检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2019年第10期35卷 1453-1460页

作者：刘金河张望明晏文涛许键炜葛章文贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州省人民医院检验科贵州贵阳550002 贵州中医药大学第一附属医院检验科贵州贵阳550001

目的二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY),是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗肿瘤等作用,研究DMY对Bloom解旋酶(Bloom helicase,BLM)生物学活性的影响对探索DMY的抗肿瘤机制具有重要意义。方法采用紫外光谱、圆二色谱、荧光偏振和自由磷检... 详细信息

目的二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY),是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗肿瘤等作用,研究DMY对Bloom解旋酶(Bloom helicase,BLM)生物学活性的影响对探索DMY的抗肿瘤机制具有重要意义。方法采用紫外光谱、圆二色谱、荧光偏振和自由磷检测等方法和技术研究DMY对BLM解旋酶的生物学活性的影响。结果圆二色谱和紫外光谱结果显示,DMY能与BLM解旋酶结合,且有1个结合位点;在0~25μmol·L^-1浓度范围内,DMY对BLM解旋酶的二级结构的干扰能力成正相关,在25~75μmol·L^-1浓度范围内则相反。荧光偏振和自由磷检测实验显示,DMY能结合在BLM解旋酶上,进而抑制BLM解旋酶的解链活性。结论DMY能够竞争性结合于BLM解旋酶的DNA结合位点上,改变BLM解旋酶的空间结构,从而抑制BLM解旋酶与DNA的结合,进而抑制BLM解旋酶的生物学活性。

关键词：二氢杨梅素 Bloom解旋酶生化活性构象二级结构圆二色谱荧光偏振

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溶瘤病毒在血液系统恶性肿瘤治疗中的研究进展

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中华实用儿科临床杂志 2019年第15期34卷 1127-1131页

作者：何志旭赵星遵义医科大学附属医院儿科贵州遵义563000 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室/贵州医科大学组织工程与干细胞研究中心贵阳550004 贵州医科大学免疫学教研室贵阳550025

近年来,血液系统恶性肿瘤的发病率逐年增高,虽然随着化疗、靶向治疗及造血干细胞移植的进展,部分类型淋巴瘤和白血病的疗效已经有了很大的提高,但其预后仍然较差、病死率高,寻找新的治疗方法提高疗效已成为当前亟须解决的问题。溶瘤病... 详细信息

近年来,血液系统恶性肿瘤的发病率逐年增高,虽然随着化疗、靶向治疗及造血干细胞移植的进展,部分类型淋巴瘤和白血病的疗效已经有了很大的提高,但其预后仍然较差、病死率高,寻找新的治疗方法提高疗效已成为当前亟须解决的问题。溶瘤病毒可通过选择性破坏肿瘤细胞并诱导机体发挥特异性抗肿瘤免疫的双重作用机制来促进抗肿瘤效应。目前溶瘤病毒已成为治疗多种恶性肿瘤的有效手段,在血液系统恶性肿瘤的治疗中也取得了许多突破性进展,现就近年来溶瘤病毒用于血液系统恶性肿瘤治疗中研究的最新进展进行综述。

关键词：血液系统恶性肿瘤溶瘤病毒免疫治疗

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ITGAM基因在急性髓细胞白血病中的表达及临床意义

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贵州医科大学学报 2020年第7期45卷 786-791,838页

作者：张太海金皎黄璟李鹏吴西军吴昌学马健娟庹媛媛李燕杨红兰潘海新杨小燕铜仁市人民医院儿科贵州铜仁554300 贵州医科大学附属医院&贵州省儿童医学中心儿童血液肿瘤科贵州贵阳550004 贵阳市公共卫生救治中心贵州贵阳550004 贵州医科大学干细胞与组织工程实验中心贵州贵阳550004 贵州医科大学分子生物学重点实验室&地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004

目的:探讨整合素αM(ITGAM)基因在急性髓细胞白血病(AML)中的表达及临床意义。方法:利用CELL数据库获取临床常见血液肿瘤性疾病数据,并分析ITGAM在不同血液肿瘤中的表达情况;利用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)数据库获得AML组173例和... 详细信息

目的:探讨整合素αM(ITGAM)基因在急性髓细胞白血病(AML)中的表达及临床意义。方法:利用CELL数据库获取临床常见血液肿瘤性疾病数据,并分析ITGAM在不同血液肿瘤中的表达情况;利用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)数据库获得AML组173例和健康对照组70例的资料,比较2组对象间ITGAM mRNA表达的差异,同时将AML组分为高表达组(高于均值)53例和低表达组(低于均值)53例、分析AML患者ITGAM表达量与其总体生存率(OS)的相关性;利用UALCAN数据库获得AML患者样本171例,分析ITGAM在M0~M7中的表达情况;利用Bloodspot数据库获得AML患者样本172例,分析ITGAM在不同基因突变或染色体异常患者中的表达,同时将AML患者分为ITGAM mRNA高表达组(高于中位数)86例和低表达组(低于中位数)86例进行生存分析。结果:与健康对照组相比,ITGAM在AML患者中表达增高(P<0.05);ITGAM在不同亚型AML中表达水平存在差异,M5中表达最高、M3中表达最低;其中,M4、M5分别与M0比较,M3、M4、M5分别与M1比较,M4、M5分别与M2比较,M4、M5、M7分别与M3比较,ITGAM基因表达差异有统计学意义(P<0.05),ITGAM在AML t(11q23)/MLL中表达最高、在AML t(15;17)中表达最低,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);ITGAM在伴有Cepba+_NPM1-_FLT3+突变的AML患者中表达较低,在Cepba-_NPM1-_FLT3-和Cepba-_NPM1+_FLT3-AML患者中表达最高;Kaplan-Meier分析结果表明,ITGAM基因表达与AML患者生存有相关性,高表达ITGAM的AML患者预后差(P=0.024,P=0.008)。结论:ITGAM基因在AML患者样本中呈高表达,且ITGAM高表达的AML患者OS差,该基因对预测AML患者预后有一定的临床应用价值。

关键词：白血病,髓样,急性基因表达 ITGAM基因总体生存率临床意义

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心血管发育相关基因mpx在斑马鱼早期胚胎发育中的表达

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贵州医科大学学报 2020年第5期45卷 526-530,615页

作者：向文碧周栋珍李志操周艳华张鹏崔冬冰何志旭舒莉萍贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学儿科学教研室贵州贵阳550004 贵州大学贵州贵阳550025 贵州省贵阳市妇幼保健院贵阳市儿童医院贵州贵阳550003 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州遵义563000

目的:探讨斑马鱼体内髓样特异性过氧化物酶(mpx)在胚胎发育过程中的表达模式。方法:按Trizol法提取斑马鱼总RNA后逆转录成cDNA,再以cDNA为模板RT-PCR扩增mpx基因片段;用基因重组技术构建pCS2^+-mpx重组质粒后将质粒酶切线性化,T3聚合酶... 详细信息

目的:探讨斑马鱼体内髓样特异性过氧化物酶(mpx)在胚胎发育过程中的表达模式。方法:按Trizol法提取斑马鱼总RNA后逆转录成cDNA,再以cDNA为模板RT-PCR扩增mpx基因片段;用基因重组技术构建pCS2^+-mpx重组质粒后将质粒酶切线性化,T3聚合酶制备mpx反义RNA探针,用全胚胎原位杂交检测mpx基因的表达。结果:成功构建了pCS2^+-mpx重组质粒,原位杂交结果显示在24 hpf,mpx基因在斑马鱼胚胎中间细胞团表达;从24 hpf开始,mpx基因在斑马鱼胚胎卵黄囊表面、心脏和轴向脉管系统中高表达,一直持续到72 hpf;尤其是在72 hpf,mpx基因在整个胚胎头部、卵黄囊表面、尾部中弥散表达。结论:mpx基因在斑马鱼心血管系统发育的时间和部位中都有表达,mpx基因可能参与调控斑马鱼心血管系统发育。

关键词：斑马鱼心血管疾病早期胚胎发育 mpx基因全胚胎原位杂交心血管

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g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达

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浙江大学学报（医学版） 2018年第1期47卷 57-63页

作者：夏海雄李莉周艳华任平平何志旭舒莉萍贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学儿科学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学实验动物中心贵州贵阳550004

目的:观察g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达情况。方法:利用基因数据库和BLAST软件分别进行g6pd基因的共线性分析和G6pd蛋白质序列相似性分析。原位杂交技术观察不同时相斑马鱼胚胎中g6pd基因的表达;构建g6pd-EGFP-pCS^(... 详细信息

目的:观察g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达情况。方法:利用基因数据库和BLAST软件分别进行g6pd基因的共线性分析和G6pd蛋白质序列相似性分析。原位杂交技术观察不同时相斑马鱼胚胎中g6pd基因的表达;构建g6pd-EGFP-pCS^(2+)重组质粒,并将其显微注射入斑马鱼胚胎内,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;蛋白质印迹法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白的表达量;改良G6pd定量比值法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd酶活性。结果:g6pd基因在进化过程中相对保守,斑马鱼与人类的G6pd蛋白质相似度为88%,斑马鱼与小鼠的G6pd蛋白质相似度为87%。原位杂交试验结果显示,g6pd基因主要表达于斑马鱼的造血组织,显微注射g6pd-EGFP-p CS2+重组质粒后观察的结果与原位杂交试验结果一致。24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白相对表达量分别为1.44±0.03、1.47±0.05、1.54±0.02,差异无统计学意义(P>0.05);G6pd酶活性分别为1.74±0.17、1.75±0.12、1.71±0.22,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功观察到斑马鱼体内g6pd基因表达部位及其变化规律,并测定了不同发育时相斑马鱼胚胎中G6pd蛋白表达和酶活性,为建立斑马鱼G6PD缺乏症模型奠定了基础。

关键词：葡糖磷酸脱氢酶缺乏葡糖磷酸脱氢酶原位杂交 DNA,重组质粒基因表达斑马鱼胚胎发育

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吉祥草水提物对小鼠慢性阻塞性肺疾病的作用和机制

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贵州医科大学学报 2020年第12期45卷 1412-1416页

作者：陈剑波张丽娟邱念念匡梦岚田永昌张观学罗桂林崔燕王涛许键炜沿河土家族自治县人民医院贵州沿河565300 贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室&组织工程与干细胞实验中心&贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学护理学院贵州贵阳550004 贵州中医药大学第一附属医院呼吸内科贵州贵阳550001 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院药理学教研室贵州贵阳550004

目的:探讨吉祥草水提物对小鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)的作用及机制。方法:采用随机数字表法将昆明种小鼠其分为正常对照组(n=20)、模型组(n=30)和治疗组(n=20),模型组与治疗组小鼠通过过滤嘴香烟烟熏法建立COPD模型,治疗组在过滤嘴香烟... 详细信息

目的:探讨吉祥草水提物对小鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)的作用及机制。方法:采用随机数字表法将昆明种小鼠其分为正常对照组(n=20)、模型组(n=30)和治疗组(n=20),模型组与治疗组小鼠通过过滤嘴香烟烟熏法建立COPD模型,治疗组在过滤嘴香烟烟熏8周后,予小鼠吉祥草水提物灌胃治疗15 d,模型组和正常对照组予以同剂量纯水灌胃;于灌胃15 d后,采用FlexiVent肺功能仪检测小鼠气道阻力(Rrs)、气道弹性阻力(Ers)、动态顺应性(Crs)、主气道阻力(P-3Rn),ELISA法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、环氧合酶-2(COX-2)、前列腺素E2(PGE2)和基质金属蛋白酶-9(MMP9)等炎症相关因子的含量,肺组织HE染色观察小鼠肺组织病理学变化。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠呼吸系统Rrs增加、Ers增加、Crs降低以及P-3Rn增加(P<0.05或P<0.01),且血清中IL-1β、IL-6、COX-2、PGE2和MMP9升高(P<0.05),说明小鼠COPD模型造模成功;与模型组比较,治疗组小鼠Rrs降低、Ers降低、Crs升高以及P-3Rn降低,并且血清中IL-1β、IL-6、COX-2、PGE2以及MMP9表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);肺脏HE染色显示,与模型组比较,治疗组小鼠气道结构未见明显异常,炎性细胞浸润减少,肺泡结构更完整,大小趋于正常。结论:吉祥草水提物可有效治疗烟熏所致的小鼠COPD症状,其机制可能与抑制炎症因子的表达、修复COPD小鼠肺脏病理损害有关。

关键词：肺疾病,慢性阻塞性小鼠气道阻力白细胞介素吉祥草水提物

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两步法玻璃化冷冻过程中卵母细胞胞内抗冻保护剂浓度的筛选

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黑龙江畜牧兽医 2018年第21期 106-109,262页

作者：周艳华黄文竹贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵阳550004 贵州医科大学生物与工程学院贵阳550004

为了研究卵母细胞第一步经20%乙二醇（EG）处理300 s,第二步经40%EG处理30 s后细胞内EG的浓度,试验将经过上述步骤处理后的卵母细胞分别移入30%、40%或50%甘油（Gly）溶液中,测定了卵母细胞经EG处理后移入不同浓度Gly溶液时的体积,观察... 详细信息

为了研究卵母细胞第一步经20%乙二醇（EG）处理300 s,第二步经40%EG处理30 s后细胞内EG的浓度,试验将经过上述步骤处理后的卵母细胞分别移入30%、40%或50%甘油（Gly）溶液中,测定了卵母细胞经EG处理后移入不同浓度Gly溶液时的体积,观察到在30%和40%Gly溶液中卵母细胞体积膨胀,在50%Gly溶液中卵母细胞体积收缩。鉴于第二步卵母细胞在40%EG中仅处理了30 s,如此短的时间内渗入胞内的EG较少,遂将40%EG换做渗透性较差的50%Gly用于冷冻卵母细胞,统计卵母细胞冷冻后的存活率、卵裂率及囊胚率。结果表明：以50%Gly替换40%EG冷冻卵母细胞存活率达75. 86%,经过20%EG处理300 s,40%EG处理30 s后胞内的抗Gly浓度介于40%-50%（摩尔浓度为5. 6-7. 0 mol/L）间。说明两步法玻璃化冷冻第二步采用渗透性较差的抗冻保护剂亦可获得较好的冷冻效果,第二步处理的主要作用是使卵母细胞脱水,延长第二步的处理时间是不必要的。

关键词：玻璃化冷冻抗冻保护剂卵母细胞浓度处理时间渗透性

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红系祖细胞在造血缺陷斑马鱼体内的移植

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中国比较医学杂志 2019年第5期29卷 84-89页

作者：李志操黄波向文碧孙琮杰吴西军周艳华何志旭舒莉萍贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心临床医学院儿科学教研室贵州省再生医学重点实验室贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵阳550004 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州遵义563003

目的评估红系祖细胞在先天原始造血缺陷cloche^(-/-)突变体斑马鱼体内的移植效果。方法收集绿色荧光标记红系祖细胞的转基因系zTg(gata1:EGFP)斑马鱼胚胎,制备成单细胞悬液,经流式细胞仪分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,利用显微注射... 详细信息

目的评估红系祖细胞在先天原始造血缺陷cloche^(-/-)突变体斑马鱼体内的移植效果。方法收集绿色荧光标记红系祖细胞的转基因系zTg(gata1:EGFP)斑马鱼胚胎,制备成单细胞悬液,经流式细胞仪分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,利用显微注射技术将gata1^+细胞移植到42hpf的cloche^(-/-)突变体斑马鱼心脏中,采用体视荧光显微镜追踪观察移植后的红系祖细胞在cloche^(-/-)突变体斑马鱼中的表达情况。结果成功分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,并在移植后2 h可观察到携带绿色荧光的gata1^+细胞逐渐增殖扩散且16 h持续有绿色荧光表达。结论红系祖细胞有重建造血的潜力,为进一步研究红系祖细胞移植后的功能鉴定提供实验依据。

关键词：红系祖细胞斑马鱼移植 cloche^-/-突变

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汉防己碱衍生物诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡

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贵州医科大学学报 2019年第2期44卷 125-129,140页

作者：黄晏军汤长宁杨爽潘卫东刘杰麟贵州医科大学免疫学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学组织工程与干细胞中心贵州贵阳550004 贵州医科大学南充市中心医院贵州省天然产物化学重点实验室贵州贵阳550004

目的:探讨汉防己碱衍生物YZ-18对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞生长、集落形成能力以及凋亡的影响,并分析可能的药物干预机制。方法:采用不同浓度汉防己碱衍生物YZ-18干预人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞后,通过MTT法检测细胞的增殖抑制率... 详细信息

目的:探讨汉防己碱衍生物YZ-18对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞生长、集落形成能力以及凋亡的影响,并分析可能的药物干预机制。方法:采用不同浓度汉防己碱衍生物YZ-18干预人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞后,通过MTT法检测细胞的增殖抑制率,集落形成实验检测细胞克隆形成能力,FCM法检测细胞凋亡率,蛋白印迹法检测细胞中BLM及乳腺癌易感基因1(BRCA1)蛋白表达水平。结果:不同浓度的汉防己碱衍生物YZ-18处理细胞后,细胞增殖生长明显受到抑制(P <0. 05),细胞克隆能力明显减弱(P <0. 001),细胞凋亡率明显增加(P <0. 01),BLM蛋白表达上调,BRCA1蛋白表达下调,且具有浓度依赖性。结论:汉防己碱衍生物YZ-18可抑制人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与BLM蛋白表达上调,BRCA1蛋白表达下调有关。

关键词：汉防己碱乳腺肿瘤细胞增殖细胞凋亡 BLM蛋白质 BRCA1蛋白质

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采用等温链置换扩增结合纳米金测流层析试纸条检测登革热病毒

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浙江大学学报（医学版） 2018年第4期47卷 405-412页

作者：赵锦夏海雄刘雨杰 Ravinder Pal 范安然何志旭曾令文贵州医科大学基础医学院免疫教研室组织工程与干细胞实验中心贵州贵阳550004 贵州医科大学海外教育学院贵州贵阳550004 中国科学院广州生物与医药健康研究院干细胞与分子诊断室广东广州510530

目的:探讨等温链置换扩增结合纳米金测流层析试纸条用于登革热病毒(DENV)快速检测的可行性。方法:采用磁珠富集法提取病毒总RNA,并逆转录为cDNA用于等温链置换扩增检测体系;等温链置换扩增用于检测DENV,琼脂糖凝胶电泳用于分析等温链置... 详细信息

目的:探讨等温链置换扩增结合纳米金测流层析试纸条用于登革热病毒(DENV)快速检测的可行性。方法:采用磁珠富集法提取病毒总RNA,并逆转录为cDNA用于等温链置换扩增检测体系;等温链置换扩增用于检测DENV,琼脂糖凝胶电泳用于分析等温链置换扩增产物及其检测的敏感度;采用柠檬酸三钠还原法制备用于试纸条的纳米金颗粒;利用核酸碱基互补配对原理设计纳米金测流层析试纸条的检测线与控制线,建立DENV的检测体系。结果:等温链置换扩增的敏感度为10 fmol/L。基于等温链置换扩增的纳米金测流层析试纸条检测DENV的敏感度也为10 fmol/L,取其检测样品浓度的对数值进行线性分析,检测浓度范围为10～10^(12)fmol/L,符合线性回归方程,线性相关系数(R^2)为0. 98。基于等温链置换扩增的纳米金测流层析试纸条检测DENV的特异性较高,与其他对照组无交叉。结论:建立了基于等温链置换扩增反应的纳米金试纸条用于DENV的检测方法,检测结果肉眼可见,敏感度高,可用于DENV的快速检测。

关键词：登革热/诊断 DNA引物序列分析核酸扩增技术纳米技术金/诊断应用生物技术

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