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2019全国老年痴呆与认知障碍相关疾病学术大会

作者：高玉梅王晓玲任家谋官志忠沈祥春齐晓岚贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室贵州医科大学附属医院病理科贵州医科大学药学院

目的研究天麻全药是否可以改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力,减少其对大脑海马区域中β-淀粉样蛋白（Aβ）的聚集程度及老年斑的形成,以及这些作用是否与调控keap1-Nrf2/HO-1抗氧化应激通路方面有关,进一步探讨天麻全药的神经保护... 详细信息

目的研究天麻全药是否可以改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力,减少其对大脑海马区域中β-淀粉样蛋白（Aβ）的聚集程度及老年斑的形成,以及这些作用是否与调控keap1-Nrf2/HO-1抗氧化应激通路方面有关,进一步探讨天麻全药的神经保护作用机制及在老年性痴呆预防及治疗中的作用。方法APP/PS1双转基因痴呆小鼠模型,实验小鼠分为A组:正常组;B组:正常给药组;C组:APP/PS1模型组;D组:模型给药组。B和D组取2月龄APP/PS1双转基因小鼠每日灌胃同等剂量天麻全药(每天1.5 g·kg),A和C组灌胃同等量的生理盐水。灌胃至5月龄时进行Morris水迷宫检测各组小鼠学习和记忆能力;取小鼠血清检测谷草转氨酶（GOT）和谷丙转氨酶（GPT）的含量;HE染色观察小鼠脑组织形态学变化、免疫组织化学检测脑组织中Aβ的沉积;实时PCR检测核因子E2相关因子2 （Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）、相关基因的mRNA水平;生化试剂盒检测小鼠海马组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性;Western蛋白印迹实验检测kelch样ECH相关蛋白1 （Keap1）、Nrf2、HO-1、醌氧化还原酶1 （NQO1）蛋白的表达水平。结果与对照组相比,水迷宫检测结果显示,C组小鼠的学习记忆能力降低（P<0.05）;各组小鼠血清中GOT和GPT的含量差异无统计学意义;HE染色结果显示,各组小鼠脑组织形态结构无明显差异;免疫组织化学检测到C组小鼠脑组织中出现明显Aβ沉积;海马组织中Nrf2和HO-1的mRNA及Keap1,Nrf2,HO-1和NQO1蛋白表达水平均有不同程度的减少（P<0.05,P<0.01）;与C组小鼠比较,D组小鼠中Aβ斑块形成减少;海马组织中Nrf2,HO-1的mRNA及Keap1,Nrf2,HO-1和NQO1蛋白表达水平均有不同程度的增加（P<0.05,P<0.01）;海马组织MDA含量明显降低（P<0.05）,SOD酶活性显著升高（P<0.05）。结论血清学检测结果显示,长期灌胃天麻全药,小鼠血清中的GOT和GPT无统计学差异,说明小鼠在长期给予天麻后,对肝脏功能代谢功能并无明显毒性作用;水迷宫及其他结果显示天麻全药能够改善阿尔茨海默病（AD）痴呆小鼠模型的学习和记忆能力,这提示天麻全药对AD痴呆小鼠模型具有一定的神经保护作用,且其可能通过调控keap1-Nrf2/HO-1通路,增强下游抗氧化基因的表达、SOD酶活性发挥抗氧化功能。在一定程度上减缓AD病理进程、减少Aβ的沉积,进而改善AD痴呆小鼠模型的学习记忆能力。

关键词：阿尔茨海默病天麻氧化应激 keap1-Nrf2/HO-1通路

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基于网络药理学的益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的免疫治疗效果及机制

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贵州医科大学学报 2024年第10期49卷 1405-1416,1427页

作者：沙婷高霄邓于新彭亚倩唐智况时祥齐晓岚贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院检验科贵州贵阳550004 贵阳中医学院第二附属医院神经内科贵州贵阳550000

目的基于网络药理学探讨益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力(MG)大鼠免疫治疗的效果及机制。方法运用中医药分子机理生物信息学分析软件(BATMAN-TCM)筛选益气解毒复方相关靶点信息,利用在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库以及Geneca... 详细信息

目的基于网络药理学探讨益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力(MG)大鼠免疫治疗的效果及机制。方法运用中医药分子机理生物信息学分析软件(BATMAN-TCM)筛选益气解毒复方相关靶点信息,利用在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库以及Genecards数据库查询MG疾病有关靶点的信息;通过注释、可视化和综合发现数据库(DAVID)、Metascape数据库对益气解毒复方治疗MG的潜在靶点进行蛋白-蛋白互作网络(PPI)分析、基因本体(GO)功能富集及京都基因组百科全书(KEGG)相关信号通路分析;制备鼠源性乙酰胆碱受体(AChR)Rα97-116肽段抗原乳剂并皮下注射至30只无特定病原体(SPF)级雌性Lewis大鼠的尾基部、后肢垫部及背部(第1次免疫注射),分别于第30天和第45天时进行加强免疫(第2、3次免疫注射),第3次免疫注射结束后1周判断实验性自身免疫性MG(EAMG)大鼠模型是否成功,造模成功后EAMG大鼠随机均分为模型组、0.945 g/(kg·d)益气解毒复方(低剂量)组、1.890 g/(kg·d)益气解毒复方(中剂量)组、3.780 g/(kg·d)益气解毒复方(高剂量)组及5.400 mg/(kg·d)醋酸泼尼松片剂组,另取6只SPF级雌性Lewis大鼠作为正常组,各药物组大鼠分别予对应药物、正常组和模型组大鼠分别予等体积纯净水,连续灌胃干预30 d,采用电子天平和Lennon评分检测各组大鼠灌胃干预前和干预第30天时的体质量和肌力,同时采用酶联免疫吸附试剂盒检测各组大鼠血清AChR抗体(AChR-Ab)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,采用流式细胞术方法检测各组大鼠灌胃干预第30天时外周血中白细胞分化抗原4(CD4^(+))T细胞、白细胞分化抗原8(CD8^(+))T细胞的百分比及T淋巴细胞亚群CD4^(+)/CD8^(+)比率;灌胃干预30 d后处死各组大鼠,取骨骼肌组织,采用苏木精-伊红染色(HE)评估骨骼肌组织的形态学特征。结果筛选到益气解毒复方治疗疾病相关基因168个,PPI分析预测IL-6、TNF、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、肿瘤蛋白(TP53)等可能是其治疗MG的重要靶点;GO功能富集结果表明,细胞组成(CC)、生物过程(BP)及分子功能(MF)涉及354个、4365个及61个条目,KEGG富集分析搜集到有关作用通路257条;灌胃干预第30天,与模型组相比,低、中、高益气解毒复方剂量组及醋酸泼尼松组大鼠体质量增加(P<0.01),Lennon评分降低(P<0.01),血清AChR-Ab、IL-1β、IL-6及TNF-α水平降低(P<0.05);EAMG大鼠血清中CD4^(+)T细胞分布及CD4^(+)/CD8^(+)比值减少(P<0.01),CD8^(+)T细胞分布增高(P<0.01),骨骼肌组织改善,肌纤维恢复,细胞核排列更规则,炎性细胞减少,其中益气解毒复方高剂量组效果较为明显。结论益气解毒复方可减轻EAMG大鼠炎症反应、减轻骨骼肌组织的损伤及促进免疫系统恢复,其机制与血清AChR-Ab水平降低及平衡CD4^(+)、CD8^(+)T细胞两者的比例有关。

关键词：大鼠重症肌无力益气解毒复方网络药理学 CD4^(+)/CD8^(+)比值乙酰胆碱受体抗体

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贵州省西部燃煤型地氟病区成年人氟斑牙与BMI状况分析

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贵州医科大学学报 2020年第1期45卷 7-12页

作者：喻艳琴张秀秀田薇李福成吴昌学张婷官志忠何燕贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 六盘水市疾病预防控制中心贵州六盘水553000

目的:分析贵州省西部燃煤型地氟病区成年人氟斑牙及人体质量指数(BMI)分布状况及关系。方法:对贵州省毕节市、六盘水市1395名成年人进行问卷调查,采用中华人民共和国卫生部《成人体重判定》WS/T428-2013推荐标准判断成年人的BMI等级(分... 详细信息

目的:分析贵州省西部燃煤型地氟病区成年人氟斑牙及人体质量指数(BMI)分布状况及关系。方法:对贵州省毕节市、六盘水市1395名成年人进行问卷调查,采用中华人民共和国卫生部《成人体重判定》WS/T428-2013推荐标准判断成年人的BMI等级(分为体重过低、正常、超重和肥胖),按照Dean氏分类法对成年人的氟斑牙进行分度;将被检人群分为6个年龄段,分析氟斑牙、BMI等级的性别分布特点及二者的关系。结果:调查人群氟斑牙总检出率为84.59%,6个年龄组氟斑牙检出率随着年龄的增加呈上升趋势(χ2=36.031,P<0.001),29~岁组和59~岁组男性氟斑牙检出率高于女性(P<0.05);调查人群体重过低、正常、超重及肥胖总检出率分别为7.17%、65.59%、20.07%及7.17%,6个年龄组间BMI等级分布差异有统计学意义(χ2=38.665,P<0.05),男女间BMI等级分布差异有高度统计学意义(P<0.01),主要表现为29~岁、39~岁、49~及59~岁年龄组(P<0.05);调查人群中氟斑牙组与正常牙组间BMI等级分布差异有高度统计学意义(P<0.01),主要表现为29~岁和49~岁组(P<0.001)。结论:贵州省西部地氟病区氟斑牙检出率随着年龄的增加呈上升趋势,年龄、性别及氟中毒可能是影响该地区成年人BMI等级分布的因素。

关键词：成年人体质量指数超重肥胖症地氟病氟斑牙

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贵州省西部燃煤型地氟病区8～14岁农村小学生营养不良和氟斑牙调查

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贵州医科大学学报 2020年第1期45卷 13-17页

作者：喻艳琴张秀秀田薇李鸣李福成张婷官志忠何燕吴昌学贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 六盘水市疾病预防控制中心贵州六盘水553000

目的:了解和评价贵州省西部燃煤型地氟病区8~14岁农村小学生营养不良状况及氟斑牙发生情况及关系。方法:采用分层随机抽样方式,以贵州省西部燃煤型地氟病区毕节、水城、六枝的8~14岁农村小学学生481人为调查对象,按照学生健康检查技术规... 详细信息

目的:了解和评价贵州省西部燃煤型地氟病区8~14岁农村小学生营养不良状况及氟斑牙发生情况及关系。方法:采用分层随机抽样方式,以贵州省西部燃煤型地氟病区毕节、水城、六枝的8~14岁农村小学学生481人为调查对象,按照学生健康检查技术规范GB/T 26343规定的器材和方法进行身高、体质量测量,采用《学龄儿童青少年营养不良筛查标准》(WS/T-456-2014)评价小学生营养不良状况,按照Dean氏分类法对小学生氟斑牙程度进行分类。结果:男学生营养不良总检出率高于女学生(P<0.05),11.0~岁年龄组内男女学生营养不良检出率差异有高度统计学意义(P<0.01),各年龄组学生的营养不良检出率差异有统计学意义(χ2=8.382,P<0.05),以12.5~14.0岁组学生营养不良检出率最高;男学生氟斑牙总检出率高于女学生(P>0.05),各年龄组内男女学生氟斑牙检出率差异均无统计学意义(P>0.05),各年龄组间学生的氟斑牙检出率差异有统计学意义(χ2=7.859,P<0.05);患氟斑牙学生的营养不良检出率高于正常学生(P<0.05),各年龄组患氟斑牙学生与正常学生间营养不良检出率的差异均无统计学意义(P>0.05);贵州省西部地氟病区学生营养不良检出率明显高于贵州省及全国水平(P<0.001)。结论:贵州省西部地氟病地区8~14岁农村小学生营养不良状况较严重,患氟斑牙学生更易发生营养不良。

关键词：儿童营养不良消瘦生长迟缓地氟病氟斑牙

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12722例新生儿出生体质量特点及其影响因素分析

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贵州医科大学学报 2021年第11期46卷 1294-1300页

作者：丁可军侯红林舒莉萍黄璟吴昌学郎溪县人民医院儿科安徽宣城242100 贵州医科大学基础医学院贵州省再生医学重点实验室&中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院儿科贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室&地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004

目的探讨12722例新生儿出生体质量及其影响因素。方法收集产科出生的12722例活产新生儿及孕母围生期临床资料,统计新生儿(新生儿出生体质量等基本数据,早产儿、低出生体质量儿、巨大儿、过期产儿发生率)、产妇(产妇总数、初产妇人数、... 详细信息

目的探讨12722例新生儿出生体质量及其影响因素。方法收集产科出生的12722例活产新生儿及孕母围生期临床资料,统计新生儿(新生儿出生体质量等基本数据,早产儿、低出生体质量儿、巨大儿、过期产儿发生率)、产妇(产妇总数、初产妇人数、年龄、孕前BMI、孕期增重程度等)情况,对新生儿出生体质量的进行单因素分析,采用Logistics回归分析新生儿出生体质量的影响因素。结果12722例新生儿平均出生体质量为(3324.37±457.64)g,男性高于女性(F=897.856,P<0.001);2012—2014年新生儿出生体质量逐年增加(F=36.552,P<0.001),2015—2019年逐年下降(F=10.663,P<0.001);2012—2019年早产儿的发生率总体保持递减趋势(χ^(2)=37.751,P<0.001);2012—2019年产妇平均年龄逐年增大(χ^(2)=57.865,P<0.001),30岁以上的产妇逐渐增多(χ^(2)=49.537,P<0.001);2012年后孕前消瘦孕妇逐渐增多(χ^(2)=19.228,P<0.001),孕前正常体质量产妇比例无明显改变(χ^(2)=0.806,P=0.652),孕前超重产妇比例下降(χ^(2)=14.559,P=0.001);单因素分析结果显示,不同性别、胎龄、出生胎儿数量新生儿的出生体质量比较,差异有统计学意义(P<0.001);不同年龄、文化水平、孕前BMI、孕期增重程度、羊水量、孕次、产次、身高以及有无患妊娠期高血压的产妇所产新生儿的出生体质量比较,差异有统计学意义(P<0.05);多Logistics回归分析果显示,新生儿出生体质量影响因素依次是双胎妊娠、胎龄、羊水量、妊娠期高血压、孕期增重程度、新生儿出生性别、产妇文化水平、妊娠糖期尿病、产妇年龄、孕前BMI、孕母身高、孕次以及产次。结论产妇年龄、孕前BMI、孕期增重程度、是否患妊娠期糖尿病和妊娠期高血压以及新生儿胎龄是新生儿出生体质量的影响因素。

关键词：新生儿出生体质量产妇婴儿,极低出生体重婴儿,早产体质量指数影响因素

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地方性氟中毒家兔的心、肝、肾组织病理学特征

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贵州医科大学学报 2023年第5期48卷 545-549页

作者：江梦露李颖官志忠段庆红贵州医科大学附属医院影像科贵州贵阳550004 贵州医科大学附属肿瘤医院影像科贵州贵阳550003 贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

目的观察地方性氟中毒(地氟病)家兔心、肝、肾组织的病理学变化。方法24只家兔随机均分为3组,对照组饮用自来水20周,10周组饮用200 mg/L含氟水10周、20周组饮用200 mg/L含氟水20周造模,实验持续20周;观察实验期间各组家兔的生长情况,实... 详细信息

目的观察地方性氟中毒(地氟病)家兔心、肝、肾组织的病理学变化。方法24只家兔随机均分为3组,对照组饮用自来水20周,10周组饮用200 mg/L含氟水10周、20周组饮用200 mg/L含氟水20周造模,实验持续20周;观察实验期间各组家兔的生长情况,实验结束时处死家兔,采用氟离子选择电极法测定家兔股骨骨氟含量,取各组家兔心肝肾、观察外观变化,苏木素-伊红(HE)染色、病理形态学观察。结果实验期间,10周组、20周组家兔体长、体质量平均增长率略低于对照组,差异无统计学意义(P>0.05);对照组、10周组、20周组家兔骨氟分别为(548.33±41.65)mg/kg、(1709.40±236.91)mg/kg、(2754.65±427.61)mg/kg,后两组较对照组家兔的骨氟含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,两模型组家兔心脏稍充血,肝脏增大,肾脏外观较苍白;HE染色发现,与对照组相比,两模型组家兔心肌横纹模糊、心肌纤维肿胀、界限不清,肝细胞排列紊乱、部分出现水肿、胞浆疏松、出现空泡变性,部分肾小管上皮细胞空泡样变、偶见局灶性坏死、炎性细胞浸润。结论地方性氟中毒家兔的心肝肾均发生病理学改变。

关键词：氟中毒兔 HE染色病理变化组织学

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敲除PaLoc毒力岛的无毒性艰难梭菌菌株的构建

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贵州医科大学学报 2019年第10期44卷 1128-1133页

作者：饶凤琴程玉梅吴昌学王义崔古贞齐晓岚洪伟贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附院综合ICU 贵州贵阳550004 美国奥本大学系统生物学系美国奥本阿拉巴马36849 贵州医科大学基础医学院贵州贵阳550025

目的:使用CRISPR-Cfp1系统敲除艰难梭菌毒性(PaLoc)毒力基因岛,构建无毒性艰难梭菌菌株。方法:使用分子克隆方法,构建针对PaLoc毒力岛的基因打靶质粒pWH53;将pWH53质粒转化艰难梭菌630菌株后,诱导Cpf1蛋白表达,PCR筛选发生双交换的PaLo... 详细信息

目的:使用CRISPR-Cfp1系统敲除艰难梭菌毒性(PaLoc)毒力基因岛,构建无毒性艰难梭菌菌株。方法:使用分子克隆方法,构建针对PaLoc毒力岛的基因打靶质粒pWH53;将pWH53质粒转化艰难梭菌630菌株后,诱导Cpf1蛋白表达,PCR筛选发生双交换的PaLoc敲除突变株,测序验证设计位点是否发生等位双交换。结果:PCR结果显示,获得的16株转化子中有8株为敲除PaLoc突变株,阳性率为50%;测序结果显示,获得的8株敲除PaLoc突变株均在设计位点发生了等位双交换。结论:成功构建艰难梭菌毒性毒力岛敲除PaLoc突变株。

关键词：艰难梭菌 CRISPR-Cpf1系统 PaLoc毒力岛基因敲除活菌疫苗毒性基因梭菌感染载体质粒

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Seipin敲低大鼠PC12细胞株的构建和对细胞凋亡的影响

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贵州医科大学学报 2020年第3期45卷 249-254页

作者：吕菊胡玉梅任真奎谢鹏张春林焦玲禹文峰贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 黔西南州人民医院检验科贵州兴义562400 贵州医科大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州医科大学附院神经内科贵州贵阳550004

目的:构建大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的先天性脂肪代谢障碍2型(BSCL2/Seipin)敲低细胞株,探讨Seipin敲低后对细胞凋亡的影响。方法:将PC12细胞分为空白感染组和助感染组(加助感染试剂Hitans G),采用不同慢病毒感染复数(MOI)感染细... 详细信息

目的:构建大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的先天性脂肪代谢障碍2型(BSCL2/Seipin)敲低细胞株,探讨Seipin敲低后对细胞凋亡的影响。方法:将PC12细胞分为空白感染组和助感染组(加助感染试剂Hitans G),采用不同慢病毒感染复数(MOI)感染细胞进行病毒预感染试验筛选助感染试剂和合适的MOI;依据上述感染条件,用阴性对照病毒和Seipin-shRNA目的病毒感染PC12细胞作为阴性对照组和Seipin敲低组,同时设置正常组(正常PC12细胞),采用蛋白质免疫印迹法检测Seipin蛋白的表达;将阴性对照组与Seipin敲低组细胞用脱氧核苷酸末端转移酶介导的d UTP缺口末端标记(TUNEL)细胞凋亡染色法和Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡情况。结果:慢病毒MOI=100时感染效果最强,助感染试剂能增加感染效率;与正常组相比,Seipin敲低组Seipin蛋白表达水平降低(P<0.05);与阴性对照组相比,TUNEL染色结果显示Seipin敲低组发红色荧光的凋亡细胞明显增加,Hoechst染色结果显示Seipin敲低组细胞的细胞核致密浓染或碎块状致密浓染程度明显增多。结论:成功构建大鼠PC12 Seipin敲低细胞,下调Seipin蛋白表达会增加细胞凋亡。

关键词：细胞凋亡帕金森病 PC12细胞神经变性疾病 Seipin蛋白基因干扰

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CD630 27900基因缺失显著降低艰难拟梭菌自溶速率、毒力及对酸和抗生素的耐受性

CD630 27900基因缺失显著降低艰难拟梭菌自溶速率、毒力及对酸和...

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中国微生物学会第十一届地质微生物学学术研讨会

作者：杨君仪鲍江舰邵瑞瑞张婷廖健程玉梅官志忠齐晓岚陈峥宏崔古贞洪伟贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550001 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550001 贵州医科大学基础医学院贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学口腔医学院/附属口腔医院贵州贵阳550001 贵州医科大学附属医院综合ICU 贵州贵阳550001 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550001 省部共建地方病及民族区域性疾病防控协同创新中心贵州贵阳550001 贵州医科大学基础医学院贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550004

艰难拟梭菌(Clostridioidesdifficile)CD630_27900基因位于slpA-cwp66基因座上,CD630_27900基因属于假定的Lmbe家族的酶,但基因功能尚未明确。[目的]本研究通过构建艰难拟梭菌CD630_27900基因敲除菌株,比较野生型菌株(CD630)与突变株表型差异,探讨CD630_27900基因对艰难拟梭菌感染的影响。[方法]用非等长同源臂偶联等位交换(allele-coupled exchange,ACE)构建CD630_27900基因缺失菌株与回补菌株。比较它们在生长曲线、自溶素(cwp19,Acd)基因表达、细胞毒力、主要毒素基因表达、抗生素及pH敏感性差异,以研究 CD630_27900基因的功能。[结果]成功构建ΔCD630_27900突变菌株和：：CD630 27900 回补菌株。菌株ΔCD630 27900 在衰亡期自溶速率显著低于菌株CD630,∷CD630_27900自溶速率恢复。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)结果显示,缺失 CD630_27900 基因,自溶素cwp19、Acd基因表达量降低,∷CD630_27900自溶素基因表达增强。相较于CD630,ΔCD630_27900菌株细胞毒力、毒素基因tcdA、tcdB表达量降低。相较于CD630,ΔCD630_27900对氨苄青霉素、甲硝唑、阿莫西林、万古霉素、诺氟沙星、头孢西丁、卡那霉素更加敏感,∷CD630_27900对以上抗生素敏感性恢复。此外,ΔCD630 27900对酸比CD630敏感,对碱敏感性未发生变化。∷CD630 27900对酸敏感性恢复至野生型水平。[结论]敲除CD630_27900基因,艰难拟梭菌自溶速率变慢、自溶素cwp19、Acd基因表达量降低、细胞毒力、毒素基因tcdA和 tcdB降低,说明CD630_27900基因影响菌株自溶以及毒力释放。菌株ΔCD630_27900对临床上常见的抗生素及酸性环境更加敏感,且这些变化均可通过基因回补恢复。提示该基因可作为联合抗生素治疗艰难梭菌感染(Clostridioides difficile infection,CDI)的潜在靶点。

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外源性硫化氢对氟诱导损伤SH-SY5Y细胞的作用及机制

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贵州医科大学学报 2020年第11期45卷 1260-1264页

作者：潘际刚吴昌学齐晓岚李成朱卫刘宇官志忠贵州医科大学基础医学院生理学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院病理科贵州贵阳550004

目的:探讨外源性硫化氢(H 2S)对氟诱导损伤SH-SY5Y细胞的作用及其机制。方法:离体培养的SH-SY5Y细胞,分为Control组(不处理)、NaF组(NaF孵育48 h诱导损伤)、NaHS组(NaHS孵育48 h)、NaF联合NaHS组(NaHS预处理30 min后加2 mmol/L NaF孵育4... 详细信息

目的:探讨外源性硫化氢(H 2S)对氟诱导损伤SH-SY5Y细胞的作用及其机制。方法:离体培养的SH-SY5Y细胞,分为Control组(不处理)、NaF组(NaF孵育48 h诱导损伤)、NaHS组(NaHS孵育48 h)、NaF联合NaHS组(NaHS预处理30 min后加2 mmol/L NaF孵育48 h);采用台盼蓝拒染法观察各组SH-SY5Y细胞存活率,采用光镜、相差显微镜及透射电镜观察各组SH-SY5Y细胞超微结构,采用流式细胞仪检测各组细胞的活性氧(ROS)水平。结果:Control组和NaF联合NaHS组SH-SY5Y细胞的存活率分别高于NaF组,差异均有统计学意义(P<0.05);NaF组细胞器结构模糊不清、线粒体空泡变性增多,NaF联合NaHS组则形态结构明显得到改善;NaF组细胞ROS水平分别高于Control组和NaF联合NaHS组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:外源性H 2S参与对氟所致神经损伤的保护,可能涉及抗氧化应激机制。

关键词：硫化氢线粒体氟中毒神经损伤活性氧 SH-SY5Y细胞

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