检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2020年第3期45卷 255-259页

作者：吕菊谢鹏任真奎胡玉梅张春林吴昌学焦玲禹文峰贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 黔西南州人民医院检验科贵州兴义562400 贵州医科大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州医科大学附院神经内科贵州贵阳550004

目的:探讨Seipin敲低对肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞凋亡的影响及其相关机制,初步探索Seipin敲低在帕金森病(PD)模型中的可能调控机制。方法:对细胞给予不同浓度的6-羟多巴胺(6-OHDA,0、25、50、75、100及125μmol/L)处理,用CCK8法检测... 详细信息

目的:探讨Seipin敲低对肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞凋亡的影响及其相关机制,初步探索Seipin敲低在帕金森病(PD)模型中的可能调控机制。方法:对细胞给予不同浓度的6-羟多巴胺(6-OHDA,0、25、50、75、100及125μmol/L)处理,用CCK8法检测细胞活性筛选6-OHDA最佳造模浓度;选取阴性对照细胞和Seipin敲低细胞分别用6-OHDA诱导体外PD模型作为阴性模型组和Seipin模型组,同时设阴性正常组和Seipin正常组;4组细胞培养18 h时,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测内质网应激(ERS)蛋白(GRP78和CHOP)和凋亡相关蛋白Bax水平。结果:CCK8法检测细胞活性,6-OHDA最适作用浓度为75μmol/L;Western blot结果显示,与阴性正常组比较,阴性模型组、Seipin模型组GRP78、CHOP及Bax蛋白水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);而与阴性模型组相比,Seipin模型组GRP78、CHOP及Bax蛋白水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:敲低Seipin诱导细胞凋亡可能涉及ERS蛋白的增加,敲低Seipin后导致6-OHDA诱导的细胞凋亡更加严重。

关键词：羟多巴胺 PC12细胞帕金森病细胞凋亡内质网应激 Seipin蛋白

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激活原代星形胶质细胞α7尼古丁胆碱能受体对PI3K/Akt/HSP70信号通路的影响

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中国老年学杂志 2019年第22期39卷 5577-5581页

作者：董智慧吕菊谢鹏任真奎官志忠禹文峰贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 黔西南州人民医院检验科贵州医科大学病理学教研室

目的研究尼古丁激活星形胶质细胞α7尼古丁胆碱能受体(nAChR)对热休克蛋白(HSP)70表达的影响,探讨激活α7nAChR对阿尔茨海默病(AD)的神经保护作用及其机制。方法从刚出24 h内的小鼠的大脑皮质中分离出原代星形胶质细胞,培养并进行细胞... 详细信息

目的研究尼古丁激活星形胶质细胞α7尼古丁胆碱能受体(nAChR)对热休克蛋白(HSP)70表达的影响,探讨激活α7nAChR对阿尔茨海默病(AD)的神经保护作用及其机制。方法从刚出24 h内的小鼠的大脑皮质中分离出原代星形胶质细胞,培养并进行细胞纯度鉴定。将培养好的星形胶质细胞分为空白对照组、尼古丁组、α7nAChR阻断剂MLA组、MLA+尼古丁组、PI3K/Akt信号通路阻断剂LY294002组和LY294002+尼古丁组。用Western印迹法检测细胞内HSP70及P-Akt蛋白的表达情况。结果与对照组相比,尼古丁组中HSP70的表达水平显著升高(P<0.01);与尼古丁组相比,MLA+尼古丁组中HSP70蛋白表达水平受到明显抑制(P<0.05);LY294002+尼古丁组中HSP70蛋白表达水平明显受到抑制(P<0.05);且尼古丁可以显著上调P-Akt蛋白水平(P<0.05),该上调效应能被MLA或LY294002抑制(P<0.05)。结论尼古丁激活星形胶质细胞α7nAChRs,可通过PI3K/Akt信号通路上调HSP70蛋白表达水平。

关键词：阿尔茨海默病 α7尼古丁胆碱能受体热休克蛋白70 星形胶质细胞

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仙茅苷对阿尔茨海默病大鼠行为学及海马神经元凋亡的影响

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中国临床药理学杂志 2019年第7期35卷 654-656+670页

作者：李若淳曾明燕苏艳丽吴昌学贵阳护理职业学院检验系贵阳中医学院第二附属医院内分泌科贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室

目的探讨仙茅苷对阿尔茨海默病大鼠行为学及海马神经元凋亡的影响。方法将60只老年健康雄性SD大鼠腹腔注射D-半乳糖60 mg·kg-1,qd（连续6周）联合海马注射β-样淀粉蛋白25-35（Aβ25-35） 4 mmol·L-1,qd（第7周）,构建阿尔茨... 详细信息

目的探讨仙茅苷对阿尔茨海默病大鼠行为学及海马神经元凋亡的影响。方法将60只老年健康雄性SD大鼠腹腔注射D-半乳糖60 mg·kg-1,qd（连续6周）联合海马注射β-样淀粉蛋白25-35（Aβ25-35） 4 mmol·L-1,qd（第7周）,构建阿尔茨海默病大鼠模型,并随机分为4组:低、中、高剂量实验组（建模期间予以灌胃仙茅苷24,48,72 mg·kg-1,qd）,模型组（建模期间予以灌胃等量0. 9%Na Cl）;另选15只老年健康雄性SD大鼠灌胃等量0. 9%Na Cl作为对照组。用Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆功能,用苏木精-伊红（HE）染色及细胞凋亡原位检测（TUNEL）法分别观察海马区神经元凋亡情况。结果对照组、模型组及低、中、高剂量实验组大鼠穿台次数分别为（15. 12±1. 78）,（5. 03±1. 17）,（7. 45±1. 36）,（9. 79±1. 21）和（12. 33±1. 09）次,模型组分别与低、中、高剂量实验组比较,差异均有统计学意义（均P <0. 05）;海马神经元凋亡比例分别（8. 42±2. 13）%,（69. 78±9. 97）%,（38. 14±8. 62）%,（24. 77±5. 43）%和（10. 02±1. 46）%,模型组分别与低、中、高剂量实验组比较,差异均有统计学意义（均P <0. 01）。结论仙茅苷可缓解海马神经元损伤,抑制海马神经元凋亡。

关键词：阿尔茨海默病仙茅苷海马神经元凋亡

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RUNX3基因在急性髓系白血病中的表达及预后意义

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现代生物医学进展 2020年第2期20卷 313-318,323页

作者：杨小燕李鹏吴西军吴昌学庹媛媛李燕杨红兰潘海新何志旭贵州医科大学附属医院儿科贵州贵阳550004 贵阳市公共卫生救治中心贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州贵阳550004 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004

目的:探讨RUNX3(Runx transcription factors-3)在急性髓系白血病中的表达及临床预后意义。方法:利用GEPIA和UALCAN数据库分析RUNX3在急性髓系白血病以及各亚型中mRNA表达情况。对癌症基因组图谱(The cancer genomeatlas,TCGA)公共数据... 详细信息

目的:探讨RUNX3(Runx transcription factors-3)在急性髓系白血病中的表达及临床预后意义。方法:利用GEPIA和UALCAN数据库分析RUNX3在急性髓系白血病以及各亚型中mRNA表达情况。对癌症基因组图谱(The cancer genomeatlas,TCGA)公共数据集中AML RNA-Seq数据采用Kaplan-Meier Plotter法对AML患者总生存期进行分析。利用UALCAN和String数据库对RUNX3相关基因及其蛋白互作网络和参与的生物学过程进行分析。结果:与正常外周血样本相比,RUNX3在急性髓系白血病患者外周血样本中高表达。在AML各亚型中,RUNX3在M0和M6中表达最高,在M4和M5中表达最低。RUNX3高表达的患者总生存期短(P=0.038)。此外,本研究发现,与RUNX3主要相互作用的蛋白是NOTCH1(P=0,R=0.62),PRF1(P=0,R=0.6),GZMB(P=1.7e-06,R=0.46)。主要参与的生物学过程有细胞黏附、小GTP酶介导的信号转导通路以及造血生成过程(P=0.0202)等。结论:RUNX3在AML中高表达,且在各亚型中表达水平存在差异。RUNX3高表达的AML患者预后较差。该研究为深入研究RUNX3在AML发生发展中的作用提供重要理论依据。

关键词：急性髓系白血病 RUNX3基因表达预后

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PNU282987通过α7神经型尼古丁受体激活PI3K/Akt/HSF1信号通路上调星形胶质细胞内源性αB-crystallin抑制Aβ聚集的研究

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中国药理学与毒理学杂志 2019年第6期33卷 475-476页

作者：任真奎董智慧吕菊谢鹏胡玉梅官志忠禹文峰贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院病理科贵州贵阳550004 黔西南州人民医院检验科贵州兴义562400

目的β-淀粉样蛋白(Aβ)的异常聚集,导致细胞外老年斑和细胞内神经原纤维缠结的形成,从而引发的细胞毒性诱导神经元凋亡,导致渐进性认知功能障碍的临床表现,是阿尔茨海默病(AD)常见发病机制之一。因此,我们研究PNU282987激活SD新生乳鼠... 详细信息

目的β-淀粉样蛋白(Aβ)的异常聚集,导致细胞外老年斑和细胞内神经原纤维缠结的形成,从而引发的细胞毒性诱导神经元凋亡,导致渐进性认知功能障碍的临床表现,是阿尔茨海默病(AD)常见发病机制之一。因此,我们研究PNU282987激活SD新生乳鼠大脑皮质星形胶质细胞α7尼古丁乙酰胆碱能受体(n ACh R)后通过PI3K/Akt/HSF1信号通路介导内源性αB-crystallin(Cryab)对Aβ聚集的影响。方法分离出生24 h内SD乳鼠皮质层的星形胶质细胞进行培养、纯化、并传代,通过细胞免疫荧光的方法对星形胶质细胞进行鉴定;体外制备Aβ1-42寡聚体并进行鉴定;将细胞分为空白对照组、MLA处理组、PNU282987处理组、PNU282987+MLA处理组、LY294002处理组、PNU282987+LY294002处理组、Aβ处理组、PNU282987+Aβ处理组、PNU282987+LY294002+Aβ处理组及HSF1敲低组。收集细胞总蛋白,通过Western蛋白印迹法检测p-Akt,Cryab,HSF1和Aβ的蛋白表达水平。结果细胞免疫荧光鉴定显示培养的原代星形胶质细胞占总细胞98%以上;Western蛋白印迹法对细胞中Cryab,p-Akt,HSF1和Aβ表达水平的结果显示:与空白对照组相比较,PNU282987处理后,Cryab,p-Akt,HSF1蛋白都表现出上升的趋势(P<0.05),而单独MLA组或LY294002组无明显差异;在HSF1敲低组,PNU282987上调Cryab的作用受到明显的抑制;正常对照组未检测到Aβ的表达,与Aβ组相比,PNU282987组的Aβ表达降低(P<0.05);与PNU282987+Aβ组相比,PNU282987+LY294002+Aβ组的Aβ表达升高(P<0.01)。结论在原代星形胶质细胞模型上,PNU282987可通过激活星形胶质细胞的α7 n ACh R介导HSF1上调内源性Cryab从而抑制Aβ集聚,PI3K/Akt信号通路很可能是这个过程中的重要参与因素,为探讨Cryab和HSF1可能是治疗AD的一个潜在靶点提供了一定的基础研究。

关键词：阿尔茨海默病星形胶质细胞 Cryab HSF1 α7尼古丁乙酰胆碱能受体

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PEG介导黄曲霉菌的遗传转化体系

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贵州医科大学学报 2019年第12期44卷 1390-1394页

作者：江银辉杨碧吴昌学周建奖贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室

目的:以吡啶硫胺抗性基因(ptrA)为筛选标记基因,建立黄曲菌遗传转化体系。方法:通过黄曲霉菌对潮霉素B(Hyg)、新霉素(G418)和嘧啶磺胺素(PT)的敏感性实验获得适合黄曲霉菌遗传转化筛选抗生素,用酶解的方法获得黄曲霉菌的原生质体;采用... 详细信息

目的:以吡啶硫胺抗性基因(ptrA)为筛选标记基因,建立黄曲菌遗传转化体系。方法:通过黄曲霉菌对潮霉素B(Hyg)、新霉素(G418)和嘧啶磺胺素(PT)的敏感性实验获得适合黄曲霉菌遗传转化筛选抗生素,用酶解的方法获得黄曲霉菌的原生质体;采用聚乙二醇(PEG)介导黄曲霉菌原生质体转化法,将携带ptrA的质粒pPTRI整合到黄曲菌株LD-F基因组DNA中,随机挑选7个转化子,通过聚合酶链反应(PCR)方法进行检测,验证ptrA是否整合到黄曲菌基因组DNA中。结果:0.2 mg/L PT可以完全抑制黄曲霉菌的菌丝生长,1%溶壁酶+1%纤维素酶+1%蜗牛酶处理黄曲霉菌丝2 h可得到大量的原生质体;PCR检测结果显示,质粒pPTRI能够成功整合到黄曲菌基因组。结论:以PT为抗性筛选,建立PEG介导黄曲霉菌的遗传转化体系。

关键词：黄曲霉菌吡啶磺胺素 PEG介导原生质体遗传转化

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ITGAM基因在急性髓细胞白血病中的表达及临床意义

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贵州医科大学学报 2020年第7期45卷 786-791,838页

作者：张太海金皎黄璟李鹏吴西军吴昌学马健娟庹媛媛李燕杨红兰潘海新杨小燕铜仁市人民医院儿科贵州铜仁554300 贵州医科大学附属医院&贵州省儿童医学中心儿童血液肿瘤科贵州贵阳550004 贵阳市公共卫生救治中心贵州贵阳550004 贵州医科大学干细胞与组织工程实验中心贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室&地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004

目的:探讨整合素αM(ITGAM)基因在急性髓细胞白血病(AML)中的表达及临床意义。方法:利用CELL数据库获取临床常见血液肿瘤性疾病数据,并分析ITGAM在不同血液肿瘤中的表达情况;利用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)数据库获得AML组173例和... 详细信息

目的:探讨整合素αM(ITGAM)基因在急性髓细胞白血病(AML)中的表达及临床意义。方法:利用CELL数据库获取临床常见血液肿瘤性疾病数据,并分析ITGAM在不同血液肿瘤中的表达情况;利用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)数据库获得AML组173例和健康对照组70例的资料,比较2组对象间ITGAM mRNA表达的差异,同时将AML组分为高表达组(高于均值)53例和低表达组(低于均值)53例、分析AML患者ITGAM表达量与其总体生存率(OS)的相关性;利用UALCAN数据库获得AML患者样本171例,分析ITGAM在M0~M7中的表达情况;利用Bloodspot数据库获得AML患者样本172例,分析ITGAM在不同基因突变或染色体异常患者中的表达,同时将AML患者分为ITGAM mRNA高表达组(高于中位数)86例和低表达组(低于中位数)86例进行生存分析。结果:与健康对照组相比,ITGAM在AML患者中表达增高(P<0.05);ITGAM在不同亚型AML中表达水平存在差异,M5中表达最高、M3中表达最低;其中,M4、M5分别与M0比较,M3、M4、M5分别与M1比较,M4、M5分别与M2比较,M4、M5、M7分别与M3比较,ITGAM基因表达差异有统计学意义(P<0.05),ITGAM在AML t(11q23)/MLL中表达最高、在AML t(15;17)中表达最低,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);ITGAM在伴有Cepba+_NPM1-_FLT3+突变的AML患者中表达较低,在Cepba-_NPM1-_FLT3-和Cepba-_NPM1+_FLT3-AML患者中表达最高;Kaplan-Meier分析结果表明,ITGAM基因表达与AML患者生存有相关性,高表达ITGAM的AML患者预后差(P=0.024,P=0.008)。结论:ITGAM基因在AML患者样本中呈高表达,且ITGAM高表达的AML患者OS差,该基因对预测AML患者预后有一定的临床应用价值。

关键词：白血病,髓样,急性基因表达 ITGAM基因总体生存率临床意义

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人肠道来源样品中肺炎克雷伯菌的分离及特征研究

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贵州医科大学学报 2019年第12期44卷 1377-1382页

作者：洪伟钱声艳吴昌学饶凤琴程玉梅张婷齐晓岚禹文峰官志忠贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附院ICU 贵州贵阳550004

目的:了解重症监护病房(ICU)肠道来源样品(粪便)中肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,Kp)携带情况及其特征。方法:采用哥伦比亚培养基分离粪便样品中的肺炎克雷伯菌,对其进行16S rDNA测序并构建发育进化树;使用稀释平板法,参照CLSI(20... 详细信息

目的:了解重症监护病房(ICU)肠道来源样品(粪便)中肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,Kp)携带情况及其特征。方法:采用哥伦比亚培养基分离粪便样品中的肺炎克雷伯菌,对其进行16S rDNA测序并构建发育进化树;使用稀释平板法,参照CLSI(2017)标准测定分离的肺炎克雷伯菌对肠道感染常用抗生素耐药性。结果:共收集粪便样本54份,从中分离到14株肺炎克雷伯菌(携带率为26%);14株肺炎克雷伯菌与欧、美菌株亲缘关系较远,与亚洲肺炎克雷伯菌(Klebsiella singaporensis strain LX3)亲缘关系较近,14株肺炎克雷伯菌聚为2个分支;抗生素耐药性检测结果表明,14株菌株对红霉素、克拉霉素、链霉素、四环素、氯霉素、阿莫西林、甲砜霉素、甲硝唑和克林霉素耐药率为100%,仅对诺氟沙星不耐药(耐药率为0%)。结论:贵州ICU病人粪便分离的14株肺炎克雷伯菌与亚洲株亲缘关系较近,且对肠道感染常用抗生素具有较强耐药性,仅对诺氟沙星不耐药。

关键词：重症监护病房粪便标本肺炎克雷伯进化地位耐药性

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人肠道来源大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因突变株的构建

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贵州医科大学学报 2019年第12期44卷 1370-1376页

作者：洪伟赵行行吴昌学饶凤琴程玉梅张婷齐晓岚禹文峰官志忠贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附院ICU 贵州贵阳550004

目的:使用嗜热二型内含子基因失活系统(Thermotargetron)失活人肠道来源大肠杆菌(HSM174 DE3)β-半乳糖苷酶基因(LacZ),构建lacZ失活突变株。方法:使用分子克隆方法,构建lacZ基因失活质粒pHK-TT1A-lacZ426a、pHK-TT1A-lacZ1879a、pHK-TT1A-lacZ1880a及pHK-TT1A-lacZ1155s,将基因失活质粒转化大肠杆菌HSM174菌株(*** HSM174),转化子培养时提高温度至48℃,诱导TeI3c/4c二型内含子“归巢”活性,采用蓝白斑及PCR筛选lacZ基因失活突变株。结果:随机挑选20株克隆菌株的PCR结果显示,lacZ426a、lacZ1879a、lacZ1880a及lacZ1155s基因失活效率分别为60%、75%、60%及75%;白斑克隆基因失活效率为100%。结论:Thermotargetron系统可高效的实现*** HSM 174菌株lacZ基因失活,并可能具有在中温菌中广泛应用的潜力。

关键词：基因失活系统二型内含子大肠杆菌 β-半乳糖苷酶基因基因失活质粒分子克隆

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外源性H_2S对血管性痴呆大鼠海马MDA、SOD、Cyt C表达的影响

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贵州医科大学学报 2019年第4期44卷 393-398,405页

作者：刘雨霞郑菊肖子宇张文萍李毅吴昌学官志忠肖雁贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学

目的:探讨外源性硫化氢(H_2S)对血管性痴呆大鼠(VaD)学习记忆能力、脑组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及神经元细胞色素C(Cyt C)表达的影响。方法:60只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(VaD)、阳性对... 详细信息

目的:探讨外源性硫化氢(H_2S)对血管性痴呆大鼠(VaD)学习记忆能力、脑组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及神经元细胞色素C(Cyt C)表达的影响。方法:60只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(VaD)、阳性对照组(Nimodipine)、NaSH低剂量组(Low-NaSH)及NaSH高剂量组(High-NaSH),除假手术组(仅分离双侧颈总动脉但不结扎)外,其余4组大鼠采用改良二血管法复制大鼠VaD模型,造模后阳性对照组给予尼莫地平10 mg/(kg·d)灌胃给药,NaSH低、高剂量组分别给予30μmoL/(kg·d)、100μmoL/(kg·d) NaSH灌胃给药,模型组及假手术组均给予等量生理盐水灌胃;给药30 d时,采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,水迷宫测试结束后采用BCA蛋白定量法测定样本蛋白浓度记为C_(样本),结合标准曲线计算组织中MDA含量;用BCA法测定样本蛋白浓度C_(样本),计算组织中SOD活力单位;Western blot法检测海马胞浆Cyt C表达。结果:与Sham组比较,VaD组大鼠的学习记忆能力显著下降,神经元胞浆蛋白中Cyt C表达显著升高,脑组织中MDA含量显著增多、SOD活性显著升高(P<0.01);与VaD组大鼠比较,加NaSH处理后,大鼠学习记忆能力显著提高,神经元胞浆蛋白中Cyt C表达显著降低、脑组织中MDA含量及SOD活性均显著降低(P<0.01),与阳性对照组结果相近。结论:NaSH可改善VaD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与NaSH降低大鼠海马的氧化应激水平、保护神经元细胞中线粒体功能有关。

关键词：痴呆,血管性硫化氢细胞色素C 氧化应激水迷宫丙二醛超氧化物歧化酶

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