催化活性、绑定转运活性和抗氧化活性。京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路显著性富集于代谢途径、次生代谢产物生物合成、苯丙烷类生物合成等,错误发现率(false discovery rate,FDR)<0.05。成功鉴定并验证到的差异蛋白分别涉及抗氧化还原蛋白、金属螯合肽合成蛋白、金属硫蛋白相关蛋白等。差异表达蛋白中,与抗氧化、重金属胁迫防御响应和信号通路等相关的蛋白总体上调,而与代谢和能量产生与转运相关蛋白表达量总体下调。

关键词：水稻蛋白组学 TMT PRM 汞胁迫

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寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒三重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

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中华实验和临床病毒学杂志 2019年第6期33卷 632-636页

作者：赖丽金李阿茜张全福孙丽娜李川芜为王芹梁米芳李德新韦艳李建东贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

目的建立一种可以同时鉴别寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒的检测方法。方法通过全球共享数据库中检索下载寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒全基因组序列进行比对分析,估计其保守区,确定靶基因位置,针对这3种病毒分别设计特异... 详细信息

目的建立一种可以同时鉴别寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒的检测方法。方法通过全球共享数据库中检索下载寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒全基因组序列进行比对分析,估计其保守区,确定靶基因位置,针对这3种病毒分别设计特异性引物和探针,建立三重实时荧光定量RT-PCR检测方法,对方法的特异性、灵敏性和重复性进行评估。结果所建立实时荧光定量RT-PCR检测方法可检出寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒模拟样本,最低检出限分别为寨卡病16.22拷贝/PCR,基孔肯雅病毒12.02拷贝/PCR,马雅罗病毒体外转录RNA为2.82拷贝/PCR,三重组合检测与3种病毒分别单重检测,灵敏度无明显差别。与登革病毒、汉坦病毒、SFTS病毒、黄热病毒和流感病毒等无交叉反应,检测100份健康人体检血清样本未见非特异性反应,特异性为100%。重复性结果显示,通过选取高、中、低3个不同浓度梯度的病毒核酸或体外转录RNA,3种病毒的标准差均控制在0.5以内,变异系数在2%以下。结论建立了寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒的三重实时荧光定量RT-PCR检测方法,该方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。

关键词：寨卡病毒基孔肯雅病毒马雅罗病毒 RT-PCR

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拉沙病毒分子流行病学特征和跨境传播风险

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病毒学报 2019年第1期35卷 158-167页

作者：殷强玲赖丽金李建东中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025

拉沙热主要流行于西非,经鼠传播,人群普遍易感,病死率高,暴发疫情频发,跨境传播时有发生。拉沙病毒易于传播,病毒分离、培养需在生物安全四级实验室(BSL-4)。2018年,世界卫生组织将其列为年度重点关注传染病,需加快研制防治关键技术手... 详细信息

拉沙热主要流行于西非,经鼠传播,人群普遍易感,病死率高,暴发疫情频发,跨境传播时有发生。拉沙病毒易于传播,病毒分离、培养需在生物安全四级实验室(BSL-4)。2018年,世界卫生组织将其列为年度重点关注传染病,需加快研制防治关键技术手段。随着中非关系的日益紧密,贸易往来频繁,中国面临拉沙热的威胁显著增加。本文检索20世纪50年代首例拉沙热病例报道以来公开发表的主要文献,归纳拉沙热临床表现、病原学特征、流行病学特征、实验室检测以及跨境传播风险等,并对GenBank发布的全部287条拉沙病毒S基因编码区全长序列进行复核分析,以加强人们对拉沙热的了解,提高防控意识。

关键词：拉沙病毒拉沙热流行病学特征遗传进化传播途径跨境传播西非

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燃煤电厂周边河流中氟、砷和重金属污染健康风险评价

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环境监测管理与技术 2019年第4期31卷 33-37页

作者：潘莎陈再琴汪钊宇刘龙韦艳谢春张华贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系贵州贵阳550004 环境污染与疾病监控教育部重点实验室(贵州医科大学) 贵州贵阳550004 贵州医科大学食品安全学院贵州贵阳550004

通过在某燃煤电厂周边河流中布设15个采样点,监测其中氟(F)、砷(As)和重金属的含量,并评价其通过饮水和皮肤接触途径对不同人群所产生的健康风险。结果表明:河流中F、As、Cd、Cr监测值均未超过《地表水环境质量标准》(GB3838—2002)Ⅲ... 详细信息

通过在某燃煤电厂周边河流中布设15个采样点,监测其中氟(F)、砷(As)和重金属的含量,并评价其通过饮水和皮肤接触途径对不同人群所产生的健康风险。结果表明:河流中F、As、Cd、Cr监测值均未超过《地表水环境质量标准》(GB3838—2002)Ⅲ类标准限值,Hg严重超标;河流中污染物所致儿童和成人健康危害的总风险分别为2.62×10^-5a^-1和1.76×10^-5a^-1,均高于瑞典环保局、荷兰建设和环境部推荐的最大可接受风险水平1.0×10^-6a^-1,其中As、Cr对儿童的健康危害风险较大,分别为1.69×10^-5a^-1和9.21×10^-6a^-1,应作为风险决策管理的重点。

关键词：氟砷重金属燃煤电厂河流健康风险评价

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燃煤型氟中毒地区居民骨吸收标志的变化规律

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环境与职业医学 2018年第7期35卷 613-618页

作者：代佑罡吴彦秋陈宣好韦艳杨瑶祁忠达张华贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳550004

[目的]观察氟中毒地区居民骨吸收标志——血清Ⅰ型胶原交联氨基末端肽(NTx)以及抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)的变化情况,为成人氟中毒骨损害机制研究提供资料基础。[方法]以贵州省六盘水市常年敞灶燃用高氟煤的陡箐乡为氟污染区,习... 详细信息

[目的]观察氟中毒地区居民骨吸收标志——血清Ⅰ型胶原交联氨基末端肽(NTx)以及抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)的变化情况,为成人氟中毒骨损害机制研究提供资料基础。[方法]以贵州省六盘水市常年敞灶燃用高氟煤的陡箐乡为氟污染区,习惯常年烧柴的花嘎乡为对照区,遵循知情同意原则,对污染区102名居民和对照区45名居民进行氟斑牙、尿氟浓度及血清NTx和TRACP-5b浓度检测,并计算氟斑牙指数。[结果]污染区居民氟斑牙检出率为79.4%,尿氟浓度为1.59(1.22~2.50)mg/L,均高于对照区[8.8%,0.65(0.42~1.04)mg/L](χ2=69.669,Z=-6.024,均P<0.001)。污染区氟斑牙指数为2.42,为较显著流行;对照区氟斑牙指数为0.23,为阴性。污染区居民血清NTx浓度为12.34(10.93~13.96)nmol/L,高于对照区的9.21(7.86~12.91)nmol/L(Z=4.062,P=0.000);TRACP-5b浓度为207.87(187.23~251.52)ng/L,低于对照区的237.36(207.47~305.95)ng/L(Z=2.938,P=0.003)。污染区青年组(18岁~)、老年组(60岁~)居民血清NTx浓度均高于对照区(均P<0.001);中年组(45岁~)居民血清TRACP-5b浓度为209.86(187.40~276.05)ng/L,低于对照区的254.07(226.81~305.07)ng/L(Z=2.268,P=0.023)。污染居民血清NTx与血清TRACP-5b浓度呈正相关(r=0.544,P=0.001);污染区居民年龄与氟斑牙程度呈正相关(r=0.242,P=0.014);血清NTx、TRACP-5b浓度与氟斑牙程度无相关性(r=0.065,P=0.516;r=0.009,P=0.932),与年龄亦无相关性(r=0.010,P=0.918;r=-0.043,P=0.670)。[结论]氟摄入过量可引起成人血清NTx升高、血清TRACP-5b下降,且血清NTx浓度和TRACP-5b浓度变化趋势存在一定联系,两者浓度变化与氟中毒的关系有待进一步验证。

关键词：燃煤型氟中毒成人 Ⅰ型胶原交联氨基末端肽抗酒石酸酸性磷酸酶

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贵州地区吸毒人群HIV、梅毒、HBV、HCV、肺结核感染现状调查

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中国药物依赖性杂志 2019年第5期28卷 390-395页

作者：王梓琪肖思曲程雨李曦罗鹏吴敬杰贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025 贵州警察学院司法鉴定中心贵阳550005

目的:了解贵州地区吸毒人群HIV、梅毒、HBV、HCV和肺结核的感染现状和流行趋势,为制定传染病防控策略提供依据。方法:对贵州省内8个戒毒所实地调查,收集2016-2017年吸毒人群传染病监测报表,对报表数据进行整理,采用WPS Office、SPSS 22... 详细信息

目的:了解贵州地区吸毒人群HIV、梅毒、HBV、HCV和肺结核的感染现状和流行趋势,为制定传染病防控策略提供依据。方法:对贵州省内8个戒毒所实地调查,收集2016-2017年吸毒人群传染病监测报表,对报表数据进行整理,采用WPS Office、SPSS 22. 0分析。结果:监测贵州地区吸毒人员18 106人,HIV、梅毒、HBV、HCV的感染率分别为0. 19%、4. 14%、4. 34%、23. 36%;肺结核患病率0. 34%。结论:吸毒人员的梅毒感染水平稍高,HIV、HBV、HCV、肺结核处在低水平流行阶段,控制总体良好。应继续重视开展健康专题宣传并加强防控工作,避免传染病从吸毒人群向一般人群播散和流行,以减轻社会和医疗负担。

关键词：吸毒传染病肺结核感染现状

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持续铝暴露对子二代大鼠海马结构以及空间学习记忆的影响

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环境与健康杂志 2018年第8期35卷 702-706,F0003页

作者：谭瑛罗雨葛启迪张华谢春贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系贵州贵阳550025 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室

目的探讨持续铝暴露对子二代大鼠海马神经元结构以及空间学习记忆的影响。方法将12只健康清洁级SD妊娠大鼠随机分为3组,分别为对照(自来水)组和600、1 000 mg/L氯化铝染毒组,每组4只。采取自由饮水方式进行染毒。母鼠从妊娠第0天至子一... 详细信息

目的探讨持续铝暴露对子二代大鼠海马神经元结构以及空间学习记忆的影响。方法将12只健康清洁级SD妊娠大鼠随机分为3组,分别为对照(自来水)组和600、1 000 mg/L氯化铝染毒组,每组4只。采取自由饮水方式进行染毒。母鼠从妊娠第0天至子一代大鼠出生第21天(postnatal day 21,PND21)染毒;子一代大鼠按照同组剂量继续染毒至PND90后,按照随机数字表每组随机选取6只(雌∶雄=2∶1)合笼,自子一代大鼠其PND22(断乳后)至子二代大鼠PND21继续染毒;从每窝中随机选取1只雌性和1只雄性子二代大鼠,每组由8只子二代大鼠组成(雌雄各半),子二代大鼠自PND22～PND60继续按照同组剂量进行染毒。采用Morris水迷宫测试子二代大鼠空间学习记忆能力;子二代大鼠处死前收集24 h尿液,测定血清、脑、尿中的铝水平。结果与对照组比较,各浓度氯化铝染毒组不同性别子二代的脑铝、尿铝、血清铝水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,训练第3、4天时各浓度氯化铝染毒组不同性别子二代大鼠的逃避潜伏期延长,差异均有统计学意义(P<0.05);而训练第1、2天时的逃避潜伏期仅略有延长。与对照组比较,各浓度氯化铝染毒组不同性别子二代大鼠的首次达台时间延长,而1 000 mg/L氯化铝染毒组不同性别子二代大鼠的穿越平台次数减少,除600 mg/L氯化铝染毒组子二代雄性大鼠首次达台时间外,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着氯化铝染毒浓度的升高,不同性别子二代大鼠的首次达台时间呈延长趋势,而穿越平台次数呈减少趋势。结论持续铝暴露可损伤子二代大鼠海马神经元结构以及降低空间学习记忆能力。

关键词：铝海马学习和记忆子二代大鼠

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妊娠期至成年期氟铝联合暴露对子代大鼠骨组织中miR-21及其血清中抗酒石酸酸性磷酸酶-5b水平的影响

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环境与健康杂志 2018年第7期35卷 569-574页

作者：韦山禄葛启迪曾智东张华谢春贵州医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系贵州贵阳550025 贵州医科大学教育部环境污染与疾病监控重点实验室

目的了解妊娠期至成年期氟铝联合暴露对子代大鼠骨组织中miR-21及血清中抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)的影响。方法将36只健康成年清洁级SD孕鼠随机分为9组,分别为对照(自来水)组和氟化钠(60、240mg/L)、氯化铝(600、1 000 mg/L)染... 详细信息

目的了解妊娠期至成年期氟铝联合暴露对子代大鼠骨组织中miR-21及血清中抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)的影响。方法将36只健康成年清洁级SD孕鼠随机分为9组,分别为对照(自来水)组和氟化钠(60、240mg/L)、氯化铝(600、1 000 mg/L)染毒组及氟化钠+氯化铝联合染毒组,每组4只。采用自由饮水方式染毒,母鼠染毒从妊娠第0天至子代大鼠出生第21天(断乳);断乳后从每组随机选取8只子代大鼠(雌雄各半)延续同组剂量染毒至出生后第90天。采用氟离子选择电极法测定尿氟、骨氟,采用石墨炉原子吸收光谱法测定尿、骨中铝含量,采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测骨组织中miR-21的表达水平。采用固相夹心ELISA法检测血清中抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)的含量。结果与对照组比较,除单独氯化铝染毒组和60 mg/L NaF+1 000 mg/L氯化铝染毒组外,其余染毒组仔鼠的尿氟浓度均升高(P<0.05);除单独NaF染毒组和240 mg/L NaF+600 mg/L氯化铝染毒组外,其余染毒组仔鼠的尿铝浓度均升高(P<0.05);除单独氯化铝染毒组和60 mg/L NaF+1 000 mg/L氯化铝染毒组外,其余染毒组仔鼠骨氟含量均升高;单独氯化铝染毒组和240 mg/L NaF+1 000 mg/L氯化铝染毒组仔鼠的骨铝含量均升高(P<0.05)。尿氟浓度在各浓度NaF+氯化铝联合染毒组中均表现为拮抗作用(P<0.05);尿铝浓度在60 mg/L NaF+1 000 mg/L氯化铝联合染毒组中均表现为协同作用,在其余各浓度NaF+氯化铝联合染毒组中均表现为拮抗作用(P<0.05);骨氟含量在各浓度NaF+氯化铝联合染毒组中均表现为拮抗作用(P<0.05);骨铝含量在各浓度NaF+氯化铝联合染毒组中未见交互作用(P>0.05)。与对照组比较,240 mg/L NaF染毒组和60 mg/L NaF+1 000 mg/L氯化铝染毒组、240 mg/L NaF+1 000 mg/L氯化铝染毒组仔鼠血清中TRACP-5b的水平均降低(P<0.05);60 mg/L NaF染毒组、1 000 mg/L氯化铝染毒组和60 mg/L NaF+600 mg/L氯化铝染毒组、240 mg/L NaF+600 mg/L氯化铝染毒组仔鼠骨组织中miR-21的表达水平均升高(P<0.05)。氟铝联合染毒对血清中TRACP-5b水平的影响表现为拮抗作用。氟铝联合染毒对不同性别仔鼠骨组织中miR-21表达的影响均存在交互作用(P<0.05);对不同性别仔鼠骨组织中miR-21表达的影响在60 mg/L NaF+600 mg/L氯化铝染毒组、240mg/L NaF+600 mg/L氯化铝染毒组中均表现为协同作用(P<0.05),在其余联合染毒组中表现为拮抗作用(P<0.05)。结论氟铝联合暴露可能通过升高骨组织中miR-21表达和降低血清中TRACP-5b水平,从而促进妊娠期至子代大鼠成年前仔鼠骨组织中破骨细胞的活性。

关键词：氟铝 miR-21 抗酒石酸酸性磷酸酶-5b 骨组织妊娠成年期

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