检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2025年第4期50卷 502-512页

作者：刘茂颖牛良飞郭文娟郭晓奎宋曙晏博陈峥宏贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 上海市公共卫生临床中心上海201508 贵州医科大学贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025

目的制备两种不同的斑马鱼-海分枝杆菌(Mycobacterium marinum,M.m)结核性脑膜炎模型,评价抗结核药物穿过血脑屏障清除斑马鱼脑部细菌的能力,评估模型应用于抗结脑药物评价的可行性。方法以斑马鱼幼鱼为观察对象,显微注射M.m至斑马鱼幼... 详细信息

目的制备两种不同的斑马鱼-海分枝杆菌(Mycobacterium marinum,M.m)结核性脑膜炎模型,评价抗结核药物穿过血脑屏障清除斑马鱼脑部细菌的能力,评估模型应用于抗结脑药物评价的可行性。方法以斑马鱼幼鱼为观察对象,显微注射M.m至斑马鱼幼鱼总主静脉与后脑,制备全身性与局限性感染的结核性脑膜炎模型;通过高内涵显微镜拍摄斑马鱼体内M.m的动态变化,同时利用抗酸染色、HE染色评估两种模型的制备效果;体外测试异烟肼(isoniazid,INH)、利福平(rifampicin,RIF)对M.m菌株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC);用不同剂量的INH、RIF以总主静脉注射或浸泡给药的方式处理脑部局部感染的斑马鱼幼鱼,通过检测药物作用后斑马鱼脑部菌载量,评价药物穿过血脑屏障对脑部M.m生长的作用。结果经总主静脉注射,M.m可随血液循环生长扩散至斑马鱼幼鱼脑部,可模拟肺外(mycobacterium tuberculosis,Mtb)随血液循环系统进入脑部的感染过程;后脑注射M.m可在斑马鱼脑部引发类上皮细胞增生、炎症细胞聚集等免疫反应,并且在感染后4 d,M.m仍局限在斑马鱼脑部,此种感染方式适用于研究药物入脑的效果;INH对抑制脑部M.m生长的效果优于RIF(P<0.05),提示INH能更好的穿透血脑屏障发挥功效。结论通过总主静脉、后脑注射M.m至斑马鱼幼鱼可成功制备斑马鱼结核性脑膜炎模型,该模型可用于评估抗结核药物通过血脑屏障的能力。

关键词：斑马鱼海分枝杆菌结核性脑膜炎模型异烟肼利福平

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组甲型流感病毒基质蛋白1和2通过ERK信号因子诱导小鼠气管上皮细胞产生IFN-γ

引用

病毒学报 2018年第5期34卷 489-496页

作者：祝洁朱颜鑫曹慧军罗红兰露莎江滟贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵阳550004 贵州医科大学附属医院微生物免疫科贵阳550004 贵州省骨科医院检验科贵阳550004

探讨重组甲型流感病毒基质蛋白1和2(rM1和rM2)通过细胞外信号调节蛋白激酶(Extracellular signal regulated kinase,ERK)诱导小鼠气管上皮细胞产生γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)作用及机制。以原代小鼠气管上皮细胞为实验模型,实验分... 详细信息

探讨重组甲型流感病毒基质蛋白1和2(rM1和rM2)通过细胞外信号调节蛋白激酶(Extracellular signal regulated kinase,ERK)诱导小鼠气管上皮细胞产生γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)作用及机制。以原代小鼠气管上皮细胞为实验模型,实验分为6组(rM1组、rM2组、甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)组、rM1+IAV组、rM2+IAV组和正常对照组)。在各组分干预细胞4h、8h、24h时,采用半定量RT-PCR法检测各组细胞中IFN-γmRNA的表达和免疫印迹法检测各组细胞中IFN-γ、ERK、磷酸化ERK(phospho-ERK,p-ERK)蛋白的表达;用抑制剂阻断ERK信号因子信号传导,观察对各组分诱导小鼠气管上皮细胞产生IFN-γ的影响。各组分干预细胞4h、8h、24h,rM1组、rM2组、IAV组、rM1+IAV组、rM2+IAV组细胞的IFN-γmRNA和IFN-γ蛋白表达水平高于正常对照组(P<0.01或P<0.05);rM1+IAV组、rM2+IAV组细胞的IFN-γmRNA和IFN-γ蛋白表达水平高于IAV组(P<0.01或P<0.05)。在干预细胞4h,仅rM2组细胞中ERK磷酸化水平显著高于正常对照组(P<0.01),在干预细胞8h、24h,rM1组、rM2组、IAV组、rM1+IAV组、rM2+IAV组细胞中ERK磷酸化水平均显著高于正常对照组(P<0.01或P<0.05)。加入ERK抑制剂,rM1组、rM2组、rM1+IAV组、rM2+IAV组细胞的IFN-γmRNA和IFN-γ蛋白表达水平显著低于非抑制剂组。本研究数据表明rM1和rM2可通过上调ERK信号因子的磷酸化水平诱导小鼠气管上皮细胞中产生IFN-γ,该诱导作用在干预4h即显著表现,并维持至少24h。

关键词：甲型流感病毒(IAV) 基质蛋白1(M1) 基质蛋白2(M2) IFN-γ ERK 磷酸化ERK

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于蛋白质组学技术探讨麻疹减毒活疫苗191株抑制三阴性乳腺癌细胞增殖的可能机制

引用

中国肿瘤生物治疗杂志 2023年第7期30卷 568-576页

作者：姚梦玮李玉迁徐庆胜方小菡魏洪迟茜文刘蕊贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学国家级实验教学中心贵州贵阳550025 贵州中医药大学第二附属医院红岩院区中心实验室贵州贵阳550003

目的:基于蛋白质组学技术探讨麻疹减毒活疫苗191株(MV-Hu191)在体内外对三阴性乳腺癌MDA-MB-231、4T1细胞的影响及其作用机制。方法:采用CCK-8法检测MV-Hu191对MDA-MB-231和4T1细胞增殖的影响;液相色谱-质谱联用技术分析MV-Hu191处理对M... 详细信息

目的:基于蛋白质组学技术探讨麻疹减毒活疫苗191株(MV-Hu191)在体内外对三阴性乳腺癌MDA-MB-231、4T1细胞的影响及其作用机制。方法:采用CCK-8法检测MV-Hu191对MDA-MB-231和4T1细胞增殖的影响;液相色谱-质谱联用技术分析MV-Hu191处理对MDA-MB-231细胞中蛋白质谱的影响,多重数据库筛选蛋白质谱中的典型差异蛋白质并进行GO、KEGG、亚细胞定位与功能注释。瘤内注射1×106 TCID50 MV-Hu191干预4T1细胞移植瘤模型小鼠,流式细胞术检测小鼠脾组织中T细胞亚群,ELISA法检测小鼠血清TNF-α和IL-6含量。结果:体外实验结果表明,MV-Hu191具有抑制MDA-MB-231和4T1细胞增殖的作用,差异均具有统计学意义(P<0.01)。蛋白质组学分析结果显示,MV-Hu191作用MDA-MB-231细胞后明显上调蛋白质有38个、下调有12个;差异表达的蛋白质主要参与细胞黏附、信号受体激活、细胞代谢、应激反应等生物学过程,22个差异蛋白质亚细胞定位位于细胞外,KEGG功能分类显示与免疫调节功能相关的差异蛋白质最多且均为上调蛋白,包括C4A、C8B、SERPINF2、A2M、SERPINC1、CTSB、SERPING1、C5;PPI预测发现免疫相关差异蛋白与CD4、CD8、TNF-α及IL-6相互关联。体内实验结果显示,MV-Hu191干预组小鼠脾组织中CD4+T细胞数量略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05),CD4+/CD8+T细胞比值明显高于对照组(P<0.05),血清TNF-α和IL-6含量显著上升(均P<0.01)。结论:MV-Hu191显著抑制MDA-MB-231、4T1细胞增殖及拮抗4T1细胞荷瘤小鼠成瘤性,其机制可能是MV-Hu191通过激活免疫效应分子实现抗肿瘤作用。

关键词：麻疹溶瘤病毒 MV-Hu191 三阴性乳腺癌 MDA-MB-231细胞 4T1细胞细胞增殖蛋白质组学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

以Real-time PCR方法检测耐药幽门螺杆菌中HefABC基因的表达

引用

基因组学与应用生物学 2019年第4期38卷 1797-1803页

作者：王琼吴芳草郭长城刘芳崔古贞潘科许良碧张永宏熊妍印琳吴晓娟张峥嵘陈峥宏贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵阳550025 贵阳市公共卫生救治中心贵阳550003 贵州省黔南布依族苗族自治州人民医院贵州558000 贵州医科大学附属医院贵阳550025 贵阳市儿童医院贵阳550003

为了探讨耐药幽门螺杆菌(Helicobacter. pylori)主动外排系统hefA、hefB、hefC基因表达与菌株克拉霉素耐药、阿莫西林耐药以及多重耐药的关系,随机选择H. pylori克拉霉素耐药株、阿莫西林耐药株、敏感株、多重耐药株各10株,利用Real-tim... 详细信息

为了探讨耐药幽门螺杆菌(Helicobacter. pylori)主动外排系统hefA、hefB、hefC基因表达与菌株克拉霉素耐药、阿莫西林耐药以及多重耐药的关系,随机选择H. pylori克拉霉素耐药株、阿莫西林耐药株、敏感株、多重耐药株各10株,利用Real-time PCR方法检测HefABC系统的表达,以成组t检验法对敏感株与各耐药株之间mRNA表达水平进行比较。结果显示,hefA在敏感组、克拉霉素耐药组、阿莫西林耐药组、多重耐药组中的mRNA表达量以2-ΔΔCt表示,分别为0.903 9±0.154 07、1.482 2±0.378 5、1.278 0±0.206 2、2.255 7±0.289 2,克拉霉素耐药组与敏感组比较:t=4.489,p<0.05;阿莫西林耐药组与敏感组比较:t=4.631,p<0.05;多重耐药组与敏感组比较:t=13.11,p<0.05。hefB在敏感组、克拉霉素耐药组、阿莫西林耐药组、多重耐药组中的m RNA表达量以2-ΔΔCt表示,分别为0.075 9±0.015 7、0.636 1±0.162 3、0.906 4±0.127 6、1.149 2±0.305 8,克拉霉素耐药组与敏感组比较:t=10.86,p<0.05;阿莫西林耐药组与敏感组比较:t=20.42,p<0.05;多重耐药组与敏感组比较:t=11.09,p<0.05。hefC在敏感组、克拉霉素耐药组、阿莫西林耐药组、多重耐药组中的m RNA表达量以2-ΔΔCt表示,分别为0.128 2±0.054 5、1.319 4±0.272 4、0.683 0±0.185 0、3.480 2±0.932 6;克拉霉素耐药组与敏感组比较:t=13.56,p<0.05;阿莫西林耐药组与敏感组比较:t=9.096,p<0.05;多重耐药组与敏感组比较:t=11.35,p<0.05。研究结果证实,H. pylori中外排系统hefA、hefB、hefC的高表达与菌株对克拉霉素耐药、阿莫西林耐药及多重耐药均有关。

关键词：幽门螺杆菌阿莫西林克拉霉素耐药性外排泵

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

瓷珠保藏法和脱纤维绵羊血介质保藏法对幽门螺杆菌的保藏效果

引用

江苏医药 2018年第1期44卷 23-26页

作者：郭长城刘芳吴芳草王琼印琳陈峥宏贵州医科大学基础医学院微生物学教研室(贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室) 贵州贵阳550025

目的比较瓷珠保藏法和脱纤维绵羊血介质保藏法对幽门螺杆菌(Hp)的保藏效果。方法对分离自胃炎和胃溃疡患者胃黏膜组织的10株Hp菌株,分别采用瓷珠保藏法和脱纤维绵羊血介质保藏法置于-80℃保藏。比较两种保藏方法在冻存1个月、反复冻存2... 详细信息

目的比较瓷珠保藏法和脱纤维绵羊血介质保藏法对幽门螺杆菌(Hp)的保藏效果。方法对分离自胃炎和胃溃疡患者胃黏膜组织的10株Hp菌株,分别采用瓷珠保藏法和脱纤维绵羊血介质保藏法置于-80℃保藏。比较两种保藏方法在冻存1个月、反复冻存2、3、6个月以及直接保藏12个月的复苏存活率。结果 10株Hp菌株冻存1个月、反复冻存2、3、6个月,采用瓷珠保藏法的复苏存活率分别为90.0%、90.0%、90.0%、50.0%,而脱纤维绵羊血介质保藏法的复苏存活率分别为100%、100%、100%、80.0%,两种方法复苏存活率相比均无统计学差异(P>0.05)。瓷珠保藏法、脱纤维绵羊血介质保藏法和液体冻存的菌株在保藏12个月复苏时的存活率分别为70.0%、100%和100%;瓷珠保藏法与脱纤维绵羊血介质保藏法的复苏存活率相比无统计学差异(P>0.05)。结论瓷珠保藏法和脱纤维绵羊血介质保藏法均适用于Hp的保藏;吸附菌细胞的瓷珠和含有菌细胞的保藏管内液体可分别冻存。

关键词：幽门螺杆菌菌种保藏瓷珠脱纤维绵羊血

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

胃内尿素酶阳性细菌对幽门螺杆菌感染诊断的影响

引用

中国病原生物学杂志 2018年第2期13卷 127-130页

作者：郭长城熊妍吴芳草潘科张永宏刘芳崔古贞朱莉王琼印琳陈峥宏贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵阳市儿童医院消化内科贵州省黔南布依族苗族自治州医院消化内科贵州医科大学附属医院消化内科

目的探讨胃内可分解尿素酶菌群对基于尿素酶阳性诊断幽门螺杆菌(***,Hp)感染的影响。方法胃镜下取疑为Hp感染患者的胃黏膜,行快速尿素酶检测(Rapid urease test,RUT)及细菌培养,根据培养物的菌落形态、革兰染色、RUT及Hp特异性16SrRNA... 详细信息

目的探讨胃内可分解尿素酶菌群对基于尿素酶阳性诊断幽门螺杆菌(***,Hp)感染的影响。方法胃镜下取疑为Hp感染患者的胃黏膜,行快速尿素酶检测(Rapid urease test,RUT)及细菌培养,根据培养物的菌落形态、革兰染色、RUT及Hp特异性16SrRNA基因片段PCR进行Hp的鉴定;提取胃黏膜组织DNA,通过Hp特异性PCR进行Hp感染快速诊断。对Hp阴性(Hp培养或特异性PCR阴性)而RUT阳性胃黏膜培养的非Hp(nonHp)进行常规尿素酶生化试验,选取20株尿素酶阳性non-Hp利用细菌16SrRNA通用引物进行PCR扩增并测序,利用NCBI系统进行序列比对,鉴定细菌种类。结果 606例患者胃黏膜RUT阳性率为58.4%(354/606),Hp培养阳性率29.7%(180/606)。Hp培养阴性胃黏膜特异性PCR阳性113例,Hp感染率为48.35%(293/606)。胃黏膜RUT阳性率高于胃黏膜Hp感染(χ2=1,2.337,P<0.05)。61例RUT阳性Hp培养或特异性PCR阴性的胃黏膜培养出80株non-Hp,其常规尿素酶生化检查均阳性。对其中20株尿素酶阳性non-Hp进行测序鉴定,均为产尿素酶菌。结论胃内存在除Hp外其他细菌,包括尿素酶阳性non-Hp,可造成RUT阳性,干扰Hp感染的实验诊断。

关键词：幽门螺杆菌非幽门螺杆菌快速尿素酶试验胃内菌群

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Cas9蛋白的克隆表达、分离纯化及多克隆抗体制备

引用

贵州医科大学学报 2019年第7期44卷 757-761,766页

作者：刘芳卢婷蔡梦迪吴芳草陈相好王彩霞崔古贞陈峥宏贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学医学检验学院贵州贵阳550004

目的:获得高纯度Cas9蛋白,制备Cas9蛋白特异性抗体。方法:以Cas9基因序列为模板,设计特异性引物,PCR扩增获得Cas9基因全长序列,利用无缝拼接技术构建pET28a-Cas9重组表达载体;转化***21(DE3),经IPTG诱导表达Cas9蛋白,并利用His-Tag技术... 详细信息

目的:获得高纯度Cas9蛋白,制备Cas9蛋白特异性抗体。方法:以Cas9基因序列为模板,设计特异性引物,PCR扩增获得Cas9基因全长序列,利用无缝拼接技术构建pET28a-Cas9重组表达载体;转化***21(DE3),经IPTG诱导表达Cas9蛋白,并利用His-Tag技术分离纯化Cas9蛋白;将纯化获得的Cas9蛋白免疫新西兰大白兔,制备Cas9蛋白多克隆抗体。结果:pET28a-Cas9重组表达载体转化的***21(DE3)可表达Cas9蛋白,纯化的Cas9蛋白免疫家兔得到的多克隆抗体效价>1∶256 K。结论:本研究获得了高质量Cas9蛋白及多克隆抗体,为后续CRISPR-Cas9基因编辑的应用奠定了良好的基础。

关键词： Cas9蛋白蛋白表达与纯化多克隆抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

幽门螺杆菌菌落PCR的优化

引用

贵州医科大学学报 2019年第7期44卷 762-766页

作者：刘芳王彩霞綦廷娜吴芳草文学琴陈峥宏崔古贞贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学医学检验学院贵州贵阳550004

目的:通过对常规菌落PCR方法进行优化,探索提高幽门螺杆菌(***)菌落PCR扩增效率的方法。方法:提取*** 26695基因组DNA作为阳性对照组,以未经任何处理的*** 26695菌落作为阴性对照组,经煮沸裂解速冻法获得的*** 26695菌落作为试验组,随... 详细信息

目的:通过对常规菌落PCR方法进行优化,探索提高幽门螺杆菌(***)菌落PCR扩增效率的方法。方法:提取*** 26695基因组DNA作为阳性对照组,以未经任何处理的*** 26695菌落作为阴性对照组,经煮沸裂解速冻法获得的*** 26695菌落作为试验组,随机选择8个不同的基因(16S rDNA、cagA-U、cagA-D、iceA、ureA、hetA、ropN、Hp0792)作为菌落PCR的候选基因进行菌落PCR验证,最后以1%琼脂糖凝胶进行电泳检测。结果:在选择的目标基因中,阴性对照组未扩增出目的条带,试验组与阳性对照组均扩增出目的相应大小的条带;与常规菌落PCR比较,煮沸速冻裂解法能显著提高***菌落PCR的扩增效率。结论:煮沸速冻裂解法可用于***的高通量筛选鉴定和分子诊断。

关键词：螺杆菌,幽门高通量筛选分子诊断技术煮沸速冻裂解法菌落PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

住院患儿血标本中病原菌的分布特点及耐药性分析

引用

贵州医科大学学报 2020年第6期45卷 705-711页

作者：曹慧军易莎莎祝洁陈强刘宝李静费樱沈祥春江滟贵州医科大学基础医学院微生物学教研室&贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学附属医院微生物免疫科贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院天然药物资源优效利用重点实验室贵州贵阳550025

目的:分析住院血培养阳性患儿分离病原菌的分布特点及耐药性。方法:收集0~14岁住院患儿血培养阳性标本442例,置于BACTECTMFX全自动血液细菌培养仪中培养,取少量培养物转种血平板和巧克力平板分离病原菌,使用Walk Away 96型全自动细菌鉴... 详细信息

目的:分析住院血培养阳性患儿分离病原菌的分布特点及耐药性。方法:收集0~14岁住院患儿血培养阳性标本442例,置于BACTECTMFX全自动血液细菌培养仪中培养,取少量培养物转种血平板和巧克力平板分离病原菌,使用Walk Away 96型全自动细菌鉴定仪对分离病原菌进行细菌鉴定,采用微量稀释法测定分离病原菌对抗生素的敏感性,采用WHONET5. 6软件对病原菌的抗生素敏感实验进行分析。结果:住院血培养阳性患儿血培养主要病原菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、大肠埃希菌、克雷伯菌属、金黄色葡萄球菌、其他肠杆菌属;新生儿和婴儿以CNS和大肠埃希菌为主,幼儿以CNS和其他肠杆菌属为主,学龄前期儿童以CNS和金黄色葡萄球菌为主,学龄期儿童以CNS、大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌为主;大肠埃希菌和肺炎克雷伯对亚胺培南、美洛培南及厄他培南的敏感率均为100%,且对其他抗生素均有不同程度耐药;非发酵菌对各类抗生素均存在耐药菌株,未检出对利奈唑胺和万古霉素耐药的葡萄球菌和肠球菌属,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCNS)的检出率分别为34. 7%和77. 6%。结论:不同年龄段血培养阳性儿童致病菌分布有所不同,病原菌耐药情况较严重,可选择的抗生素有限。

关键词：儿童血流感染病原菌分布特征血培养耐药性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

瓷珠保藏法和脱纤维血液保藏法保藏幽门螺杆菌的效果比较

瓷珠保藏法和脱纤维血液保藏法保藏幽门螺杆菌的效果比较

引用

2017年中国微生物学会学术年会

作者：郭长城刘芳吴芳草王琼印琳陈峥宏贵州省贵阳市贵安新区大学城贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室 550025

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：