检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究 2025年

作者：卢永恒朱双赵飞艳艾福军刘艳洁董阳婷官志忠魏娜贵州医科大学临床医学院病理学教研室贵州医科大学附属医院病理科地方病与少数民族疾病(贵州医科大学)教育部重点实验室

背景：前期研究发现持续过量氟暴露导致的神经细胞受损与Ca2+超载有关，但Ca2+在细胞内各钙库之间的流动转换和细胞凋亡损伤的作用机制尚不明确。目的：探讨氟暴露对原代神经细胞线粒体相关内质网膜内Ca2+转运通道蛋白及细胞凋亡水平的... 详细信息

背景：前期研究发现持续过量氟暴露导致的神经细胞受损与Ca2+超载有关，但Ca2+在细胞内各钙库之间的流动转换和细胞凋亡损伤的作用机制尚不明确。目的：探讨氟暴露对原代神经细胞线粒体相关内质网膜内Ca2+转运通道蛋白及细胞凋亡水平的影响。方法：体外培养新生SD大鼠原代神经细胞，培养至第7天采用神经元核特异性抗体NeuN行免疫荧光染色鉴定。神经细胞按照加氟浓度分为对照组（含0 mmol/L氟化钠）、低氟组（含0.5 mmol/L氟化钠）、高氟组（含1 mmol/L氟化钠），氟暴露24 h后光镜下观察细胞形态变化；蛋白免疫印迹检测凋亡相关蛋白BAX/BCL-2和钙转移相关通路VDAC1、GRP75、IP3R蛋白表达；RT-PCR检测钙转移相关通路VDAC1、GRP75、IP3R mRNA表达；线粒体Ca2+探针Rhod-2AM检测Ca2+水平；线粒体膜电位试剂盒检测线粒体膜电位变化；流式细胞术、TUNEL染色法检测细胞凋亡水平。结果与结论：（1）培养至第7天的神经细胞经鉴定纯度可达90%以上，杂质少，生长状态良好，细胞网络连接紧密，达到后续实验要求；（2）与对照组相比，低氟组和高氟组神经细胞聚团生长增多，突起断裂，胞体圆缩，细胞之间连接网络被破坏；与低氟组相比，高氟组细胞损伤变化更为明显；（3）与对照组比较，低氟组和高氟组VDAC1、GRP75、IP3R蛋白表达上调（P <0.05），凋亡相关蛋白BAX/BCL-2比值升高（P<0.05）；与对照组相比，低氟组VDAC1、GRP75mRNA表达明显上调（P<0.05），高氟组VDAC1、GRP75、IP3RmRNA表达显著上调（P<0.01）；（4）氟暴露处理后细胞凋亡水平明显上升，且高氟组显著高于对照组和低氟组（P <0.01）；（5）氟暴露处理后神经细胞线粒体Ca2+浓度明显增加（P <0.05），线粒体膜电位下降（P <0.01），且高氟组损伤程度更为明显（P <0.05）。结果表明，氟暴露会损害原代神经细胞的形态结构，导致细胞内质网-线粒体间Ca2+转移通路蛋白表达上调，线粒体Ca2+超载，线粒体损伤，细胞凋亡水平升高。

关键词：氟暴露原代神经细胞 Ca 转移细胞凋亡线粒体膜电位线粒体损伤线粒体相关内质网膜钙转运通道

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基于标准化病人对基层医生“以患者为中心”医疗服务质量评估研究——以糖尿病为例

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中国卫生事业管理 2025年第2期42卷 150-154,222页

作者：张加才蔡毅媛徐东王晓辉廖婧卢芸贵州医科大学公共卫生与健康学院·环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳561113 贵州医科大学省部共建地方病及民族区域性疾病防控协同创新中心南方医科大学卫生管理学院卫生管理学系世界卫生组织研究中心南方医科大学皮肤病医院全球健康研究中心Acacia实施科学实验室兰州大学公共卫生学院中山大学公共卫生学院

目的:了解基层全科医生“以患者为中心”医疗服务质量现状及其影响因素,为完善基层医生“以患者为中心”医疗服务质量提供研究依据。方法:于2021年3月至2022年12月采用标准化病人法开展了现场调查,本次调查包括由来自194家基层医疗机构... 详细信息

目的:了解基层全科医生“以患者为中心”医疗服务质量现状及其影响因素,为完善基层医生“以患者为中心”医疗服务质量提供研究依据。方法:于2021年3月至2022年12月采用标准化病人法开展了现场调查,本次调查包括由来自194家基层医疗机构的194名医生和9名标准化病人产生的194条医患沟通数据。收集被调查机构医生人口统计特征及问诊信息。采用经汉化版的患者视角下以患者为中心评估量表进行评估,采用多重线性回归模型分析“以患者为中心”医疗服务质量的影响因素。结果:“以患者为中心”的平均得分为(2.75±0.51)分,“以患者为中心”程度总体较低。探索疾病经验维度的得分均值(2.41±0.58)最低;了解整体人维度得分均值(2.94±0.58)最高;增进医患关系维度和寻找共识维度的得分均值分别为(2.70±0.67)、(2.90±0.51)分。就诊时间中位数7.00(5.00,10.00)分钟,候诊时间中位数3.00(1.00,11.00)分钟,问诊条目中位数8.00(6.00,11.00)条。多重线性回归结果显示,问诊条目数、就诊时间、医生年龄、省份是“以患者为中心”医疗服务质量的影响因素(P<0.05)。结论:基层医生以“以患者为中心”医疗服务质量仍然有待进一步提升,建议加强对基层医生“以患者为中心”的专业培训,强调对患者的全面问诊。

关键词：基层全科医生标准化患者以患者为中心医疗服务质量

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APP N端在阿尔茨海默病病理中的多维调控作用及靶向治疗潜力

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贵州医科大学学报 2025年第3期50卷 313-324页

作者：谭俊陈江齐晓岚贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的病理过程涉及多个机制,包括β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)积聚、Tau蛋白磷酸化、神经炎症以及突触丧失。淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)作为Aβ的前体,APP N端不仅调控Aβ... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的病理过程涉及多个机制,包括β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)积聚、Tau蛋白磷酸化、神经炎症以及突触丧失。淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)作为Aβ的前体,APP N端不仅调控Aβ的生成,还在Tau病理、炎症反应和突触功能失调中扮演关键角色。APP N端由E1结构域、KPI域和AcD组成,调节多个病理通路,推动AD的进展。近年来研究揭示,APP N端的多功能性使其成为AD治疗的新兴靶点。靶向N端的策略,如6KApoE肽和AV-1959D疫苗,显示出在多靶点干预中的潜力,但仍面临血脑屏障穿透性和脱靶效应的挑战。未来的研究将聚焦APP N端在AD多病理网络中的作用,结合多组学技术、类器官模型及人工智能辅助药物设计,推动精准治疗策略的发展。

关键词：阿尔茨海默病 APP N端 Aβ生成 Tau病理靶向治疗

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利用免疫抑制小鼠模型检测真菌病毒对黄曲霉菌致病力影响

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微生物学报 2022年第5期62卷 1784-1794页

作者：杨碧刘翔田询禹文峰齐晓岚江银辉贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004

【目的】构建用于比较黄曲霉(Aspergillus flavus,***)菌株之间致病力差异的小鼠感染模型,并利用该模型评价真菌病毒AfPV1对宿主***致病力的影响。【方法】用不同浓度环磷酰胺腹腔注射Institute of Cancer Research(ICR)小鼠,根据白细... 详细信息

【目的】构建用于比较黄曲霉(Aspergillus flavus,***)菌株之间致病力差异的小鼠感染模型,并利用该模型评价真菌病毒AfPV1对宿主***致病力的影响。【方法】用不同浓度环磷酰胺腹腔注射Institute of Cancer Research(ICR)小鼠,根据白细胞的数量判断小鼠免疫抑制程度;通过滴鼻和尾静脉两种感染方法接种不同浓度的***孢子量,统计14 d以内小鼠的死亡率,确定***最佳的孢子接种量;通过小鼠组织的菌落负荷量以及肺部组织的病理观察,确定***感染是否成功;最后利用该小鼠模型评价真菌病毒AfPV1对寄主***致病力的影响。【结果】腹腔注射环磷酰胺的浓度为250 mg/kg时,能够达到免疫抑制水平;小鼠组织真菌负荷和病理组织切片观察显示***成功感染接种的ICR小鼠组织;在滴鼻接种模型中,***的孢子接种量为40μL(1×10^(6) CFU/mL)时比较合适评价***菌株之间的差异;在尾静脉接种的模型中,***的孢子接种量在50μL(1×10^(6) CFU/mL)比较合适评价***菌株之间的差异;病毒AfPV1能够引起***的致病力下降,但是不影响***在小鼠肺部的定殖量。【结论】本研究构建的小鼠感染模型能够评价***菌株之间致病力的差异;真菌病毒AfPV1的感染降低了宿主***的致病力。

关键词： Aspergillus flavus 真菌病毒免疫抑制小鼠感染模型尾静脉注射滴鼻接种

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外源性H_(2)S对血管性痴呆大鼠缺血再灌注后神经元线粒体损伤及其相关信号通路的影响

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中国老年学杂志 2023年第22期43卷 5547-5553页

作者：刘雨霞肖子宇郑菊张文萍齐晓岚吴昌学李毅官志忠肖雁地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州医科大学贵州贵阳550004

目的以二血管(2-VO)法制作血管性痴呆(VaD)大鼠模型,探讨神经元自噬及相关信号通路的变化及外源性硫化氢(H_(2)S)的神经保护作用。方法改良2-VO结扎SD大鼠双侧颈总动脉制作VaD模型,按缺血进程急性缺血期、缺血损伤期、损伤恢复期共设置1... 详细信息

目的以二血管(2-VO)法制作血管性痴呆(VaD)大鼠模型,探讨神经元自噬及相关信号通路的变化及外源性硫化氢(H_(2)S)的神经保护作用。方法改良2-VO结扎SD大鼠双侧颈总动脉制作VaD模型,按缺血进程急性缺血期、缺血损伤期、损伤恢复期共设置1、7、30 d 3个时间段,每个时间段各有假手术(Sham)组、模型(VaD)组、阳性对照[尼莫地平(Nimodipine)组、硫氢化钠(NaSH)低剂量(Low-NaSH)组、NaSH高剂量(High-NaSH)组。为保持药物处理时间一致,1 d及7 d,各组术前灌胃给药30 d,30 d各组术后灌胃给药30 d,VaD组和Sham组生理盐水灌胃,Nimodipine组Nimodipine灌胃给药,Low-NaSH组、High-NaSH组NaSH灌胃给药。利用水迷宫检测30 d各组学习记忆能力。Western印迹检测海马神经元线粒体蛋白中Beclin1、P62、蛋白激酶B(Akt)、P-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、P-mTOR表达。结果术后1 d,与Sham组比较,VaD组Beclin1、P-Akt、P-mTOR表达显著降低;与VaD组比较,不同剂量NaSH组Beclin1表达显著降低,Nimodipine组及不同剂量NaSH组P-Akt表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。术后7 d,与Sham组比较,VaD组P62、P-Akt、P-mTOR表达显著降低,Beclin1表达显著升高;与VaD组比较,Nimodipine组及不同剂量NaSH组P62表达显著升高、Beclin1表达显著降低,不同剂量NaSH组P-Akt表达显著升高,High-NaSH组P-mTOR表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。术后30 d,与Sham组比较,VaD组Beclin1、P62表达显著升高,P-mTOR、P-Akt表达显著降低;与VaD组比较,Nimodipine组及不同剂量NaSH组Beclin1、P62表达显著降低,P-mTOR、P-Akt表达显著升高;与Low-NaSH组比较,High-NaSH组Beclin1、P62表达显著降低,P-mTOR、P-Akt表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论缺血再灌注会导致神经细胞线粒体功能受损,且引发线粒体自噬,外源性H_(2)S可减轻VaD大鼠海马神经元线粒体自噬程度并保护线粒体功能,从而改善VaD大鼠学习记忆功能,推测其保护作用是通过上调磷脂酰肌醇3蛋白激酶(PI3K)/Akt/mTOR信号通路实现的。

关键词：血管性痴呆线粒体自噬硫化氢氧化应激蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)

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贵州壮侗语族7个少数民族21个Y-SNP多态性

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中山大学学报（自然科学版） 2020年第1期59卷 125-132页

作者：张秀秀喻艳琴田薇张婷王婵娟单可人何燕地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室/贵州医科大学贵州贵阳550004 贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

调查贵州壮侗语族7个少数民族(水族、布依族、侗族、仡佬族、壮族、毛南族、仫佬族)人群Y染色体上21个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点的遗传多态性,并探讨该人群与其他民族以及其他语族之间的遗传关系。采用SN... 详细信息

调查贵州壮侗语族7个少数民族(水族、布依族、侗族、仡佬族、壮族、毛南族、仫佬族)人群Y染色体上21个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点的遗传多态性,并探讨该人群与其他民族以及其他语族之间的遗传关系。采用SNapShot法对445例贵州壮侗语族7个少数民族男性个体21个Y-SNP位点进行复合扩增检测,用直接计数法计算等位基因频率、单倍型频率与单倍群频率,运用SPSS 24软件进行主成分分析。在贵州水族、布依族、侗族、仡佬族、壮族、毛南族和仫佬族中,21个Y-SNP组成的单倍型多态性值(haplotype diversity,HD)分别为0.5977、0.9456、0.8856、0.8869、0.7686、0.3587和0.7078;与已报道的其他9个民族人群单倍群分布频率进行主成分分析,壮侗语族与苗瑶语族聚在一起。从父系遗传角度分析,壮侗语族与苗瑶语族亲缘关系较近。

关键词：壮侗语族 Y染色体单核苷酸多态性遗传多态性贵州

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正常与氧糖剥夺再复氧培养的星形胶质细胞来源外泌体miRNA测序分析

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中国生物化学与分子生物学报 2022年第3期38卷 356-364页

作者：龙培艳张文萍郑菊付燕林高霄王正薇肖雁地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵阳550004

本研究通过高通量测序技术,分析正常培养和氧糖剥夺再复氧(oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)培养星形胶质细胞来源外泌体的差异微小RNA(microRNA,miRNA)。采用超速离心法提取正常组和OGD/R组星形胶质细胞培养基上... 详细信息

本研究通过高通量测序技术,分析正常培养和氧糖剥夺再复氧(oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)培养星形胶质细胞来源外泌体的差异微小RNA(microRNA,miRNA)。采用超速离心法提取正常组和OGD/R组星形胶质细胞培养基上清的外泌体,透射电镜观察到提取的外泌体呈典型囊泡状,包膜完整,含有低电子密度的物质;纳米颗粒追踪技术(NTA)检测到星形胶质细胞外泌体大小为100.5±31.1 nm,占比为96.8%;免疫印迹检测显示,提取物中有外泌体标志性蛋白肿瘤易感蛋白(tumour-susceptibility protein,TSG101)、热休克蛋白60(heat shock proteins 60,Hsp60)、ALG-2相互作用蛋白X(ALG-2-interacting protein X,ALIX)的表达。与正常组相比,OGD/R组共有41个miRNA发生显著改变,其中20个miRNA显著升高,21个miRNA显著降低(P<0.05)。基因本体功能(GO)分析显示,差异靶基因主要参与蛋白质糖基化、脂质代谢过程、磷酸化作用、高尔基体、内质网、内吞体、细胞质囊泡和细胞突起等生物学过程;京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析发现,差异靶基因主要与丁酸代谢、β-丙氨酸代谢、脂肪酸降解、线粒体自噬和P53信号通路等代谢途径和信号通路有关。通过对正常组和OGD/R组的星形胶质细胞来源的外泌体miRNA测序并进一步施行靶基因功能富集分析,为后续研究星形胶质细胞外泌体对氧糖剥夺再灌注神经元发挥的保护作用的具体机制提供了一定的研究基础。

关键词：氧糖剥夺再灌注星形胶质细胞外泌体高通量测序技术微小RNA

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亚慢性氟中毒大鼠脑组织RAGE/p38MAPK/NF-κB信号通路的变化及银杏叶提取物和RAGE阻断剂的保护作用

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环境与职业医学 2023年第5期40卷 577-582页

作者：梁秋哲李红梅邓婕张婷马彦琳张凯琳贵州医科大学基础医学院贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室/贵州省分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

[背景]长期摄入过量的氟会蓄积在脑组织中并造成神经损伤和学习记忆能力的衰退,晚期糖基化终产物受体(RAGE)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)/核因子κB(NF-κB)信号通路是其中的重要机制。[目的]研究亚慢性氟中毒大鼠脑组织RAGE/p38MAP... 详细信息

[背景]长期摄入过量的氟会蓄积在脑组织中并造成神经损伤和学习记忆能力的衰退,晚期糖基化终产物受体(RAGE)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)/核因子κB(NF-κB)信号通路是其中的重要机制。[目的]研究亚慢性氟中毒大鼠脑组织RAGE/p38MAPK/NF-κB信号通路的改变,并探讨银杏叶提取物(EGb761)和RAGE阻断剂(FPS-ZM1)对神经记忆能力的保护作用。[方法]选择雄性清洁级SD大鼠90只,将其分为9组,每组10只,造模周期6个月。分别为对照组(C组):自由饮用自来水(含氟量<0.5 mg·L^(−1)),低、高剂量染氟组(LF、HF组):分别自由饮用含氟量为10、50 mg·L^(−1)的自来水;银杏叶提取物干预组(CE、LFE、HFE组):在C、LF、HF组的基础上,每天给予100 mg·kg^(−1)·d^(−1)EGb761灌胃;FPS-ZM1干预组(CF、LFF、HFF组):在C、LF、HF组的基础上,造模结束前7 d每天腹腔注射1 mg·kg^(−1)·d^(−1)FPS-ZM1。检测各组大鼠的脑氟和血氟含量;水迷宫实验检测各组学习记忆能力;尼氏染色检测各组大鼠海马的病理形态学改变;蛋白免疫印迹法检测脑组织中RAGE及其配体高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、NF-κB、p38MAPK、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白的表达水平;实时荧光定量PCR法检测RAGE、HMGB1、p38MAPK的mRNA表达水平。[结果]与C组血氟、脑氟相比,LF、HF组大鼠的血氟、脑氟含量均增加(P均<0.05)。水迷宫实验结果显示,与C组相比,LF组、HF组的逃避潜伏时间延长,穿越次数减少;与HF组相比,HFE组和HFF组的逃避潜伏时间缩短,穿越次数增加(P均<0.05)。尼氏染色结果显示,与C组相比,HF组尼氏体数量减少;与HF组相比,HFE组和HFF组尼氏体数量增加。Western blotting结果显示:与C组RAGE、HMGB1、NF-κB、p38MAPK、p-p38MAPK、IL-6、TNF-α蛋白相对表达量相比,LF组RAGE、HMGB1、NF-κB、p-p38MAPK、IL-6和HF组的RAGE、HMGB1、NF-κB、p38MAPK、p-p38MAPK、IL-6、TNF-α上调(P均<0.05);与HF组相比,HFE组、HFF组的RAGE、HMGB1、NF-κB、p38MAPK、p-p38MAPK、IL-6、TNF-α蛋白相对表达量均下调(P均<0.05);与LF组RAGE、HMGB1蛋白相对表达量相比,LFE组和LFF组均下调(P均<0.05)。实时荧光定量PCR法结果显示:与C组相比,LF、HF组RAGE、HMGB1的mRNA表达水平上调;与LF组相比,LFE组、LFF组的RAGE的mRNA表达水平下调;与HF组相比,HFE组、HFF组的RAGE、HMGB1的mRNA表达水平下调(P均<0.05)。[结论]亚慢性氟中毒引起的中枢神经系统损伤可能与RAGE/p38-MAPK/NF-κB信号通路激活有关,可损害大鼠的学习记忆能力,而EGb761和FPS-ZM1可能对神经损伤有一定的保护作用。

关键词：亚慢性氟中毒脑组织晚期糖基化终产物受体银杏叶提取物阻断剂

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幽门螺杆菌CagA对胃上皮细胞线粒体功能的影响

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中国病原生物学杂志 2021年第2期16卷 155-160页

作者：陈定宇何小凤张瑜赵艳王琴容周建奖谢渊贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

目的评价幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)细胞毒素相关蛋白CagA对胃上皮细胞线粒体功能的影响。方法用CagA基因失活突变Hp菌株(1004Hp△cagA)和野生型1004Hp菌株分别感染人胃上皮细胞GES-1和AGS 24 h,收集标本。Western blot检测各... 详细信息

目的评价幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)细胞毒素相关蛋白CagA对胃上皮细胞线粒体功能的影响。方法用CagA基因失活突变Hp菌株(1004Hp△cagA)和野生型1004Hp菌株分别感染人胃上皮细胞GES-1和AGS 24 h,收集标本。Western blot检测各组细胞中CagA蛋白、线粒体融合分裂蛋白Mfn1、Mfn2、Fis1和Drp1的表达情况;加入JC-1荧光探针后,荧光显微镜观察各组细胞线粒体膜电位变化;ATP检测试剂盒检测各组细胞中ATP生成水平的变化。结果Western blot鉴定显示野生型1004Hp中有CagA的表达,而1004Hp△cagA无CagA的表达。1004Hp感染组与1004Hp△cagA感染组比较,线粒体融合蛋白Mfn1、Mfn2表达下降(P<0.05),线粒体分裂蛋白Fis1、Drp1表达上升(P<0.05),线粒体膜电位下降,且在GES-1和AGS两株细胞结果一致。1004Hp感染组和1004Hp△cagA中AGS和GES-1细胞ATP相对生成量分别为0.30±0.03、0.64±0.04和0.64±0.01、1.23±0.19,AGS中1004 Hp感染组较1004 Hp△cagA感染组ATP生成水平下降53.1%,GES-1中1004 Hp感染组较1004 Hp△cagA感染组ATP生成水平下降48.0%(P<0.05)。结论Hp/cagA影响线粒体动态平衡,诱发功能障碍,可能是Hp引起胃部病理变化的原因之一。

关键词：幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白CagA 线粒体融合线粒体分裂线粒体膜电位

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外源性H_(2)S对氧糖剥夺再灌注后SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

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西安交通大学学报（医学版） 2021年第5期42卷 659-665页

作者：吴昌学董艳军黄赟肖子宇李毅齐晓岚官志忠肖雁地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州省人民医院贵州贵阳550004

目的探讨外源性硫化氢(H_(2)S)对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)后SH-SY5Y细胞损伤的保护作用。方法建立SH-SY5Y细胞OGD/R模型,SH-SY5Y细胞分为对照组、OGD/R模型组、OGD/R+不同浓度NaHS(H_(2)S供体)处理组;OGD/R制备:用不含血清的低糖DMEM培养... 详细信息

目的探讨外源性硫化氢(H_(2)S)对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)后SH-SY5Y细胞损伤的保护作用。方法建立SH-SY5Y细胞OGD/R模型,SH-SY5Y细胞分为对照组、OGD/R模型组、OGD/R+不同浓度NaHS(H_(2)S供体)处理组;OGD/R制备:用不含血清的低糖DMEM培养基在37℃、930 mL/L N_(2)、20 mL/L O_(2)的低氧条件下培养各组细胞12 h,然后用完全培养液复氧培养24 h。采用CCK-8检测存活率,流式细胞技术检测细胞凋亡水平,蛋白印迹方法(Western blotting)检测细胞中内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及NF-κBP65、COX-2蛋白表达水平。结果OGD/R模型组SH-SY5Y细胞活性较对照组降低(P<0.05)。0~0.5 mmol/L浓度的NaHS处理组细胞活性随着给予NaHS浓度的增加较OGD/R模型组逐渐升高(P<0.05),超过这个浓度范围,细胞活性较OGD/R模型组降低(P<0.05)。模型组细胞的早期凋亡水平均显著高于对照组(P<0.05)。0.2、0.4 mmol/L NaHS处理组细胞的早期凋亡水平较OGD/R模型组显著降低、4 mmol/L NaHS处理组细胞的早期凋亡水平较OGD/R模型组显著升高(P<0.05);Western blotting检测结果显示,OGD/R模型组细胞的GRP78、CHOP、NF-κBp65及COX-2蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05);与OGD/R模型组比较,0.2、0.4、4 mmol/L浓度NaHS处理组细胞的GRP78、CHOP、NF-κBp65及COX-2表达水平显著降低(P<0.05),但各剂量组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论NaHS可以提高经OGD/R损伤后细胞的活性,可能是通过抑制内质网应激诱导的NF-κBp65、COX-2蛋白的激活从而减少细胞凋亡水平来实现。

关键词：血管性痴呆硫化氢核转录因子-κB 凋亡

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