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亲水亲油平衡固相萃取小柱结合气相色谱-串联质谱法测定大果木姜子药材中禁用农药残留

中国药业 2025年第1期34卷 62-68页

作者：汪洋蒋礼黎雪朱帮会郑林李勇军马雪贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心·省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室·国家苗药工程技术研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳561113

目的建立检测大果木姜子药材中禁用农药残留量的亲水亲油平衡(HLB)固相萃取小柱结合气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法。方法样品经正己烷-乙腈-饱和氯化钠水溶液三相分配除去部分杂质,农药组分转移至乙腈提取液中,以加强型HLB固相萃取小... 详细信息

目的建立检测大果木姜子药材中禁用农药残留量的亲水亲油平衡(HLB)固相萃取小柱结合气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法。方法样品经正己烷-乙腈-饱和氯化钠水溶液三相分配除去部分杂质,农药组分转移至乙腈提取液中,以加强型HLB固相萃取小柱净化,采用GC-MS/MS多反应监测模式(MRM)进行测定,以基质内标法定量。结果大果木姜子药材中禁用农药残留物在各自质量浓度范围内与待测成分峰面积/内标峰面积线性关系良好(R2>0.99,n=6);在3个添加水平下,平均回收率为61.80%~125.53%,RSD为1.90%~14.77%(n=6)。15批大果木姜子药材中均未检出禁用农药残留。结论该方法操作简便、准确性和重复性好,可用于大果木姜子药材中禁用农药残留量的测定。

关键词：大果木姜子气相色谱-串联质谱法亲水亲油平衡固相萃取禁用农药残留

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GC-MS分析三种不同方法提取大果木姜子鲜果、干果挥发油成分

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中药材 2022年第1期45卷 123-129页

作者：晏婷周祖英骆弟元迟明艳王爱民黄勇郑林贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025 贵州益佰制药股份有限公司贵州贵阳550008

目的:采用GC-MS探讨不同方法提取大果木姜子鲜果、干果中挥发油化学成分的差异。方法:采用水蒸气蒸馏法、索氏提取法、同时蒸馏萃取法三种不同方法提取大果木姜子鲜果、干果中挥发油,通过GC-MS分别对其挥发油化学成分进行分析与鉴定,通... 详细信息

目的:采用GC-MS探讨不同方法提取大果木姜子鲜果、干果中挥发油化学成分的差异。方法:采用水蒸气蒸馏法、索氏提取法、同时蒸馏萃取法三种不同方法提取大果木姜子鲜果、干果中挥发油,通过GC-MS分别对其挥发油化学成分进行分析与鉴定,通过峰面积归一化法计算各成分的相对含量。结果:采用三种提取方法所得大果木姜子鲜果、干果中挥发油的化学成分存在一定差异,从水蒸气蒸馏提取大果木姜子鲜果、干果挥发油中分别鉴定出44、37个成分,索氏提取法中鉴定出15、13个成分,同时蒸馏萃取法分别鉴定出41、36个成分。结论:三种不同提取方法对大果木姜子鲜果、干果挥发油的提取效果影响显著,研究其具体差异可为大果木姜子药材进一步研究提供参考。

关键词：大果木姜子挥发油提取方法 GC-MS

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鱼腥草内生菌Aspergillus ***-636次级代谢产物研究

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中草药 2021年第10期52卷 2863-2868页

作者：刘思成许言超吴耽何文文胡华林朱伟明王立平贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014

目的研究鱼腥草内生真菌Aspergillus ***-636的次级代谢产物和抗植物病原菌活性。方法采用硅胶柱色谱、高效液相色谱等方法对化合物进行分离纯化,采用核磁共振谱、质谱和Marfey水解等方法确定化合物的化学结构,采用平板法测试化合物的... 详细信息

目的研究鱼腥草内生真菌Aspergillus ***-636的次级代谢产物和抗植物病原菌活性。方法采用硅胶柱色谱、高效液相色谱等方法对化合物进行分离纯化,采用核磁共振谱、质谱和Marfey水解等方法确定化合物的化学结构,采用平板法测试化合物的抗植物病原菌活性。结果从鱼腥草内生真菌Aspergillus ***-636的发酵产物中分离鉴定了6个化合物,分别为18-氧代曲普鲁斯太汀B(1)、1,2-裂环-杀锥曲菌素(2)、常现青霉素(3)、短密青霉菌胺F(4)、特来孢菌嗪D(5)、去甲氧基烟曲霉素C(6)。在50μg/mL质量浓度下,化合物2和3对小麦赤霉病菌的抑制率分别为21.4%和20.0%,对辣椒枯萎病菌抑制率分别为18.0%和20.9%。结论化合物1为新的吲哚二酮哌嗪生物碱,鱼腥草内生菌可代谢产生抗植物病原菌活性的化合物。

关键词：鱼腥草曲霉次级代谢产物抗植物病原菌活性吲哚二酮哌嗪 18-氧代曲普鲁斯太汀B

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基于网络药理学及实验验证探究廖氏化风丹抗白血病活性

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中药新药与临床药理 2023年第11期34卷 1575-1585页

作者：黄丽荣程莎侯菁余佳宋玉万小青滕彩厚徐应江骆衡贵州理工学院食品药品制造工程学院贵州贵阳550003 贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州省天然产物研究中心贵州贵阳550014 贵州万胜药业有限责任公司贵州遵义563005

目的基于网络药理学探究廖氏化风丹抗白血病活性及作用机制,并通过实验进行验证。方法采用气相色谱-质谱联用分析结合中药系统药理学数据库与分析平台检索廖氏化风丹的化学成分;应用Swiss Target Prediction数据库检索该成分的潜在作用... 详细信息

目的基于网络药理学探究廖氏化风丹抗白血病活性及作用机制,并通过实验进行验证。方法采用气相色谱-质谱联用分析结合中药系统药理学数据库与分析平台检索廖氏化风丹的化学成分;应用Swiss Target Prediction数据库检索该成分的潜在作用靶点;通过数据库GeneCards、CTD和OMIM检索白血病相关靶点;使用STRING数据库对交集靶点进行互作分析,构建PPI网络,筛选核心靶点;借助Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-成分-靶点”网络,分析抗白血病关键活性成分;应用DAVID数据库进行基因本体(GO)功能富集与京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路注释分析,将得到的主要活性成分与核心靶蛋白进行分子对接验证。采用MTT实验检测廖氏化风丹对白血病细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对白血病细胞凋亡的影响;构建白血病小鼠模型,通过动物实验检测廖氏化风丹体内抗白血病活性。结果分析确定了廖氏化风丹活性成分111个,作用靶点1170个,其中与白血病相关的潜在靶点970个,核心靶点10个,主要包括ABL、BCL-2、KIT等;GO富集分析与KEGG注释分析显示这些作用靶点主要参与细胞凋亡、细胞增殖的调控等生物过程及cAMP信号通路、癌症通路、神经活性配体-受体相互作用、PI3K-Akt信号通路等;分子对接结果显示廖氏化风丹核心活性成分与核心靶蛋白ABL、BCL-2、KIT有较强的亲和力;体外细胞实验表明廖氏化风丹能够抑制HEL、K562细胞增殖并诱导细胞凋亡(P<0.01);动物体内实验结果表明廖氏化风丹对小鼠白血病有明显治疗作用(P<0.05,P<0.01)。结论揭示了廖氏化风丹抗白血病多成分、多靶点、多通路的作用机制,明确了其具有抗白血病活性,为进一步研究开发廖氏化风丹的药用价值提供依据。

关键词：廖氏化风丹白血病网络药理学分子对接实验验证 HEL细胞 K562细胞小鼠

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UPLC-MS/MS研究荭草提取物的H9c2细胞药代动力学

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中国中药杂志 2021年第18期46卷 4833-4840页

作者：陆苑黎娜吕婷王永林潘洁孙佳李勇军刘春花贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004

建立H9c2细胞中异荭草素、荭草素、槲皮苷、牡荆素和山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,并运用在荭草提取物的H9c2细胞药代动力学研究中。荭草提取物(100μg·mL^(-1))处理H9c2细胞后,于不同... 详细信息

建立H9c2细胞中异荭草素、荭草素、槲皮苷、牡荆素和山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,并运用在荭草提取物的H9c2细胞药代动力学研究中。荭草提取物(100μg·mL^(-1))处理H9c2细胞后,于不同时间点分别收集获得整体细胞以及相应的细胞核、线粒体和高尔基体,蛋白沉淀方法处理样品,采用UPLC-MS/MS测定整体细胞以及亚细胞结构中异荭草素、荭草素、槲皮苷、牡荆素、山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷的药物浓度,并计算相关药动学参数。结果在整体细胞中,各成分的达峰时间均为8 h,荭草素、牡荆素、槲皮苷、异荭草素与细胞核和线粒体的亲和力均较高,山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷与线粒体亲和力较高。实验结果提示荭草保护心肌细胞中,这5个化学成分可能主要是通过作用于细胞核或线粒体而发挥药理效应。

关键词： UPLC-MS/MS 荭草 H9c2细胞细胞药代动力学细胞核线粒体

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黄芪药渣对贵州黑山羊生长性能、免疫功能和肉品质的影响

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中国饲料 2022年第13期 72-77页

作者：韩昌权王恩花高明张琳李良群杨礼寿邓廷飞葛丽娟张富林严艳芳杨小生潘雄贵州农业职业学院贵州清镇551400 省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室(贵州医科大学) 贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014

为研究黄芪药渣对贵州黑山羊生长性能、免疫功能和肉品质的影响,试验选取平均体重(15.0±1.0)kg、3月龄、雄性羔羊16只,随机为4组,每组4个重复,每个重复1只。对照组(CT组)不添加黄芪药渣(AMBR),G1、G2、G3组分别在日粮中添加5%、10%... 详细信息

为研究黄芪药渣对贵州黑山羊生长性能、免疫功能和肉品质的影响,试验选取平均体重(15.0±1.0)kg、3月龄、雄性羔羊16只,随机为4组,每组4个重复,每个重复1只。对照组(CT组)不添加黄芪药渣(AMBR),G1、G2、G3组分别在日粮中添加5%、10%、15%的AMBR。预试验期10 d,正式期90 d。结果表明:G3组的终末体重、胴体重及屠宰率均显著高于CT和G1组(P<0.05),最终体重分别增加了24.86%和21.05%,胴体重分别增加了36.55%和26.95%,屠宰率分别增加了9.32%和4.83%;G3组料重比显著低于CT组(P<0.01),降低了28.69%;G2、G3组血清免疫球蛋白(Ig G、IgM、IgA)水平极显著高于CT组(P<0.01),其中G2组与CT组相比,IgG、IgM和IgA分别提高了185.77%、31.16%、46.05%,G3组与CT组相比,IgG、IgM和IgA分别提高了264.79%、25.03%、28.74%。;此外,G1、G2、G3组肉质与CT组无显著差异(P>0.05)。综上所述,在常规日粮中添加15%AMBR可提高贵州黑山羊的生长性能及免疫力,并且对肉质不会产生负面影响。

关键词：黄芪药渣贵州黑山羊生长性能免疫功能肉品质

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基于血浆药物化学和网络药理学分析良附滴丸治疗胃肠道疾病的活性成分和潜在分子机制

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中国中药杂志 2021年第20期46卷 5393-5402页

作者：付昌丽刘春花潘洁陆苑孙佳李勇军王爱民贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004

探究良附滴丸治疗胃肠道疾病的活性成分和潜在分子机制。采用UHPLC-Q-TOF-MS分析良附滴丸的血浆药物化学成分;基于血浆药物化学结果,在TCMSP数据库和SwissTargetPrediction数据库中检索血浆中移行成分的作用靶点,利用OMIM、CTD、GeneCa... 详细信息

探究良附滴丸治疗胃肠道疾病的活性成分和潜在分子机制。采用UHPLC-Q-TOF-MS分析良附滴丸的血浆药物化学成分;基于血浆药物化学结果,在TCMSP数据库和SwissTargetPrediction数据库中检索血浆中移行成分的作用靶点,利用OMIM、CTD、GeneCards和DrugBank数据库获取胃肠道疾病的相关靶点,筛选化学成分作用于疾病的主要蛋白,利用STRING数据库对这些主要靶点进行蛋白相互作用(PPI)分析,并通过Metascape数据库进行GO和KEGG通路富集分析;利用Cytoscape软件构建成分-靶点、PPI网络图和拓扑分析,综合分析预测出关键作用靶点、生物学过程和作用通路;最后,运用AutoDock Vina 4.2.6软件对化学成分与关键靶点进行分子对接验证。共鉴定出良附滴丸中的化学成分12个,血浆中的移行成分4个,分别为高良姜素、鼠李柠檬素、高良姜素-3-O-甲醚、α-香附酮,涉及189个疾病靶点,并作用于细胞对氮化合物、对有机环状化合物和对激素刺激的反应等生物过程,主要富集在PI3K-Akt、Foxo和IL-17等信号通路上;分子对接结果显示,4个血浆移行成分与核心靶点亲和性好。良附滴丸中高良姜素、鼠李柠檬素、高良姜素-3-O-甲醚、α-香附酮可能是其治疗胃肠道疾病的活性成分,该研究初步阐释了良附滴丸治疗胃肠道疾病的药效物质基础和作用机制,为其深入开发和应用提供了一定的理论基础。

关键词：良附滴丸 UHPLC-Q-TOF-MS 血浆药物化学网络药理学胃肠道疾病

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重楼中一株产纤维素酶内生真菌的分离及鉴定

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生物技术通报 2022年第2期38卷 95-104页

作者：张功友王一涵郭敏张婷婷王兵刘红美贵州医科大学医药生物技术工程研究中心贵阳550025 贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550025 贵州医科大学生物与工程学院贵阳550025 贵州省高校免疫细胞与抗体工程研究中心贵阳550025 贵州医科大学基础医学院贵阳550025

从重楼根茎中分离、鉴定具有产纤维素酶活性的内生真菌。采用表面消毒法从重楼块茎中分离内生真菌;用纤维素酶活性CMC平板检测分离菌株的产纤维素酶活性;对高产菌株进行形态学观察和分子生物学测序鉴定;探究影响纤维素酶活力的因素;利... 详细信息

从重楼根茎中分离、鉴定具有产纤维素酶活性的内生真菌。采用表面消毒法从重楼块茎中分离内生真菌;用纤维素酶活性CMC平板检测分离菌株的产纤维素酶活性;对高产菌株进行形态学观察和分子生物学测序鉴定;探究影响纤维素酶活力的因素;利用平板法检测该株菌产其他胞外水解酶的活性。从3个来源的重楼中分离出41株内生真菌,通过平板检测发现AS-5、AS-7、AS-9和AS-18菌株能产生纤维素酶,其中AS-9菌株活性最强;通过形态学观察和ITS、LSU序列分析将AS-9菌株鉴定为Setophoma terrestris;该菌在pH值为7.0和温度为28℃时表现出最大纤维素酶活性,紫外线照射对产纤维素酶活性无明显作用;检测发现AS-9菌株同时具有产酪蛋白酶、脂肪酶、天冬酰胺酶、谷氨酰胺酶和脲酶活性。首次在重楼中发现内生真菌Setophoma terrestris,且具有较好的产纤维素酶能力,值得深入研究。

关键词：纤维素酶重楼分离鉴定 Setophoma terrestris 胞外水解酶

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基于外翻肠囊模型研究荭草提取物在正常和心肌缺血模型大鼠中的肠吸收特征

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中国中药杂志 2021年第1期46卷 196-205页

作者：刘春花王明金杨淑婷黎娜陆苑潘洁李勇军王永林孙佳贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室/民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004

采用大鼠外翻肠囊模型考察荭草提取物在正常和心肌缺血模型大鼠的肠吸收特征。收集荭草提取物(5.0,10.0,20.0 mg·mL^(-1))在各肠段中的肠囊液,采用UPLC-TQD测定肠囊液中荭草素、异荭草素、牡荆素、原儿茶酸、山柰素-3-O-β-D-葡萄... 详细信息

采用大鼠外翻肠囊模型考察荭草提取物在正常和心肌缺血模型大鼠的肠吸收特征。收集荭草提取物(5.0,10.0,20.0 mg·mL^(-1))在各肠段中的肠囊液,采用UPLC-TQD测定肠囊液中荭草素、异荭草素、牡荆素、原儿茶酸、山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮苷6个化学成分的含量,计算吸收速率和累积吸收量,同时考察P-糖蛋白(P-gp)抑制剂对6种成分肠吸收的影响。结果发现,正常状态下,低、中、高浓度下,主要吸收部位分别是十二指肠、结肠和回肠;心肌缺血状态下,低浓度主要集中在回肠和空肠,中浓度在回肠,高浓度在十二指肠和回肠。与正常组相比,模型组中6种成分的吸收速率和累积吸收量均显著下降。P-gp抑制剂能显著提高模型组中6种成分的吸收速率和累积吸收量,推测荭草中的6种成分可能是P-gp的底物。外翻肠囊模型能有效评价荭草提取物中这6种成分在正常和心肌缺血状态下的肠吸收特征,该研究为荭草的临床用药和深入开发利用提供参考依据。

关键词：荭草提取物肠吸收离体外翻肠囊法心肌缺血 P-糖蛋白抑制剂

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定量核磁共振氢谱测定发酵饮料中乙醇、乙酸的含量

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食品与发酵工业 2021年第10期47卷 235-239页

作者：梁光焰姜阳明周美夏宇李春燕胡恩明颜秋晓王道平贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014

以乙醇、乙酸为研究对象,采用定量核磁共振氢谱技术测定发酵饮料中乙醇、乙酸的含量。使用氘代二甲基亚砜为溶剂,3-(三甲基甲硅烷基)丙酸-d_(4)钠[sodium 3-(trimethylsilyl)propionate-2,2,3,3-d_(4),TMSP]为内标,90°脉冲,扫描次... 详细信息

以乙醇、乙酸为研究对象,采用定量核磁共振氢谱技术测定发酵饮料中乙醇、乙酸的含量。使用氘代二甲基亚砜为溶剂,3-(三甲基甲硅烷基)丙酸-d_(4)钠[sodium 3-(trimethylsilyl)propionate-2,2,3,3-d_(4),TMSP]为内标,90°脉冲,扫描次数(NS)为16,弛豫时间(D_(1))为20 s,采样时间(AQ)为4.50 s,298 K恒温测试。以乙醇(1.10 ppm)、乙酸(1.80 ppm)及TMSP(0.00 ppm)峰为定量峰,对5种发酵饮料中乙醇、乙酸的含量进行测定。q^(1)H-NMR测定乙醇线性范围为64.05~0.32 mg/mL,回收率99.68%~100.65%;乙酸线性范围为19.51~0.20 mg/mL,回收率98.38%~99.24%;乙醇、乙酸重复性相对标准差分别为0.11%、0.99%(n=6),48 h内测试结果准确可信。q^(1)H-NMR技术可用于发酵饮料中乙醇、乙酸的含量测定,该方法操作高效简便、不损耗样品,检测结果准确可靠,拓宽了醇、酸类成分的检测手段。

关键词：定量核磁共振乙醇、乙酸含量发酵饮料

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