检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2015年第10期31卷 855-859页

作者：张洁李显航刘红美贵州医科大学医学生物技术教研室贵阳550025

目的对家蝇小热休克蛋白Hsp20.6基因进行原核表达,并研究高温胁迫下该基因在家蝇各生长发育阶段及成虫不同部位的表达变化情况,为最终阐明其生物学功能奠定基础。方法利用p ET28a(+)原核表达载体构建家蝇Hsp20.6基因的重组表达载体,酶... 详细信息

目的对家蝇小热休克蛋白Hsp20.6基因进行原核表达,并研究高温胁迫下该基因在家蝇各生长发育阶段及成虫不同部位的表达变化情况,为最终阐明其生物学功能奠定基础。方法利用p ET28a(+)原核表达载体构建家蝇Hsp20.6基因的重组表达载体,酶切、测序鉴定后,诱导蛋白的表达。采用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR研究Hsp20.6在家蝇卵、3日龄幼虫、蛹、成虫4个生长发育阶段及成虫头部、胸部、腹部的表达情况。结果成功构建p ET28a(+)-Hsp20.6重组表达载体,IPTG诱导表达产物大小约为Mr21 000,与生物信息学预测结果相符。RT-PCR与实时荧光定量PCR表明Hsp20.6基因在家蝇各个发育时期和成虫各部位有不同程度的表达,热激能上调该基因的表达(P<0.05),以幼虫和成虫头部组织上调量最高。结论 Hsp20.6基因属于热诱导型基因,参与了家蝇适应热胁迫的调控,可能在其中具有某种重要功能。

关键词：家蝇小热休克蛋白原核表达热激表达分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

贵州半夏块茎腐烂病拮抗细菌的筛选与鉴定

引用

微生物学通报 2017年第2期44卷 438-448页

作者：祝学海李玉权陶小买任建国周静刘红美贵州医科大学生物与工程学院医学生物技术教研室贵州贵阳550004

【目的】从半夏根际土壤筛选对半夏块茎腐烂病致病菌有拮抗活性的细菌并进行鉴定。【方法】采用稀释分离法和平板对峙法分离拮抗菌,然后根据菌落形态、生理生化特性,结合分子生物学方法进行鉴定。【结果】从半夏根际土壤共分离到228株细... 详细信息

【目的】从半夏根际土壤筛选对半夏块茎腐烂病致病菌有拮抗活性的细菌并进行鉴定。【方法】采用稀释分离法和平板对峙法分离拮抗菌,然后根据菌落形态、生理生化特性,结合分子生物学方法进行鉴定。【结果】从半夏根际土壤共分离到228株细菌,其中菌株GZDF2、GZDF3、GZDF4对病原细菌及病原真菌均有拮抗活性,抑菌圈大小达23 mm,并且抑菌谱广。经形态学观察、生理生化特性分析和分子生物学方法,将菌株GZDF2、GZDF3、GZDF4鉴定为短短芽胞杆菌(Brevibacillus brevis)。进一步采用gyr B和rpo B基因对3株短短芽胞杆菌进行聚类分析,结果显示GZDF3菌株与其他2株短短芽胞杆菌存在遗传差异。【结论】半夏根际土壤中分离到的3株短短芽胞杆菌抑菌活性强、抑菌谱广,具有开发成生防剂的潜力。

关键词：半夏块茎腐烂病拮抗菌 16S rRNA基因 gyrB基因生防剂

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

家蝇Phormicin蛋白表达及对白色念珠菌的抑菌活性分析

引用

基因组学与应用生物学 2021年第4期40卷 1553-1560页

作者：王兵杜兵韦鹏威黄伟康李道远万珊朱贵明贵州医科大学生物与医学工程重点实验室贵阳550025 贵州医科大学医药生物技术工程研究中心贵阳550025 贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵阳550025 贵州医科大学第一附属医院贵阳550025 贵州医科大学生物与工程学院化学生物学教研室贵阳550025

防御素是一类具有广普抗菌活性的阳离子抗菌肽,而家蝇(Musca domestica)的Phormicin属于防御素超家族。白色念珠菌(Candida albicans)是临床上常见的引起人体感染的条件致病真菌。随着免疫缺陷病、糖尿病等疾病发生率的增加,在病人体内... 详细信息

防御素是一类具有广普抗菌活性的阳离子抗菌肽,而家蝇(Musca domestica)的Phormicin属于防御素超家族。白色念珠菌(Candida albicans)是临床上常见的引起人体感染的条件致病真菌。随着免疫缺陷病、糖尿病等疾病发生率的增加,在病人体内植入设备的白色念珠菌残留及附带感染日益成为临床感染的常见类型。本研究制备了家蝇Phormicin A、Phormicin B的原核表达蛋白,将其作用于白色念珠菌。微量液体稀释法测定了其最小抑菌浓度为2.5mmol/L和1.875mmol/L。进一步绘制了其对白色念珠菌的时间杀菌曲线。结果显示,二者对白色念珠菌都具有一定的抑菌效果。本研究为进一步探索Phormicin参与家蝇天然免疫和揭示家蝇抗真菌防御中的机制提供理论参考,为开发多肽类抗真菌药物提供线索。

关键词： Phormicin 抗菌肽阳离子肽家蝇

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

未成熟树突状细胞与成熟树突状细胞的细胞骨架调控相关基因表达的差异分析

引用

基因组学与应用生物学 2018年第7期37卷 3252-3261页

作者：蒙富雪董蓉吴翠芳谭诚胡祖权刘丽娜邱伟王赟周静吴宁曾柱贵州医科大学生物与医学工程重点实验室贵阳550025 贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵阳550025 贵州医科大学基础医学院生物化学教研室贵阳550052

分析未成熟树突状细胞（immature dendritic cells,im DCs）向成熟的树突状细胞（mature dendritic cells,m DCs）分化的过程中,细胞骨架的调控相关基因及信号通路的表达变化,为进一步理解不同分化阶段树突状细胞（dendritic cells,DCs... 详细信息

分析未成熟树突状细胞（immature dendritic cells,im DCs）向成熟的树突状细胞（mature dendritic cells,m DCs）分化的过程中,细胞骨架的调控相关基因及信号通路的表达变化,为进一步理解不同分化阶段树突状细胞（dendritic cells,DCs）的生物物理学特性、迁移能力和免疫学相关功能的改变。利用CEO数据库获得经CD14^＋单核细胞（monocytos,monos）诱导而成的im DCs和m DCs的m RNA的表达数据（芯片编号：GSE15076）,通过R语言软件对原始数据进行处理,筛选差异表达基因（Log｜FC｜≥2,p〈0.05）,利用STRING online-工具对差异表达基因进一步筛选（可信度≥0.4）;Cytoscape软件构建蛋白质相互作用网络图（protein-protein interaction network,PPI）,通过Cluster ONE对筛选后的差异表达基因进行聚类分析,筛选功能相关性密切的差异表达基因,并利用DAVID在线分析进一步进行GO分析和KEGG信号通路分析。m DCs相对于im DCs差异表达的基因共3 351个,上调基因1 801个,下调基因1 550个,其中C-C趋化因子受体活性、G-蛋白偶联的嘌呤核苷酸受体活性和异源三聚体G蛋白复合物等与细胞骨架调控密切相关。主要涉及的信号通路包括趋化因子/趋化因子受体信号通路、Rap1信号通路、Jak-STAT信号通路和PI3K-Akt信号通路等,其中的相关基因与细胞骨架的调控关系密切。这对进一步深入理解DCs的生物物理学特性、迁移能力和免疫学功能有一定的帮助。

关键词：未成熟树突状细胞成熟树突状细胞细胞骨架生物信息学基因芯片分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

原核表达家蝇Phormicin蛋白对金黄色葡萄球菌的抑菌活性分析

引用

基因组学与应用生物学 2020年第12期39卷 5533-5539页

作者：王兵杜兵韦鹏威黄伟康姚杨伍仕梅万珊朱贵明吴建伟贵州医科大学贵州医科大学生物与医学工程重点实验室贵阳550025 贵州医科大学医药生物技术工程研究中心资源昆虫研究室贵阳550025 贵州医科大学生物技术教研室贵阳550025 贵州医科大学第一附属医院微生物免疫科贵阳550025 贵州医科大学基础医学院病原生物学教研室贵阳550025

家蝇Phormicin是一类具有广普抗菌活性的抗菌肽,属于防御素家族。本研究采用原核表达法纯化并获得家蝇Phormicin A、Phormicin B蛋白,将其作用于金黄色葡萄球菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为0.625 mmol/L和0.469 m... 详细信息

家蝇Phormicin是一类具有广普抗菌活性的抗菌肽,属于防御素家族。本研究采用原核表达法纯化并获得家蝇Phormicin A、Phormicin B蛋白,将其作用于金黄色葡萄球菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为0.625 mmol/L和0.469 mmol/L。进一步绘制了二者对金黄色葡萄球菌的时间杀菌曲线,并利用牛津杯法进一步验证了二者的抗菌效果。结果显示,二者对金黄色葡萄球菌都具有一定的抑菌效果。本研究为进一步探索Phormicin在家蝇天然免疫和防御中的机制提供理论参考。

关键词： Phormicin 抗菌肽家蝇

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

白纹伊蚊唾液蛋白Alb-AG5-3的基因特征分析及真核表达

引用

中国病原生物学杂志 2023年第9期18卷 1039-1046页

作者：高敏吴家红程金芝张霞牟小会聂映彭哲慧李志强赵久刚商正玲刘磊蓝静刘红美贵州医科大学生物与工程学院/健康医药现代产业学院生物技术教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室贵州医科大学基础医学院免疫学教研室

目的初探白纹伊蚊唾液蛋白Antigen5-3(Alb-AG5-3)的结构与功能特征,并采用果蝇S2真核表达体系表达Alb-AG5-3。方法采取同源比对的方式,从NCBI数据库中钓取Antigen5-3序列,根据白纹伊蚊分泌蛋白Antigen5-3基因参考序列(GenBank:AY82610... 详细信息

目的初探白纹伊蚊唾液蛋白Antigen5-3(Alb-AG5-3)的结构与功能特征,并采用果蝇S2真核表达体系表达Alb-AG5-3。方法采取同源比对的方式,从NCBI数据库中钓取Antigen5-3序列,根据白纹伊蚊分泌蛋白Antigen5-3基因参考序列(GenBank:AY826105.1)设计特异性引物,从白纹伊蚊安顺株中扩增基因全长。经序列比对后利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(Expasy)以及生物信息学在线软件SignalP、TMHMM、SOPMA、SWISS-MODEL、AlphaFold等对该蛋白进行生物信息学分析。Trizol法提取白纹伊蚊雌蚊与雄蚊整蚊以及吸血前后雌蚊唾液腺RNA,qRT-PCR检测Alb-AG5-3在RNA相对表达量;以白纹伊蚊整蚊cDNA为模板,特异性扩增除信号肽外的Alb-AG5-3编码区,PCR产物经切胶回收纯化后与昆虫真核表达载体pMT/BiP/V5连接,构建真核重组质粒pMT/BiP/V5-Alb-AG5-3。随后转入果蝇S2细胞中,500μmol/L CuSO4诱导重组蛋白Alb-AG5-3的表达。收集上清,采用Western blot鉴定V5表达标签,镍柱亲和层析纯化重组蛋白Alb-AG5-3。结果生物信息学分析该基因CDS(Coding sequence)区扩增全长为768 bp,编码255个氨基酸,二、三级结构预测以无规则卷曲和a-螺旋为主,具CAP超家族经典的PR-1结构域,该基因编码的蛋白是一种强亲水性(GRAVY:-0.864)的富含半胱氨酸的分泌蛋白。Alb-AG5-3 mRNA在雌蚊中表达量高于雄蚊且吸血后的表达量显著下调。成功构建了白纹伊蚊唾液蛋白pMT/BiP/V5-Alb-AG5-3真核表达质粒并通过果蝇S2表达体系表达出真核蛋白,镍柱亲和纯化后的Alb-AG5-3经Western blot检测能被V5标签蛋白抗体识别。结论成功构建白纹伊蚊Alb-AG5-3真核质粒并在果蝇S2细胞中表达真核蛋白Alb-AG5-3,镍柱亲和纯化后获得单一的Alb-AG5-3蛋白以备后续分析。

关键词：白纹伊蚊唾液腺 Alb-AG5-3蛋白真核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

埃及伊蚊体内wAlbB株沃尔巴克氏体感染的时空分布

引用

中国病原生物学杂志 2021年第1期16卷 71-75页

作者：陈玲玲王政艳胡蓉石梦婷蓝静程金芝吴家红贵州医科大学基础医学院现代病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州省黔西南州疾病预防控制中心贵州医科大学公共与卫生学院贵州医科大学医学生物技术教研室

目的了解沃尔巴克氏体(Wolbachia)在WB株埃及伊蚊体内不同时间和空间的分布状况。方法采用实时荧光定量PCR测定埃及伊蚊体内不同发育时期、不同日龄和不同组织的Wolbachia密度。结果埃及伊蚊卵和成虫期Wolbachia密度均高于其幼虫和蛹期(... 详细信息

目的了解沃尔巴克氏体(Wolbachia)在WB株埃及伊蚊体内不同时间和空间的分布状况。方法采用实时荧光定量PCR测定埃及伊蚊体内不同发育时期、不同日龄和不同组织的Wolbachia密度。结果埃及伊蚊卵和成虫期Wolbachia密度均高于其幼虫和蛹期(P<0.01);不同日龄雌、雄成蚊体内Wolbachia密度均随日龄增大而上升(P<0.05);同一日龄雌、雄成蚊体内Wolbachia密度随着日龄增长雌蚊显著高于雄蚊(P<0.01);雌蚊卵巢中Wolbachia密度显著高于脂肪体和中肠,但是与唾液腺之间的差异不具统计学意义(P>0.05)。结论wAlbB株Wolbachia密度受埃及伊蚊发育状态和日龄的影响,随日龄升高密度显著升高。这为进一步揭示Wolbachia与宿主之间的互作关系提供了基础数据。

关键词：埃及伊蚊 wAlbB株沃尔巴克氏体时空分布感染密度实时荧光PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

家蝇Phormicin A多克隆抗体的制备及效价检测

引用

基因组学与应用生物学 2021年第3期40卷 1040-1046页

作者：王兵覃海赵杰琼姚杨韦鹏威宋朝蓉李道远张其柱朱贵明吴建伟贵州医科大学生物与医学工程重点实验室贵阳550025 贵州医科大学医药生物技术工程研究中心贵阳550025 贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵阳550025 空军军医大学唐都医院心血管内科西安710038 贵州医科大学第一附属医院贵阳550025 贵州医科大学基础医学院病原生物学教研室贵阳550025

家蝇Phormicin作为防御素家族的成员,是一类具有广普抗菌活性的抗菌肽。本研究采用原核表达法表达并纯化获得了家蝇Phormicin A蛋白。将家蝇Phormicin A原核表达蛋白与完全佐剂和不完全佐剂乳化混匀,先后免疫新西兰白兔获得其多克隆抗... 详细信息

家蝇Phormicin作为防御素家族的成员,是一类具有广普抗菌活性的抗菌肽。本研究采用原核表达法表达并纯化获得了家蝇Phormicin A蛋白。将家蝇Phormicin A原核表达蛋白与完全佐剂和不完全佐剂乳化混匀,先后免疫新西兰白兔获得其多克隆抗体。通过原核表达蛋白中和吸附实验,以及Western blot实验验证了抗体的特异性。进一步用金黄色葡萄球菌刺激家蝇三龄幼虫样品,进行内源性验证并测定抗体的效价。结果显示,该多克隆抗体既可以识别家蝇Phormicin A原核表达蛋白,也可以识别金黄色葡萄球菌刺激家蝇三龄幼虫产生的内源性Phormicin A蛋白。本研究为进一步探索Phormicin在家蝇天然免疫和防御中的机制等后续工作打下基础。

关键词： Phormicin 多克隆抗体家蝇抗菌肽

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

亚硒酸钠对HepG2细胞脂质和葡萄糖代谢相关基因表达的影响

引用

基因组学与应用生物学 2021年第4期40卷 1838-1845页

作者：张亮亮易婉婷黄江涛代杰曾柱贾义贵州医科大学贵州省免疫细胞和抗体工程研究中心贵阳550025 贵州医科大学生物与医学工程重点实验室贵阳550025 贵州医科大学医学生物技术工程研究中心贵阳550025 贵州医科大学基础医学院贵阳550025

硒是人和动物必需的微量元素,不同浓度的硒可以调节猪、羔羊、小鼠、人和酵母中与脂质和葡萄糖代谢相关基因的表达水平,但是目前尚不清楚低剂量硒对HepG2细胞脂质和葡萄糖代谢相关基因的影响。因此,我们通过实时荧光定量PCR和基因组学分... 详细信息

硒是人和动物必需的微量元素,不同浓度的硒可以调节猪、羔羊、小鼠、人和酵母中与脂质和葡萄糖代谢相关基因的表达水平,但是目前尚不清楚低剂量硒对HepG2细胞脂质和葡萄糖代谢相关基因的影响。因此,我们通过实时荧光定量PCR和基因组学分析,研究了亚硒酸钠对HepG2细胞中脂质和葡萄糖代谢相关基因表达水平的影响。结果表明,脂质代谢相关基因FAR1,DGKD和HILPDA在24 h和36 h时表达增加,葡萄糖代谢相关基因UGDH,IRS-2和PEPCK在24 h和36 h时表达增加。与对照组相比,0.1μmol/L亚硒酸钠处理HepG2细胞24 h可以增加TRAP1,HILPDA和PEPCK的表达水平,它们在肿瘤发生发展中起着重要的作用。此外,转录组学分析表明,亚硒酸钠可以改变代谢调控网络,包括萜类骨架的生物合成、胰岛素抵抗、磷酸肌醇代谢和细胞周期途径等。以上结果表明,0.1μmol/L亚硒酸钠可能会影响HepG2细胞的脂质和葡萄糖代谢,影响肿瘤的发生发展。

关键词：亚硒酸钠脂质代谢葡萄糖代谢 HepG2细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

体外转录小鼠MAGE-A3 mRNA在NIH/3T3细胞中的表达

引用

安徽医科大学学报 2020年第8期55卷 1157-1160页

作者：陈鹤丹林煊谢颖陈尧杨君仪王赟张世超胡祖权曾柱刘丽娜贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵阳550025 贵州医科大学生物与医学工程重点实验室/贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心/医药生物技术工程研究中心贵阳550025 贵州医科大学基础医学院贵阳550025 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025

目的构建编码MAGE-A3的真核表达载体,体外转录获得MAGE-A3 mRNA,在哺乳动物细胞NIH/3T3中表达MAGE-A3蛋白。方法通过逆转录PCR从三阴型乳腺癌细胞系4T1中扩增得到MAGE-A3编码基因,插入到载体pcDNA3.1(+)中,成功构建重组表达载体pcDNA3.1... 详细信息

目的构建编码MAGE-A3的真核表达载体,体外转录获得MAGE-A3 mRNA,在哺乳动物细胞NIH/3T3中表达MAGE-A3蛋白。方法通过逆转录PCR从三阴型乳腺癌细胞系4T1中扩增得到MAGE-A3编码基因,插入到载体pcDNA3.1(+)中,成功构建重组表达载体pcDNA3.1-MAGE作为体外转录RNA的模板。利用T7体外转录试剂盒获得MAGE-A3 RNA,添加poly(A)尾后进行mRNA纯化。将纯化后的MAGE-A 3 mRNA转染到NIH/3T3细胞中,Western blot实验检测MAGE-A3蛋白的表达。结果pcDNA3.1-MAGE-A3正确表达和构建。体外转录MAGE-A3 mRNAA(260)/A(280)为1.92,浓度是872.3 ng/μl,长度约为500 bp。转染MAGE-A3 mRNA后,NIH/3T3能表达大小约35 ku的MAGE-A3蛋白。结论成功构建编码MAGE-A3的真核表达载体,体外转录获得纯度较高的MAGE-A3 mRNA,该mRNA能在NIH/3T3细胞中表达MAGE-A3蛋白。

关键词： MAGE-A3 体外转录mRNA 蛋白表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：