检索结果-内蒙古大学图书馆

2019全国老年痴呆与认知障碍相关疾病学术大会

作者：任真奎董智慧吕菊谢鹏胡玉梅官志忠禹文峰贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室黔西南州人民医院检验科贵州医科大学附属医院病理科

目的β-淀粉样蛋白（Aβ）的异常聚集,导致细胞外老年斑和细胞内神经原纤维缠结的形成,从而引发的细胞毒性诱导神经元凋亡,导致渐进性认知功能障碍的临床表现,是阿尔茨海默病（AD）常见发病机制之一。因此,我们研究PNU282987激活SD新生... 详细信息

目的β-淀粉样蛋白（Aβ）的异常聚集,导致细胞外老年斑和细胞内神经原纤维缠结的形成,从而引发的细胞毒性诱导神经元凋亡,导致渐进性认知功能障碍的临床表现,是阿尔茨海默病（AD）常见发病机制之一。因此,我们研究PNU282987激活SD新生乳鼠大脑皮质星形胶质细胞α7尼古丁乙酰胆碱能受体（nAChR）后通过PI3K/Akt/HSF1信号通路介导内源性αB-crystallin（Cryab）对Aβ聚集的影响。方法分离出生24 h内SD乳鼠皮质层的星形胶质细胞进行培养、纯化、并传代,通过细胞免疫荧光的方法对星形胶质细胞进行鉴定;体外制备Aβ寡聚体并进行鉴定;将细胞分为空白对照组、MLA处理组、PNU282987处理组、PNU282987+MLA处理组、LY294002处理组、PNU282987+LY294002处理组、Aβ处理组、PNU282987+Aβ处理组、PNU282987+LY294002+Aβ处理组及HSF1敲低组。收集细胞总蛋白,通过Western蛋白印迹法检测p-Akt,Cryab,HSF1和Aβ的蛋白表达水平。结果细胞免疫荧光鉴定显示培养的原代星形胶质细胞占总细胞98%以上;Western蛋白印迹法对细胞中Cryab,p-Akt,HSF1和Aβ表达水平的结果显示:与空白对照组相比较,PNU282987处理后,Cryab,p-Akt,HSF1蛋白都表现出上升的趋势（P<0.05）,而单独MLA组或LY294002组无明显差异;在HSF1敲低组,PNU282987上调Cryab的作用受到明显的抑制;正常对照组未检测到Aβ的表达,与Aβ组相比,PNU282987组的Aβ表达降低（P<0.05）;与PNU282987+Aβ组相比,PNU282987+LY294002+Aβ组的Aβ表达升高（P<0.01）。结论在原代星形胶质细胞模型上,PNU282987可通过激活星形胶质细胞的α7 nAChR介导HSF1上调内源性Cryab从而抑制Aβ集聚,PI3K/Akt信号通路很可能是这个过程中的重要参与因素,为探讨Cryab和HSF1可能是治疗AD的一个潜在靶点提供了一定的基础研究。

关键词：阿尔茨海默病星形胶质细胞 Cryab HSF1 α7尼古丁乙酰胆碱能受体

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胃癌组织中肿瘤相关成纤维细胞与正常成纤维细胞之间转录组学研究及验证

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中国生物化学与分子生物学报 2018年第4期34卷 427-433页

作者：陈学书袁航龙妮娅李雅洁张晓怡赵艳谢渊周建奖地方病与少数民族疾病教育部重点实验室(贵州医科大学) 贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵阳550004 襄阳市第一人民医院病理科湖北襄阳440000 贵州医科大学附属医院临检科贵阳550004

胃癌组织中肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma associated fibroblasts,CAFs)是胃癌微环境的重要成分,主要来源于正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)的活化,对胃癌的发生发展有重要作用,但是两者之间的基因表达差异并不完全清楚。本研... 详细信息

胃癌组织中肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma associated fibroblasts,CAFs)是胃癌微环境的重要成分,主要来源于正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)的活化,对胃癌的发生发展有重要作用,但是两者之间的基因表达差异并不完全清楚。本研究选取从人胃癌组织中分离获得的CAFs及NFs各3组,进行转录组学研究,筛选出3组细胞中交集且差异倍数较大的基因12个,用Omicsbean在线工具对差异基因进行Gene Ontology(GO)功能及KEGG通路富集,构建蛋白质相互作用调控网络;最后用RT-qPCR验证CAFs和NFs中差异基因的表达。结果显示,筛选出的12个差异表达基因主要参与NF-κB信号、炎症、细胞黏附、细胞表面受体和细胞因子等功能,上述功能均与肿瘤的发生发展密切相关。RT-qPCR检测发现,与NFs相比,CAFs中BCL2A1、NKX3-2、CXCL12、TNFAIP3、FOS、CDH4及CLDN1表达上调;ATF3、CYFIP2、CCL11、KLF2及GDF15基因表达下调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结果提示,胃癌CAFs与NFs中存在肿瘤相关的差异表达基因,这些差异基因可能在胃癌微环境中发挥重要作用。

关键词：胃癌肿瘤相关成纤维细胞转录组学生物信息学

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医学分子生物学教学改革的探索

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教育界（高等教育） 2018年第6期 66-67页

作者：谢渊张婷禹文峰贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室

医学分子生物学是一门十分重要的课程.为有效解决医学专业分子生物学教学中存在的教学模式单一、课程内容设置不合理以及考核方式不客观等问题,文章提出有效的解决对策与建议,提高分子生物学教学改革的成效,进而提升医学专业学生运用分... 详细信息

医学分子生物学是一门十分重要的课程.为有效解决医学专业分子生物学教学中存在的教学模式单一、课程内容设置不合理以及考核方式不客观等问题,文章提出有效的解决对策与建议,提高分子生物学教学改革的成效,进而提升医学专业学生运用分子生物学理论解决实际问题的能力。

关键词：分子生物学医学教学改革

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天麻全药对APP/PS1小鼠痴呆模型的神经保护作用及机制

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中国药理学与毒理学杂志 2019年第6期33卷 433-433页

作者：高玉梅王晓玲任家谋官志忠沈祥春齐晓岚贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院病理科贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004

目的研究天麻全药是否可以改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力,减少其对大脑海马区域中β-淀粉样蛋白(Aβ)的聚集程度及老年斑的形成,以及这些作用是否与调控keap1-Nrf2/HO-1抗氧化应激通路方面有关,进一步探讨天麻全药的神经保护作... 详细信息

目的研究天麻全药是否可以改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力,减少其对大脑海马区域中β-淀粉样蛋白(Aβ)的聚集程度及老年斑的形成,以及这些作用是否与调控keap1-Nrf2/HO-1抗氧化应激通路方面有关,进一步探讨天麻全药的神经保护作用机制及在老年性痴呆预防及治疗中的作用。方法 APP/PS1双转基因痴呆小鼠模型,实验小鼠分为A组:正常组;B组:正常给药组;C组:APP/PS1模型组;D组:模型给药组。B和D组取2月龄APP/PS1双转基因小鼠每日灌胃同等剂量天麻全药(每天1.5 g·kg-1),A和C组灌胃同等量的生理盐水。灌胃至5月龄时进行Morris水迷宫检测各组小鼠学习和记忆能力;取小鼠血清检测谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)的含量;HE染色观察小鼠脑组织形态学变化、免疫组织化学检测脑组织中Aβ的沉积;实时PCR检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、相关基因的m RNA水平;生化试剂盒检测小鼠海马组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western蛋白印迹实验检测kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、Nrf2、HO-1、醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白的表达水平。结果与对照组相比,水迷宫检测结果显示,C组小鼠的学习记忆能力降低(P<0.05);各组小鼠血清中GOT和GPT的含量差异无统计学意义;HE染色结果显示,各组小鼠脑组织形态结构无明显差异;免疫组织化学检测到C组小鼠脑组织中出现明显Aβ沉积;海马组织中Nrf2和HO-1的m RNA及Keap1,Nrf2,HO-1和NQO1蛋白表达水平均有不同程度的减少(P<0.05,P<0.01);与C组小鼠比较,D组小鼠中Aβ斑块形成减少;海马组织中Nrf2,HO-1的m RNA及Keap1,Nrf2,HO-1和NQO1蛋白表达水平均有不同程度的增加(P<0.05,P<0.01);海马组织MDA含量明显降低(P<0.05),SOD酶活性显著升高(P<0.05)。结论血清学检测结果显示,长期灌胃天麻全药,小鼠血清中的GOT和GPT无统计学差异,说明小鼠在长期给予天麻后,对肝脏功能代谢功能并无明显毒性作用;水迷宫及其他结果显示天麻全药能够改善阿尔茨海默病(AD)痴呆小鼠模型的学习和记忆能力,这提示天麻全药对AD痴呆小鼠模型具有一定的神经保护作用,且其可能通过调控keap1-Nrf2/HO-1通路,增强下游抗氧化基因的表达、SOD酶活性发挥抗氧化功能。在一定程度上减缓AD病理进程、减少Aβ的沉积,进而改善AD痴呆小鼠模型的学习记忆能力。

关键词：阿尔茨海默病天麻氧化应激 keap1-Nrf2/HO-1通路

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慢性氟中毒大鼠学习记忆能力与血清、海马及皮质脑组织中PGC-1α水平的相关性

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贵州医科大学学报 2018年第10期43卷 1154-1158,1168页

作者：刘仙红陈丹曾晓晓董阳婷邓婕齐晓岚吴昌学李毅宋辉官志忠贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附院病理科贵州贵阳550004

目的:研究慢性氟中毒大鼠脑组织中过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子(PGC-1α)水平,探讨PGC-1α与学习记忆能力的关系。方法:SD大鼠60只,随机分为对照组(饮水含氟量<0. 5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为5. 0 mg/L)、高氟组(饮水含... 详细信息

目的:研究慢性氟中毒大鼠脑组织中过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子(PGC-1α)水平,探讨PGC-1α与学习记忆能力的关系。方法:SD大鼠60只,随机分为对照组(饮水含氟量<0. 5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为5. 0 mg/L)、高氟组(饮水含氟量为50. 0 mg/L),染氟时间分别为3个月及6个月;分别于染氟3月及6月时,用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,采用氟离子选择电极法测定大鼠血清氟含量,用蛋白印记方法检测大鼠海马及皮质组织中PGC-1α蛋白表达水平,分析大鼠海马及皮质PGC-1α蛋白水平与血清氟含量及空间学习记忆能力的相关性。结果:染氟大鼠逃避潜伏期较对照组显著延长、穿越平台次数及逗留平台象限时间明显缩短,以染氟6月组大鼠更明显(P <0. 05);血清氟含量随着染氟浓度的增高及染氟时间的延长而升高,高氟组大鼠血氟含量显著高于对照组,以染氟6月组大鼠尤为明显(P <0. 05);染氟大鼠海马区和皮质区的PGC-1α蛋白表达水平随着染氟浓度的增加和染氟时间的延长而逐渐下降,染氟6月组大鼠海马及皮质PGC-1α蛋白与血氟含量呈负相关(r=-0. 574、-0. 516,P <0. 05)、与大鼠逗留平台象限时间呈正相关(r=0. 76、0. 60,P <0. 05)、与逃避潜伏期呈负相关(r=-0. 542、-0. 58,P <0. 05)。结论:慢性氟中毒大鼠大脑组织PGC-1α蛋白表达水平降低,可能是氟中毒大鼠空间学习记忆能力降低的机制之一。

关键词：氟中毒过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子学习记忆能力脑组织大鼠 Sprague-Dawley

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贵州3个世居少数民族CCR5基因Δ32多态分布

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广东医学 2018年第1期39卷 88-91页

作者：国学红何燕张秀秀王婵娟张婷官志忠地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室(贵州医科大学) 贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

目的调查贵州3个世居少数民族人群(苗族、布依族、水族)中趋化因子受体5(CCR5)基因Δ32位点多态性分布情况。方法采用PCR法直接扩增120例男性样本(雷山苗族27例、荔波布依族70例、荔波水族23例)的CCR5Δ32等位基因,分析PCR扩增产物并对... 详细信息

目的调查贵州3个世居少数民族人群(苗族、布依族、水族)中趋化因子受体5(CCR5)基因Δ32位点多态性分布情况。方法采用PCR法直接扩增120例男性样本(雷山苗族27例、荔波布依族70例、荔波水族23例)的CCR5Δ32等位基因,分析PCR扩增产物并对产物进行测序验证。结果 3个世居少数民族人群中只发现了169 bp片段的野生型基因型,CCR5Δ32等位基因突变频率为0。结论贵州3个世居少数民族人群CCR5Δ32等位基因突变频率较低,可能对人类免疫缺陷性病毒(HIV-1)易感。

关键词： CCR5△32基因贵州少数民族 HIV-1 易感性

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一种简便的幽门螺杆菌液体培养法的构建

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贵州医科大学学报 2018年第2期43卷 160-163页

作者：李雅洁张晓怡周建奖赵艳龙妮娅陈学书王琴容程薇谢渊贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学

目的:建立一种简便、有效的幽门螺杆菌(***)的液体培养法。方法:取脑心浸液9 m L、胎牛血清1 m L、***选择剂(万古霉素、头孢磺啶、甲氧氨苄嘧啶及两性霉素B)400μL制成***液体培养基,将***接种于***液体培养基,在厌氧罐中通过微需氧袋... 详细信息

目的:建立一种简便、有效的幽门螺杆菌(***)的液体培养法。方法:取脑心浸液9 m L、胎牛血清1 m L、***选择剂(万古霉素、头孢磺啶、甲氧氨苄嘧啶及两性霉素B)400μL制成***液体培养基,将***接种于***液体培养基,在厌氧罐中通过微需氧袋建立微需氧条件,于37℃振荡培养3 d,同时设立传统固体培养基培养的***作为对照;观察2种方法培养的***生长状况及***形态,比较2种方法培养的***的尿素酶、氧化酶及触酶试验结果。结果:固体培养到第3天时,***生长良好,哥伦比亚血琼脂平板上见透明、针尖样菌落形态;液体培养第3天时可见培养基明显浑浊,涂抹少量菌液于无抗生素的哥伦比亚血琼脂平板培养,肉眼未见污染菌生长,并有透明、针尖样的菌落长出;革兰染色后,固体培养基中的***为螺旋状、海鸥状、S状弯曲菌或短杆菌;液体培养基中的***则多为螺旋短杆状、亦见部分长丝状细菌,有的互相缠绕聚集成团,有的散在分布;取两种方法培养的***菌进行尿素酶、氧化酶及触酶试验,结果均为阳性。结论:成功建立一种简便、有效的***液体培养法,细菌生长良好,且***形态变长。

关键词：幽门螺杆菌液体培养脑心浸液革兰氏染色 H.pylori选择刹微需氧

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PPARγ激动剂对抗经氟诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化损伤

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贵州医科大学学报 2018年第10期43卷 1149-1153页

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂15d-PGJ2对氟诱导人神经母瘤SHSY5Y细胞氧化损伤的影响。方法:将体外培养的SH-SY5Y细胞,分为对照组、染氟组(Na F组)、单纯PPARγ激动剂组(R组)、干预组(R+Na F组,先加入15d-PGJ2 ... 详细信息

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂15d-PGJ2对氟诱导人神经母瘤SHSY5Y细胞氧化损伤的影响。方法:将体外培养的SH-SY5Y细胞,分为对照组、染氟组(Na F组)、单纯PPARγ激动剂组(R组)、干预组(R+Na F组,先加入15d-PGJ2 2 h后再加Na F),各组处理后培养48 h,用蛋白印记法检测SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平,微量酶标法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,分析PPARγ蛋白与SOD活性及MDA含量的相关关系。结果:与对照组相比,R组SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白水平、SOD活性及MDA含量无明显改变(P> 0. 05),Na F组SH-SY5Y细胞PPARγ蛋白水平和SOD活性明显降低,MDA含量明显增加(P <0. 05); R+Na F组SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平及SOD活性明显高于Na F组、MDA含量明显低于Na F组(P <0. 05); SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平与SOD活性呈正相关关系(r=0. 771,P <0. 05),与MDA含量呈负相关关系(r=-0. 762,P <0. 05)。结论:过量氟会导致体外培养的SH-SY5Y细胞发生氧化损伤,而PPARγ激动剂15d-PGJ2处理后可减轻氟诱导的细胞氧化损伤。

关键词：氟过氧化物酶体增殖激活受体γ 激动剂氧化性应激超氧化物歧化酶丙二醛

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综合治理后贵州省燃煤型地氟病区人群健康状况评价

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贵州医科大学学报 2018年第10期43卷 1124-1128页

作者：官志忠吴昌学齐晓岚贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附院病理科贵州贵阳550004

地方性氟中毒（endemic fluorosis）简称地氟病，是严重危害人体健康的全身性疾病。地氟病主要存在３种类型，即饮水型氟中毒、燃煤污染型氟中毒和饮茶型氟中毒。我国和印度是国际上地氟病流行范围最广、损害程度最重的国家，燃煤型地... 详细信息

地方性氟中毒（endemic fluorosis）简称地氟病，是严重危害人体健康的全身性疾病。地氟病主要存在３种类型，即饮水型氟中毒、燃煤污染型氟中毒和饮茶型氟中毒。我国和印度是国际上地氟病流行范围最广、损害程度最重的国家，燃煤型地氟病主要发生在我国中西部13个省、市、区，受威胁人口3430万人。

关键词：燃煤污染氟中毒氧化性应激综合治理健康教育效果评价

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H2S在缺血再灌注损伤中神经细胞自噬发生机制中的作用研究

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神经药理学报 2018年第2期 36-37页

作者：肖雁黄赟刘雨霞田茂齐晓岚禹文峰官志忠贵州医科大学附属医院病理科地方病与少数民族疾病贵州医科大学教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室贵州医科大学

目的:利用siRNA干扰技术干扰H2S生成的关键酶胱硫醚β-合成酶（cystathionineβ-synthase,CBS）基因并构建细胞氧糖剥夺再灌注（oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）模型,探讨OGD/R和CBS基因干扰后SH-SY5Y细胞自噬和凋亡情况及相关信号通路变化。方法:构建OGD/R模型,体外模拟缺血再灌注过程,根据氧糖剥夺和再灌注时间不同共设9组,利用透射电镜观察各组细胞OGD/R后细胞内自噬小体形成情况,根据透射电镜结果选取氧糖剥夺4 h/再灌注24 h作为后续实验的OGD/R模型;脂质体转染法将针对CBS基因的siRNA转入SH-SY5Y细胞内,同时构建OGD/R模型,将细胞分为3个组,分别为CBS干扰组,OGD/R组和CBS干扰+OGD/R组,各组均设相应对照。Real time PCR和蛋白印迹法鉴定CBS基因干扰效率,并检测各组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1和信号通路中Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的蛋白表达水平,以及凋亡信号通路中NF-κBp65、COX-2蛋白表达水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡水平。结果:透射电镜观察细胞内自噬小体:除正常对照组和氧糖剥夺4 h/再灌注12 h组未观察到自噬小体外,其余各组均在胞质内观察到了较多自噬小体。CBS基因干扰效率达80%。CBS干扰组自噬相关蛋白及相关信号通路蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,Beclin-1,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR蛋白表达水平与阴性对照组比较均无统计学差异;OGD/R组与正常对照组比较,OGD/R组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ明显高于正常对照组,p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR均明显降低,NF-κBp65、COX-2蛋白表达水平均高于正常对照组;CBS干扰+OGD/R组与对照组比较,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,Beclin-1,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR均无显著差异。CBS干扰组细胞凋亡率与阴性对照组比较无统计学差异;与正常对照组比较OGD/R组细胞凋亡率明显高于正常对照组;CBS干扰+OGD/R组与阴性对照组比较,细胞凋亡率无显著差异。结论:OGD/R能够明显诱导SH-SY5Y细胞发生自噬和凋亡,且可能与Akt/mTOR及NF-κBp65/COX-2信号通路相关;CBS基因干扰后对细胞自噬和凋亡均无明显影响。

关键词： H2S 自噬 CBS p-Akt/Akt p-mTOR/mTOR NF-κBp65 COX-2

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