检索结果-内蒙古大学图书馆

中药材 2020年第11期43卷 2713-2717页

作者：晏婷蒯晴叶黄勇郑林李勇军蒲健王爱民贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳贵州益佰制药股份有限公司贵州贵阳550008

目的:建立金铁锁中挥发油和脂肪酸的气相色谱质谱联用(GC⁃MS)分析方法。方法:采用水蒸气蒸馏法提取金铁锁中挥发油,通过GC⁃MS对其挥发油化学成分进行分析与鉴定;利用索氏提取法提取金铁锁中脂肪酸,通过GC⁃MS对甲酯化后的脂肪酸进行分析... 详细信息

目的:建立金铁锁中挥发油和脂肪酸的气相色谱质谱联用(GC⁃MS)分析方法。方法:采用水蒸气蒸馏法提取金铁锁中挥发油,通过GC⁃MS对其挥发油化学成分进行分析与鉴定;利用索氏提取法提取金铁锁中脂肪酸,通过GC⁃MS对甲酯化后的脂肪酸进行分析。通过峰面积归一化法计算各成分的相对含量,鉴别金铁锁的化学成分。结果:从金铁锁挥发油中共鉴定出50种化学成分,其相对含量占挥发油总量78.69%。金铁锁根挥发油主要含有成分是己醛(16.48%)、2⁃戊基⁃呋喃(10.69%)、棕榈酸(9.05%)、(E,E)⁃2,4⁃癸二烯醛(6.21%)等。从金铁锁提取的甲酯化溶液中共鉴定出26种化学成分,其中脂肪酸有23种,占总成分相对含量92.25%。金铁锁中脂肪酸的主要成分为棕榈酸甲酯(30.29%)、反油酸甲酯(18.53%)、反亚油酸甲酯(17.32%)、硬脂酸甲酯(4.4%)等。结论:所建立的金铁锁挥发油和脂肪酸化学成分GC⁃MS分析方法操作简单、迅速灵敏、准确度高,可为金铁锁质量评价提供参考。

关键词：金铁锁挥发油脂肪酸 GC⁃MS

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人源SIRT4蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化

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郑州大学学报（医学版） 2018年第4期53卷 443-447页

作者：朱红王春王芳邹叶芳陈晓雪刘亭李燕何彬贵州医科大学药学院贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004 贵州医科大学基础医学院化学教研室贵阳550004 贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004

目的:获得表达量较高且有活性的人源SIRT4蛋白。方法:将SIRT4基因克隆到p PICZA载体上,得到重组p PICZA-SIRT4表达质粒。重组质粒线性化后转入到巴斯德毕赤酵母X33感受态细胞中,筛选出阳性菌株。将阳性重组菌株发酵培养,并对诱导剂甲醇... 详细信息

目的:获得表达量较高且有活性的人源SIRT4蛋白。方法:将SIRT4基因克隆到p PICZA载体上,得到重组p PICZA-SIRT4表达质粒。重组质粒线性化后转入到巴斯德毕赤酵母X33感受态细胞中,筛选出阳性菌株。将阳性重组菌株发酵培养,并对诱导剂甲醇浓度进行优化,表达蛋白用镍柱His TrapTMHP进行纯化,并对表达的蛋白进行活性考察。结果:SDS-PAGE显示表达的SIRT4目的蛋白大小约33 000,与预期蛋白相对分子质量大小相符,进一步利用His标签抗体通过Western blot确认了目标蛋白,并且初步验证了SIRT4的去生物素酰化和去硫辛酰化的活性。结论:成功用巴斯德毕赤酵母表达了有活性的SIRT4蛋白,并且获得酵母表达的最佳诱导条件。

关键词：人源SIRT4蛋白巴斯德毕赤酵母胞内表达

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参芎葡萄糖注射液抗H9c2细胞凋亡的机制

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贵州医科大学学报 2021年第11期46卷 1277-1282,1288页

作者：吴忠秀陆定艳杨畅何彬李勇军王永林刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004

目的运用网络药理学技术结合细胞体外实验,探究参芎葡萄糖注射液(SGI)的抗细胞凋亡途径。方法采用中药系统药理学平台(TCMSP)和SwissTarget Prediction数据库检索SGI可能的作用靶点,并运用DAVID数据库(DAVID)平台进行京都基因与基因组... 详细信息

目的运用网络药理学技术结合细胞体外实验,探究参芎葡萄糖注射液(SGI)的抗细胞凋亡途径。方法采用中药系统药理学平台(TCMSP)和SwissTarget Prediction数据库检索SGI可能的作用靶点,并运用DAVID数据库(DAVID)平台进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集、基因本体(GO)功能分析,预测SGI抗凋亡机制;体外培养H9c2细胞,将细胞分为空白组(Con组)、模型组(H_(2)O_(2)组)和SGI低、中、高浓度组,Con组加入完全培养基,H_(2)O_(2)组用300μmol/L H_(2)O_(2)处理0.5 h,SGI低、中、高浓度组分别用100、200、400μmol/L SGI预处理6 h后,用300μmol/L H_(2)O_(2)处理0.5 h;利用H_(2)O_(2)建立H9c2细胞凋亡模型,流式细胞术检测线粒体膜电位(MMP)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测H9c2细胞中细胞色素C(Cyt-c)的表达水平。结果网络药理学分析结果显示,SGI的12个成分涉及142个靶点,KEGG通路富集涉及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-AKT)信号通路等,GO功能分析主要富集在线粒体外膜和线粒体,其生物过程与线粒体膜电位的调控有关;流式细胞术和Western blot实验结果显示,与H_(2)O_(2)组比较,SGI低、中、高浓度组均显著增加H_(2)O_(2)诱导H9c2细胞中的MMP(P<0.001),并显著降低Cyt-c的释放(P<0.001)。结论SGI可能通过线粒体途径拮抗H_(2)O_(2)诱导的H9c2细胞凋亡。

关键词：细胞凋亡参芎葡萄糖注射液 H9c2细胞网络药理学线粒体途径线粒体膜电位细胞色素C

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苗药羊耳菊中7个抗炎活性成分在Raw264.7细胞中含量测定方法的建立

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江苏大学学报（医学版） 2022年第6期32卷 524-531页

作者：周杰薛寸张青陈思颖陈艺黄静李月婷黄勇郑林巩仔鹏贵州医科大学药学院贵州省药物制剂重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

目的:建立同时测定Raw264.7细胞中羊耳菊提取物中7个抗炎活性成分木犀草苷(luteolin,LUT)、绿原酸(chlorogenic acid,CA)、新绿原酸(neochlorogenic acid,NCA)、隐绿原酸(cryptochlorogenic acid,CCA)、3,4-二咖啡酰基奎宁酸(3,4-dicaffeoylquinic acid,3,4-DCQA)、3,5-二咖啡酰基奎宁酸(3,5-dicaffeoylquinic acid,3,5-DCQA)、4,5-二咖啡酰基奎宁酸(4,5-dicaffeoylquinic acid,4,5-DCQA)含量的方法。方法:以小鼠巨噬细胞Raw 264.7为研究对象,采用超高液相色谱-三重四级杆质谱联用仪(UPLC-MS/MS)建立同时测定Raw 264.7细胞中LUT、CA、NCA、CCA、3,4-DCQA、3,5-DCQA、4,5-DCQA等7个成分含量的方法,包括专属性、线性、基质效应、回收率、准确度、精密度和稳定性等。结果:建立了一个快速稳定测量Raw264.7细胞中微量药物的分析方法,该方法的最低定量限为0.48~3.84 ng/mL,准确度为(90.78±5.30)%~(113.99±13.51)%,提取回收率为(87.19±5.33)%~(103.59±14.00)%,基质效应为(94.50±15.17)%~(112.77±7.02)%,稳定性为(91.71±11.70)%~(109.45±10.63)%,能够满足测量的要求。结论:建立了快速、准确的同时测定Raw264.7细胞羊耳菊提取物中7个活性成分(LUT、CA、NCA、CCA、3,4-DCQA、3,5-DCQA、4,5-DCQA)含量的UPLC-MS/MS方法,为开展羊耳菊提取物的细胞药代动力学研究奠定基础。

关键词：羊耳菊提取物 Raw264.7细胞抗炎成分绿原酸细胞药代动力学 UPLC-MS/MS

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白及主要活性成分Militarine对斑马鱼胚胎发育的安全性评价

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中国药业 2019年第23期28卷 1-4页

作者：陈浩刘慧郑林李月婷李勇军巩仔鹏黄勇刘丽娜贵州医科大学.贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室.民族药与中药开发应用教育部工程研究中心

目的探讨白及主要活性成分Militarine对斑马鱼胚胎发育的影响。方法以受精后小时(hpf)为时间段,将6 hpf的胚胎暴露在不同质量浓度(0.025,0.050,0.100,0.200,0.800,1.600,3.200 g/L) Militarine溶液中,且设置空白对照组,24 h更换1次药液... 详细信息

目的探讨白及主要活性成分Militarine对斑马鱼胚胎发育的影响。方法以受精后小时(hpf)为时间段,将6 hpf的胚胎暴露在不同质量浓度(0.025,0.050,0.100,0.200,0.800,1.600,3.200 g/L) Militarine溶液中,且设置空白对照组,24 h更换1次药液。分别于24,48,72,96,144 hpf时通过显微镜观察斑马鱼胚胎的发育形态,测定24 hpf胚胎尾部自主抽动频率,48 hpf心率,48,72,96 hpf孵化率,72,96,144 hpf死亡率和畸形率。结果除质量浓度为0.025,0.050,0.100 g/L溶液中孵育的胚胎外,其余质量浓度溶液中孵育的胚胎24 hpf尾部抽动数与空白对照组比较有显著差异(P<0.05),且随着质量浓度的增加,斑马鱼胚胎的尾部自主抽动次数减少;除质量浓度为0.025 g/L和0.05 g/L溶液中孵育的胚胎外,其余质量浓度孵育的胚胎与空白对照组比较有显著差异(P<0.01),且随着质量浓度的增加,斑马鱼胚胎的心率变缓;各浓度组胚胎孵化率在不同时间段呈现不同趋势,中间浓度组胚胎的孵化率较高,与空白对照组比较有明显差异(P<0.05);斑马鱼胚胎的死亡率和畸形率均随时间的延长和浓度的增大而逐渐增大。结论初步评价了白及有效成分Militarine对斑马鱼胚胎发育的安全性,为其创新药物研制和临床安全用药提供了参考。

关键词：白及 Militarine 斑马鱼胚胎发育安全性评价

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心脉通软胶囊的质量控制及稳定性考察

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中国药业 2019年第17期28卷 11-14页

作者：郑林刘丽娜李月婷李勇军黄勇王永林兰燕宇贵州医科大学·贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室·民族药与中药开发应用教育部工程研究中心

目的建立心脉通软胶囊的质量控制方法,考察其稳定性。方法采用薄层色谱法鉴别心脉通软胶囊中的荭草、山楂叶和三七;采用高效液相色谱法对君药荭草中的异荭草素、荭草素进行含量测定;运用加速试验和长期试验方法对心脉通软胶囊的稳定性... 详细信息

目的建立心脉通软胶囊的质量控制方法,考察其稳定性。方法采用薄层色谱法鉴别心脉通软胶囊中的荭草、山楂叶和三七;采用高效液相色谱法对君药荭草中的异荭草素、荭草素进行含量测定;运用加速试验和长期试验方法对心脉通软胶囊的稳定性进行考察。结果薄层色谱法均检出了心脉通软胶囊中的主要药材,异荭草素、荭草素的质量浓度分别在11.05~88.40μg/mL(r=0.9999)和10.83~86.60μg/mL(r=0.9997)范围内与峰面积积分值线性关系良好,且3批心脉通软胶囊经6个月加速试验和24个月长期试验考察,各项指标均符合质量标准要求。结论心脉通软胶囊质量可控,稳定性好。

关键词：心脉通软胶囊质量控制稳定性薄层色谱法高效液相色谱法

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水黄花质量标准研究

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中国药业 2020年第17期29卷 47-51页

作者：马雪刘春花王爱民王永林李勇军贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心·省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004

目的建立水黄花药材质量标准。方法采用性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱法对水黄花药材进行鉴别,按2015年版《中国药典(四部)》通则对其进行水分、灰分和浸出物的测定,采用高效液相色谱法测定其槲皮苷的含量。结果样品的形态特征及显微特... 详细信息

目的建立水黄花药材质量标准。方法采用性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱法对水黄花药材进行鉴别,按2015年版《中国药典(四部)》通则对其进行水分、灰分和浸出物的测定,采用高效液相色谱法测定其槲皮苷的含量。结果样品的形态特征及显微特征明显;薄层色谱鉴别斑点清晰,专属性强;4批药材水分含量为10.80%~11.10%,总灰分含量为5.29%~5.83%,水溶性浸出物含量为19.20%~20.33%;槲皮苷质量浓度在0.0050~0.0896 mg/m L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为101.11%,RSD为0.99%(n=9)。结论该方法操作简便、精密度高、结果可靠,可用于水黄花药材的质量控制。

关键词：水黄花质量标准显微鉴别薄层色谱法高效液相色谱法含量测定

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合欢花HPLC指纹图谱模式识别及含量测定研究

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中国民族民间医药 2020年第18期29卷 46-51页

作者：李银聂雨杉彭潇马雪潘洁陆苑李勇军贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004

目的:建立合欢花药材HPLC指纹图谱分析方法,结合模式识别与含量测定为其质量控制提供科学依据。方法:采用HPLC法,Waters CORTECS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7μm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长27... 详细信息

目的:建立合欢花药材HPLC指纹图谱分析方法,结合模式识别与含量测定为其质量控制提供科学依据。方法:采用HPLC法,Waters CORTECS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7μm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长270 nm。通过相似度分析、主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析对16批合欢花指纹图谱进行评价,寻找合欢花的主要差异性化学成分,并测定其含量。结果:建立了合欢花药材的指纹图谱,确定12个共有峰,并指认了其中3个共有峰,16批药材相似度均大于0.90。根据聚类分析结果,可将16批药材聚为2类,通过主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析确定槲皮苷为合欢花的主要差异性化学成分,方法学考察符合规定,RSD均小于3.0%。结论:该方法精密度高、重现性好,可为合欢花药材质量控制与评价提供参考。

关键词：合欢花高效液相色谱法指纹图谱模式识别含量测定质量控制

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载阿霉素纳米粒温敏凝胶复合体系的体内缓释性能和抗肿瘤作用及瘤内滞留性能评价

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贵州医科大学学报 2024年第3期49卷 361-367,374页

作者：杜华康陆苑金阳陈玉颖王永林李勇军刘文贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

目的探讨载阿霉素(DOX)纳米粒温敏凝胶(DOX-NPs-Gel)复合体系的体内缓释性能、抗肿瘤作用及瘤内滞留性能。方法18只SD雄性大鼠随机均分为DOX组、DOX-碘油组(4 g/L DOX溶液1 mL与碘油1 mL混匀现配,5 mL/kg)及DOX-NPs-Gel组(5 mg/kg DOX+2... 详细信息

目的探讨载阿霉素(DOX)纳米粒温敏凝胶(DOX-NPs-Gel)复合体系的体内缓释性能、抗肿瘤作用及瘤内滞留性能。方法18只SD雄性大鼠随机均分为DOX组、DOX-碘油组(4 g/L DOX溶液1 mL与碘油1 mL混匀现配,5 mL/kg)及DOX-NPs-Gel组(5 mg/kg DOX+2 g/L DOX),腹腔注射,分别于给药后不同时间点经眼底静脉丛穿刺取血,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术检测血浆中DOX的浓度,利用WinNonLin 8.1软件拟合主要药代参数[半衰期(t 1/2)、峰浓度(C max)、曲线下面积(AUC)、清除率(CL)、平均驻留时间(MRT)];培养、收集小鼠肝癌细胞株H22细胞制成悬液,单次接种于90只雄性ICR小鼠右腋皮下构建荷瘤模型,分2部分进行实验,第一部分取荷瘤小鼠36只均分为生理盐水组(注射用生理盐水,5 mL/kg)、空白NPs-Gel组(100 mg空白NPs冻干粉分散于1 mL空白Gel,5 mL/kg)、碘油组(碘油,5 mL/kg)、DOX组(2 g/L DOX,5 mL/kg)、DOX-碘油组(4 g/L DOX溶液1 mL与碘油1 mL混匀现配,5 mL/kg)及DOX-NPs-Gel组(2 g/L DOX,5 mL/kg),瘤内注射、给药1次,观测10 d,给药后每2天称体质量1次并计算各组小鼠的体质量变化百分比,称重后同时测量各组小鼠瘤体宽度、长度并计算肿瘤体积(V),观测结束时脱颈处死、剥离肿瘤组织,称取各组小鼠瘤体质量并计算抑瘤率,然后制作切片采用苏木精-伊红(HE)染色观察组织学特征;第二部分取荷瘤小鼠54只均分为DOX组、DOX-碘油组及DOX-NPs-Gel组,给药剂量和途径同前,给药后12、24、48、72、96及120 h时取各组3只小鼠脱颈处死,剥离肿瘤组织,采用UPLC-MS/MS检测瘤体组织中各时间点的DOX瘤内滞留率。结果体内缓释性能研究结果显示,相比于其余组,DOX-NPs-Gel组大鼠t 1/2延长、CL降低(P<0.05);抗肿瘤作用考察结果显示,与其它治疗组相比,DOX-NPs-Gel组小鼠肿瘤组织生长最慢,瘤重降低(P<0.05),抑瘤率最高(76.55%),HE染色显示肿瘤组织出现大范围凋亡和坏死情况;瘤内滞留性能考察结果显示,DOX-NPs-Gel组小鼠第5天时滞留率为(44.14±3.84)%,其余组第4天时滞留率已降至0%。结论与DOX和DOX-碘油相比,DOX-NPs-Gel在动物体内具有更强的缓释性能、抗肿瘤作用及瘤内滞留性能。

关键词：纳米粒温敏凝胶药代动力学抗肿瘤作用缓释作用肝动脉化疗栓塞术

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UPLC-ESI-MS/MS法测定苗药隔山消中8个成分含量

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贵州医科大学学报 2021年第8期46卷 886-892页

作者：秦兰孙佳刘春花陆苑潘洁李勇军王永林林昌虎贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004

目的建立超高效液相色谱-电喷雾电离-串联质谱法(UPLC-ESI-MS/MS)检测隔山消中告达亭、松脂素、白首乌二苯酮、阿魏酸、没食子酸、东莨菪内酯、丁香酸及绿原酸8个成分含量的标准。方法选取13批不同产地隔山消,采用UPLC-ESI-MS/MS法,以AC... 详细信息

目的建立超高效液相色谱-电喷雾电离-串联质谱法(UPLC-ESI-MS/MS)检测隔山消中告达亭、松脂素、白首乌二苯酮、阿魏酸、没食子酸、东莨菪内酯、丁香酸及绿原酸8个成分含量的标准。方法选取13批不同产地隔山消,采用UPLC-ESI-MS/MS法,以ACQUITY UPLC BEH C 18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为色谱柱,0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液为流动相、梯度洗脱、流速0.35 mL/min、柱温40℃,采用电喷雾离子源(ESI)和多反应离子监测(MRM)模式检测其中告达亭、松脂素、白首乌二苯酮、阿魏酸、没食子酸、东莨菪内酯、丁香酸及绿原酸的含量。结果告达亭、松脂素、白首乌二苯酮、阿魏酸、没食子酸、东莨菪内酯、丁香酸及绿原酸的质量浓度分别于1.860~119.048μg/L、148.950~4766.400μg/L、186.012~47619.045μg/L、5.813~11904.760μg/L、2.325~148.809μg/L、3.720~952.380μg/L、37.202~4761.900μg/L及3.720~1904.760μg/L范围内与峰面积呈良好线性关系,r>0.9990,平均加样回收率范围95.247%~102.432%;13批样品中告达亭、松脂素、白首乌二苯酮、阿魏酸、没食子酸、东莨菪内酯、丁香酸及绿原酸的含量测定结果分别为0.443~2.958μg/g、6.794~22.436μg/g、33.584~649.745μg/g、1.828~55.290μg/g、0.102~0.304μg/g、0.525~5.213μg/g、2.052~7.757μg/g及8.042~31.608μg/g;不同批次各成分的含量差异较大,其中白首乌二苯酮含量最高,松脂素、阿魏酸和绿原酸的含量相对较高,其余成分含量较低。结论UPLC-ESI-MS/MS法可作为隔山消药材质量控制的检测方法。

关键词：质量控制隔山消多反应离子监测模式含量测定超高效液相色谱-电喷雾串联质谱联用白首乌二苯酮

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