检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2021年第18期46卷 4833-4840页

作者：陆苑黎娜吕婷王永林潘洁孙佳李勇军刘春花贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004

建立H9c2细胞中异荭草素、荭草素、槲皮苷、牡荆素和山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,并运用在荭草提取物的H9c2细胞药代动力学研究中。荭草提取物(100μg·mL^(-1))处理H9c2细胞后,于不同... 详细信息

建立H9c2细胞中异荭草素、荭草素、槲皮苷、牡荆素和山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,并运用在荭草提取物的H9c2细胞药代动力学研究中。荭草提取物(100μg·mL^(-1))处理H9c2细胞后,于不同时间点分别收集获得整体细胞以及相应的细胞核、线粒体和高尔基体,蛋白沉淀方法处理样品,采用UPLC-MS/MS测定整体细胞以及亚细胞结构中异荭草素、荭草素、槲皮苷、牡荆素、山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷的药物浓度,并计算相关药动学参数。结果在整体细胞中,各成分的达峰时间均为8 h,荭草素、牡荆素、槲皮苷、异荭草素与细胞核和线粒体的亲和力均较高,山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷与线粒体亲和力较高。实验结果提示荭草保护心肌细胞中,这5个化学成分可能主要是通过作用于细胞核或线粒体而发挥药理效应。

关键词： UPLC-MS/MS 荭草 H9c2细胞细胞药代动力学细胞核线粒体

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宽叶缬草SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选

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中国实验方剂学杂志 2021年第23期27卷 163-171页

作者：梁芳瑜何茂秋徐昌艳杨小生杨娟罗忠圣覃容贵贵州医科大学药学院贵阳550025 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵阳550014 省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014

目的:建立宽叶缬草的相关序列扩增多态性(SRAP)-聚合酶链式反应(PCR)反应体系,为宽叶缬草良种选育提供理论和技术基础。方法:采用单因素试验考察Taq Mix用量,Mg^(2+)浓度,模板DNA浓度,Taq DNA聚合酶浓度对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影... 详细信息

目的:建立宽叶缬草的相关序列扩增多态性(SRAP)-聚合酶链式反应(PCR)反应体系,为宽叶缬草良种选育提供理论和技术基础。方法:采用单因素试验考察Taq Mix用量,Mg^(2+)浓度,模板DNA浓度,Taq DNA聚合酶浓度对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响,以此为基础进行正交试验,优化宽叶缬草SRAP-PCR反应体系,并在最优反应体系条件下筛选可用于宽叶缬草遗传多样性研究的有效引物。结果:单因素实验结果表明Taq Mix用量为8~11μL时扩增效果较佳;加入低浓度Mg^(2+)可获得较佳扩增效果;中低浓度模板DNA用量可提高扩增效果;加入少量Taq DNA聚合酶可增加扩增结果丰富度。正交实验结果表明各因素对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响程度大小依次为Taq Mix用量>Taq DNA聚合酶加入量>Mg^(2+)加入量>模板DNA用量。适于宽叶缬草的最优反应体系为Taq Mix 11μL,模板DNA 30 ng,Mg^(2+)0.025 mmol·L^(-1),Taq DNA1.5 U,正向引物与反向引物各5μmol·L^(-1),用双蒸水补足体系至20μL。最优退火温度为36.8℃。应用最优体系从88对引物中筛选出17对适用于宽叶缬草SRAP-PCR的条带清晰、多态性较高的有效引物。结论:建立的宽叶缬草SRAP-PCR反应体系稳定性良好,可用于宽叶缬草遗传多样性研究。

关键词：宽叶缬草相关序列扩增多态性(SRAP) 体系优化引物筛选正交试验设计

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基于血浆药物化学和网络药理学分析良附滴丸治疗胃肠道疾病的活性成分和潜在分子机制

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中国中药杂志 2021年第20期46卷 5393-5402页

作者：付昌丽刘春花潘洁陆苑孙佳李勇军王爱民贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004

探究良附滴丸治疗胃肠道疾病的活性成分和潜在分子机制。采用UHPLC-Q-TOF-MS分析良附滴丸的血浆药物化学成分;基于血浆药物化学结果,在TCMSP数据库和SwissTargetPrediction数据库中检索血浆中移行成分的作用靶点,利用OMIM、CTD、GeneCa... 详细信息

探究良附滴丸治疗胃肠道疾病的活性成分和潜在分子机制。采用UHPLC-Q-TOF-MS分析良附滴丸的血浆药物化学成分;基于血浆药物化学结果,在TCMSP数据库和SwissTargetPrediction数据库中检索血浆中移行成分的作用靶点,利用OMIM、CTD、GeneCards和DrugBank数据库获取胃肠道疾病的相关靶点,筛选化学成分作用于疾病的主要蛋白,利用STRING数据库对这些主要靶点进行蛋白相互作用(PPI)分析,并通过Metascape数据库进行GO和KEGG通路富集分析;利用Cytoscape软件构建成分-靶点、PPI网络图和拓扑分析,综合分析预测出关键作用靶点、生物学过程和作用通路;最后,运用AutoDock Vina 4.2.6软件对化学成分与关键靶点进行分子对接验证。共鉴定出良附滴丸中的化学成分12个,血浆中的移行成分4个,分别为高良姜素、鼠李柠檬素、高良姜素-3-O-甲醚、α-香附酮,涉及189个疾病靶点,并作用于细胞对氮化合物、对有机环状化合物和对激素刺激的反应等生物过程,主要富集在PI3K-Akt、Foxo和IL-17等信号通路上;分子对接结果显示,4个血浆移行成分与核心靶点亲和性好。良附滴丸中高良姜素、鼠李柠檬素、高良姜素-3-O-甲醚、α-香附酮可能是其治疗胃肠道疾病的活性成分,该研究初步阐释了良附滴丸治疗胃肠道疾病的药效物质基础和作用机制,为其深入开发和应用提供了一定的理论基础。

关键词：良附滴丸 UHPLC-Q-TOF-MS 血浆药物化学网络药理学胃肠道疾病

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基于外翻肠囊模型研究荭草提取物在正常和心肌缺血模型大鼠中的肠吸收特征

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中国中药杂志 2021年第1期46卷 196-205页

作者：刘春花王明金杨淑婷黎娜陆苑潘洁李勇军王永林孙佳贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室/民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004

采用大鼠外翻肠囊模型考察荭草提取物在正常和心肌缺血模型大鼠的肠吸收特征。收集荭草提取物(5.0,10.0,20.0 mg·mL^(-1))在各肠段中的肠囊液,采用UPLC-TQD测定肠囊液中荭草素、异荭草素、牡荆素、原儿茶酸、山柰素-3-O-β-D-葡萄... 详细信息

采用大鼠外翻肠囊模型考察荭草提取物在正常和心肌缺血模型大鼠的肠吸收特征。收集荭草提取物(5.0,10.0,20.0 mg·mL^(-1))在各肠段中的肠囊液,采用UPLC-TQD测定肠囊液中荭草素、异荭草素、牡荆素、原儿茶酸、山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮苷6个化学成分的含量,计算吸收速率和累积吸收量,同时考察P-糖蛋白(P-gp)抑制剂对6种成分肠吸收的影响。结果发现,正常状态下,低、中、高浓度下,主要吸收部位分别是十二指肠、结肠和回肠;心肌缺血状态下,低浓度主要集中在回肠和空肠,中浓度在回肠,高浓度在十二指肠和回肠。与正常组相比,模型组中6种成分的吸收速率和累积吸收量均显著下降。P-gp抑制剂能显著提高模型组中6种成分的吸收速率和累积吸收量,推测荭草中的6种成分可能是P-gp的底物。外翻肠囊模型能有效评价荭草提取物中这6种成分在正常和心肌缺血状态下的肠吸收特征,该研究为荭草的临床用药和深入开发利用提供参考依据。

关键词：荭草提取物肠吸收离体外翻肠囊法心肌缺血 P-糖蛋白抑制剂

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刺梨多糖RRTFP-2结构分析及类NGF神经营养活性研究

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食品科技 2022年第4期47卷 224-230页

作者：谢慧荣邓靖杨小生李立郎王瑜李齐激罗忠圣杨娟贵州中医药大学药学院贵州贵阳550025 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014

采用离子交换、分子凝胶柱层析对刺梨干果粗多糖进行纯化,对得到的纯多糖RRTFP-2单糖组成、分子质量、糖醛酸含量及糖醛酸种类、主链及支链的组成、糖残基连接方式进行分析;运用大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)模型考察RRTFP-2类神经生长... 详细信息

采用离子交换、分子凝胶柱层析对刺梨干果粗多糖进行纯化,对得到的纯多糖RRTFP-2单糖组成、分子质量、糖醛酸含量及糖醛酸种类、主链及支链的组成、糖残基连接方式进行分析;运用大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)模型考察RRTFP-2类神经生长因子(NGF)活性。结果显示,RRTFP-2是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸组成,中性单糖摩尔比为1.0:6.5:1.1:1.2:16.1,糖醛酸含量为11.42%,分子质量为74330 u的结构复杂的酸性杂多糖;RRTFP-2表现出类NGF神经营养活性。实验结果为刺梨多糖结构的阐明及其资源新用途提供参考。

关键词：刺梨多糖分离纯化结构分析大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞) 类NGF神经营养活性

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黔产赤灵芝不同部位无机元素和营养成分分析

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信阳师范学院学报（自然科学版） 2023年第1期36卷 39-45页

作者：柳小兰梁光焰杨莹魏福晓张清海邓廷飞周新富王道平贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014 贵州医科大学公共卫生学院贵州贵阳550025 贵州万众康源家庭农场有限公司贵州黔南布依族苗族自治州558000

以黔产青冈椴木赤灵芝为研究对象,测定了灵芝子实体(整支)、灵芝孢子粉(破壁)、灵芝孢子粉(未破壁)和灵芝菌盖中5种营养成分和24种无机元素,并进行相关性分析。结果表明:灵芝中营养成分与无机元素间具有一定的相关特性;灵芝不同部位的... 详细信息

以黔产青冈椴木赤灵芝为研究对象,测定了灵芝子实体(整支)、灵芝孢子粉(破壁)、灵芝孢子粉(未破壁)和灵芝菌盖中5种营养成分和24种无机元素,并进行相关性分析。结果表明:灵芝中营养成分与无机元素间具有一定的相关特性;灵芝不同部位的水分、灰分、多糖和三萜及甾醇含量均符合2020版《中华人民共和国药典》规定;灵芝孢子粉(破壁)具有较高的蛋白质、多糖和三萜及甾醇含量;元素Sn、Mo、B、Be和Ag在灵芝不同部位中均未检出;As在灵芝孢子粉(破壁)、灵芝孢子粉(未破壁)中未检出;元素Pb、Cd、As、Hg和Cu在灵芝不同部位中的含量均低于最大限量值;Al在灵芝子实体(整支)中超标率为100%;Cr在灵芝孢子粉(破壁)中超标率亦为100%。

关键词：赤灵芝营养成分无机元素相关性

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氧化苦参碱通过抑制心肌细胞焦亡改善脂多糖诱导的心肌损伤

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中药材 2022年第12期45卷 2961-2967页

作者：高歌方官琴付凌云徐旖旎陶玲刘同征沈祥春贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学药学院贵州特色天然药物高效利用工程中心贵州贵阳550025 暨南大学肿瘤药理研究所广东广州510632

目的:探讨氧化苦参碱对脂多糖(LPS)诱导心肌损伤的保护作用及对心肌细胞焦亡的影响。方法:将50只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、阿司匹林(25 mg/kg)阳性对照组及氧化苦参碱低(25 mg/kg)、高(50 mg/kg)剂量组,每组10只。各给... 详细信息

目的:探讨氧化苦参碱对脂多糖(LPS)诱导心肌损伤的保护作用及对心肌细胞焦亡的影响。方法:将50只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、阿司匹林(25 mg/kg)阳性对照组及氧化苦参碱低(25 mg/kg)、高(50 mg/kg)剂量组,每组10只。各给药组予相应剂量药物灌胃,正常对照组和模型组予相应体积生理盐水灌胃,1次/d,共8 d。第8天给药1 h后腹腔注射LPS建立小鼠心肌损伤模型。采用心脏超声监测小鼠心功能;HE染色观察小鼠心脏组织病理学变化;免疫组织化学染色观察Cleaved Caspase-1表达;ELISA检测小鼠血清IL-18、TNF-α含量;Western Blot检测小鼠心脏组织中焦亡通路关键蛋白(NLRP3、Cleaved Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、IL-18、IL-1β)表达。体外实验采用LPS作用原代大鼠心肌细胞12 h,给药组以相应药物预保护1 h,MTT法检测细胞活力;Calcein-AM/PI染色观察心肌细胞焦亡;Western Blot检测焦亡相关蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,体内实验中模型组小鼠出现心功能障碍,心脏组织出现炎性细胞浸润,血清炎症因子含量及焦亡相关蛋白表达显著上调(P<0.05或P<0.01);体外实验中,模型组心肌细胞活力显著降低,焦亡相关蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,体内实验中氧化苦参碱能改善心肌损伤小鼠心功能,减少心脏组织炎性细胞浸润,降低血清炎症因子含量及焦亡关键蛋白表达(P<0.05或P<0.01);体外实验中,氧化苦参碱能提高心肌细胞活力,降低焦亡相关蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:氧化苦参碱可改善LPS诱导的心肌损伤,其作用机制可能与抑制心肌细胞焦亡有关。

关键词：氧化苦参碱炎症反应细胞焦亡心肌细胞脂多糖心肌损伤

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大王马先蒿对四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的保护作用

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医药导报 2022年第4期41卷 423-429页

作者：张春雷吴新玉王栋陆倩董莉张金娟廖尚高贵州医科大学药学院省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵安新区550025 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/贵州省药物制剂重点实验室贵阳550004 贵州医科大学基础医学院贵安新区550025

目的探讨大王马先蒿对肝纤维化的保护作用。方法将昆明小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱(0.1 mg·kg^(-1))组及大王马先蒿小(200 mg·kg^(-1))、中(400 mg·kg^(-1))、大(800 mg·kg^(-1))剂量组,每组10只... 详细信息

目的探讨大王马先蒿对肝纤维化的保护作用。方法将昆明小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱(0.1 mg·kg^(-1))组及大王马先蒿小(200 mg·kg^(-1))、中(400 mg·kg^(-1))、大(800 mg·kg^(-1))剂量组,每组10只;通过腹腔注射四氯化碳(CCl_(4),1 mL·kg^(-1))建立肝纤维化模型,并于第5周开始灌胃给药,每天1次,持续至第12周结束;末次给药后1 h,麻醉眼球取血检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及IV型胶原(Ⅳ-C)水平,处死小鼠并取出脏器,计算小鼠脏器系数,Western blotting检测肝组织TGF-β_(1),Smad3,α-SMA及Collagen Ⅰ表达,苏木精-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察小鼠肝组织病理形态。结果模型对照组小鼠皮毛竖立,活动减少,反应迟缓,大王马先蒿组小鼠一般状态好于模型对照组,反应较敏捷,皮色白有光泽。与模型对照组比较,大王马先蒿各剂量均能显著改善CCl_(4)所致小鼠肝组织的肝纤维化程度,显著降低血清ALT、AST、HA、LN、PCⅢ及Ⅳ-C水平(P<0.01),显著下调TGF-β_(1),Smad3,α-SMA及Collagen Ⅰ蛋白表达(P<0.01)。结论大王马先蒿对CCl_(4)诱导的肝纤维化小鼠具有较好的保护作用,该作用可能与抑制TGF-β_(1)/Smad信号通路及下调α-SMA和Collagen Ⅰ蛋白的表达有关。

关键词：大王马先蒿肝纤维化 TGF-β_(1)/Smad信号通路 α-SMA CollagenⅠ

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山豆根提取物质量标准研究

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精细化工中间体 2024年第1期54卷 17-20,74页

作者：田彩燕安巧张吉胡占兴郝小江贵州中医药大学药学院贵州贵阳550025 贵州省天然产物研究中心贵州贵阳550014 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014

建立山豆根提取物的质量标准。选取乙醇浓度、料液比、回流提取时间及提取次数为影响因素,采用正交实验法优化山豆根提取物提取工艺,并以HPLC法测定山豆根提取物中苦参碱和氧化苦参碱的含量。优化提取工艺为:乙醇浓度60%、料液比1∶20(g... 详细信息

建立山豆根提取物的质量标准。选取乙醇浓度、料液比、回流提取时间及提取次数为影响因素,采用正交实验法优化山豆根提取物提取工艺,并以HPLC法测定山豆根提取物中苦参碱和氧化苦参碱的含量。优化提取工艺为:乙醇浓度60%、料液比1∶20(g∶mL)、回流时间2 h、提取次数3次。HPLC含量测定结果为:苦参碱及氧化苦参碱在选定范围内线性关系良好,加样回收率RSD不高于2%。提取工艺稳定可行,且建立的HPLC含量测定方法简便、快捷。

关键词：山豆根苦参碱氧化苦参碱提取工艺高效液相色谱法

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抗SARS-CoV-2 N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

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安徽医科大学学报 2022年第3期57卷 429-432,437页

作者：刘江丽李盈盈王佳雯许喻鈞张艳黄江涛胡祖权曾柱贵州医科大学生物与工程学院贵州省感染免疫与抗体工程特色重点实验室/生物与医学工程重点实验室贵阳550025 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550025

目的制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性。方法利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细... 详细信息

目的制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性。方法利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选出阳性杂交瘤细胞株,并鉴定其亚型,腹水法制备mAbs,Protein G亲和柱纯化后通过SDS-PAGE、间接ELISA和Western blot检测其纯度、效价及特异性。结果获得5株能稳定分泌抗SARS-CoV-2 N蛋白mAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为N1~5。通过腹水法制备获得5个mAbs,亚型鉴定结果显示1个为IgG2a*κ型、4个为IgG1*κ型,其效价均达到2×10^(4)以上。Western blot结果表明5个mAbs都能与重组SARS-CoV-2 N蛋白结合。结论通过杂交瘤技术成功制备了5个能特异性识别重组SARS-CoV-2 N蛋白的mAbs,为开发免疫诊断试剂奠定了基础。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2 核衣壳蛋白单克隆抗体免疫学检测

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