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慢性氟中毒大鼠学习记忆能力与血清、海马及皮质脑组织中PGC-1α水平的相关性

贵州医科大学学报 2018年第10期43卷 1154-1158,1168页

作者：刘仙红陈丹曾晓晓董阳婷邓婕齐晓岚吴昌学李毅宋辉官志忠贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附院病理科贵州贵阳550004

目的:研究慢性氟中毒大鼠脑组织中过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子(PGC-1α)水平,探讨PGC-1α与学习记忆能力的关系。方法:SD大鼠60只,随机分为对照组(饮水含氟量<0. 5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为5. 0 mg/L)、高氟组(饮水含... 详细信息

目的:研究慢性氟中毒大鼠脑组织中过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子(PGC-1α)水平,探讨PGC-1α与学习记忆能力的关系。方法:SD大鼠60只,随机分为对照组(饮水含氟量<0. 5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为5. 0 mg/L)、高氟组(饮水含氟量为50. 0 mg/L),染氟时间分别为3个月及6个月;分别于染氟3月及6月时,用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,采用氟离子选择电极法测定大鼠血清氟含量,用蛋白印记方法检测大鼠海马及皮质组织中PGC-1α蛋白表达水平,分析大鼠海马及皮质PGC-1α蛋白水平与血清氟含量及空间学习记忆能力的相关性。结果:染氟大鼠逃避潜伏期较对照组显著延长、穿越平台次数及逗留平台象限时间明显缩短,以染氟6月组大鼠更明显(P <0. 05);血清氟含量随着染氟浓度的增高及染氟时间的延长而升高,高氟组大鼠血氟含量显著高于对照组,以染氟6月组大鼠尤为明显(P <0. 05);染氟大鼠海马区和皮质区的PGC-1α蛋白表达水平随着染氟浓度的增加和染氟时间的延长而逐渐下降,染氟6月组大鼠海马及皮质PGC-1α蛋白与血氟含量呈负相关(r=-0. 574、-0. 516,P <0. 05)、与大鼠逗留平台象限时间呈正相关(r=0. 76、0. 60,P <0. 05)、与逃避潜伏期呈负相关(r=-0. 542、-0. 58,P <0. 05)。结论:慢性氟中毒大鼠大脑组织PGC-1α蛋白表达水平降低,可能是氟中毒大鼠空间学习记忆能力降低的机制之一。

关键词：氟中毒过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子学习记忆能力脑组织大鼠 Sprague-Dawley

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人肠道来源艰难梭菌感染Caco-2细胞对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响

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贵州医科大学学报 2019年第12期44卷 1365-1369页

作者：洪伟饶凤琴吴昌学赵行行程玉梅张婷齐晓岚禹文峰官志忠贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附院ICU 贵州贵阳550004

目的:研究人肠道来源艰难梭感染Caco-2细胞对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。方法:用艰难梭菌毒素A和毒素B感染Caco-2细胞24 h,以未感染艰难梭菌毒素A和毒素B的Caco-2细胞为对照组,蛋白质免疫印迹法检测真核细胞核因子(NF-κB)通路... 详细信息

目的:研究人肠道来源艰难梭感染Caco-2细胞对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。方法:用艰难梭菌毒素A和毒素B感染Caco-2细胞24 h,以未感染艰难梭菌毒素A和毒素B的Caco-2细胞为对照组,蛋白质免疫印迹法检测真核细胞核因子(NF-κB)通路蛋白P-p65和p65的表达;Caco-2细胞用6孔板制作爬片,待细胞长满6孔板后,以感染复数(MOI)=100加入艰难梭菌,与Caco-2细胞共培养3、6、9、12及24 h,革兰染色后油镜观察,记录黏附细菌数与细胞数,计算共培养时间与细菌黏附数量之间的关系;艰难梭菌感染Caco-2细胞12 h,以Caco-2为对照组,蛋白质免疫印迹法检测NF-κB通路蛋白P-p65、p65、IKKα及IκBα的表达。结果:艰难梭菌与Caco-2细胞共培养12 h时黏附数最多,P-p65和IKKα蛋白表达增加(P<0.05),p65和IκBα蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人源艰难梭菌感染Caco-2细胞可激活NF-κB信号通路。

关键词：人源艰难梭菌肠上皮细胞炎症凋亡 NF-κB信号通路

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PPARγ激动剂对抗经氟诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化损伤

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贵州医科大学学报 2018年第10期43卷 1149-1153页

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂15d-PGJ2对氟诱导人神经母瘤SHSY5Y细胞氧化损伤的影响。方法:将体外培养的SH-SY5Y细胞,分为对照组、染氟组(Na F组)、单纯PPARγ激动剂组(R组)、干预组(R+Na F组,先加入15d-PGJ2 ... 详细信息

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂15d-PGJ2对氟诱导人神经母瘤SHSY5Y细胞氧化损伤的影响。方法:将体外培养的SH-SY5Y细胞,分为对照组、染氟组(Na F组)、单纯PPARγ激动剂组(R组)、干预组(R+Na F组,先加入15d-PGJ2 2 h后再加Na F),各组处理后培养48 h,用蛋白印记法检测SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平,微量酶标法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,分析PPARγ蛋白与SOD活性及MDA含量的相关关系。结果:与对照组相比,R组SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白水平、SOD活性及MDA含量无明显改变(P> 0. 05),Na F组SH-SY5Y细胞PPARγ蛋白水平和SOD活性明显降低,MDA含量明显增加(P <0. 05); R+Na F组SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平及SOD活性明显高于Na F组、MDA含量明显低于Na F组(P <0. 05); SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平与SOD活性呈正相关关系(r=0. 771,P <0. 05),与MDA含量呈负相关关系(r=-0. 762,P <0. 05)。结论:过量氟会导致体外培养的SH-SY5Y细胞发生氧化损伤,而PPARγ激动剂15d-PGJ2处理后可减轻氟诱导的细胞氧化损伤。

关键词：氟过氧化物酶体增殖激活受体γ 激动剂氧化性应激超氧化物歧化酶丙二醛

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综合治理后贵州省燃煤型地氟病区人群健康状况评价

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贵州医科大学学报 2018年第10期43卷 1124-1128页

作者：官志忠吴昌学齐晓岚贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附院病理科贵州贵阳550004

地方性氟中毒（endemic fluorosis）简称地氟病，是严重危害人体健康的全身性疾病。地氟病主要存在３种类型，即饮水型氟中毒、燃煤污染型氟中毒和饮茶型氟中毒。我国和印度是国际上地氟病流行范围最广、损害程度最重的国家，燃煤型地... 详细信息

地方性氟中毒（endemic fluorosis）简称地氟病，是严重危害人体健康的全身性疾病。地氟病主要存在３种类型，即饮水型氟中毒、燃煤污染型氟中毒和饮茶型氟中毒。我国和印度是国际上地氟病流行范围最广、损害程度最重的国家，燃煤型地氟病主要发生在我国中西部13个省、市、区，受威胁人口3430万人。

关键词：燃煤污染氟中毒氧化性应激综合治理健康教育效果评价

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ALX1基因过表达促进非小细胞肺癌细胞系PC-9上皮间质转化

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贵州医科大学学报 2017年第4期42卷 416-420页

作者：王琴容宋科伟吴昌学赵艳谢渊周建奖贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学运动与健康学院贵州贵阳550004

目的:探讨ALX1(aristaless-like homeobox 1)基因过表达对非小细胞肺癌细胞系PC-9上皮间质转化(EMT)能力的影响。方法:构建pc DNA3.1-ALX1过表达重组载体,将pc DNA3.1-ALX1和pc DNA3.1分别转染PC-9细胞;采用细胞划痕实验和Transwell实验分析PC-9细胞迁移及侵袭能力的改变,用qRT-PCR和Western印迹法检测EMT过程相关标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin)、紧密连接蛋白(ZO-1)以及转录因子slug和snail表达水平的改变。结果:与对照组相比,ALX1过表达组中PC-9细胞的迁移和侵袭能力明显增强(P<0.001),ZO-1表达量明显降低(P<0.05),N-cadherin、slug和snail表达量明显增高(P<0.001)。结论:ALX1基因过表达能够促进非小细胞肺癌细胞PC-9的EMT转化,其机制可能与ZO-1表达量下调和N-cadherin、slug和snail表达量上调有关。

关键词：癌,非小细胞肺 ALX1 上皮间质转化侵袭迁移

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Aβ_(1-42)寡聚体在非Caspase依赖性细胞凋亡通路中的作用机制

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贵州医科大学学报 2017年第3期42卷 253-257页

作者：杨梅任真奎官志忠禹文峰贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学病理学教研室贵州贵阳550004

目的:观察Aβ_(1-42)寡聚体对凋亡诱导因子(AIF)在神经细胞线粒体或细胞核中表达的影响。方法:将体外培养原代神经细胞分为对照组和Aβ_(1-42)寡聚体处理组,(分别用0.1、0.2、0.5及1μmol/L的Aβ_(1-42)寡聚体处理24 h),采用MTT法测定... 详细信息

目的:观察Aβ_(1-42)寡聚体对凋亡诱导因子(AIF)在神经细胞线粒体或细胞核中表达的影响。方法:将体外培养原代神经细胞分为对照组和Aβ_(1-42)寡聚体处理组,(分别用0.1、0.2、0.5及1μmol/L的Aβ_(1-42)寡聚体处理24 h),采用MTT法测定神经细胞的相对生存率,Western blotting检测凋亡诱导因子(AIF)在神经细胞的线粒体和细胞核中的表达。结果:MTT结果显示,与对照组比较,Aβ_(1-42)寡聚体处理组的OD值均有不同程度的下降,Aβ_(1-42)寡聚体为0.1、0.2及0.5μmol/L时的细胞相对生存率明显降低(P<0.05),1μmol/L时降低最明显(P<0.01);与对照组比较,Aβ_(1-42)寡聚体处理组神经细胞线粒体中AIF蛋白表达减少(P<0.05或P<0.01),而细胞核中AIF蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论:Aβ_(1-42)寡聚体可能通过AIF介导的非Caspase依赖性细胞凋亡通路导致大鼠神经细胞的凋亡,其机制可能与Aβ_(1-42)寡聚体促进AIF从线粒体向细胞核转移有关。

关键词：细胞凋亡阿尔茨海默病细胞神经大鼠,Sprague-Dawley 凋亡诱导因子 Aβ1-42寡聚体

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康复新液治疗儿童急性淋巴细胞白血病化疗性口腔溃疡的临床疗效

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贵州医科大学学报 2017年第10期42卷 1176-1178,1195页

作者：齐兴菊吴昌学贵州省人民医院儿内科贵州贵阳550002 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004

目的:观察康复新液对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)化疗性口腔溃疡的临床疗效。方法:儿童ALL化疗性口腔溃疡患儿60例,随机均分为康复新液组和龙掌口含液组,分别给予康复新液或龙掌口含液口服(3~5 m L含服3~5 min,4次/d)治疗;于治疗第6天... 详细信息

目的:观察康复新液对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)化疗性口腔溃疡的临床疗效。方法:儿童ALL化疗性口腔溃疡患儿60例,随机均分为康复新液组和龙掌口含液组,分别给予康复新液或龙掌口含液口服(3~5 m L含服3~5 min,4次/d)治疗;于治疗第6天时,观察两组患儿口腔溃疡的治疗效果,比较治疗前后2组患儿口腔溃疡级别、口腔溃疡的消退时间及不良反应。结果:用药第6天时,康复新液组有效率高于龙掌口含液组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前,两组患儿口腔溃疡以3、4级为主,用药第6天时两组患儿的口腔溃疡均有好转,口腔溃疡以0级为主,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后康复新液组患儿0级口腔溃疡比例高于龙掌口含液组(P<0.05),溃疡消退时间短于龙掌口含液组(P<0.05),两组患儿用药期间均无明显不良反应。结论:康复新液治疗儿童ALL化疗性口腔溃疡的效果优于龙掌口含液。

关键词：康复新液龙掌口含液白血病口腔溃疡

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α7胆碱能受体激动剂PNU刺激SD大鼠星形胶质细胞钙调蛋白的表达

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贵州医科大学学报 2017年第1期42卷 7-10页

作者：何婧任真奎官志忠禹文峰吴昌学贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学病理学教研室贵州贵阳550004

目的:探讨α7胆碱能受体(α7nAChRs)激动剂(PNU)对SD大鼠星形胶质细胞钙调蛋白(CaM)表达水平的影响。方法:将培养第3~4代的星形胶质细胞分为对照组、PNU处理组(PNU组)、α7nAChRs阻断剂(MLA)联合PNU处理组(联合组);对照组不加PNU和MLA处... 详细信息

目的:探讨α7胆碱能受体(α7nAChRs)激动剂(PNU)对SD大鼠星形胶质细胞钙调蛋白(CaM)表达水平的影响。方法:将培养第3~4代的星形胶质细胞分为对照组、PNU处理组(PNU组)、α7nAChRs阻断剂(MLA)联合PNU处理组(联合组);对照组不加PNU和MLA处理,PNU组以1、5及10μmol/L的PNU处理星形胶质细胞6、12、18及24 h,联合组以0.05、0.1及0.15μmol/L浓度的MLA预先处理星形胶质细胞2 h后,选择加入上调CaM蛋白表达水平最高的PNU浓度和最佳时间(PNU组筛选后所得)处理细胞;运用蛋白印迹(Western blotting)方法检测3组星形胶质细胞CaM的蛋白表达水平。结果 :与对照组比较,1、5及10μmol/L PNU刺激星形胶质细胞6、12、18及24 h可使CaM蛋白表达水平升高(P<0.05);加入5μmol/L PNU培养12 h后,上调作用最明显;联合组(0.05、0.1及0.15μmol/L的MLA预先处理星形胶质细胞2 h后,再加入PNU 5μmol/L培养12 h)与PNU组比较,星形胶质细胞裂解液中CaM蛋白的表达受到抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PNU激活星形胶质细胞后可提高CaM的蛋白表达水平,MLA可阻断该表达。

关键词：星形胶质细胞 α7胆碱能受体激动剂钙调蛋白阿尔茨海默病

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星形胶质细胞α7神经型尼古丁受体激动剂Nicotine和PNU对钙调蛋白水平的影响

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贵州医科大学学报 2017年第1期42卷 11-14,20页

目的:探讨星形胶质细胞α7神经型尼古丁受体(α7nAChRs)激动剂Nicotine和PNU对钙调蛋白(CaM)表达水平的影响。方法:第3~4代乳鼠大脑星形胶质细胞分为对照组和实验组,对照组不加α7nAChRs激动剂,实验组分别加入α7nAChRs激动剂Nicotine或... 详细信息

目的:探讨星形胶质细胞α7神经型尼古丁受体(α7nAChRs)激动剂Nicotine和PNU对钙调蛋白(CaM)表达水平的影响。方法:第3~4代乳鼠大脑星形胶质细胞分为对照组和实验组,对照组不加α7nAChRs激动剂,实验组分别加入α7nAChRs激动剂Nicotine或PNU处理细胞,Nicotine或PNU的浓度为1、5及10μmol/L,处理时间为6、12、18及24 h;采用蛋白印迹(Western blotting)方法检测Nicotine或PNU不同浓度及不同时间点细胞裂解液中的CaM蛋白水平。结果:5μmol/L Nicotine处理6、12、18及24 h和10μmol/L Nicotine处理12、18及24 h的星形胶质细胞裂解液中的CaM蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),其余Nicotine浓度和处理时间点星形胶质细胞裂解液中CaM蛋白表达水平虽略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);浓度为1、10μmol/L的PNU处理24 h,CaM蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),其他浓度及时间点的CaM蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05)。结论 :星形胶质细胞α7 nAChRs的激活可以使CaM的蛋白表达水平增加。

关键词：星形胶质细胞 α7神经型尼古丁受体激动剂钙调蛋白阿尔茨海默病

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过表达CagA对胃癌细胞中GLUT1表达的影响

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贵州医科大学学报 2021年第4期46卷 381-386页

作者：程薇杨丽萍周建奖谢渊全欣莹陈定宇王琴容赵艳贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室&贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床医学研究中心贵州贵阳550004

目的探究幽门螺杆菌(***)的细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)过表达对胃癌细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达的影响。方法用过表达cagA腺病毒感染人胃癌细胞株AGS和人原代胃癌细胞,免疫荧光检测GLUT1的表达;用过表达glut1慢病毒及其空载体慢... 详细信息

目的探究幽门螺杆菌(***)的细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)过表达对胃癌细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达的影响。方法用过表达cagA腺病毒感染人胃癌细胞株AGS和人原代胃癌细胞,免疫荧光检测GLUT1的表达;用过表达glut1慢病毒及其空载体慢病毒感染胃癌细胞株AGS和BGC-823、0.002 mg/L嘌呤霉素筛选,用Western blot、免疫荧光验证稳转细胞株;最后用过表达cagA腺病毒感染过表达GLUT1的稳转细胞株,免疫荧光检测GLUT1与CagA的细胞定位。结果成功建立过表达glut1的稳转细胞株AGS/glut1和BGC-823/glut1,免疫荧光结果显示CagA和GLUT1蛋白主要在细胞膜上表达,且过表达CagA能引起细胞膜上GLUT1蛋白达降低并出现碎片化,且CagA与Glut1在细胞膜上共定位。结论CagA与GLUT1共定位于细胞膜上,破坏细胞膜,抑制GLUT1蛋白的表达。

关键词：胃肿瘤螺杆菌,幽门细胞毒素相关基因A蛋白葡萄糖转运蛋白1

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