检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2020年第2期36卷 210-225页

作者：洪伟万雯崔古贞官志忠齐晓岚禹文峰贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学病理学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院微生物教研室贵州贵阳550004

艰难梭菌Clostridioesdifficile是一种革兰氏阳性、产芽孢、专性厌氧细菌,是医院相关性腹泻的主要病原体。近年来,随着强毒株的出现(如核糖体027型),其流行性与致死率逐年上升,因此对艰难梭菌生理、生化特征及致病机制的研究受到广泛重... 详细信息

艰难梭菌Clostridioesdifficile是一种革兰氏阳性、产芽孢、专性厌氧细菌,是医院相关性腹泻的主要病原体。近年来,随着强毒株的出现(如核糖体027型),其流行性与致死率逐年上升,因此对艰难梭菌生理、生化特征及致病机制的研究受到广泛重视。艰难梭菌生理、生化特征及致病机制研究又以建立其稳定、高效的基因编辑方法为必要前提。借助基因编辑工具,研究者可以扰动艰难梭菌核心生物学过程,在分子水平研究其分子致病机制。如Clos Tron技术在艰难梭菌毒素A (Toxin A)和毒素B (Toxin B)与其致病力关系的研究中起到了关键作用。文中以时间为主线综述了艰难梭菌基因编辑技术的发展历程和最新进展,并对艰难梭菌基因编辑技术未来的研究方向进行展望。

关键词：艰难梭菌艰难梭菌感染基因编辑基因功能研究致病机制

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骨保护素基因多态性与贵州省燃煤污染型地方性氟中毒的关联分析

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中华地方病学杂志 2020年第9期39卷 641-646页

作者：田薇喻艳琴赵安宿张秀秀王婵娟张婷单可人何燕贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵阳550004 贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室贵阳550004

目的探讨骨保护素(OPG)基因多态性与贵州省燃煤污染型地方性氟中毒(简称燃煤型地氟病)的关系。方法2018、2019年,采用病例对照研究方法,在贵州省典型燃煤型地氟病病区毕节市选取燃煤型地氟病患者260例作为病例组,根据《地方性氟骨症诊... 详细信息

目的探讨骨保护素(OPG)基因多态性与贵州省燃煤污染型地方性氟中毒(简称燃煤型地氟病)的关系。方法2018、2019年,采用病例对照研究方法,在贵州省典型燃煤型地氟病病区毕节市选取燃煤型地氟病患者260例作为病例组,根据《地方性氟骨症诊断标准》(WS 192-2008)将病例组分为重症组和轻症组,每组130例;同时,在贵州省非燃煤型地氟病病区长顺县选取无氟斑牙及氟骨症症状者130例作为对照组。提取研究对象全血基因组DNA,采用TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR法对所有样本OPG基因rs2460985、rs2073618、rs6469804、rs69938134个单核苷酸多态性(SNP)位点进行基因分型和遗传模式分析,比较其等位基因、基因型及所构建的单倍型在对照、轻症、重症组中频率分布的差异。结果经Hardy-Weinberg平衡检验,4个SNP位点基因型频率在对照、轻症、重症组中均达到遗传平衡(P均>0.05)。OPG基因rs6469804位点基因型频率组间比较差异有统计学意义(χ2=10.615,P<0.05),且该位点基因型频率对照组与重症组比较差异有统计学意义(χ2=6.784,P<0.05)。遗传模式分析结果显示,rs6469804位点对照组与重症组比较最优遗传模式为超显性遗传模式,在该模式下基因型AA+GG和AG频率分布差异有统计学意义[比值比(OR)=1.94,95%置信区间(CI):1.16~3.23,P<0.05],基因型AG是燃煤型地氟病发生的危险因素;rs2073618位点对照组与轻症组比较最优遗传模式为隐性遗传模式,在该模式下基因型GG+GC和CC频率分布差异有统计学意义(OR=3.17,95%CI:1.08~9.30,P<0.05),基因型CC是燃煤型地氟病发生的危险因素。对照组与轻症组比较,单倍型C-C-G-T、T-G-A-C是燃煤型地氟病发生的危险因素(调整OR=2.41、1.98,95%CI:1.29~4.50、1.22~3.23,P均<0.05);对照组与重症组比较,单倍型T-G-A-C是燃煤型地氟病发生的危险因素(调整OR=1.87,95%CI:1.14~3.07,P<0.05)。结论OPG基因rs6469804位点基因型AG和rs2073618位点基因型CC可能是燃煤型地氟病发生的危险因素。

关键词：骨保护素氟中毒基因多态性单倍型

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氟暴露对大鼠肾脏损伤及SIRT3-FOXO3a-PINK1/PARKIN通路的影响

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中华地方病学杂志 2024年第7期43卷 528-535页

作者：宋居会何文雯李瑞超罗蕴胭张婷王婵娟董阳婷何燕贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物学重点实验室省部共建地方病及民族区域性疾病防控协同创新中心贵阳550004

目的探讨氟暴露对大鼠肾脏损伤及沉默信息调节因子3(SIRT3)-叉头蛋白O3a(FOXO3a)-张力蛋白同源物诱导的假定激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶(PARKIN)通路的影响。方法选取4周龄SD大鼠(清洁级,体质量100~150 g)24只,按随机数字表法分为3组:对... 详细信息

目的探讨氟暴露对大鼠肾脏损伤及沉默信息调节因子3(SIRT3)-叉头蛋白O3a(FOXO3a)-张力蛋白同源物诱导的假定激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶(PARKIN)通路的影响。方法选取4周龄SD大鼠(清洁级,体质量100~150 g)24只,按随机数字表法分为3组:对照组、低氟组、高氟组,每组8只(雌雄各半)。对照组自由饮用自来水(氟离子浓度<0.5 mg/L),低、高氟组分别自由饮用自来水和氟化钠配制的溶液(氟离子浓度分别为5.0、50.0 mg/L),周期为180 d。实验结束后,观察并记录大鼠氟斑牙形成情况,采集大鼠股骨、尿液、血液,检测骨氟、尿氟、血氟含量,并检测肾脏功能相关指标(血清尿酸、肌酐、尿素氮含量);光镜下观察苏木素-伊红(HE)染色肾组织形态学变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法和蛋白质印迹法分别检测肾脏SIRT3、FOXO3a、PINK1、PARKIN、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、自噬受体蛋白(P62)mRNA和蛋白表达水平。结果低、高氟组大鼠分别有7、1只检出Ⅰ度氟斑牙,0、7只检出Ⅱ度氟斑牙。与对照组比较,低、高氟组大鼠骨氟(μg/g:1.18±0.06、2.16±0.07比0.52±0.05)、尿氟(mg/L:4.43±0.11、7.46±0.09比2.58±0.14)、血氟含量(μg/ml:0.77±0.06、1.68±0.10比0.52±0.08),血清尿酸(μg/ml:61.01±4.17、103.92±5.43比28.68±2.91)、肌酐(μg/ml:74.82±9.61、132.05±5.35比22.38±4.11)、尿素氮含量(μg/ml:13.36±1.27、14.55±0.34比0.29±0.07)均较高(均P<0.05)。光镜下,对照组肾组织表现为肾小管和肾小球细胞排列紧密且整齐,细胞形态规则,轮廓完整清晰;低氟组与对照组相似,未见明显异常;高氟组可见肾小球结构异常,出现萎缩现象,部分区域肾小管表现为上皮细胞水肿和细胞间界限不清。qRT-PCR检测结果显示,与对照组比较,低、高氟组SIRT3(0.82±0.03、0.58±0.02比1.00±0.08)和P62 mRNA表达水平(0.75±0.07、0.28±0.09比1.00±0.07)均较低(均P<0.05);FOXO3a(1.35±0.04、3.01±0.23比1.00±0.08),PINK1(1.58±0.09、3.28±0.09比1.00±0.07),PARKIN(1.51±0.04、1.67±0.10比1.00±0.05)和LC3 mRNA表达水平(1.74±0.07、2.38±0.18比1.00±0.08)均较高(均P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,与对照组比较,低、高氟组SIRT3(0.91±0.01、0.55±0.03比1.00±0.01)和P62蛋白表达水平(0.94±0.27、0.66±0.38比1.00±0.19)均较低(均P<0.05);FOXO3a(1.14±0.03、1.22±0.05比1.00±0.02),PINK1(1.46±0.03、1.56±0.03比1.00±0.05),PARKIN(1.98±0.02、2.33±0.11比1.00±0.06)和LC3蛋白表达水平(4.10±0.58、4.93±0.33比1.00±0.13)均较高(均P<0.05)。结论氟暴露可致大鼠肾组织损伤,SIRT3、P62表达水平下调,FOXO3a、PINK1、PARKIN及LC3表达水平上调。

关键词：氟大鼠线粒体自噬沉默信息调节因子3-叉头蛋白O3a 张力蛋白同源物诱导的假定激酶1/E3泛素连接酶

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过量氟暴露对体内外星形胶质细胞及其胶质纤维酸性蛋白表达的影响

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中华地方病学杂志 2022年第9期41卷 722-728页

作者：傅晓丽周箫薄莉李彬何冬玲官志忠刘艳洁贵州医科大学附属医院病理科贵阳550004 贵州省分子生物学重点实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵阳550004

目的探讨过量氟暴露对体内外星形胶质细胞及其胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法(1)体内实验:选择24只SPF级SD大鼠,雌雄各半,按性别、体重采用随机数字表法分为对照组和染氟组,每组12只,分别饮用自来水配制的<1 mg/L和50 mg/L... 详细信息

目的探讨过量氟暴露对体内外星形胶质细胞及其胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法(1)体内实验:选择24只SPF级SD大鼠,雌雄各半,按性别、体重采用随机数字表法分为对照组和染氟组,每组12只,分别饮用自来水配制的<1 mg/L和50 mg/L氟化钠溶液,饲养6个月。实验结束后采用免疫荧光法、免疫组织化学法和蛋白质免疫印迹法检测大鼠脑组织GFAP蛋白表达水平。(2)体外实验:分离成年(6月龄)大鼠大脑皮质星形胶质细胞进行原代培养(4 mmol/L氟化钠溶液培养24 h),采用免疫荧光法鉴定星形胶质细胞,实时荧光定量PCR法和蛋白质免疫印迹法分别检测GFAP mRNA及蛋白表达水平,流式细胞术检测星形胶质细胞凋亡情况及钙离子含量。结果(1)体内实验:免疫荧光法、免疫组织化学法、蛋白质免疫印迹法检测结果均显示,染氟组大鼠脑组织GFAP蛋白表达水平高于对照组(0.440±0.200比0.250±0.120,t=-5.93,P=0.027;0.270±0.020比0.240±0.050,t=-4.87,P=0.040;1.017±0.001比0.486±0.006,t=-52.48,P=0.001)。(2)体外实验:免疫荧光法鉴定结果显示,GFAP阳性,原代培养细胞鉴定为星形胶质细胞;实时荧光定量PCR法检测结果显示,染氟组GFAP mRNA表达水平高于对照组(2.780±0.120比0.134±0.005,t=-37.84,P=0.001);蛋白质免疫印迹法检测结果显示,染氟组GFAP蛋白表达水平高于对照组(2.76±0.10比1.38±0.05,t=-20.44,P=0.002);流式细胞术检测结果显示,染氟组细胞凋亡率高于对照组(%:55.0±1.0比3.5±0.6,t=-10.28,P=0.009),钙离子含量低于对照组(%:54±9比72±13,t=4.64,P=0.043)。结论过量氟暴露可造成体内外星形胶质细胞GFAP表达增加,细胞凋亡增多,并影响钙信号转导通路。

关键词：氟化物中毒胶质纤维酸性蛋白星形胶质细胞原代细胞培养

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内皮型一氧化氮合成酶基因rs3918181多态性与贵州省苗族、布依族原发性高血压的关系

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临床心血管病杂志 2017年第5期33卷 443-447页

作者：张旺德何燕赵孝梅张婷王婵娟禹文峰官志忠地方病与少数民族疾病教育部重点实验室(贵州医科大学) 贵州省医学分子生物学重点实验室(贵州医科大学)贵阳550004

目的:探讨贵州省苗族、布依族人群内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因第14内含子rs3918181位点多态性与原发性高血压的关系。方法:选取贵州雷山县苗族和荔波县布依族247例原发性高血压患者(苗族123例,布依族124例)为高血压组,244例健康人群... 详细信息

目的:探讨贵州省苗族、布依族人群内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因第14内含子rs3918181位点多态性与原发性高血压的关系。方法:选取贵州雷山县苗族和荔波县布依族247例原发性高血压患者(苗族123例,布依族124例)为高血压组,244例健康人群(苗族118例,布依族126例)为对照组。采用TaqMan探针法检测eNOS基因rs3918181位点多态性,分析rs3918181位点不同基因型及等位基因频率在两个民族人群中的分布。结果:eNOS基因rs3918181位点AA、AG、GG基因型及A、G等位基因在苗族、布依族高血压组与对照组中的分布频率符合Hardy-Weinberg平衡定律;贵州苗族、布依族人群eNOS基因rs3918181位点基因型分布频率及等位基因频率在高血压组和健康对照组之间差异无统计学意义。结论:eNOS基因rs3918181位点多态性与贵州省苗族、布依族人群原发性高血压可能不相关,该位点多态性在贵州苗族、布依族人群之间无民族差异性。

关键词：原发性高血压一氧化氮合酶基因多态性贵州

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不同培养条件对幽门螺杆菌体外感染活力的影响

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中国病原生物学杂志 2017年第9期12卷 833-836页

作者：李雅洁周建奖赵艳袁航龙妮娅王琴容谢渊贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

目的比较不同培养条件下幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)对胃癌细胞株AGS感染的能力。方法按不同培养条件分为微需氧培养组和10%CO2培养组。每组再分为未加抗生素组、加Hp选择剂组及Hp选择剂+杆菌肽+萘啶酸组;液体培养组和培养7d组... 详细信息

目的比较不同培养条件下幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)对胃癌细胞株AGS感染的能力。方法按不同培养条件分为微需氧培养组和10%CO2培养组。每组再分为未加抗生素组、加Hp选择剂组及Hp选择剂+杆菌肽+萘啶酸组;液体培养组和培养7d组。37℃培养3d或7d后收集细菌,以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为50分别感染胃癌细胞株AGS细胞,6h后收集培养上清液,分别采用ELISA和BCA法检测白细胞介素-8(IL-8)水平和总蛋白含量,计算上清液中每mg蛋白IL-8含量。结果微需氧培养组和10%CO2培养组中未加抗生素组IL-8含量分别为2.30±0.16和2.91±0.74,加Hp选择剂组分别为0.95±0.01和1.11±0.28,Hp选择剂+杆菌肽+萘啶酸组分别为1.01±0.15和1.37±0.23,10%CO2培养组IL-8含量均高于微需氧培养组(P<0.05);微需氧培养及10%CO2培养条件下,未加抗生素组IL-8含量均高于加抗生素组(P<0.05);液体培养组(3.25±0.57)IL-8含量高于固体培养组(0.95±0.01),培养3d组(1.11±0.28)高于培养7d组(0.6±0.17)(P<0.05)。结论在37℃、10%CO2条件下用无抗生素液体培养基培养3d,Hp体外感染胃癌细胞的活力较强。

关键词：幽门螺杆菌白细胞介素8 感染活力胃癌

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东亚与西方幽门螺杆菌菌株感染原代胃癌细胞的转录组学分析

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基因组学与应用生物学 2023年第2期42卷 121-132页

作者：廖永慧龙妮娅李雷蕾彭国玲陈源佳谢渊赵艳周建奖贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵阳550004 贵州医科大学附属医院贵阳550004

本研究旨在比较、分析和验证东亚与西方幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)菌株感染原代胃癌细胞后的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),探讨东亚与西方菌株的致病差异。用幽门螺杆菌东亚菌株GZ7、西方菌株26695以感染复... 详细信息

本研究旨在比较、分析和验证东亚与西方幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)菌株感染原代胃癌细胞后的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),探讨东亚与西方菌株的致病差异。用幽门螺杆菌东亚菌株GZ7、西方菌株26695以感染复数(multiplicity of infection,MOI)50∶1感染原代胃癌细胞6 h,收取细胞进行转录组学测序,以|log_(2)FC|>1,FDR≤0.05为标准,筛选DEGs,利用OmicsBean-Cancer在线工具对DEGs进行生物信息学分析。选择4个重要基因进行TCGA数据库分析及Western blot验证。结果表明,GZ7感染胃癌细胞组与未感染胃癌细胞组比较有31个DEGs;26695感染胃癌细胞组与未感染胃癌细胞组比较有109个DEGs;26695感染组与GZ7感染组之间共有的DEGs为22个;GZ7感染组特有的DEGs为9个,26695感染组特有的DEGs为87个。DEGs主要与炎症(TNF信号通路、NF-κB信号通路)、细胞表面受体(Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路)等通路相关。TCGA数据库分析发现IL6和DKK1在胃癌组织中的表达显著高于正常组织的(P<0.001),且IL6和DKK1高表达与胃癌患者10年生存率呈负相关(P<0.01)。Western blot结果证实幽门螺杆菌感染上调胃癌细胞中JUN和FOSL1(两个转录因子),IL6,以及DKK1(东亚菌株特有的DEGs)蛋白的表达;下调细胞中的JUN基因可以抑制IL6和DKK1蛋白的表达,GZ7再感染能够恢复细胞中JUN、IL6和DKK1蛋白的表达水平。总之,东亚、西方幽门螺杆菌菌株感染胃癌细胞产生的DEGs有明显差异,这可能是东亚、西方国家胃癌发病率差异的原因之一。

关键词：幽门螺杆菌胃癌转录组测序差异表达基因

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腺病毒载体介导CagA基因表达对原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达的影响

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中国病原生物学杂志 2019年第11期14卷 1297-1302,1311页

作者：杨丽萍贾岑岑龙妮娅骆梅杨丹王珺谢渊赵艳王琴容周建奖贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州医科大学附属医院临床医学研究中心贵州医科大学附属医院临检科

目的研究过表达CagA对原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达的影响。方法构建CagA重组腺病毒载体pAdeno-MCMV-CagA-3Flag-IRES2-EGFP(pAdeno-CagA),转染HEK293细胞,包装腺病毒,以感染复数(Multiplicity of infection, MOI) 50感染原代胃癌细胞72 h,并用幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)东亚株GZ7(CagA^+)以MOI 50感染原代胃癌细胞24 h,通过Western blot检测CagA和已糖激酶2(HK2)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、烯醇化酶1(ENO1)、丙酮酸激酶1/2(PKM1/2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)糖酵解代谢酶的蛋白表达,采用流式细胞术检测胃癌细胞周期分布。结果成功构建了CagA重组腺病毒载体pAdeno-CagA,用pAdeno-CagA腺病毒和Hp GZ7感染原代胃癌细胞后糖酵解代谢酶HK2、ENO1、GLUT1的表达与空载组或Hp非感染组比较均显著下调(P<0.05)。与空载组比较,pAdeno-CagA感染胃癌SGC-7901细胞24、48、72 h,其G2/M期细胞百分比显著增加(P<0.05),感染72 h的空载组和CagA腺病毒组G2/M期的比值分别为16.90%和65.93%。结论 Hp通过CagA使原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达下调,可能与DNA损伤使细胞阻滞在G2/M期有关。

关键词：幽门螺杆菌腺病毒 CagA 胃癌糖酵解细胞周期

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L-亚氨基乙基鸟氨酸与过量氟共培养对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞一氧化氮／内皮型一氧化氮合酶表达的影响

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中华地方病学杂志 2018年第6期37卷 455-460页

作者：朱丹刘宇平桂传枝官志忠贵州医科大学病理学教研室贵阳550004 贵州医科大学贵州省分子生物学重点实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵阳550004

目的探讨内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）特异性抑制剂L-亚氨基乙基鸟氨酸（L-iminoethyl ornithine hydrochloride，L-NIO）对氟致体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡、eNOS mRNA和蛋白表达以 ... 详细信息

目的探讨内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）特异性抑制剂L-亚氨基乙基鸟氨酸（L-iminoethyl ornithine hydrochloride，L-NIO）对氟致体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡、eNOS mRNA和蛋白表达以及一氧化氮（Nitric oxide，NO）含量和一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）活性改变的影响。方法将体外培养的 SH-SY5Y细胞分为对照组、低氟组、高氟组、L-NIO组、低氟＋ L-NIO组、高氟＋ L-NIO组，n = 3。对照组加入与实验组等体积的培养液，低氟组和高氟组加入氟化钠（sodium fluoride，NaF）浓度分别为0.2、2.0 mmol／L，L-NIO组加入3 μmol／L L-NIO，低氟＋ L-NIO组和高氟＋ L-NIO组分别加入0.2 mmol／L NaF和3 μmol／L L-NIO、2.0 mmol／L NaF和3 μmol／L L-NIO，培养时间为48 h。采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测细胞中eNOS蛋白表达水平，实时荧光定量PCR（Real-time fluorescent quantitative PCR）法检测细胞中eNOS mRNA表达水平，流式细胞仪检测细胞的凋亡情况，硝酸还原酶法和比色法检测细胞培养液中NO含量和NOS活性。结果与对照组（1.000 ± 0.026）比较，低、高氟组eNOS蛋白表达量（1.108 ± 0.071、1.349 ± 0.057 ）升高，L-NIO组（0.755 ± 0.148）下降（P均〈 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟＋ L-NIO组（0.802 ± 0.115）下降（P均〈 0.05）；与高氟组比较，高氟＋ L-NIO组（0.988 ± 0.135）下降（P 〈 0.05）。与对照组（1.000 ± 0.018）比较，低、高氟组eNOS mRNA表达量（1.809 ± 0.099、2.416 ± 0.295）升高，L-NIO组（0.609 ± 0.077）下降（P均〈 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟＋ L-NIO组（1.040 ± 0.034）下降（P均〈 0.05）；与高氟组比较，高氟＋ L-NIO组（1.233 ± 0.152）下降（P 〈 0.05）。与对照组［（1.66 ± 0.07）％］比较，低、高氟组细胞凋亡率［（8.81 ± 0.27）%、（17.60 ± 0.20）%］升高，L-NIO组［（1.03 ± 0.04）%］下降（P均〈 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟＋ L-NIO组［（6.03 ± 0.10）%］下降（P均〈 0.05）；与高氟组比较，高氟＋ L-NIO组［（12.12 ± 0.08）％］下降（P 〈 0.05）。与对照组［（2.773 ± 0.145）μmol／L］比较，低、高氟组细胞培养液中NO含量［（8.251 ± 1.047）、（14.287 ± 1.062）μmol／L ］升高，L-NIO组［（1.648 ± 0.155）μmol／L］下降（P均〈 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟＋ L-NIO组［（4.622 ± 0.252）μmol／L］下降（P均〈 0.05）；与高氟组比较，高氟＋ L-NIO组［（7.899 ± 0.385）μmol／L］下降（P 〈 0.05）。与对照组［（0.507 ± 0.041）Ｕ／ｍｌ］比较，低、高氟组细胞培养液中NOS活性［（0.772 ± 0.032）、（2.258 ± 0.062 ）Ｕ／ｍｌ］升高，L-NIO组［（0.346 ± 0.015）Ｕ／ｍｌ］下降（P均〈 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟＋ L-NIO 组［（0.637 ± 0.026）Ｕ／ｍｌ］下降（P均〈 0.05）；与高氟组比较，高氟＋ L-NIO组［（1.161 ± 0.071）Ｕ／ｍｌ］下降（P 〈 0.05）。结论过量氟可导致SH-SY5Y细胞eNOS蛋白和mRNA过度表达以及细胞凋亡率上升，细胞培养液中NO含量增多以及NOS 活性增强，加入L-NIO与氟共培养后可拮抗氟对SH-SY5Y细胞的损伤，起到一定的神经保护作用。

关键词：氟人神经母细胞瘤细胞内皮型一氧化氮合酶一氧化氮

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幽门螺杆菌毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白表达的影响

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中国病原生物学杂志 2019年第12期14卷 1394-1397,1402页

作者：鲍丽雅黄婷婷赵艳李超陈定宇王琴容周建奖谢渊贵州医科大学地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院感染科肝炎实验室贵州医科大学分子生物学重点实验室

目的检测幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,Hp)主要毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白par-kin、p62、LC3表达的影响,为Hp致胃癌的研究提供理论基础。方法用cagA基因失活突变Hp菌株(1004HpAcagA)和野生型Hp/cagA+菌株(1004Hp)感... 详细信息

目的检测幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,Hp)主要毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白par-kin、p62、LC3表达的影响,为Hp致胃癌的研究提供理论基础。方法用cagA基因失活突变Hp菌株(1004HpAcagA)和野生型Hp/cagA+菌株(1004Hp)感染原代胃癌细胞,感染6 h收集细胞蛋白,用高表达cagA的真核表达载体pcDNA3.1/cagA脂质体转染胃癌细胞AGS,24 h收集细胞蛋白,用Western blot检测各组细胞线粒体自噬相关蛋白***3表达变化。结果parkin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在1004 HpAcagA感染组分别为0.97±0.23 J.71±0.23,1.03+0.14,1004 Hp感染组分别为1.61±0,32,2.26±0,08,1.32±0,04,1004 Hp感染组较1004 HpAcagA感染组升高了1.66倍、1.32倍、1.27倍,差异有统计学意义(F值分别为7.96,15.35,11.09,P<0.05);par-kin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在pcDNA3.1空载体转染组分别为1.15+0.14,0.75+0.23,0.74±0,19,pcDNA 3.1/cagA转染组分别为1.49±0,02,1.01+0.02、l.29±0.07,pcDNA3.1/cagA转染组较pcDNA3.1空载体转染组升高1.29倍、1.35倍、1.74倍,差异有统计学意义(F值分别为17.48,14.02,21.06,P<0.05)。Hp/cagA+感染和pcDNA 3.1/cagA转染取得一致结果,提示Hp cagA注入胃上皮细胞后影响细胞线粒体自噬相关蛋白的表达。结论HpCagA对线粒体自噬有一定的调控作用,其可能是Hp诱导胃癌发生发展的分子机制。

关键词：胃癌细胞线粒体自噬幽门螺杆菌 CagA

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