检索结果-内蒙古大学图书馆

基因组学与应用生物学 2024年第4期43卷 697-707页

作者：刘凯凤韦现鹏欧阳燕胡祖权岳萍曾柱贵州医科大学基础医学院贵州省感染免疫与抗体工程特色重点实验室贵州省细胞免疫治疗工程研究中心贵阳550025 贵州医科大学生物与工程学院(健康医药现代产业学院) 贵州医科大学生物与医学工程重点实验室贵州省高等学校免疫细胞与抗体工程研究中心贵阳550025

子宫内膜癌(uterine corpus endometrial carcinoma,UCEC)是最常见的女性生殖系统肿瘤,肿瘤发生远端转移的患者预后极差。失巢凋亡(anoikis)是一种特殊的程序性细胞死亡形式,在肿瘤的侵袭和转移中起着关键作用,分析失巢凋亡相关基因与U... 详细信息

子宫内膜癌(uterine corpus endometrial carcinoma,UCEC)是最常见的女性生殖系统肿瘤,肿瘤发生远端转移的患者预后极差。失巢凋亡(anoikis)是一种特殊的程序性细胞死亡形式,在肿瘤的侵袭和转移中起着关键作用,分析失巢凋亡相关基因与UCEC患者预后之间的关系将为临床治疗提供指导。本研究采用非监督一致性聚类算法对数据集进行分组,分析患者的肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)与临床特征的差异。同时,筛选预后相关的失巢凋亡基因,构建风险评分模型,评估UCEC患者的风险评分与临床特征、TME和药物治疗反应之间的关系。在分析失巢凋亡相关基因表达差异的基础上确定两个明确的聚类(A簇和B簇),与A簇UCEC患者相比,B簇UCEC患者的总生存期较短、免疫浸润水平较低。构建的风险评分模型可量化失巢凋亡相关基因的调控模式,高风险评分组表现为预后不良且免疫细胞浸润水平低,而低风险评分组则相反。药物敏感性分析结果表明,高风险评分的人群可能从靶向有丝分裂和DNA修复通路的药物中获得更佳疗效。本研究揭示了失巢凋亡相关基因与临床特征、TME和药物治疗反应之间的潜在关系,并阐明了其在UCEC治疗中的价值。

关键词：子宫内膜癌肿瘤微环境失巢凋亡风险评分模型预后价值

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黄曲霉毒素B1对肝癌细胞HepG2生物物理学特性及细胞骨架结构的影响

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安徽医科大学学报 2023年第1期58卷 10-14页

作者：于欢喻艳琴钱天宝刘清玉王赟曾柱胡祖权贵州医科大学生物与工程学院贵州省高等学校免疫细胞与抗体工程研究中心贵阳550025 贵州医科大学基础医学院贵州省感染免疫与抗体工程特色重点实验室/贵州省细胞免疫治疗工程研究中心贵阳550025

目的研究黄曲霉毒素B1(AFB1)对人肝癌细胞(HCCs)生物物理学特性及细胞骨架结构的影响。方法利用0、0.01、0.1、1、5、10μmol/L AFB1分别处理HepG2细胞24 h和48 h,采用CCK-8试剂盒检测细胞活力。在此基础上,分析10μmol/L AFB1对细胞渗... 详细信息

目的研究黄曲霉毒素B1(AFB1)对人肝癌细胞(HCCs)生物物理学特性及细胞骨架结构的影响。方法利用0、0.01、0.1、1、5、10μmol/L AFB1分别处理HepG2细胞24 h和48 h,采用CCK-8试剂盒检测细胞活力。在此基础上,分析10μmol/L AFB1对细胞渗透脆性、膜流动性、细胞电泳率和F-actin骨架结构的影响。随后,提取细胞总RNA,通过实时荧光定量PCR检测12种主要细胞骨架结合蛋白的转录水平变化。结果AFB1处理48 h时HepG2细胞的活力呈剂量依赖性增强。10μmol/L AFB1处理能够增强HepG2细胞抗低渗能力及细胞电泳率,细胞骨架F-actin含量明显增加,主要细胞骨架结合蛋白的mRNA表达发生改变。结论AFB1能够影响HepG2细胞的生物物理学特性、细胞骨架结构及其结合蛋白,这可能与其毒性作用直接相关。

关键词：黄曲霉毒素肝癌细胞生物物理学特性细胞骨架

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SARS-CoV-2刺突蛋白受体结合结构域编码基因的体外转录及其在293T细胞中的表达

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中国动物传染病学报 2023年

作者：周雪高磊张瑾宬袁思凌操蓉刘丽娜贵州医科大学基础医学院/生物与工程学院贵州省感染免疫与抗体工程特色重点实验室贵州省细胞免疫治疗工程研究中心贵州医科大学生物与医学工程重点实验室贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室

为获得能表达严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）刺突蛋白受体结合结构域（RBD）的体外转录mRNA，将设计、优化并合成的RBD基因片段插入真核表达载体pcDNA3.1(+)，构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-RBD；重组质粒转染哺乳动物细胞2... 详细信息

为获得能表达严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）刺突蛋白受体结合结构域（RBD）的体外转录mRNA，将设计、优化并合成的RBD基因片段插入真核表达载体pcDNA3.1(+)，构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-RBD；重组质粒转染哺乳动物细胞293T后，Western blot检测重组蛋白RBD的表达；以表达RBD的重组质粒为模板，PCR扩增包含T7启动子的RBD基因片段作为体外转录模板，之后利用T7转录试剂盒体外转录获得修饰的RBD mRNA，添加多聚腺苷酸尾后使用RNA纯化试剂盒进行纯化，纯化后的RBD mRNA转染至293T细胞中，利用Western blot进行目的蛋白表达鉴定。结果显示，编码RBD的重组质粒构建成功并能在293T细胞中表达外源蛋白，体外转录获得修饰的RBD mRNA能在哺乳动物细胞中翻译，表达的RBD蛋白能与抗RBD的单克隆抗体反应，具有免疫反应原性，为SARS-CoV-2 RBD mRNA疫苗的研制奠定了基础。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2 刺突蛋白受体结合结构域体外转录真核表达

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微丝骨架结合蛋白在未成熟树突状细胞抗原吞噬过程中的差异表达分析

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医用生物力学 2024年第5期39卷 814-822页

作者：李道红罗代琴曾宪琳张帅徐朴吴翠芳王赟叶远浓胡祖权龙金华曾柱贵州医科大学基础医学院、贵州省细胞免疫治疗工程技术中心/贵州省感染免疫与抗体工程特色重点实验室贵阳550025 贵州医科大学生物与工程学院(健康医药现代产业学院、贵州省高等学校免疫细胞与抗体工程研究中心生物与医学工程重点实验室)贵阳550025 贵州医科大学附属医院介入科贵阳550004 贵州医科大学大健康学院医学信息学教研室生物信息学与生物医学大数据智能挖掘实验室贵阳550025 贵州医科大学附属肿瘤医院头颈肿瘤科贵阳550000

目的探讨未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,imDCs)发挥抗原吞噬功能时关键微丝骨架结合蛋白(microfilament cytoskeleton-binding proteins,MCBPs)的差异表达情况。方法从健康人外周血中分离单核细胞(monocytes,MOs),经重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,rhGM-CSF)、重组人白介素-4(recombinant human interleukin-4,rhIL-4)诱导培养6天获得imDCs;将imDCs与低分子量(40 kDa)和高分子量(150 kDa)的右旋糖酐分别孵育1、3和6 h,流式细胞仪检测imDCs吞噬右旋糖酐的比率及免疫表型分子的表达;免疫荧光检测丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)及PFN1、WASP、α-actinin在细胞中的定位情况;qPCR和Western blotting分别检测MCBPs在mRNA和蛋白水平的表达差异;最后,基于系统生物学算法中的逐步回归和主成分分析方法筛选成分系数最大的MCBPs。结果在吞噬抗原的过程中,imDCs对低分子量抗原的吞噬速度更快,吞噬时长可维持约3 h,其细胞表型和细胞形态逐渐向mDCs分化,且F-actin发生明显的重塑,PFN1、CDM、WASP、CAPZB、Filamin A、α-actinin等MCBPs的表达下调,WAVE1、Arp2/3复合体、Fascin的表达上调;信号蛋白Rac1的mRNA表达上调,CDC42和RhoA的mRNA表达下调;免疫荧光结果显示,PFN1、WASP、α-actinin在imDCs吞噬抗原过程中发生转位;逐步回归和主成分分析结果显示PFN1的成分系数最大。结论PFN1可能是imDCs吞噬抗原过程中的关键MCBPs,这对于深入理解imDCs细胞骨架结构变化与免疫学功能之间的关系具有重要意义。

关键词：未成熟树突状细胞吞噬微丝骨架微丝骨架结合蛋白系统生物学

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不同物理形貌对树突状细胞伪足小体及细胞骨架分布的影响

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医用生物力学 2024年第S1期39卷 297-297页

作者：龙世棋吴翠芳曾柱贵州医科大学基础医学院贵州省细胞免疫治疗工程研究中心贵州省感染免疫与抗体工程重点实验室贵阳550000 贵州医科大学生物与工程学院贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心生物与医学工程重点实验室贵阳550000

目的在生物体内,细胞无时无刻与细胞外基质发生接触,细胞外基质的物理形貌可通过机械传导影响细胞的生物学功能。作为重要的固有免疫细胞,树突状细胞可在体内不停巡逻、识别抗原并加工提呈给T细胞,进而启动适应性免疫应答。目前,尚不清... 详细信息

目的在生物体内,细胞无时无刻与细胞外基质发生接触,细胞外基质的物理形貌可通过机械传导影响细胞的生物学功能。作为重要的固有免疫细胞,树突状细胞可在体内不停巡逻、识别抗原并加工提呈给T细胞,进而启动适应性免疫应答。目前,尚不清楚树突状细胞巡逻过程中面对不同的物理形貌会有怎样的感知及反应。本研究通过构建平面基底和圆柱型凹槽基底探讨不同物理形貌对树突状细胞伪足小体形成及细胞骨架分布的影响。方法通过光刻和微加工技术制备圆柱型凹槽微结构;活细胞观测细胞自由迁移情况;免疫荧光技术检测细胞骨架相关蛋白F-actin、tubulin和伪足小体相关蛋白vinculin的表达及空间定位情况。结果活细胞观测显示,相较于平面基底,树突状细胞在圆柱形凹槽基底中表现出绕圈迁移的特点。免疫荧光结果显示,在平面基底中树突状细胞F-actin主要位于细胞周围,tubulin主要位于细胞内部,vinculin主要位于细胞与平面基底接触部位。而在圆柱形凹槽基底中,树突状细胞F-actin、vinculin在凹槽侧壁有更为明显的聚集,tubulin则在细胞内部均匀分布。结论不同的物理形貌可以影响树突状细胞微丝及伪足小体的分布。目前的研究为进一步探讨不同的物理形貌对树突状细胞迁移及吞噬功能的影响奠定基础。

关键词：树突状细胞细胞外基质细胞骨架免疫荧光技术空间定位微加工技术圆柱形吞噬功能

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ROS响应型抗氧化TiO_(2)纳米阵列对树突状细胞免疫学功能调控的研究

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医用生物力学 2024年第S1期39卷 264-264页

作者：董美玲罗赵雅静吴仪陈红胡祖权陈晋王赟曾柱贵州医科大学基础医学院贵州省细胞免疫治疗工程研究中心贵州省感染免疫与抗体工程特色重点实验室贵阳550000 贵州医科大学生物与工程学院贵州省普通高等学校免疫细胞与抗体工程研究中心贵阳550000

目的材料与组织界面处活性氧(reactive oxygen species,ROS)的过度累积所引起的慢性炎症是导致钛种植体失败的重要原因。为了清除过多的ROS,本研究在钛表面设计了一种具有ROS响应能力的抗氧化功能涂层,并探究其对树突状细胞(dendritic c... 详细信息

目的材料与组织界面处活性氧(reactive oxygen species,ROS)的过度累积所引起的慢性炎症是导致钛种植体失败的重要原因。为了清除过多的ROS,本研究在钛表面设计了一种具有ROS响应能力的抗氧化功能涂层,并探究其对树突状细胞(dendritic cells,DCs)免疫表型及功能的影响。方法采用电化学阳极氧化法在钛表面构建TiO_(2)纳米阵列,并将其植入大鼠胫骨侧软组织,评估植入体-组织界面的炎症细胞浸润和ROS水平。在TiO_(2)纳米管中负载乙酰半胱氨酸(NAcetylcysteine,NAC),通过层层自组装技术在钛表面覆盖明胶/壳聚糖(Gel/Chi)凝胶涂层并接枝NBC分子使其有ROS响应性,获得功能化涂层。构建细胞培养模型,研究钛表面功能化涂层对DCs免疫表型分子的表达和免疫功能的影响。结果钛植入会导致植入体-组织界面处炎性细胞浸润、DCs聚集及ROS水平升高。钛表面功能化涂层具有良好的ROS响应性,可使DCs免疫表型分子CD80、CD86、CD40与MHC-Ⅱ的表达降低,胞内ROS水平下降。在功能化涂层表面黏附后,DCs吞噬抗原的能力下降,且更倾向于促进naive CD4^(+)T细胞向调节性T细胞(Treg)分化。结论钛表面的功能化涂层具有ROS响应性,能够在氧化应激环境中释放NAC清除ROS,促进DCs成为耐受型DCs,从而提供免疫抑制的微环境,利于钛植入的预后。

关键词：炎症细胞浸润组织界面免疫表型树突状细胞乙酰半胱氨酸 CD86 免疫学功能层层自组装技术

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流体剪切力——树突状细胞免疫反应的负调节因子

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医用生物力学 2024年第S1期39卷 682-682页

作者：余鹏刘鲜梅曾柱贵州医科大学基础医学院贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室贵州省感染免疫与抗体工程特色重点实验室贵州省细胞免疫治疗工程研究中心贵阳550000 贵州医科大学生物与工程学院生物与医学工程重点实验室贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心贵阳550000

基于树突状细胞(dendritic cells,DCs)的肿瘤疫苗免疫疗法被认为是克服癌症最有前景的免疫疗法之一,其临床效果与过继回输途径有关。临床研究发现,DCs疫苗静脉回输后的疗效低于肿瘤原位注射和引流淋巴结注射,其潜在机制尚不清楚。从生... 详细信息

基于树突状细胞(dendritic cells,DCs)的肿瘤疫苗免疫疗法被认为是克服癌症最有前景的免疫疗法之一,其临床效果与过继回输途径有关。临床研究发现,DCs疫苗静脉回输后的疗效低于肿瘤原位注射和引流淋巴结注射,其潜在机制尚不清楚。从生物力学的角度看,DCs疫苗静脉回输前后力学环境的转变(由静息状态向流体剪切状态转变)可能是潜在的影响因素。在本研究中,利用锥版剪切系统施加流体剪切力(fluid shear stress,FSS)处理,分析FSS对DCs力学表型和免疫表型的影响,并探究其潜在力-化耦合分子机制。结果发现,FSS显著重塑了DCs的力学表型和免疫表型,降低了其抗原吞噬作用和迁移能力,并抑制其抗原提呈,表现为抑制T细胞增殖、诱导T细胞凋亡的状态。体内实验证实,FSS处理后的DCs能在体内介导抑炎作用,使得炎性肠病模型小鼠的症状得到显著改善。机制上,DCs通过G蛋白偶联受体(GPCRs)-Src-Rho A/ROCK/LIMK/Cofilin信号通路感知FSS刺激,并抑制了转录因子NFκB的表达。综上认为,FSS可能是DCs免疫反应的负调节因子,在维持免疫稳态中发挥重要作用,这对于进一步理解DCs的免疫调节功能和提高基于DCs免疫治疗的临床疗效具有重要意义。

关键词：负调节因子静脉回输炎性肠病流体剪切力免疫疗法树突状细胞免疫反应免疫调节功能

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AGR2和ANO6在乳腺癌中的作用及其机制研究

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医用生物力学 2024年第S1期39卷 414-414页

作者：唐福州张世超刘芹曾柱贵州医科大学生物与工程学院(健康医药现代产业学院) 贵阳550000 贵州医科大学基础医学院贵阳550000 贵州省感染免疫与抗体工程特色重点实验室贵州省细胞免疫治疗工程研究中心贵阳550000 贵州医科大学生物与医学工程重点实验室贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心贵阳550000

开发新的个体化免疫治疗标记物对改善乳腺癌免疫治疗效果来说具有重要意义,AGR2和ANO6作为潜在的力调控基因,能否作为乳腺癌个体化免疫治疗的生物标记物仍然不清楚。因此,本研究通过生物信息学分析方法和细胞实验分别探讨了AGR2和ANO6... 详细信息

开发新的个体化免疫治疗标记物对改善乳腺癌免疫治疗效果来说具有重要意义,AGR2和ANO6作为潜在的力调控基因,能否作为乳腺癌个体化免疫治疗的生物标记物仍然不清楚。因此,本研究通过生物信息学分析方法和细胞实验分别探讨了AGR2和ANO6在乳腺癌肿瘤微环境中的作用及其潜在机制。本研究发现,AGR2在泛癌中的表达与多种癌症的预后密切相关。在乳腺癌中AGR2启动子甲基化水平随其表达的增加而降低。AGR2低表达患者表现出免疫“热”和免疫抑制表型,其特征是肿瘤免疫细胞浸润丰度高,TGF-β和EMT途径富集评分增加,而AGR2高表达患者表现出相反的免疫特征,缺乏免疫细胞浸润,提示免疫“冷”表型。单细胞分析进一步揭示了AGR2在恶性细胞中通过协调细胞趋化因子信号和免疫浸润改变细胞与细胞间的相互作用。在两个免疫治疗队列中,AGR2和AGR2共表达基因的表达可以作为乳腺癌患者生存的预后指标。ANO6高表达与乳腺癌患者较差的预后密切相关。ANO6可促进乳腺癌中巨噬细胞的浸润。通过细胞实验研究发现他们的沉默可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭、抗凋亡能力以及体内成瘤能力。此外,AGR2可通过激活Akt和ERK通路促进乳腺癌进程。总之,本研究为基于AGR2及ANO6开发个体化免疫治疗策略提供了一定理论基础和实验依据。

关键词：恶性细胞启动子甲基化细胞实验肿瘤微环境 ERK通路免疫治疗生物标记物单细胞分析

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大剂量放射鼻咽癌细胞衍生外泌体诱导树突状细胞成熟的研究

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医用生物力学 2024年第S1期39卷 126-126页

作者：冷吉曾宪琳曾柱贵州医科大学基础医学院贵阳550000 贵州医科大学生物与工程学院(健康医药现代产业学院) 贵阳550000 贵州省感染与抗体工程特色重点实验室贵州省细胞免疫治疗工程研究中心贵阳550000

目的放疗是鼻咽癌的主要治疗方法之一。作为体内最强大的抗原提呈细胞,树突状细胞(dendritic cells,DCs)在肿瘤的发生发展中发挥着关键作用。然而,大剂量放射(>2 Gy)对鼻咽癌的影响及其诱导的免疫应答类型尚不明确。因此,本课题旨在... 详细信息

目的放疗是鼻咽癌的主要治疗方法之一。作为体内最强大的抗原提呈细胞,树突状细胞(dendritic cells,DCs)在肿瘤的发生发展中发挥着关键作用。然而,大剂量放射(>2 Gy)对鼻咽癌的影响及其诱导的免疫应答类型尚不明确。因此,本课题旨在探究不同剂量放射后鼻咽癌细胞衍生外泌体对DCs免疫功能的影响及机制。方法通过超速离心分离放疗后鼻咽癌细胞衍生外泌体,透射电镜和纳米颗粒追踪技术表征外泌体,与DCs共培养后,流式细胞术及RT-q PCR检测DCs免疫表型变化的情况。结果成功获得鼻咽癌细胞衍生外泌体。与PBS组相比,DCs与鼻咽癌细胞衍生外泌体共培养后,共刺激分子CD80、CD40及趋化因子受体CCR7表达上调,结论大剂量放疗鼻咽癌细胞衍生的外泌体可诱导DCs分化成熟。

关键词：外泌体树突状细胞抗原提呈细胞鼻咽癌细胞免疫表型流式细胞术共刺激分子超速离心

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