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中国中药杂志 2023年第22期48卷 6183-6190页

作者：肖金超王玲张丽迟明艳黄勇巩仔鹏郑林何峰贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004

中药复方制剂成分复杂,舒肝宁注射液作为临床应用广泛的中药注射剂,其体内过程尚不明确,测定药物的血浆蛋白结合率对药物的药动学、药效学研究具有重要意义。该实验采用平衡透析法结合UPLC-MS/MS技术测定舒肝宁注射液中对羟基苯乙酮、... 详细信息

中药复方制剂成分复杂,舒肝宁注射液作为临床应用广泛的中药注射剂,其体内过程尚不明确,测定药物的血浆蛋白结合率对药物的药动学、药效学研究具有重要意义。该实验采用平衡透析法结合UPLC-MS/MS技术测定舒肝宁注射液中对羟基苯乙酮、咖啡酸、黄芩素、千层纸素A、栀子苷、黄芩苷、木犀草苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、野黄芩苷、金丝桃苷10种成分在大鼠及人血浆中的血浆蛋白结合率,为进一步阐明舒肝宁注射液的体内过程及指导临床用药提供理论依据。结果显示,除黄芩素及栀子苷外其他8种成分在人血浆中结合率高于大鼠血浆,且均存在种属差异。在人血浆中,除栀子苷、咖啡酸及黄芩苷外,其余7种成分血浆蛋白结合率均高于80%,其中黄芩素及千层纸素A高于90%,除栀子苷外各成分与血浆蛋白结合程度高。

关键词：舒肝宁注射液血浆蛋白结合率液质联用技术平衡透析法黄芩苷栀子苷

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UPLC-MS/MS同时测定云实皮中8种成分的含量

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中国中药杂志 2022年第3期47卷 692-700页

作者：李月婷刘慧蒙文莎周婷巩仔鹏黄勇郑林贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004

建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定云实皮药材中8种成分的含量,并结合化学模式识别方法对不同产地的云实皮药材进行质量评价。采用Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-0.1%甲酸乙腈(B... 详细信息

建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定云实皮药材中8种成分的含量,并结合化学模式识别方法对不同产地的云实皮药材进行质量评价。采用Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-0.1%甲酸乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温40℃,进样量1μL;质谱采用电喷雾离子源,负离子模式多反应监测进行定量分析;对多批次云实皮含量测定结果进行聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),评价其质量差异性。8种成分在各自的质量浓度范围内线性关系良好(r>0.999),平均加样回收率为96.85%~103.4%,RSD为0.52%~2.8%。定量测定结果显示各批次样品间存在一定差异,HCA和PCA 2种方法均把样品分为3类。该方法简便、灵敏、准确、高效,可用于云实皮药材的质量评价。

关键词：云实皮超高效液相色谱-串联质谱含量测定聚类分析主成分分析

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HPLC测定大风艾中5种二氢黄酮类成分的含量

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中国现代应用药学 2021年第5期38卷 615-618页

作者：谭道鹏杜艺玫秦琳鲁艳柳张倩茹何芋岐遵义医科大学药学院贵州遵义563009 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014

目的测定大风艾药材中3,3’,5,7-四羟基-4’-甲氧基二氢黄酮、3’,5,5’,7-四羟基二氢黄酮、3,3’,4’,5-四羟基-7-甲氧基二氢黄酮、3,3’,5-三羟基-4’,7-二甲氧基二氢黄酮、艾纳香素5种二氢黄酮类成分的含量。方法采用高效液相色谱法... 详细信息

目的测定大风艾药材中3,3’,5,7-四羟基-4’-甲氧基二氢黄酮、3’,5,5’,7-四羟基二氢黄酮、3,3’,4’,5-四羟基-7-甲氧基二氢黄酮、3,3’,5-三羟基-4’,7-二甲氧基二氢黄酮、艾纳香素5种二氢黄酮类成分的含量。方法采用高效液相色谱法测定,色谱柱为AKZONOBEL Kromasil 100-5C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-0.2%冰醋酸(B),梯度洗脱(0~10 min,20%A;10~15 min,20%→25%A;15~25 min,25%A;25~50 min,25%→65%A);流速:1.0 mL·min^(-1);检测波长:289 nm;柱温:35℃;进样量:10μL。结果 5种二氢黄酮类成分的线性关系良好,加样回收率为98.73%~101.84%。结论该方法简便、准确,可用作大风艾药材质量控制的方法。

关键词：大风艾二氢黄酮含量测定

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天然产物Polygalolides的全合成研究进展

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应用化学 2023年第5期40卷 615-624页

作者：李佳铮何述钟贵州大学药学院贵阳550000 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014

Polygalolide A和B是从药用植物黄花倒水莲(Polygala Falax Hemsl)的根茎中分离得到的2个新型酚类化合物。该类天然产物具有复杂紧凑的四环笼状骨架,包含1个高度氧化的环庚酮、3个含氧杂环及2个连续的桥头季碳中心等结构特征。本文综述... 详细信息

Polygalolide A和B是从药用植物黄花倒水莲(Polygala Falax Hemsl)的根茎中分离得到的2个新型酚类化合物。该类天然产物具有复杂紧凑的四环笼状骨架,包含1个高度氧化的环庚酮、3个含氧杂环及2个连续的桥头季碳中心等结构特征。本文综述了3个课题组分别利用(5+2)环加成、分子内(3+2)环加成和分子内亲核取代构建中心四环,后经向山羟醛缩合得到目标天然产物。这些工作为该分子生物活性的研究奠定了基础。

关键词： Polygalolide A和B 酚类化合物四环笼状骨架全合成

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基于高内涵筛选技术的吴茱萸次碱肝毒性研究

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中国药理学通报 2022年第10期38卷 1548-1558页

作者：郭丽路青瑜李娇杨付梅孙黔云贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014

目的利用高内涵筛选技术研究吴茱萸次碱(ruteacarpine,RUT)的肝毒性及其可能机制。方法HepG2细胞暴露于不同浓度的RUT后作用不同时间,MTT法检测细胞活力,采用高内涵检测RUT对细胞存活、细胞核面积、线粒体膜电位(MMP)、ROS、钙离子内流... 详细信息

目的利用高内涵筛选技术研究吴茱萸次碱(ruteacarpine,RUT)的肝毒性及其可能机制。方法HepG2细胞暴露于不同浓度的RUT后作用不同时间,MTT法检测细胞活力,采用高内涵检测RUT对细胞存活、细胞核面积、线粒体膜电位(MMP)、ROS、钙离子内流、细胞膜完整性(DIR)和MAPK、NF-κB、JAKs-STATs信号通路活化水平的影响,流式细胞检测细胞凋亡。结果100μmol·L^(-1)RUT明显抑制了HepG2细胞的活力(P<0.01),表现为RUT作用24 h后,细胞核面积减少,核形态不均一,作用48 h后存活细胞数量明显减少(P<0.01),并伴随着细胞的早期凋亡(P<0.01);从6 h开始,100μmol·L^(-1)RUT组细胞内活性氧和钙离子水平明显升高(P<0.01),细胞膜完整性明显降低(P<0.01);100μmol·L^(-1)RUT作用24 h后,ERK1/2、JNK、STAT3和p38的磷酸化水平明显升高(P<0.01,P<0.05),总蛋白未见明显变化;在3 h可检测到c-Jun、c-Fos的表达上调,与对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);在3 h时间点,可明显检测到p-NF-κB p65的表达上调(P<0.01),但NF-κB p65入核不明显。结论吴茱萸次碱在100μmol·L^(-1)的条件下对HepG2细胞表现出细胞毒性,其毒性机制主要与氧化应激和炎症反应导致的细胞损伤有关。

关键词：吴茱萸次碱肝毒性高内涵筛选技术氧化应激 HepG2 MAPK

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黄芩苷对脂多糖致内皮细胞炎症反应的保护作用及机制研究

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中国药理学通报 2021年第2期37卷 251-257页

作者：路青瑜郭丽张启云杨付梅李娇孙黔云贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014

目的研究黄芩苷对脂多糖(LPS)致人微血管内皮细胞(HMEC)炎症反应的保护作用及作用机制。方法采用LPS作用HMEC,建立炎症反应模型;以不同浓度的黄芩苷预处理细胞,然后将细胞暴露于LPS,ELISA检测炎症因子ICAM-1、IL-6和MCP-1的含量;荧光观... 详细信息

目的研究黄芩苷对脂多糖(LPS)致人微血管内皮细胞(HMEC)炎症反应的保护作用及作用机制。方法采用LPS作用HMEC,建立炎症反应模型;以不同浓度的黄芩苷预处理细胞,然后将细胞暴露于LPS,ELISA检测炎症因子ICAM-1、IL-6和MCP-1的含量;荧光观察Ca^2+内流并采用流式细胞仪检测细胞内Ca^2+水平;免疫荧光法检测NF-κB p65入核情况;双荧光素酶报告基因方法检测NF-κB核内转录活性;Western blot检测NF-κB p65、p-NF-κB p65及TLR4的表达。结果HMEC暴露于LPS后,出现了明显的Ca^2+内流,NF-κB p65发生磷酸化,核内转录活性上调,ICAM-1、IL-6及MCP-1表达上调。不同浓度的黄芩苷均能抑制LPS刺激HMEC后产生的Ca^2+内流、NF-κB p65入核及核内转录活性上调,减少ICAM-1、IL-6、MCP-1的表达,下调NF-κB p65、p-NF-κB p65及TLR4的表达,且抑制作用呈现一定的量效关系。结论黄芩苷能抑制LPS诱导的HMEC炎症反应,其机制与抑制Ca^2+内流和NF-κB信号通路的活化,从而降低炎症反应的水平有关。

关键词：黄芩苷脂多糖内皮细胞 NF-κB TLR4 炎症反应钙离子内流

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银杏双黄酮对高糖致微血管内皮细胞炎症反应的保护作用及机制研究

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中国药理学通报 2020年第10期36卷 1463-1469页

作者：郭丽路青瑜张启云杨付梅孙黔云贵州医科大学省部共建药用植物与功效与利用国家重点实验室贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014

目的研究银杏双黄酮对高糖致人微血管内皮细胞(HMEC)炎症反应的干预作用及其可能的分子机制。方法MTT比色法检测细胞活力,采用ELISA检测细胞培养上清中可溶性黏附分子ICAM-1和炎症介质(IL-6、TNF-α)的含量变化;荧光免疫法和流式细胞仪... 详细信息

目的研究银杏双黄酮对高糖致人微血管内皮细胞(HMEC)炎症反应的干预作用及其可能的分子机制。方法MTT比色法检测细胞活力,采用ELISA检测细胞培养上清中可溶性黏附分子ICAM-1和炎症介质(IL-6、TNF-α)的含量变化;荧光免疫法和流式细胞仪测定HMEC细胞表面ICAM-1的表达;双荧光素酶报告基因检测NF-κB p65核内转录活性;Western blot检测NF-κB p65及p-NF-κB p65、Bax、Bcl-2的表达水平。结果HMEC暴露于高糖后,NF-κB信号通路活化,NF-κB p65磷酸化及核内转录活性明显上调,HMEC表达ICAM-1和TNF-α、IL-6明显升高,凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的比值出现上调。1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7 mol·L^-1的银杏双黄酮对上述炎症反应相关指标的上调均有明显的干预作用,且呈现一定的量效关系。结论银杏双黄酮对高糖刺激HMEC炎症反应有明显的干预作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路活化,从而降低炎症反应水平有关。

关键词：银杏双黄酮高糖微血管内皮细胞炎症反应黏附分子炎症介质 NF-κB信号通路

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HPLC法同时测定苗药黑骨藤中6种咖啡酰基奎宁酸成分含量及指纹图谱研究

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中国新药杂志 2020年第9期29卷 1052-1058页

作者：马雪何燕玲刘文静郑林李月婷王广成李勇军贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州医科大学药学院贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室

目的:建立HPLC法同时测定黑骨藤药材中6种咖啡酰基奎宁酸类成分的含量及液相指纹图谱,为其质量控制提供理论依据。方法:采用Agela Technologies Venusil XBP C18色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),以乙腈-0. 1%磷酸水为流动相,梯度洗脱... 详细信息

目的:建立HPLC法同时测定黑骨藤药材中6种咖啡酰基奎宁酸类成分的含量及液相指纹图谱,为其质量控制提供理论依据。方法:采用Agela Technologies Venusil XBP C18色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),以乙腈-0. 1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速为0. 8 m L·min-1,检测波长为280 nm,柱温为25℃。结果:测定的6种成分5-O-咖啡酰基奎宁酸、3-O-咖啡酰基奎宁酸、4-O-咖啡酰基奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸分别在9. 84～252. 00,31. 63～506. 00,5. 76～147. 50,0. 62～15. 81,1. 45～37. 24,2. 94～75. 14 mg·L-1范围内线性关系良好。平均加样回收率分别为102. 8%,91. 3%,92. 2%,97. 4%,92. 4%,97. 4%; RSD值分别为1. 6%,2. 1%,2. 6%,2. 1%,1. 9%,1. 0%。建立了黑骨藤HPLC指纹图谱,确立了19个共有峰,14批药材的相似度在0. 899以上。结论:该方法简便、快捷,重复性好,可为黑骨藤的质量评价提供参考。

关键词：黑骨藤 HPLC 咖啡酰基奎宁酸指纹图谱

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民族药羊屎条的化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

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中国中药杂志 2024年第17期49卷 4695-4701页

作者：龙楚仪李齐激周浪胡占兴杨娟贵州医科大学药学院省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳561113 贵州省天然产物研究中心贵州贵阳550014

研究民族药羊屎条Viburnum utile乙醇提取物的化学成分。采用D101大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20柱色谱等手段进行分离,利用NMR、MS等波谱技术鉴定结构并开展α-葡萄糖苷酶抑制活性检测。从该药材90%乙醇提取物中共分离16个化合物,分... 详细信息

研究民族药羊屎条Viburnum utile乙醇提取物的化学成分。采用D101大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20柱色谱等手段进行分离,利用NMR、MS等波谱技术鉴定结构并开展α-葡萄糖苷酶抑制活性检测。从该药材90%乙醇提取物中共分离16个化合物,分别鉴定为viburnumide A(1)、维生素E(2)、α-香树脂醇(3)、α-托可醌(4)、narjatamanin B(5)、咖啡酸乙酯(6)、柚皮素(7)、芹菜素(8)、ethylβ-D-ribo-hex-3-ulopyranoside(9)、反式对羟基肉桂酸(10)、穗花杉双黄酮(11)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(12)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(13)、鄂西香茶菜苷(14)、熊果酸(15)、2α-羟基齐墩果酸(16)。其中化合物1为新化合物,化合物2~16均为首次从羊屎条中分离得到。化合物11的α-葡萄糖苷酶抑制作用(IC50为4.0μmol·L^(-1))与阳性对照阿卡波糖(IC50为2.3μmol·L^(-1))相当。

关键词：羊屎条化学成分 viburnumide A α-葡萄糖苷酶抑制活性

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N-苯基-4-三氟甲基-2-氨基喹唑啉衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

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中国药学杂志 2024年第15期59卷 1375-1383页

作者：代兴程莎陈明秀余佳骆衡徐广灿徐必学贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014 贵州省天然产物研究中心贵阳550014 贵州医科大学药学院贵阳561113

目的发现新型高效低毒的2-芳氨基喹唑啉类抗肿瘤目标化合物。方法以邻硝基苯甲醛和6-硝基藜芦醛为原料,通过亲核加成、氧化、还原、环合、氯代、偶联等反应,合成了16个N-苯基-4-三氟甲基-2-氨基喹唑啉衍生物,并通过核磁共振(NMR)和质谱(... 详细信息

目的发现新型高效低毒的2-芳氨基喹唑啉类抗肿瘤目标化合物。方法以邻硝基苯甲醛和6-硝基藜芦醛为原料,通过亲核加成、氧化、还原、环合、氯代、偶联等反应,合成了16个N-苯基-4-三氟甲基-2-氨基喹唑啉衍生物,并通过核磁共振(NMR)和质谱(MS)对其进行结构表征;采用噻唑蓝(MTT)法评价了目标化合物对前列腺癌细胞(PC3、LNCaP)、人慢性髓系白血病细胞(K562)和宫颈癌细胞(HeLa)4种肿瘤细胞株的生长抑制活性,并对高活性化合物8b作了靶点预测。结果活性测试结果显示,化合物8b和8c都显示出良好的抗增殖活性,特别是化合物8b,对PC3、LNCaP和K562细胞的半数抑制浓度(IC_(50))分别为5.51、4.51和8.49μmol·L^(-1);分子对接结果显示,莫洛尼小鼠白血病病毒前病毒整合激酶1(provirus integration in maloney murine leukemia virus kinase-1,PIM-1)蛋白可能是8b的潜在作用靶点。结论含哌嗪结构的芳氨基喹唑啉化合物8b值得深入研究。

关键词：芳氨基喹唑啉合成抗肿瘤活性噻唑蓝法三氟甲基

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