检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2021年第6期46卷 632-638页

作者：张健彭煜晖李毅梁欣明付文莉张婷柏华禹文峰吴昌学张启芳贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学第三附属医院医学中心实验室贵州都匀558000

目的探讨黄连素(BBR)对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)紫杉醇(PTX)耐药细胞活力、增殖及高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达的影响。方法取对数生长期的PTX耐药前列腺癌细胞株DU145 R,用0、5、10、20、30及50μmol/LBBR处理,采用细胞计数试剂盒8(CC... 详细信息

目的探讨黄连素(BBR)对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)紫杉醇(PTX)耐药细胞活力、增殖及高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达的影响。方法取对数生长期的PTX耐药前列腺癌细胞株DU145 R,用0、5、10、20、30及50μmol/LBBR处理,采用细胞计数试剂盒8(CCK8)分别于48和72 h评估6组DU145 R细胞的细胞活力;分别用二甲基亚砜(DMSO)、10及20μmol/L BBR处理对数生长期的DU145 R细胞,采用细胞克隆形成实验检测3组DU145 R细胞的克隆形成数;利用Oncomine数据库与人类蛋白质图谱数据库(HPA)分别分析HMGB1 mRNA及蛋白在前列腺癌和正常组织中的表达,利用TIMER2.0数据库分析HMGB1表达与前列腺癌患者生存的相关性;取对数生长期细胞DU145及DU145 R(分为0、10及20μmol/L BBR处理组),采用蛋白印迹法检测2组细胞中HMGB1蛋白表达。结果与0μmol/L BBR组相比,各浓度组DU145 R细胞的细胞活力降低(P<0.05);与DMSO组相比,5和10μmol/L BBR组DU145 R细胞的克隆形成数量减少(P<0.05);与正常组织相比,前列腺癌组织中HMGB1 mRNA及蛋白表达增加(P<0.001),且HMGB1高表达与前列腺癌患者不良预后相关(P=0.0193);与DU145组相比,DU145 R各组细胞HMGB1的表达明显增高(P<0.001);与0μmol/L BBR组相比,10和20μmol/L BBR组DU145 R细胞HMGB1蛋白表达下调(P<0.05)。结论BBR可抑制CRPC PTX耐药细胞增殖、细胞活力及HMGB1的表达。

关键词：前列腺肿瘤前列腺癌细胞紫杉醇耐药 Oncomine数据库人类蛋白质图谱高迁移率族蛋白1 黄连素

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APP N端在阿尔茨海默病病理中的多维调控作用及靶向治疗潜力

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贵州医科大学学报 2025年第3期50卷 313-324页

作者：谭俊陈江齐晓岚贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的病理过程涉及多个机制,包括β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)积聚、Tau蛋白磷酸化、神经炎症以及突触丧失。淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)作为Aβ的前体,APP N端不仅调控Aβ... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的病理过程涉及多个机制,包括β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)积聚、Tau蛋白磷酸化、神经炎症以及突触丧失。淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)作为Aβ的前体,APP N端不仅调控Aβ的生成,还在Tau病理、炎症反应和突触功能失调中扮演关键角色。APP N端由E1结构域、KPI域和AcD组成,调节多个病理通路,推动AD的进展。近年来研究揭示,APP N端的多功能性使其成为AD治疗的新兴靶点。靶向N端的策略,如6KApoE肽和AV-1959D疫苗,显示出在多靶点干预中的潜力,但仍面临血脑屏障穿透性和脱靶效应的挑战。未来的研究将聚焦APP N端在AD多病理网络中的作用,结合多组学技术、类器官模型及人工智能辅助药物设计,推动精准治疗策略的发展。

关键词：阿尔茨海默病 APP N端 Aβ生成 Tau病理靶向治疗

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过表达CagA对胃癌细胞中GLUT1表达的影响

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贵州医科大学学报 2021年第4期46卷 381-386页

作者：程薇杨丽萍周建奖谢渊全欣莹陈定宇王琴容赵艳贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室&贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床医学研究中心贵州贵阳550004

目的探究幽门螺杆菌(***)的细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)过表达对胃癌细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达的影响。方法用过表达cagA腺病毒感染人胃癌细胞株AGS和人原代胃癌细胞,免疫荧光检测GLUT1的表达;用过表达glut1慢病毒及其空载体慢... 详细信息

目的探究幽门螺杆菌(***)的细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)过表达对胃癌细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达的影响。方法用过表达cagA腺病毒感染人胃癌细胞株AGS和人原代胃癌细胞,免疫荧光检测GLUT1的表达;用过表达glut1慢病毒及其空载体慢病毒感染胃癌细胞株AGS和BGC-823、0.002 mg/L嘌呤霉素筛选,用Western blot、免疫荧光验证稳转细胞株;最后用过表达cagA腺病毒感染过表达GLUT1的稳转细胞株,免疫荧光检测GLUT1与CagA的细胞定位。结果成功建立过表达glut1的稳转细胞株AGS/glut1和BGC-823/glut1,免疫荧光结果显示CagA和GLUT1蛋白主要在细胞膜上表达,且过表达CagA能引起细胞膜上GLUT1蛋白达降低并出现碎片化,且CagA与Glut1在细胞膜上共定位。结论CagA与GLUT1共定位于细胞膜上,破坏细胞膜,抑制GLUT1蛋白的表达。

关键词：胃肿瘤螺杆菌,幽门细胞毒素相关基因A蛋白葡萄糖转运蛋白1

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人耐紫杉醇去势性前列腺癌细胞系的构建

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贵州医科大学学报 2021年第6期46卷 621-626页

作者：吴昌学李毅张婷彭煜晖张健禹文峰柏华张启芳贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学第三附属医院医学实验中心贵州都匀558000

目的构建人耐紫杉醇(PTX)去势性前列腺癌细胞模型。方法培养人细胞株DU145细胞,逐渐增加PTX的浓度(1、4、6、8、10及12 nmol/L)处理细胞;以12 nmol/L浓度处理后存活的DU145细胞作为PTX耐药细胞株(命名为DU145 R)、DU145细胞作为对照,采... 详细信息

目的构建人耐紫杉醇(PTX)去势性前列腺癌细胞模型。方法培养人细胞株DU145细胞,逐渐增加PTX的浓度(1、4、6、8、10及12 nmol/L)处理细胞;以12 nmol/L浓度处理后存活的DU145细胞作为PTX耐药细胞株(命名为DU145 R)、DU145细胞作为对照,采用细胞增殖检测(CCK8)法检测DU145和DU145 R细胞的细胞活力、光学显微镜下观察细胞核形态、实时荧光定量PCR(qPCR)法检测细胞多药耐药基因1(MDR 1)和c-Myc mRNA表达水平、Western blot法检测细胞MDR1和c-Myc蛋白表达水平。结果与DU145细胞比较,显微镜下观察发现DU145 R细胞核里有多核化现象,DU145 R细胞活力明显高于DU145细胞(P<0.01),MDR1及c-Myc mRNA和蛋白表达水平明显高于DU145细胞(P<0.01)。结论成功构建DU145 R细胞,该细胞MDR 1及c-Myc表达水平上调,对PTX耐药。

关键词：前列腺肿瘤前列腺癌细胞紫杉醇耐药多药耐药基因1 c-Myc

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基于OBE教育理念的分子生物学理论课程与实验课程的教学改革

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现代职业教育 2021年第33期 12-13页

作者：王碧张婷李渺柏松地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室贵州医科大学贵州理工学院

分子生物学理论课程与实验课程是生物技术或生物工程专业的基础课程,针对分子生物学理论课程与实验课程教学过程中出现的问题,将OBE教育理念引入该门课程的教学过程中,打破传统的教学模式,以充分激发学生的创新能力为教学改革目标,完善... 详细信息

分子生物学理论课程与实验课程是生物技术或生物工程专业的基础课程,针对分子生物学理论课程与实验课程教学过程中出现的问题,将OBE教育理念引入该门课程的教学过程中,打破传统的教学模式,以充分激发学生的创新能力为教学改革目标,完善基于OBE教育理念的教学内容、教学方式和教学评价体系的改革,提高教学质量。

关键词： OBE 分子生物学教学改革

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二十二碳六烯酸对甲基苯丙胺诱导的人神经母细胞瘤细胞神经毒性的影响

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中国医科大学学报 2021年第10期50卷 904-909页

作者：陈芳萍王琪郑丹官志忠楼迪栋贵州医科大学法医学院法医病理学教研室贵阳550004 贵阳市妇幼保健院围产期保健科贵阳550003 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室贵阳550004 贵州中医药大学基础医学院法医学教研室贵阳550025

目的探讨二十二碳六烯酸(DHA)对甲基苯丙胺(METH)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞神经毒性的作用及其作用机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为Control组、METH组以及METH+DHA组。显微镜下观察SH-SY5Y细胞形态,测量并计算细胞长轴和短... 详细信息

目的探讨二十二碳六烯酸(DHA)对甲基苯丙胺(METH)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞神经毒性的作用及其作用机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为Control组、METH组以及METH+DHA组。显微镜下观察SH-SY5Y细胞形态,测量并计算细胞长轴和短轴的比值,通过流式细胞术检测各组SH-SY5Y细胞凋亡水平。采用蛋白质组学分析METH引起的SH-SY5Y蛋白组改变,并筛选加入DHA后表达回调的蛋白。结果与Control组比较,METH组SH-SY5Y细胞神经突明显短缩,长轴与短轴比值减小(均P<0.05);与METH组比较,METH+DHA组神经突伸长,细胞长轴与短轴比值增大(均P<0.05)。与Control组比较,METH组早期细胞凋亡和晚期细胞凋亡比例升高,且总凋亡细胞比例也明显升高(均P<0.05);与METH组比较,METH+DHA组晚期细胞凋亡和总凋亡细胞比例降低(均P<0.05)。蛋白组学分析显示,加入DHA可以将22个METH诱导下表达变化的蛋白反向调节,涉及了核糖体、细胞骨架和谷胱甘肽代谢等生物学功能。结论DHA可减弱METH诱导的SH-SY5Y细胞神经毒性,其机制可能与DHA调控角蛋白表达,改善谷胱甘肽代谢等信号通路有关。

关键词：二十二碳六烯酸甲基苯丙胺 SH-SY5Y细胞蛋白质组学

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贵州省部分地区不同民族育龄人群地中海贫血基因检测结果分析研究

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中国优生与遗传杂志 2021年第9期29卷 1235-1241页

作者：朱晓西杨雪李广萍唐黛丽刘美金亚清王碧禹文峰贵阳市妇幼保健院贵州贵阳550003 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院贵州贵阳550004

目的分析贵州省部分地区不同民族育龄人群地中海贫血(简称地贫)基因类型携带情况,为各地区地贫预防和诊断提供参考依据。方法选取2016年1月到2019年4月于贵阳市妇幼保健院进行地贫基因检测的贵州省部分地区不同民族育龄人群样本,共27112... 详细信息

目的分析贵州省部分地区不同民族育龄人群地中海贫血(简称地贫)基因类型携带情况,为各地区地贫预防和诊断提供参考依据。方法选取2016年1月到2019年4月于贵阳市妇幼保健院进行地贫基因检测的贵州省部分地区不同民族育龄人群样本,共27112例,进行血常规检测和(或)血红蛋白电泳分析,初筛阳性样本进行地贫基因检测,表型阳性而未检出中国人已知突变基因型的样本进一步进行地贫基因测序分析。结果 27112例送检标本中,经血常规和(或)血红蛋白电泳分析共检出阳性样本9912例,总地贫筛查阳性率为36.56%;地贫筛查表型阳性样本经PCR结合反向点杂交(RDB)法检测,共检出4090例阳性,总地贫基因检出率为41.26%;地贫基因阳性样本中α-地贫基因携带者共计1892例,共有22种突变类型,主要以SEA杂合子、3.7杂合子和4.2杂合子为主,总突变率占83.03%,汉族与其他少数民族α-地贫基因型分布情况大致相同;地贫基因阳性样本中β-地贫基因携带者共计2052例,共有18种突变类型,主要以β17杂合子、β41-42杂合子和β654杂合子为主,总突变率占92.99%;地贫基因阳性样本中αβ-地贫基因携带者共计146例,共检出19种基因类型;9912例阳性结果中夫妇为同型地贫共127例,产前地贫基因检出中间型α-地贫11例,重型α-地贫5例,重型β-地贫9例,中重型或重型αβ-地贫3例,产前诊断阳性率为22.05%。结论贵州省部分地区不同民族育龄人群地贫基因型分布具有民族性和区域性等特点,初步了解贵州部分少数民族的地贫基因携带情况,有助于对该民族地贫危害性进行评估,为有效防控地贫提供基础数据。

关键词：地中海贫血基因检测育龄人群贵州少数民族

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YTHDF3对去势抵抗性前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用及机制

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贵州医科大学学报 2025年第5期 638-648页

作者：范道贵段娟娟彭煜晖陈萍萍谢欣曾红梅付文莉周宇姜依廷张婷吴昌学张启芳贵州医科大学基础医学院地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省医学分子生物学重点实验室贵州医科大学

目的探讨N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine, m6A)甲基化结合蛋白YTH域家族蛋白3(YTH domain family protein 3, YTHDF3)调控细胞周期蛋白依赖性激酶7(cyclin-dependent kinase 7, CDK7)表达对去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer, CRPC)细胞增殖及迁移、侵袭的影响及其机制。方法取对数生长期RWPE-1和DU145细胞，采用Western blot法检测2种细胞中YTHDF3蛋白的表达；取对数生长期DU145细胞，采用携带YTHDF3 shRNA的慢病毒构建沉默YTHDF3稳转细胞株(沉默YTHDF3组),相应的对照慢病毒构建对照细胞(对照组),采用CDK7 siRNA转染DU145细胞构建沉默CDK7组细胞株(沉默CDK7组),相应的对照构建对照细胞(对照组),采用CCK-8实验检测各组DU145细胞培养24、48及72 h时波长450 nm处的吸光度值；采用EdU增殖实验和Transwell实验检测各组DU145细胞增殖能力和迁移、侵袭能力；使用实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测各组DU145细胞中YTHDF3和CDK7 mRNA表达；采用流式细胞术检测各组DU145细胞的细胞周期；使用GEPIA分析正常前列腺组织和前列腺癌(prostate cancer, PCa)组织中CDK7的表达及PCa组织中YTHDF3和CDK7表达的相关性，使用human protein atlas (HPA)数据库中调取CDK7蛋白在正常前列腺组织和PCa组织中的表达，使用Kaplan-Meier Plotter制作CDK7表达高PCa患者和CDK7表达低PCa患者的生存曲线，使用SRAMP预测CDK7 mRNA序列上的潜在m6A位点；使用放线菌素D分别处理对照组和沉默YTHDF3组DU145细胞0、3、6及9 h,采用qPCR方法检测CDK7 mRNA的稳定性。结果 DU145细胞中YTHDF3的表达明显高于正常前列腺RWPE-1细胞(P<0.001);与对照组相比，沉默YTHDF3组DU145细胞中YTHDF3蛋白、CDK7蛋白及CDK mRNA的表达水平下降(P<0.001),细胞周期S期占比下降(P<0.001);与对照组相比较，沉默YTHDF3和CDK7组DU145细胞活力、增殖、迁移和侵袭能力下降(P<0.05);生物信息学分析和免疫组织化学结果显示，PCa组织中CDK7蛋白较正常前列腺组织高表达，SRAMP网站预测CDK7 mRNA有7个潜在m6A位点；与对照组相比，沉默YTHDF3组DU145细胞CDK7 mRNA的相对表达水平下降(P<0.05)。结论 YTHDF3可促进CRPC细胞的增殖、迁移及侵袭能力，其机制与调控CDK7 mRNA的稳定性有关。

关键词：前列腺肿瘤细胞增殖细胞迁移分析 YTH结构域的家族蛋白3 细胞周期蛋白依赖性激酶7

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过表达Seipin对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响

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贵州医科大学学报 2021年第4期46卷 387-391页

作者：胡玉梅任真奎郭冬芬刘颖吴昌学禹文峰贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 黔西南州人民医院检验科贵州兴义562400

目的构建Seipin过表达PC12细胞株,探讨Seipin过表达后PC12细胞的凋亡情况。方法将PC12细胞分为正常组(未经任何处理的PC12细胞)、阴性组(不带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC12细胞株)和过表达组(带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC1... 详细信息

目的构建Seipin过表达PC12细胞株,探讨Seipin过表达后PC12细胞的凋亡情况。方法将PC12细胞分为正常组(未经任何处理的PC12细胞)、阴性组(不带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC12细胞株)和过表达组(带Seipin过表达基因的慢病毒感染的PC12细胞株);进行相应处理后培养24 h,采用荧光显微镜观察红色荧光基因(慢病毒携带的Seipin基因和空载体都包含了红色荧光基因)在细胞中的表达,采用Real time PCR检测BSCL2 mRNA表达水平,Western blot检测凋亡相关蛋白BCL2-Associated X蛋白质(Bax)的表达水平;TUNEL染色观察细胞内断裂DNA情况。结果正常组未观察到红色荧光,阴性组和过表达组均出现红色荧光,感染效率>80%,提示成功构建Seipin过表达的PC12细胞株;Real time PCR结果显示,过表达组BSCL2 mRNA水平相较正常组和阴性组升高,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,过表达组Seipin蛋白表达水平高于正常组和阴性组、凋亡相关蛋白Bax低于正常组和阴性组,差异有统计学意义(P<0.01),TUNEL染色观察到过表达组细胞核荧光强度弱于正常组和阴性组。结论Seipin可能对PC12细胞有保护作用。

关键词：大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞慢病毒感染细胞凋亡 Seipin TUNEL

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PC12细胞氧糖剥夺不同时间段再灌注后内质网应激及细胞凋亡

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中国老年学杂志 2020年第6期40卷 1297-1301页

作者：郑菊刘雨霞张文萍吴昌学李毅齐晓岚官志忠肖雁贵州医科大学分子生物学重点实验室地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 赣南医学院赣南医学炎症与免疫中心贵州医科大学学报编辑部

目的观察大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12细胞)细胞氧糖剥夺(OGD)不同时间段再灌注(OGD/R)后内质网应激及凋亡的变化,探讨神经元OGD再灌注所致内质网应激与凋亡的关系。方法利用无糖DMEM及三气培养箱对PC12细胞进行OGD,不同时间段OGD后... 详细信息

目的观察大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12细胞)细胞氧糖剥夺(OGD)不同时间段再灌注(OGD/R)后内质网应激及凋亡的变化,探讨神经元OGD再灌注所致内质网应激与凋亡的关系。方法利用无糖DMEM及三气培养箱对PC12细胞进行OGD,不同时间段OGD后恢复正常培养24 h,根据不同OGD时间段,将细胞分为五组:control、3 h/24 h、6 h/24 h、9 h/24 h、12 h/24 h,OGD/R相应时间后,采用Western印迹检测内质网相关蛋白分子伴侣葡萄糖调节蛋白(GRP)78、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)及凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3的表达,免疫荧光方法检测GRP78蛋白的表达情况,并利用流式细胞仪检测凋亡率。结果 OGD/R后,与control组相比,6 h/24 h、9 h/24 h、12 h/24 h组细胞中GRP78蛋白及caspase-3蛋白的表达水平明显增加(P<0.01,P<0.05),而PERK蛋白在各组中无明显变化。用Spearman相关性分析结果显示,capase-3蛋白与GRP78蛋白表达水平成呈正相关(R=0.561,P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,与control组相比,各组的凋亡率明显增高(P<0.01)。结论 PC12细胞OGD/R后内质网应激及凋亡呈动态变化,且内质网应激蛋白GRP78与凋亡蛋白caspase-3的表达水平有关,这将对缺血再灌注后神经元损伤的研究具有一定的意义。

关键词： PC12细胞氧糖剥夺再灌注内质网应激凋亡

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