检索结果-内蒙古大学图书馆

中成药 2021年第5期43卷 1152-1157页

作者：刘欢吴忠秀陆定艳席晓岚王永林李勇军杨畅刘亭贵州医科大学/贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025

目的探讨参芎葡萄糖注射液对氯化钴(CoCl_(2))诱导的H9c2心肌细胞凋亡的拮抗作用及其机制。方法体外培养H9c2细胞,利用CoCl_(2)建立细胞凋亡模型;MTS法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测c-Jun... 详细信息

目的探讨参芎葡萄糖注射液对氯化钴(CoCl_(2))诱导的H9c2心肌细胞凋亡的拮抗作用及其机制。方法体外培养H9c2细胞,利用CoCl_(2)建立细胞凋亡模型;MTS法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测c-Jun、p-c-Jun、Bcl-2、Bax和Cleaved caspase 3的表达情况。结果CoCl_(2)浓度在600μmol/L处理24 h的情况下可建立H9c2细胞凋亡模型;不同浓度的SGI预处理后,可明显增加细胞存活率,降低细胞凋亡率,下调蛋白c-Jun磷酸化水平、Bax和Cleaved caspase 3表达水平,上调蛋白Bcl-2表达水平。结论SGI预处理对CoCl_(2)诱导H9c2细胞凋亡具有拮抗作用,其机制可能与其抑制c-Jun通路有关。

关键词：参芎葡萄糖注射液 H9c2细胞细胞凋亡 c-Jun通路

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UHPLC-PDA法同时测定毛大丁草中6种成分

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中成药 2021年第1期43卷 111-116页

作者：游景瑞孙佳兰燕宇李勇军王永林刘春花贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004

目的建立UHPLC-PDA法同时测定毛大丁草Gerbera piloselloides(Linn.)Cass.中熊果苷、绿原酸、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C的含量。方法毛大丁草50%甲醇提取物的分析采用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm)... 详细信息

目的建立UHPLC-PDA法同时测定毛大丁草Gerbera piloselloides(Linn.)Cass.中熊果苷、绿原酸、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C的含量。方法毛大丁草50%甲醇提取物的分析采用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.28 mL/min;柱温40℃;检测波长280、328 nm。结果熊果苷、绿原酸、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C分别在4.45~284.59(r=0.9999)、0.30~19.52(r=0.9998)、0.30~19.50(r=0.9998)、0.31~19.84(r=0.9999)、0.61~38.96(r=0.9998)、0.32~20.19(r=0.9998)μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为102.06%、103.37%、104.97%、104.79%、105.21%、104.75%,RSD分别为1.88%、1.70%、1.20%、1.89%、1.53%、1.25%。结论该方法稳定,重复性好,可用于毛大丁草的质量控制。

关键词：毛大丁草化学成分 UHPLC

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黔北茶叶矿质元素与生化品质含量特征分析

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食品研究与开发 2022年第1期43卷 39-46页

作者：颜秋晓王道平李相楹李春燕胡恩明张清海贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550002 贵州大学林学院贵州贵阳550025 贵州大学新农村发展研究院贵州贵阳550025 贵州医科大学食品安全学院贵州贵阳550004

探究贵州黔北地区茶叶中矿质元素及生化指标的含量情况,为黔北茶叶品质评价提供参考。对黔北地区当季春茶矿质元素、茶多酚、氨基酸的含量进行分析,钙含量范围为1.69 g/kg~3.86 g/kg,镁含量为1.08 g/kg~2.06 g/kg,锰含量为0.52 g/kg~1.1... 详细信息

探究贵州黔北地区茶叶中矿质元素及生化指标的含量情况,为黔北茶叶品质评价提供参考。对黔北地区当季春茶矿质元素、茶多酚、氨基酸的含量进行分析,钙含量范围为1.69 g/kg~3.86 g/kg,镁含量为1.08 g/kg~2.06 g/kg,锰含量为0.52 g/kg~1.19 g/kg,铁含量为67.04 mg/kg~123.35 mg/kg,锌含量为25.65 mg/kg~62.74 mg/kg,锶含量为2.83 mg/kg~8.18 mg/kg,硒含量为0.05 mg/kg~0.14 mg/kg。茶多酚含量为23.57%~43.24%,平均为32.41%,绿茶高于红茶;茶氨酸含量为1.06%~2.05%,平均为1.63%,绿茶高于红茶。钙和锶极显著正相关,镁与铁、锌显著正相关,锰与茶多酚显著负相关,与茶氨酸极显著负相关,茶氨酸与钙、锶显著负相关,总体微量元素含量较丰富,但元素含量差异较大。锰对茶氨酸、茶多酚的形成有一定的拮抗作用,钙、锶含量对茶氨酸的形成有一定的抑制作用。湄潭红茶、凤冈绿茶、道真绿茶酚氨比较高,茶汤较为苦涩,湄潭绿茶、道真红茶茶多酚含量较为合适,不会对茶汤口感产生影响。

关键词：茶叶矿质元素生化指标相关性茶叶主产区

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太子参连作根际土壤中3株真菌的分离鉴定及其生物学特性研究

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山东农业大学学报（自然科学版） 2022年第6期53卷 839-844页

作者：周丹朱梅韦雪娇胡华林程搏幸贵州师范学院生物科学院贵州贵阳550018 贵州医科大学省部共建药物植物功效与利用国家重点实验室/贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014

本文对太子参连作根际土壤分离培养的3株真菌进行分子生物学鉴定,并从温度、pH、碳源及光照等方面对其生物学特性影响进行了研究。结果表明,通过对菌株形态进行观察和结合系统发育树进行分析,初步判断菌株A为卵形球托霉(Gongronella but... 详细信息

本文对太子参连作根际土壤分离培养的3株真菌进行分子生物学鉴定,并从温度、pH、碳源及光照等方面对其生物学特性影响进行了研究。结果表明,通过对菌株形态进行观察和结合系统发育树进行分析,初步判断菌株A为卵形球托霉(Gongronella butleri),菌株F为赭绿青霉(Penicillium ochrochloron),菌株L为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。菌株A在以D-果糖为碳源、温度30℃、pH 11、连续黑暗培养条件下生长良好。菌株F在以糊精为碳源、温度25℃、pH值5和6、12 h光暗交替培养条件下生长良好。菌株L以α-乳糖为碳源,温度条件为25℃,碱性条件下,连续黑暗或12 h光暗培养条件下,生长较好。

关键词：太子参土壤微生物生物学特性

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PD0721单链抗体的体外原核表达条件优化及蛋白质鉴定

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食品与生物技术学报 2021年第7期40卷 42-49页

作者：张煜彬叶路芬吴忠秀薛维娜何彬杨畅李勇军王永林刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学医药卫生管理学院贵州贵阳550025 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025

为了构建抗表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factor receptor variant typeⅢ,EGFRvⅢ)的单链抗体PD0721的大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统,作者研究了PD0721重组蛋白在大肠杆菌BL21中的最佳表达条件,并建立相应的重... 详细信息

为了构建抗表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factor receptor variant typeⅢ,EGFRvⅢ)的单链抗体PD0721的大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统,作者研究了PD0721重组蛋白在大肠杆菌BL21中的最佳表达条件,并建立相应的重组蛋白质纯化方法。首先构建重组表达质粒PD0721-pET-22b(+)并转化至大肠杆菌BL21中,再利用SDS-PAGE研究不同诱导剂IPTG浓度、不同诱导温度、不同诱导时间和不同菌体浓度对PD0721重组蛋白表达的影响。利用镍柱亲和层析开发PD0721重组蛋白的纯化方法,并使用蛋白质印迹法以及N端测序法对纯化后的蛋白质进行鉴定。菌落PCR及琼脂糖凝胶电泳表明,PD0721-pET-22b(+)重组质粒及PD0721重组大肠杆菌BL21构建成功.PD0721重组蛋白在体外原核表达的最佳诱导剂浓度为0.6μmol/L,最佳温度为15℃,最佳诱导时间为12 h,最佳菌体浓度OD600约为0.6。经过Ni2+柱亲和层析后,当咪唑的浓度为150 mmol/L,可以得到纯度较高的PD0721重组蛋白。SDS-PAGE电泳和Western Blotting结果表明,重组蛋白质产物的相对分子质量约为31000,与理论相对分子质量一致,蛋白质的N端测序也与设计序列一致。作者成功构建了抗EGFRvⅢ抗体PD0721重组蛋白的体外原核表达体系,优化了最佳表达条件,并提供了纯化重组PD0721蛋白的可行方法。

关键词：大肠杆菌表达系统 EGFRvⅢ 表达条件优化亲和层析蛋白质印迹法

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八元瓜环与常山碱的相互作用模式

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高等学校化学学报 2020年第2期41卷 277-283页

作者：蒋静陈晓丽黄亚励张奇龙徐红杨小生贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550025 贵州医科大学公共卫生学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025 贵州医科大学基础医学院贵阳550025

利用紫外吸收光谱、荧光光谱、核磁共振氢谱及红外光谱等方法考察了八元瓜环(Q[8])对常山碱(Feb)的包结作用;采用紫外吸收光谱法研究了Q[8]对Feb理化性质的影响及不同pH条件下Q[8]/Feb包合物溶液中Feb的释放及Q[8]/Feb包合物在人工肠液... 详细信息

利用紫外吸收光谱、荧光光谱、核磁共振氢谱及红外光谱等方法考察了八元瓜环(Q[8])对常山碱(Feb)的包结作用;采用紫外吸收光谱法研究了Q[8]对Feb理化性质的影响及不同pH条件下Q[8]/Feb包合物溶液中Feb的释放及Q[8]/Feb包合物在人工肠液和人工胃液中的释放。结果表明,在pH=1. 2的盐酸介质中,Q[8]与Feb可形成摩尔比1∶1的稳定主客体包合物,结合常数为4. 20×10^4L/mol。在pH=1. 2(人工胃液的pH值)时,Feb可与Q[8]形成稳定包合物;在pH=6. 8(人工肠液的pH值)时,Q[8]/Feb包合物可释放出单纯的游离Feb。因此,Q[8]可作为Feb的一种潜在药物载体为减轻Feb呕吐副反应提供借鉴。

关键词：八元瓜环常山碱主客体包合物药物释放

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云实皮中二苯并氧辛类新化合物

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中国中药杂志 2021年第20期46卷 5310-5313页

作者：雷艳蒋礼刘俊宏陆苑马雪郑林李勇军贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州省食品药品审评查验中心贵州贵阳550004

研究豆科云实属植物云实Caesalpinia decapetala的化学成分。采用硅胶、反相C18、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备型HPLC等方法进行分离纯化,根据理化性质、波谱数据结合参考文献鉴定化合物结构。从云实皮70%乙醇提取物中分离得到3对二... 详细信息

研究豆科云实属植物云实Caesalpinia decapetala的化学成分。采用硅胶、反相C18、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备型HPLC等方法进行分离纯化,根据理化性质、波谱数据结合参考文献鉴定化合物结构。从云实皮70%乙醇提取物中分离得到3对二苯并氧辛类新化合物,分别鉴定为protosappanoside A(1a)和isoprotosappanoside A(1b)、protosappanoside B(2a)和isoprotosappanoside B(2b)、protosappanoside C(3a)和isoprotosappanoside C(3b)。以上化合物均为二苯并氧辛类新化合物。

关键词：豆科云实二苯并氧辛类衍生物结构鉴定

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新型4-三氟甲基-6-甲氧基喹啉-2-胺衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

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中南药学 2023年第2期21卷 413-420页

作者：李成吕梦凡余佳徐必学徐广灿贵州中医药大学药学院贵阳550025 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵阳550014

目的发现高效、低毒的新型抗肿瘤目标化合物。方法以4-甲氧基苯胺为原料,通过氨解、环化、氯代、偶联、烷基化等反应,设计并合成一系列新型4-三氟甲基-6-甲氧基喹啉-2-胺衍生物,并通过^(1)H NMR、^(13)C NMR、^(19)F NMR进行结构确证... 详细信息

目的发现高效、低毒的新型抗肿瘤目标化合物。方法以4-甲氧基苯胺为原料,通过氨解、环化、氯代、偶联、烷基化等反应,设计并合成一系列新型4-三氟甲基-6-甲氧基喹啉-2-胺衍生物,并通过^(1)H NMR、^(13)C NMR、^(19)F NMR进行结构确证。采用MTT法评价目标化合物对K562细胞(人慢性髓系白血病细胞)、LNCaP细胞(前列腺癌细胞)、PC3细胞(前列腺癌细胞)、HeLa细胞(人宫颈癌细胞)和A549细胞(人肺癌细胞)5种肿瘤细胞株的生长抑制活性。结果共合成了4-三氟甲基-6-甲氧基喹啉-2-胺衍生物17个。其中,在5μmol·L^(-1)浓度下,化合物5b对LNCaP细胞抑制率为42.61%,化合物5e对K562细胞抑制率为41.29%。结论建立了一种新型4-三氟甲基-6-甲氧基喹啉-2-胺衍生物的快速合成方法,部分化合物对肿瘤细胞的增殖具有一定的抑制活性,可为该类化合物的深入研究提供参考。

关键词：喹啉衍生物三氟甲基癌症抗肿瘤活性

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沉默BLM DNA解旋酶基因对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响

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贵州医科大学学报 2022年第8期47卷 869-878页

作者：黄亚兰张望明刘小花余晓静安丽君吴介恒杨留启刘杰麟贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014

目的探讨沉默BLM DNA解旋酶基因对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响。方法利用数据库分析BLM DNA解旋酶在乳腺癌组织中的表达情况及后评估价值,免疫组织化学技术检测三阴性乳腺癌、乳腺纤维腺瘤和癌旁组织中BLM DNA解旋酶表... 详细信息

目的探讨沉默BLM DNA解旋酶基因对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响。方法利用数据库分析BLM DNA解旋酶在乳腺癌组织中的表达情况及后评估价值,免疫组织化学技术检测三阴性乳腺癌、乳腺纤维腺瘤和癌旁组织中BLM DNA解旋酶表达,Western blot检测MCF-10A细胞、MCF-7细胞、MDA-MB-468细胞中BLM DNA解旋酶蛋白表达水平;合成siRNA序列沉默MDA-MB-468细胞中BLM DNA解旋酶基因的表达,选取沉默效率最高的siRNA-BLM 3序列构建shRNA干扰载体慢病毒;将慢病毒感染MDA-MB-468细胞分为shRNA-NC组和shRNA-BLM组,MTT、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,单细胞凝胶电泳技术检测与DNA损伤相关的细胞尾部DNA含量,免疫细胞化学检测DNA损伤标志物γ-H2AX表达情况,Western blot检测凋亡相关蛋白及DNA损伤修复蛋白表达情况。结果生物信息学分析显示BLM DNA解旋酶在乳腺癌组织中高表达,且与乳腺癌患者不良预后密切相关;三阴性乳腺癌组织BLM DNA解旋酶表达水平高于乳腺纤维腺瘤和癌旁组织(P<0.001);与MCF-10A细胞、MCF-7细胞比较,MDA-MB-468细胞中BLM DNA解旋酶蛋白表达水平升高(P<0.01);与未转染组比较,siRNA-BLM 3组BLM DNA解旋酶蛋白表达下调(P<0.05);与shRNA-NC组比较,shRNA-BLM组细胞增殖能力被抑制、凋亡率升高、尾部DNA含量增加、γ-H2AX阳性细胞比例升高(P<0.01)、凋亡相关蛋白Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-8表达上调,Bcl-2及DNA损伤修复蛋白BRCA1、Rad51、BLM表达下调(P<0.05)。结论沉默BLM DNA解旋酶基因表达抑制三阴性乳腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,凋亡机制可能与细胞DNA损伤增加,DNA损伤修复相关蛋白受抑制有关。

关键词：乳腺肿瘤细胞增殖细胞凋亡 BLM DNA解旋酶基因 RNA干扰

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黑骨藤对高表达表皮生长因子受体突变体Ⅲ的人胶质母细胞瘤细胞DKMG的影响及机制

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贵州医科大学学报 2023年第10期48卷 1137-1144页

作者：唐银彤官志忠陆定艳陈帅帅吴忠秀曹陶涛郭玮钰刘亭贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室&贵州省医学分子生物学重点实验室贵州贵阳550001 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

目的探讨黑骨藤对高表达表皮生长因子(EGF)受体突变体Ⅲ(EGFRvⅢ)的人胶质母细胞瘤细胞DKMG的影响及其机制。方法取对数生长期的DKMG和不表达EGFRvⅢ的人脑星形胶质母细胞瘤细胞U87MG,各自分为空白(Con)组(DMEM培养液)、低浓度黑骨藤组(... 详细信息

目的探讨黑骨藤对高表达表皮生长因子(EGF)受体突变体Ⅲ(EGFRvⅢ)的人胶质母细胞瘤细胞DKMG的影响及其机制。方法取对数生长期的DKMG和不表达EGFRvⅢ的人脑星形胶质母细胞瘤细胞U87MG,各自分为空白(Con)组(DMEM培养液)、低浓度黑骨藤组(100 mg/L黑骨藤培养液)、中浓度黑骨藤组(200 mg/L黑骨藤培养液)及高浓度黑骨藤组(400 mg/L黑骨藤培养液),处理细胞24 h,采用细胞增殖与毒力检测试剂盒(MTS)检测各组DKMG、U87MG细胞的存活率,采用流式细胞术检测各组DKMG细胞凋亡率;实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qRT-PCR)检测各组DKMG细胞中EGFRvⅢ、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及BCL2-Associated X(Bax)的信使核糖核酸(mRNA)表达,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组DKMG细胞中EGFRvⅢ、Bcl-2、Bax、半胱氨酸蛋酶家族(Caspase-3、Cleaved caspase-3)蛋白的表达。结果MTS检测显示,与Con组相比,各浓度黑骨藤组DKMG细胞存活率明显降低(P<0.05),各浓度黑骨藤组U87MG细胞存活率比较、差异无统计学意义(P>0.05);流式细胞术结果表明,与Con组比较,各浓度黑骨藤组DKMG细胞凋亡率明显增加(P<0.05);qRT-PCR结果表明,与Con组比较,各浓度黑骨藤组DKMG细胞中EGFRvⅢ和Bcl-2 mRNA表达降低(P<0.05),Bax表达无变化(P>0.05);Western blot结果显示,各浓度黑骨藤组DKMG细胞中EGFRvⅢ、Bcl-2及Caspase-3蛋白表达下降(P<0.05),Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。结论黑骨藤可诱发DKMG细胞凋亡,产生细胞杀伤作用,其机制可能与下调EGFRvⅢ、Bcl-2、Caspase-3表达及上调Bax、Cleaved caspase-3表达有关。

关键词：细胞凋亡黑骨藤 DKMG细胞 U87MG细胞表皮生长因子受体突变体Ⅲ 细胞毒性

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