检索结果-内蒙古大学图书馆

中华中医药杂志 2023年第4期38卷 1839-1843页

作者：文波罗芳高群付凌云陶玲沈祥春贵州医科大学天然药物资源优效利用重点实验室贵阳550025 贵州医科大学微生物与生化药学教研室贵阳550025 贵州医科大学药学院贵阳550025 贵州医科大学附属医院贵阳550001

目的:研究1,8-桉叶油素(1,8-Cineole)对四氧嘧啶诱导胰岛β细胞NIT-1损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法:利用四氧嘧啶建立NIT-1细胞损伤模型,并以1.25、2.5、5μmol/L1,8-Cineole预处理30 min。实验分为对照组、模型组和1,8-Cine... 详细信息

目的:研究1,8-桉叶油素(1,8-Cineole)对四氧嘧啶诱导胰岛β细胞NIT-1损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法:利用四氧嘧啶建立NIT-1细胞损伤模型,并以1.25、2.5、5μmol/L1,8-Cineole预处理30 min。实验分为对照组、模型组和1,8-Cineole高、中、低剂量组。采用MTT法、划痕实验分别检测1,8-Cineole对NIT-1细胞损伤的存活率、划痕修复率的影响;生化法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;ELISA检测细胞上清液中胰岛素的分泌情况;Western Blot检测Bcl-2、Bax和Caspase-9蛋白的表达;机制研究进一步分为对照组、模型组、1,8-Cineole组、Z-VAD-FMK组和1,8-Cineole+Z-VAD-FMK组,采用Western Blot检测Caspase-9蛋白的表达。结果:与对照组比较,模型组细胞存活率、划痕修复率显著降低(P<0.01),上清液中SOD、CAT、GSH-Px含量以及胰岛素分泌量均显著减少(P<0.01),MDA含量显著增加(P<0.01),Bax、Caspase-9蛋白表达显著上调(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.01)。加入1,8-Cineole预处理后,低、中、高剂量组能显著提高细胞存活率(P<0.05,P<0.01),高、中剂量组能提高划痕修复率(P<0.05),高剂量组SOD、CAT、GSH-Px以及胰岛素的分泌显著增加(P<0.01,P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05),中、高剂量组Bax、Caspase-9蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著上调(P<0.01)。采用Caspase凋亡抑制剂Z-VAD-FMK作用细胞后,Caspase-9蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论:1,8-Cineole能改善四氧嘧啶诱导的NIT-1细胞损伤,其作用机制与改善氧化应激程度和抑制细胞凋亡有关。

关键词： 1 8-桉叶油素四氧嘧啶 NIT-1细胞保护作用胰岛β细胞氧化应激细胞凋亡糖尿病

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基于UPLC多指标成分定量和指纹图谱结合化学模式识别法评价不同基原十大功劳木的质量

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中草药 2025年第8期56卷 2914-2924页

作者：吴秀平徐明珠孙宜春段丽王杏高秀丽祝清灿中药功效成分挖掘与利用全国重点实验室/贵州医科大学药学院贵州贵阳550025 国药集团同济堂(贵州)制药有限公司贵州贵阳550025 贵州医科大学微生物与生化药学工程中心贵州贵阳550025

目的建立UPLC多指标成分定量测定与指纹图谱结合化学模式识别法对不同基原十大功劳木Mahoniae Caulis药材进行质量评价,为十大功劳木质评质控体系的构建及其基原鉴别提供参考和依据。方法采用UPLC法,色谱柱为Agilent Zorbax SB-Aq(150 m... 详细信息

目的建立UPLC多指标成分定量测定与指纹图谱结合化学模式识别法对不同基原十大功劳木Mahoniae Caulis药材进行质量评价,为十大功劳木质评质控体系的构建及其基原鉴别提供参考和依据。方法采用UPLC法,色谱柱为Agilent Zorbax SB-Aq(150 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min,指纹图谱和含量测定检测波长分别为220 nm和345 nm,柱温15℃,进样量为2μL。通过建立不同基原十大功劳木指纹图谱,同时测定十大功劳木中的4个指标成分,结合聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)和方差分析对不同基原十大功劳木作差异性鉴别研究。结果建立了4种基原十大功劳木药材UPLC指纹图谱,同一基原的十大功劳木相似度均大于0.968,4种基原十大功劳木相似度为0.864~0.964。其中宽苞十大功劳木***、小果十大功劳木***、安平十大功劳木***和长柱十大功劳木***分别确定了17、15、14、9个共有峰,并指认了4种基原十大功劳木共有峰中的4个成分,分别是非洲防己碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱;运用HCA、PCA和OPLS-DA能将4种基原明显区分,OPLS-DA筛选得到7个差异性标志物。定量测定结果得出不同基原的4指标成分差异明显,安平十大功劳木基原质量较好。结论建立的指纹图谱和定量测定方法合理、可靠,能准确有效地鉴别十大功劳木不同基原药材,为十大功劳木药材的质量控制和基原鉴别提供科学依据和参考。

关键词：十大功劳木十大功劳属 UPLC 指纹图谱非洲防己碱盐酸药根碱盐酸巴马汀盐酸小檗碱化学模式识别质量评价

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S100A4在肥大细胞的表达及血清S100A4含量的检测对过敏性哮喘的诊断价值

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第9期40卷 826-833页

作者：莫诗卉陶甜王晨予晏世荣李静吴通前余芳贵州医科大学医学检验学院微生物及免疫教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床研究中心贵州贵阳550004

目的初步研究S100钙结合蛋白A4(S100A4)是否参与肥大细胞脂质代谢以及对过敏性哮喘的临床意义。方法从基因表达数据集(GEO)数据库中下载过敏性哮喘相关的单细胞RNA(scRNA)表达矩阵GSE213085,使用R包进行数据可视化处理。通过体外培养C5... 详细信息

目的初步研究S100钙结合蛋白A4(S100A4)是否参与肥大细胞脂质代谢以及对过敏性哮喘的临床意义。方法从基因表达数据集(GEO)数据库中下载过敏性哮喘相关的单细胞RNA(scRNA)表达矩阵GSE213085,使用R包进行数据可视化处理。通过体外培养C57肥大细胞,慢病毒感染肥大细胞建立S100A4低表达的细胞系,实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测S100A4的mRNA和蛋白水平,实时荧光定量PCR检测脂质代谢相关基因ATP柠檬酸合成酶(ACLY)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、CD36、溶质载体家族27a成员6(SCL27a6)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)的mRNA水平。采集过敏性哮喘的患者和健康对照人群外周血,ELISA检测血清S100A4水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析S100A4对疾病的诊断效能,并计算曲线下面积(AUC)。结果用scRNA数据集GSE213085鉴定出26225个细胞,提取出肥大细胞进行后续分析,功能富集分析结果表明,肥大细胞特征基因集中于脂质代谢相关的途径。肥大细胞低表达S100A4时,其脂质代谢相关基因ACLY、ACC1、CD36、SCL27a6、PPARα表达下调。ELISA检测显示过敏性哮喘患者血清S100A4较健康对照人群升高,ROC曲线发现,血清S100A4含量对过敏性哮喘具有一定诊断效能(AUC=0.746)。结论S100A4可能参与肥大细胞脂质代谢调节,血清S100A4检测对过敏性哮喘诊断可能有一定价值。

关键词：过敏性哮喘肥大细胞 S100钙结合蛋白A4(S100A4) 生物信息学分析受试者特征曲线

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刺梨中鞣花酸的分离鉴定及提取工艺的优化

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食品工业科技 2023年第8期44卷 212-220页

作者：刘玉杰季嘉城张硕唐丽陈浪张敏王鹏娇李韬高秀丽贵州医科大学药学院省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学微生物与生化药学工程中心贵州贵阳550025 贵州医科大学实验动物中心贵州贵阳550025 贵州省贵阳市市场监督管理局贵州贵阳550014

目的:本研究旨在建立刺梨中鞣花酸的分离纯化方法,并对提取鞣花酸的酸水解法进行工艺优化。方法:以刺梨干果为原料,通过超声辅助提取法提取单宁酸,加酸进行水解制得粗鞣花酸,并通过甲醇重结晶进行纯化,采用高效液相色谱测定其纯度,及核... 详细信息

目的:本研究旨在建立刺梨中鞣花酸的分离纯化方法,并对提取鞣花酸的酸水解法进行工艺优化。方法:以刺梨干果为原料,通过超声辅助提取法提取单宁酸,加酸进行水解制得粗鞣花酸,并通过甲醇重结晶进行纯化,采用高效液相色谱测定其纯度,及核磁共振波谱法(NMR)、红外光谱法(IR)、质谱法(MS)、高效液相色谱法(HPLC)、紫外光谱法(UV)对提取得到的鞣花酸进行结构确证,另外,以得率为指标,以酸浓度、提取温度、提取时间、液料比为自变量,在单因素实验的基础上,通过Box-Benhnken中心组合设计和响应面分析法确定刺梨鞣花酸的酸水解工艺条件。结果:从刺梨中提取得到了鞣花酸提取物,通过HPLC分析测定其纯度达到92%,鞣花酸提取物的最大吸收波长254 nm,分子离子峰m/z 301.00,红外吸收各波数与标准品一致,并利用^(1)H-NMR,^(13)C-NMR确定了其结构。通过响应面法得到了酸水解法制取鞣花酸的最优工艺:酸浓度5%,提取温度127℃,液料比为8:1 mL/g,提取时间9.8 h,在此条件下刺梨鞣花酸的得率为30.2%±2.3%(与预测值相比P>0.05)。结论:本研究建立了一种刺梨中鞣花酸简便高效的纯化方法并对其进行了结构确证,并获得了酸水解法制取鞣花酸的最优工艺,为刺梨资源的开发利用提供了参考。

关键词：刺梨鞣花酸提取纯化鉴定工艺优化

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基于网络药理学和动物体内试验验证云实感冒合剂对呼吸道合胞病毒作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第2期44卷 170-182页

作者：徐庆胜李玉迁蒋立娜魏洪迟茜文廖思睿陈维娇贵州医科大学基础医学院国家级实验教学中心微生物学教研室贵州省普通高校学校病原生物学特色重点实验室贵阳550025 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州省普通高校学校病原生物学特色重点实验室贵阳550025 贵州医科大学基础医学院国家级实验教学中心贵阳550025

目的基于网络药理学和体内试验探讨云实感冒合剂抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的作用机制。方法网络药理学预测:运用TCMSP、GeneCards等数据库预测云实感冒合剂干预RSV的活性成分及作用靶点。利用Cytoscape 3.2.1... 详细信息

目的基于网络药理学和体内试验探讨云实感冒合剂抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的作用机制。方法网络药理学预测:运用TCMSP、GeneCards等数据库预测云实感冒合剂干预RSV的活性成分及作用靶点。利用Cytoscape 3.2.1软件构建中药成分-疾病靶点网络图。通过STRING数据库分析蛋白质相互作用关系。借助Metascape数据库进行富集分析。采用分子对接技术分析验证网络药理学结果。云实感冒合剂干预RSV感染验证试验:滴鼻法建立RSV小鼠模型,灌胃合剂后检测血常规、肺指数,观察肺组织病理变化,流式细胞术检测外周血T细胞亚群,ELISA检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量,RT-PCR检测肺组织中TLR4、NF-κB和RSV-N基因mRNA相对水平。结果分析获得云实感冒合剂有效活性成分41个,抗RSV靶点111个,富集得到167条信号通路,主要是PI3K/AKT、MAPK、Toll-like等信号通路。分子对接结果显示,云实感冒合剂活性成分木犀草素、山奈酚、槲皮素与RSV-G、RSV-F、PI3K、AKT1、Bcl-2结合能均小于0 kcal/mol。体内试验结果显示,与RSV组相比,云实感冒合剂高剂量组白细胞、淋巴细胞计数升高、肺指数降低,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示RSV组肺组织增生,肺泡壁变厚,间质内有炎性细胞浸润,利巴韦林组和云实感冒合剂低、中、高剂量组中肺泡大小趋向均匀,肺泡壁厚度均一。与RSV组相比,云实感冒合剂低、中、高剂量组的CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞数量明显升高,CD4^(+)/CD8^(+)T细胞数量比值降低,血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量下降,肺组织中病毒载量和TLR4、NF-κB mRNA水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论云实感冒合剂通过多成分、多靶点、多通路发挥调控RSV感染,主要通过缓解肺组织病理损伤,减轻炎症反应,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路激活有关。

关键词：云实感冒合剂网络药理学呼吸道合胞病毒体内试验分子对接

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百草妇炎清栓对大鼠细菌性阴道炎的改善作用及机制

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中国药房 2023年第20期34卷 2476-2482页

作者：王棋王鹏娇孙小东张敏袁敏艳孟小夏赵燕妮张硕高秀丽贵州医科大学药学院/药用植物功能与应用国家重点实验室贵阳550025 贵州医科大学微生物与生化制药工程中心贵阳550025 贵州医科大学实验动物中心贵阳550025

目的探究百草妇炎清栓对大鼠细菌性阴道炎(BV)的改善作用及潜在机制。方法将雌性SD大鼠随机分为正常组,模型组,甲硝唑组(阳性对照,0.03 g/kg)和百草妇炎清栓低、中、高剂量组(0.18、0.36、0.72 g/kg),每组8只。除正常组外,其余各组大鼠... 详细信息

目的探究百草妇炎清栓对大鼠细菌性阴道炎(BV)的改善作用及潜在机制。方法将雌性SD大鼠随机分为正常组,模型组,甲硝唑组(阳性对照,0.03 g/kg)和百草妇炎清栓低、中、高剂量组(0.18、0.36、0.72 g/kg),每组8只。除正常组外,其余各组大鼠均通过皮下注射苯甲酸雌二醇注射液0.2 g+经阴道口注入大肠埃希菌悬液(2×10^(8)~3×10^(8) cfu/mL)20μL建立BV大鼠模型。各药物组大鼠经阴道给予相应药物,正常组和模型组大鼠给予生理盐水,每天1次,持续6 d。末次给药24 h后,对各组大鼠进行阴道外观评分并检测阴道pH,检测其阴道灌洗液中细胞因子[白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-13、免疫球蛋白A(IgA)]水平,观察其子宫及附件形态和阴道组织病理改变,并检测其阴道组织中Toll样受体2(TLR2)、TLR4、核因子κB(NF-κB)蛋白的表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠子宫明显充血水肿,子宫及附件的形态不规则;阴道组织可见明显水肿增生、上皮细胞脱落,并伴有大量炎症细胞浸润;其阴道口红肿评分和分泌物评分,阴道pH,促炎因子IL-1β、IL-2水平和TLR2、TLR4、NF-κB蛋白的表达均显著升高/上调,IgA和抗炎因子IL-13水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各药物组大鼠子宫及附件、阴道组织病变均有不同程度改善,上述大部分定量指标均显著好转(P<0.05或P<0.01)。结论百草妇炎清栓对BV大鼠炎症症状有一定的改善作用,其机制可能与抑制TLR/NF-κB信号通路有关。

关键词：百草妇炎清栓细菌性阴道炎炎症 Toll样受体/核因子κB信号通路

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白纹伊蚊唾液蛋白诱导的免疫应答对小鼠体内DENV-2感染的影响

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中国热带医学 2025年

作者：周璐黄贞植牟安阳秦菲吴家红商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室

目的探究白纹伊蚊唾液蛋白（mosquito salivary protein， MSP）诱导的免疫应答对Ⅰ型干扰素受体缺陷(IfnaR-/-)鼠中2型登革病毒（dengue virus ， DENV-2）感染的影响。方法使用白纹伊蚊（广州株）雌蚊每周叮咬1次，连续4周免疫IfnaR... 详细信息

目的探究白纹伊蚊唾液蛋白（mosquito salivary protein， MSP）诱导的免疫应答对Ⅰ型干扰素受体缺陷(IfnaR-/-)鼠中2型登革病毒（dengue virus ， DENV-2）感染的影响。方法使用白纹伊蚊（广州株）雌蚊每周叮咬1次，连续4周免疫IfnaR-/-鼠，并观察其饱血情况，末次叮咬后3周获取免疫血清。Western blot检测鼠血清中抗MSP抗体。间接ELISA法检测抗MSP IgG的效价及其亚类。使用Nanoject Ⅱ自动纳升注射器（Drummond）将107TCID50/mL的DENV2显微注射入蚊胸部，采用实时荧光定量逆转录PCR（ real-time quantitative reverse transcription PCR， qRT-PCR）检测不同时间点蚊唾液腺中DENV-E基因水平。使用DENV-2感染的雌蚊叮咬小鼠，qRT-PCR检测免疫/未免疫组蚊体内病毒残留量。蚊叮咬感染5 d后，qRT-PCR检测免疫/未免疫鼠不同组织中DENV-E基因的核酸变化；病毒空斑实验测定鼠脑组织中活病毒含量。结果 Western blot显示鼠血清中含有针对多种MSP的特异性IgG。抗MSP IgG效价可达1:800，以IgG1为主，且可维持21 d。胸腔注射10 d后蚊唾液腺中DENV-E基因含量达复制平台期。叮咬完成后qRT-PCR结果显示蚊唾液腺中的余留病毒量，推测两组小鼠初始感染量相近。免疫组鼠的脾脏，肝脏，脑组织中的病毒核酸含量明显低于未免疫组（P<0.0001），且脑组织中活病毒量低（P<0.0013）。结论蚊唾液蛋白诱发的适应性免疫具有抑制DENV-2感染的效应，为探究白纹伊蚊唾液蛋白具有抗病毒的免疫原组分提供实验基础。

关键词：白纹伊蚊唾液蛋白登革病毒抗蚊唾液蛋白抗体免疫应答

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拐枣提取物的活性成分及肠道菌群调节作用

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中国测试 2024年

作者：蒙紫鑫陈峥宏吴道艳贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州省病原生物学特色重点实验室

拐枣富含多酚，本课题研究了拐枣甲醇提取物的活性成分和益生功能，为拐枣甲醇提取物的开发利用提供参考价值。利用气相色谱/质谱（GC/MS）和高效液相色谱（HPLC）技术结合体外发酵模型，对拐枣甲醇提取物的活性成分及肠道菌群调节作用... 详细信息

拐枣富含多酚，本课题研究了拐枣甲醇提取物的活性成分和益生功能，为拐枣甲醇提取物的开发利用提供参考价值。利用气相色谱/质谱（GC/MS）和高效液相色谱（HPLC）技术结合体外发酵模型，对拐枣甲醇提取物的活性成分及肠道菌群调节作用进行分析测试。结果表明，在拐枣甲醇提取物中检测到7-羟基-4-甲氧基甲基香豆素、(4-溴-2-氯苯氧基)乙酸、胸苷、西伯利亚远志糖A6等主要化学组分；定量检测到可增强拐枣甲醇提取物抗氧化能力的没食子酸、阿魏酸、香草酸、儿茶素等酚类物质。拐枣甲醇提取物可促进肠道益生菌的增殖，提高肠道菌群代谢物短链脂肪酸（SCFAs）的含量。综上，拐枣甲醇提取物具有多种活性成分，对肠道菌群有调节作用，研究结果有望挖掘其在肠道健康和产品开发领域的应用潜力。

关键词：拐枣活性成分多酚肠道菌群短链脂肪酸

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乳双歧杆菌对旋毛虫感染小鼠炎性细胞因子及肠道菌群的影响

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医学动物防制 2023年第3期39卷 282-287,293页

作者：迟茜文解文利姚梦玮李玉迁魏洪贵州医科大学基础医学院感染与免疫学实验室贵阳550025 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室

目的探究不同剂量乳双歧杆菌对旋毛虫感染小鼠的虫荷量、炎症调节作用及肠道菌群组成的影响。方法取感染旋毛虫的小鼠(300条/只)随机分为模型组、乳双歧杆菌高剂量组、中剂量组、低剂量组,未感染旋毛虫小鼠作为空白对照组;高、中、低剂... 详细信息

目的探究不同剂量乳双歧杆菌对旋毛虫感染小鼠的虫荷量、炎症调节作用及肠道菌群组成的影响。方法取感染旋毛虫的小鼠(300条/只)随机分为模型组、乳双歧杆菌高剂量组、中剂量组、低剂量组,未感染旋毛虫小鼠作为空白对照组;高、中、低剂量组分别给予乳双歧杆菌灌胃,模型组和空白对照组每日给予等量磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline,PBS)连续灌胃30 d;胃蛋白酶消化法检测各组第7 d肠道成虫数量及第30 d肌肉幼虫数量。ELISA法检测各组模型小鼠血清中白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)水平,采集各组小鼠肠道感染期粪便样本,采用16S rDNA高通量测序进行微生物组生物信息学分析,评估样本多样性和分类学特征。结果虫荷量结果显示,高剂量乳双歧杆菌显著降低旋毛虫感染小鼠第7 d肠道成虫及第30 d肌肉幼虫数量(P<0.05);炎性因子水平检测发现高剂量乳双歧杆菌使旋毛虫感染小鼠血清抑炎因子(IL-10)水平升高(P<0.05),促炎因子(TNF-α)水平降低(P<0.05)。肠道微生物组成结果显示,乳双歧杆菌干预使感染小鼠厚壁菌门与拟杆菌门比值上升,降低普雷沃菌属丰度,高剂量组中异杆菌属、颤螺菌属丰度增加,中剂量组中布劳特菌属增加。结论乳双歧杆菌能改善旋毛虫感染小鼠炎症表现,促进旋毛虫清除,提高感染小鼠肠道内有益菌丰度。

关键词：乳双歧杆菌旋毛虫肠道菌群虫荷量炎性因子

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幽门螺杆菌katA基因功能及其在耐受氧化损伤中的作用分析

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生物技术通报 2024年第5期40卷 310-320页

作者：王鑫鑫管玉祝李晓苇洪伟吴道艳康颖倩刘永畅陈峥宏崔古贞贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵阳550000 贵州省病原生物学特色重点实验室贵阳550000 贵州省分子生物学重点实验室贵阳550000

【目的】过氧化氢酶(KatA)是幽门螺杆菌编码的重要毒力因子,在抵抗宿主免疫杀伤和疫苗研发等方面具有重要功能。为了鉴定幽门螺杆菌KatA的酶学特性,并分析其在幽门螺杆菌氧化耐受中的功能。【方法】首先,从幽门螺杆菌临床耐药菌株Hp_G27... 详细信息

【目的】过氧化氢酶(KatA)是幽门螺杆菌编码的重要毒力因子,在抵抗宿主免疫杀伤和疫苗研发等方面具有重要功能。为了鉴定幽门螺杆菌KatA的酶学特性,并分析其在幽门螺杆菌氧化耐受中的功能。【方法】首先,从幽门螺杆菌临床耐药菌株Hp_G272基因组中分离katA基因,并在大肠杆菌中克隆表达、分离纯化KatA^(G272)蛋白;然后,利用CAT检测试剂盒体外分析KatA^(G272)的过氧化氢酶活性;其次,利用同源重组技术构建katA基因工程菌株,包括敲除菌株和回补菌株;最后,通过比较野生菌株与工程菌株生长表型差异、分解过氧化氢能力差异及耐受过氧化氢能力差异,阐述katA基因的功能及其在幽门螺杆菌耐受氧化损伤中的作用。【结果】在大肠杆菌中成功克隆表达并分离纯化KatA^(G272),体外酶学分析表明,KatA^(G272)是一类嗜酸性过氧化氢酶,基因敲除分析表明,敲除该基因幽门螺杆菌丧失分解和耐受过氧化氢的能力,而回补该基因幽门螺杆菌回复分解和耐受过氧化氢的能力。【结论】katA基因是幽门螺杆菌分解和耐受过氧化氢的唯一功能基因,在幽门螺杆菌氧化耐受中具有重要功能。

关键词：幽门螺杆菌过氧化氢酶 katA 耐受性克隆表达基因敲除

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