检索结果-内蒙古大学图书馆

中山大学学报（自然科学版） 2020年第1期59卷 125-132页

作者：张秀秀喻艳琴田薇张婷王婵娟单可人何燕地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室/贵州医科大学贵州贵阳550004 贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

调查贵州壮侗语族7个少数民族(水族、布依族、侗族、仡佬族、壮族、毛南族、仫佬族)人群Y染色体上21个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点的遗传多态性,并探讨该人群与其他民族以及其他语族之间的遗传关系。采用SN... 详细信息

调查贵州壮侗语族7个少数民族(水族、布依族、侗族、仡佬族、壮族、毛南族、仫佬族)人群Y染色体上21个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点的遗传多态性,并探讨该人群与其他民族以及其他语族之间的遗传关系。采用SNapShot法对445例贵州壮侗语族7个少数民族男性个体21个Y-SNP位点进行复合扩增检测,用直接计数法计算等位基因频率、单倍型频率与单倍群频率,运用SPSS 24软件进行主成分分析。在贵州水族、布依族、侗族、仡佬族、壮族、毛南族和仫佬族中,21个Y-SNP组成的单倍型多态性值(haplotype diversity,HD)分别为0.5977、0.9456、0.8856、0.8869、0.7686、0.3587和0.7078;与已报道的其他9个民族人群单倍群分布频率进行主成分分析,壮侗语族与苗瑶语族聚在一起。从父系遗传角度分析,壮侗语族与苗瑶语族亲缘关系较近。

关键词：壮侗语族 Y染色体单核苷酸多态性遗传多态性贵州

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外源性H_(2)S对氧糖剥夺再灌注后SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

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西安交通大学学报（医学版） 2021年第5期42卷 659-665页

作者：吴昌学董艳军黄赟肖子宇李毅齐晓岚官志忠肖雁地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州省人民医院贵州贵阳550004

目的探讨外源性硫化氢(H_(2)S)对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)后SH-SY5Y细胞损伤的保护作用。方法建立SH-SY5Y细胞OGD/R模型,SH-SY5Y细胞分为对照组、OGD/R模型组、OGD/R+不同浓度NaHS(H_(2)S供体)处理组;OGD/R制备:用不含血清的低糖DMEM培养... 详细信息

目的探讨外源性硫化氢(H_(2)S)对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)后SH-SY5Y细胞损伤的保护作用。方法建立SH-SY5Y细胞OGD/R模型,SH-SY5Y细胞分为对照组、OGD/R模型组、OGD/R+不同浓度NaHS(H_(2)S供体)处理组;OGD/R制备:用不含血清的低糖DMEM培养基在37℃、930 mL/L N_(2)、20 mL/L O_(2)的低氧条件下培养各组细胞12 h,然后用完全培养液复氧培养24 h。采用CCK-8检测存活率,流式细胞技术检测细胞凋亡水平,蛋白印迹方法(Western blotting)检测细胞中内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及NF-κBP65、COX-2蛋白表达水平。结果OGD/R模型组SH-SY5Y细胞活性较对照组降低(P<0.05)。0~0.5 mmol/L浓度的NaHS处理组细胞活性随着给予NaHS浓度的增加较OGD/R模型组逐渐升高(P<0.05),超过这个浓度范围,细胞活性较OGD/R模型组降低(P<0.05)。模型组细胞的早期凋亡水平均显著高于对照组(P<0.05)。0.2、0.4 mmol/L NaHS处理组细胞的早期凋亡水平较OGD/R模型组显著降低、4 mmol/L NaHS处理组细胞的早期凋亡水平较OGD/R模型组显著升高(P<0.05);Western blotting检测结果显示,OGD/R模型组细胞的GRP78、CHOP、NF-κBp65及COX-2蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05);与OGD/R模型组比较,0.2、0.4、4 mmol/L浓度NaHS处理组细胞的GRP78、CHOP、NF-κBp65及COX-2表达水平显著降低(P<0.05),但各剂量组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论NaHS可以提高经OGD/R损伤后细胞的活性,可能是通过抑制内质网应激诱导的NF-κBp65、COX-2蛋白的激活从而减少细胞凋亡水平来实现。

关键词：血管性痴呆硫化氢核转录因子-κB 凋亡

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幽门螺杆菌CagA的序列差异对细胞形态的影响

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中国病原生物学杂志 2022年第5期17卷 537-541页

作者：曾晓燕全欣莹李雷蕾贾岑岑廖永慧谢渊赵艳周建奖贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

目的比较幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染过程中不同细胞毒素相关基因A(cytotoxin-associated gene A,CagA)序列对胃上皮癌细胞株AGS形态的影响,探讨CagA序列的结构差异。方法将含不同CagA序列的4株东亚株、3株西方株、1株cagA... 详细信息

目的比较幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染过程中不同细胞毒素相关基因A(cytotoxin-associated gene A,CagA)序列对胃上皮癌细胞株AGS形态的影响,探讨CagA序列的结构差异。方法将含不同CagA序列的4株东亚株、3株西方株、1株cagA基因敲除株和1株CagA C端缺失株的Hp以感染复数30∶1分别感染AGS细胞6 h和7 d,观察不同时间点的细胞形态变化。以未感染及煮沸10 min的Hp感染AGS细胞为空白对照及阴性对照。从GenBank数据库收集150条cagA基因序列,用MEGA7.0软件进行聚类分析。结果cagA基因敲除株和cagA基因C端缺失株Hp感染AGS细胞6 h均未出现明显的细胞形态改变,其它7株(cagA基因完整)感染细胞后均出现明显的蜂鸟样表型的形态改变。将9株Hp煮沸10 min灭活后感染的细胞也未出现明显的形态改变。Hp持续感染7 d后,只有3株西方株和1株东亚株感染的细胞呈现蜂鸟样表型,另3株带CagA的EPIYA基序变异的东亚株未发生细胞形变。聚类分析显示,多株起源于东亚国家日本、中国和韩国的Hp聚类于西方株,且西方株CagA中EPIYA基序更容易发生变异。结论Hp西方株在中国和其它东亚国家普遍流行,其CagA比东亚株的CagA有更强的致细胞形变能力和更多的EPIYA基序变异,完整的CagA序列是诱导细胞形变的主要因素。这些数据对深入研究Hp不同基因型的致病能力有重要意义。

关键词：幽门螺杆菌 CagA 聚类分析细胞形态学

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贵州三个世居少数民族24个Y-STR基因座的遗传多态性及遗传关系

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中华医学遗传学杂志 2018年第4期35卷 595-599页

作者：国学红何燕张秀秀王婵娟张婷官志忠贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室贵阳550004

目的调查贵州羌、满、畲等世居少数民族群体Y-STR基因座的单倍型分布，并评价其对于个体识别及群体遗传学的价值。方法用Microreader^TM 24Y Direct ID System试剂盒扩增174名无关男性的24个Y-STR基因座，将扩增产物在ABI3100遗传分析... 详细信息

目的调查贵州羌、满、畲等世居少数民族群体Y-STR基因座的单倍型分布，并评价其对于个体识别及群体遗传学的价值。方法用Microreader^TM 24Y Direct ID System试剂盒扩增174名无关男性的24个Y-STR基因座，将扩增产物在ABI3100遗传分析仪上进行电泳，用GeneMapper软件收集数据，统计3个群体的数据，并结合相关资料分析3个民族与其他群体之间的遗传关系。结果在3个群体中共检测到76种单倍型，其中羌族13种，满族35种，畲族28种。单倍型多样性依次为0．7327、0．9578、0．9344。畲族与羌族的遗传距离相对较近，与满族的遗传距离则相对较远。结论本研究所揭示的贵州3个世居少数民族父系的遗传分化特点及亲缘关系，可为研究该地区的父系起源、进化、融合等提供依据。

关键词： Y染色体短串联重复序列单倍型遗传多态性遗传距离

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过量氟暴露对体内外星形胶质细胞及其胶质纤维酸性蛋白表达的影响

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中华地方病学杂志 2022年第9期41卷 722-728页

作者：傅晓丽周箫薄莉李彬何冬玲官志忠刘艳洁贵州医科大学附属医院病理科贵阳550004 贵州省分子生物学重点实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵阳550004

目的探讨过量氟暴露对体内外星形胶质细胞及其胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法(1)体内实验:选择24只SPF级SD大鼠,雌雄各半,按性别、体重采用随机数字表法分为对照组和染氟组,每组12只,分别饮用自来水配制的<1 mg/L和50 mg/L... 详细信息

目的探讨过量氟暴露对体内外星形胶质细胞及其胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法(1)体内实验:选择24只SPF级SD大鼠,雌雄各半,按性别、体重采用随机数字表法分为对照组和染氟组,每组12只,分别饮用自来水配制的<1 mg/L和50 mg/L氟化钠溶液,饲养6个月。实验结束后采用免疫荧光法、免疫组织化学法和蛋白质免疫印迹法检测大鼠脑组织GFAP蛋白表达水平。(2)体外实验:分离成年(6月龄)大鼠大脑皮质星形胶质细胞进行原代培养(4 mmol/L氟化钠溶液培养24 h),采用免疫荧光法鉴定星形胶质细胞,实时荧光定量PCR法和蛋白质免疫印迹法分别检测GFAP mRNA及蛋白表达水平,流式细胞术检测星形胶质细胞凋亡情况及钙离子含量。结果(1)体内实验:免疫荧光法、免疫组织化学法、蛋白质免疫印迹法检测结果均显示,染氟组大鼠脑组织GFAP蛋白表达水平高于对照组(0.440±0.200比0.250±0.120,t=-5.93,P=0.027;0.270±0.020比0.240±0.050,t=-4.87,P=0.040;1.017±0.001比0.486±0.006,t=-52.48,P=0.001)。(2)体外实验:免疫荧光法鉴定结果显示,GFAP阳性,原代培养细胞鉴定为星形胶质细胞;实时荧光定量PCR法检测结果显示,染氟组GFAP mRNA表达水平高于对照组(2.780±0.120比0.134±0.005,t=-37.84,P=0.001);蛋白质免疫印迹法检测结果显示,染氟组GFAP蛋白表达水平高于对照组(2.76±0.10比1.38±0.05,t=-20.44,P=0.002);流式细胞术检测结果显示,染氟组细胞凋亡率高于对照组(%:55.0±1.0比3.5±0.6,t=-10.28,P=0.009),钙离子含量低于对照组(%:54±9比72±13,t=4.64,P=0.043)。结论过量氟暴露可造成体内外星形胶质细胞GFAP表达增加,细胞凋亡增多,并影响钙信号转导通路。

关键词：氟化物中毒胶质纤维酸性蛋白星形胶质细胞原代细胞培养

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亚慢性氟中毒大鼠脑组织RAGE/p38MAPK/NF-κB信号通路的变化及银杏叶提取物和RAGE阻断剂的保护作用

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环境与职业医学 2023年第5期40卷 577-582页

作者：梁秋哲李红梅邓婕张婷马彦琳张凯琳贵州医科大学基础医学院贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室/贵州省分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

[背景]长期摄入过量的氟会蓄积在脑组织中并造成神经损伤和学习记忆能力的衰退,晚期糖基化终产物受体(RAGE)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)/核因子κB(NF-κB)信号通路是其中的重要机制。[目的]研究亚慢性氟中毒大鼠脑组织RAGE/p38MAP... 详细信息

[背景]长期摄入过量的氟会蓄积在脑组织中并造成神经损伤和学习记忆能力的衰退,晚期糖基化终产物受体(RAGE)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)/核因子κB(NF-κB)信号通路是其中的重要机制。[目的]研究亚慢性氟中毒大鼠脑组织RAGE/p38MAPK/NF-κB信号通路的改变,并探讨银杏叶提取物(EGb761)和RAGE阻断剂(FPS-ZM1)对神经记忆能力的保护作用。[方法]选择雄性清洁级SD大鼠90只,将其分为9组,每组10只,造模周期6个月。分别为对照组(C组):自由饮用自来水(含氟量<0.5 mg·L^(−1)),低、高剂量染氟组(LF、HF组):分别自由饮用含氟量为10、50 mg·L^(−1)的自来水;银杏叶提取物干预组(CE、LFE、HFE组):在C、LF、HF组的基础上,每天给予100 mg·kg^(−1)·d^(−1)EGb761灌胃;FPS-ZM1干预组(CF、LFF、HFF组):在C、LF、HF组的基础上,造模结束前7 d每天腹腔注射1 mg·kg^(−1)·d^(−1)FPS-ZM1。检测各组大鼠的脑氟和血氟含量;水迷宫实验检测各组学习记忆能力;尼氏染色检测各组大鼠海马的病理形态学改变;蛋白免疫印迹法检测脑组织中RAGE及其配体高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、NF-κB、p38MAPK、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白的表达水平;实时荧光定量PCR法检测RAGE、HMGB1、p38MAPK的mRNA表达水平。[结果]与C组血氟、脑氟相比,LF、HF组大鼠的血氟、脑氟含量均增加(P均<0.05)。水迷宫实验结果显示,与C组相比,LF组、HF组的逃避潜伏时间延长,穿越次数减少;与HF组相比,HFE组和HFF组的逃避潜伏时间缩短,穿越次数增加(P均<0.05)。尼氏染色结果显示,与C组相比,HF组尼氏体数量减少;与HF组相比,HFE组和HFF组尼氏体数量增加。Western blotting结果显示:与C组RAGE、HMGB1、NF-κB、p38MAPK、p-p38MAPK、IL-6、TNF-α蛋白相对表达量相比,LF组RAGE、HMGB1、NF-κB、p-p38MAPK、IL-6和HF组的RAGE、HMGB1、NF-κB、p38MAPK、p-p38MAPK、IL-6、TNF-α上调(P均<0.05);与HF组相比,HFE组、HFF组的RAGE、HMGB1、NF-κB、p38MAPK、p-p38MAPK、IL-6、TNF-α蛋白相对表达量均下调(P均<0.05);与LF组RAGE、HMGB1蛋白相对表达量相比,LFE组和LFF组均下调(P均<0.05)。实时荧光定量PCR法结果显示:与C组相比,LF、HF组RAGE、HMGB1的mRNA表达水平上调;与LF组相比,LFE组、LFF组的RAGE的mRNA表达水平下调;与HF组相比,HFE组、HFF组的RAGE、HMGB1的mRNA表达水平下调(P均<0.05)。[结论]亚慢性氟中毒引起的中枢神经系统损伤可能与RAGE/p38-MAPK/NF-κB信号通路激活有关,可损害大鼠的学习记忆能力,而EGb761和FPS-ZM1可能对神经损伤有一定的保护作用。

关键词：亚慢性氟中毒脑组织晚期糖基化终产物受体银杏叶提取物阻断剂

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Stattic增强三氧化二砷诱导急性髓样白血病THP1细胞生存和凋亡的机制

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西安交通大学学报（医学版） 2021年第1期42卷 53-58页

作者：吴昌学赵艳张婷张健禹文峰柏华张启芳贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州省医学分子生物学重点实验室贵州医科大学贵州贵阳550004 贵州医科大学第三附属医院医学中心实验室贵州都匀558000

目的探讨STAT3抑制剂Stattic联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)THP1细胞生存和凋亡的影响及其作用机制。方法以THP1细胞株为研究对象,用CCK8法检测Stattic联合ATO对THP1细胞生存的影响,用流式细胞术检测细胞凋亡、ROS水平,用Caspase 3/7 Glo assay试剂盒检测细胞Caspase 3/7活性,用qPCR检测mRNA表达,Western blotting检测蛋白表达。结果Stattic可明显抑制磷酸化STAT3的水平,显著加剧ATO对AML细胞生存抑制,增强ATO诱导的细胞凋亡和氧化应激产物。Stattic显著抑制ATO上调的Nrf2的表达以及下游基因的表达。结论Stattic可增强ATO对AML细胞生存抑制和凋亡诱导作用,其机制可能与抑制Nrf2和Nrf2下游基因表达引起ROS增多有关。

关键词： Stattic 三氧化二砷 THP1细胞细胞生存凋亡 Nrf2

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幽门螺杆菌东、西方株CagA的结构差异及其基因表达研究

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中国病原生物学杂志 2018年第10期13卷 1067-1072页

作者：张晓怡周建奖李雅洁赵艳陈学书龙妮娅王琴容谢渊贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

目的比较幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)东、西方株CagA蛋白的结构差异,探讨其致病性差异的原因。方法微需氧培养Hp东、西方株各3株,获取cagA全长序列,用DNA Star和MEGA6进行氨基酸序列和构成比对。PT-PCR和Western blot检测东、... 详细信息

目的比较幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)东、西方株CagA蛋白的结构差异,探讨其致病性差异的原因。方法微需氧培养Hp东、西方株各3株,获取cagA全长序列,用DNA Star和MEGA6进行氨基酸序列和构成比对。PT-PCR和Western blot检测东、西方株中CagA和尿素酶及其基因的表达。RT-qPCR检测东、西方株中8个基因的表达并进行分析。结果成功培养并鉴定Hp临床株4株,3株为东方株,1株为西方株。序列比对分析东、西方株中CagA氨基酸全长序列有明显差异。丙氨酸、精氨酸和苏氨酸在东方株中显著高于西方株:分别为88和83(t=5.303,P=0.006)、32和25(t=3.528,P=0.025)、57和50(t=3.951,P=0.017);组氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、谷氨酰胺和缬氨酸在东方株显著低于西方株:分别为13和17(t=8.485,P=0.001)、137和147(t=11.72,P=0.000)、12和20(t=9.449,P=0.001)、59和63(t=4.472,P=0.011)、59和63(t=6.5,P=0.003)。尿素酶α基因在6株Hp中均有表达,但有2株Hp不表达CagA和尿素酶β。定量PCR结果显示,东方株尿素酶α基因、LPS合成蛋白基因及鞭毛钩蛋白FlgE基因高表达,而西方株中尿素酶辅助蛋白Ureh基因、鞭毛合成蛋白FlhA基因及膜蛋白基因高表达(P<0.05)。结论 Hp东、西方株在CagA结构及基因表达存在差异性,推测可能是Hp东方株致病性更强的原因之一。

关键词：幽门螺杆菌分离鉴定 CagA 尿素酶

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线粒体DNA拷贝数与燃煤污染型地方性氟中毒的关联分析

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中华地方病学杂志 2022年第2期41卷 111-116页

作者：赵安宿田薇喻艳琴李瑞超王婵娟张婷单可人何燕贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室贵阳550004

目的探讨相对线粒体DNA拷贝数(mitochondrial DNA copy number,mtDNA-CN)与燃煤污染型地方性氟中毒(简称燃煤型地氟病)的关联。方法2018年6月至2019年3月,采用横断面研究,在贵州省典型燃煤型地氟病病区毕节市选择482例燃煤型地氟病患者... 详细信息

目的探讨相对线粒体DNA拷贝数(mitochondrial DNA copy number,mtDNA-CN)与燃煤污染型地方性氟中毒(简称燃煤型地氟病)的关联。方法2018年6月至2019年3月,采用横断面研究,在贵州省典型燃煤型地氟病病区毕节市选择482例燃煤型地氟病患者作为病例组;同时,在非病区长顺县选择212例健康人群作为对照组。通过问卷调查和体格检查收集两组人群基本信息、生活行为习惯等一般情况,采集外周静脉血血样,采用实时荧光定量PCR法检测外周血相对mtDNA-CN;应用二分类和无序多分类logistic回归等方法分析相对mtDNA-CN与燃煤型地氟病的相关性。结果对照组与病例组人群的体质指数(body mass index,BMI)及性别比例、婚姻状况、文化程度分布情况比较差异均有统计学意义(t=7.91,χ2=5.11、13.33、34.32,P均<0.05);且对照组人群相对mtDNA-CN高于病例组[中位数(四分位数):202(138,292)比131(96,217),Z=-7.80,P<0.001]。二分类logistic回归分析结果[比值比(95%置信区间)]显示,文化程度[小学:0.572(0.377~0.868)、初中及以上:0.292(0.174~0.493)]、相对mtDNA-CN[131~<217:0.265(0.144~0.488)、≥217:0.183(0.100~0.335)]、BMI[1.222(1.142~1.307)]均为燃煤型地氟病患病风险的影响因素(P均<0.05)。在不同BMI及文化程度亚组中,相对mtDNA-CN与燃煤型地氟病患病风险均呈显著负相关(P趋势均<0.05);相对mtDNA-CN与人群BMI、文化程度对燃煤型地氟病均不存在交互效应(P交互均>0.05)。无序多分类logistic回归分析结果显示,相对mtDNA-CN与氟斑牙、氟骨症的患病风险均呈显著负相关(P趋势均<0.05)。结论相对mtDNA-CN越高,人群燃煤型地氟病患病风险越低,提示mtDNA-CN可能是燃煤型地氟病的潜在生物标志物。

关键词：氟煤线粒体DNA 拷贝数横断面研究影响因素

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L-亚氨基乙基鸟氨酸与过量氟共培养对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞一氧化氮／内皮型一氧化氮合酶表达的影响

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中华地方病学杂志 2018年第6期37卷 455-460页

作者：朱丹刘宇平桂传枝官志忠贵州医科大学病理学教研室贵阳550004 贵州医科大学贵州省分子生物学重点实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵阳550004

目的探讨内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）特异性抑制剂L-亚氨基乙基鸟氨酸（L-iminoethyl ornithine hydrochloride，L-NIO）对氟致体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡、eNOS mRNA和蛋白表达以 ... 详细信息

目的探讨内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）特异性抑制剂L-亚氨基乙基鸟氨酸（L-iminoethyl ornithine hydrochloride，L-NIO）对氟致体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡、eNOS mRNA和蛋白表达以及一氧化氮（Nitric oxide，NO）含量和一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）活性改变的影响。方法将体外培养的 SH-SY5Y细胞分为对照组、低氟组、高氟组、L-NIO组、低氟＋ L-NIO组、高氟＋ L-NIO组，n = 3。对照组加入与实验组等体积的培养液，低氟组和高氟组加入氟化钠（sodium fluoride，NaF）浓度分别为0.2、2.0 mmol／L，L-NIO组加入3 μmol／L L-NIO，低氟＋ L-NIO组和高氟＋ L-NIO组分别加入0.2 mmol／L NaF和3 μmol／L L-NIO、2.0 mmol／L NaF和3 μmol／L L-NIO，培养时间为48 h。采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测细胞中eNOS蛋白表达水平，实时荧光定量PCR（Real-time fluorescent quantitative PCR）法检测细胞中eNOS mRNA表达水平，流式细胞仪检测细胞的凋亡情况，硝酸还原酶法和比色法检测细胞培养液中NO含量和NOS活性。结果与对照组（1.000 ± 0.026）比较，低、高氟组eNOS蛋白表达量（1.108 ± 0.071、1.349 ± 0.057 ）升高，L-NIO组（0.755 ± 0.148）下降（P均〈 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟＋ L-NIO组（0.802 ± 0.115）下降（P均〈 0.05）；与高氟组比较，高氟＋ L-NIO组（0.988 ± 0.135）下降（P 〈 0.05）。与对照组（1.000 ± 0.018）比较，低、高氟组eNOS mRNA表达量（1.809 ± 0.099、2.416 ± 0.295）升高，L-NIO组（0.609 ± 0.077）下降（P均〈 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟＋ L-NIO组（1.040 ± 0.034）下降（P均〈 0.05）；与高氟组比较，高氟＋ L-NIO组（1.233 ± 0.152）下降（P 〈 0.05）。与对照组［（1.66 ± 0.07）％］比较，低、高氟组细胞凋亡率［（8.81 ± 0.27）%、（17.60 ± 0.20）%］升高，L-NIO组［（1.03 ± 0.04）%］下降（P均〈 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟＋ L-NIO组［（6.03 ± 0.10）%］下降（P均〈 0.05）；与高氟组比较，高氟＋ L-NIO组［（12.12 ± 0.08）％］下降（P 〈 0.05）。与对照组［（2.773 ± 0.145）μmol／L］比较，低、高氟组细胞培养液中NO含量［（8.251 ± 1.047）、（14.287 ± 1.062）μmol／L ］升高，L-NIO组［（1.648 ± 0.155）μmol／L］下降（P均〈 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟＋ L-NIO组［（4.622 ± 0.252）μmol／L］下降（P均〈 0.05）；与高氟组比较，高氟＋ L-NIO组［（7.899 ± 0.385）μmol／L］下降（P 〈 0.05）。与对照组［（0.507 ± 0.041）Ｕ／ｍｌ］比较，低、高氟组细胞培养液中NOS活性［（0.772 ± 0.032）、（2.258 ± 0.062 ）Ｕ／ｍｌ］升高，L-NIO组［（0.346 ± 0.015）Ｕ／ｍｌ］下降（P均〈 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟＋ L-NIO 组［（0.637 ± 0.026）Ｕ／ｍｌ］下降（P均〈 0.05）；与高氟组比较，高氟＋ L-NIO组［（1.161 ± 0.071）Ｕ／ｍｌ］下降（P 〈 0.05）。结论过量氟可导致SH-SY5Y细胞eNOS蛋白和mRNA过度表达以及细胞凋亡率上升，细胞培养液中NO含量增多以及NOS 活性增强，加入L-NIO与氟共培养后可拮抗氟对SH-SY5Y细胞的损伤，起到一定的神经保护作用。

关键词：氟人神经母细胞瘤细胞内皮型一氧化氮合酶一氧化氮

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