检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2019年第10期44卷 1140-1144页

作者：刘金河葛章文张望明晏文涛刘志吴昌学贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 贵州省人民医院检验科贵州贵阳550002 贵州中医药大学第一附属医院检验科贵州贵阳550001 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

目的:探讨二氢杨梅素(DMY)对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响。方法:将肺癌A549细胞分为DMY组和对照组,DMY组分成5组,分别加入终浓度1、5、10、15及20mg/L的DMY,对照组加入等量DMSO;各组细胞培养72h时,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,计算DM... 详细信息

目的:探讨二氢杨梅素(DMY)对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响。方法:将肺癌A549细胞分为DMY组和对照组,DMY组分成5组,分别加入终浓度1、5、10、15及20mg/L的DMY,对照组加入等量DMSO;各组细胞培养72h时,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,计算DMY对A549细胞的半数致死量(IC50值);选取IC50值附近浓度的DMY处理细胞,分别在24、48及72h时,采用MTT检测细胞存活率;肺癌A549细胞分为DMY组(终浓度大约为IC50值的DMY)及对照组,细胞培养48h时,采用Hoechst33342/PI双染法结合倒置荧光显微镜检测细胞凋亡,DNAladder凝胶电泳检测细胞内DNA的断裂程度。结果:DMY能显著抑制A549细胞的增殖,细胞抑制率随着DMY浓度的增加逐渐增高(P<0.01),呈明显的浓度依赖性,IC50值为(13.16±0.098)mg/L;以15mg/LDMY处理A549细胞,细胞存活率随着时间的延长逐渐降低(P<0.01),呈明显的时间依赖性;15mg/LDMY孵育A549细胞48h,Hoechst33342/PI染色后荧光显微镜下细胞核内呈现强蓝光,说明细胞处于凋亡状态,DNAladder凝胶实验检测发现凋亡DNA片段明显增加,出现Ladder现象。结论:DMY能抑制肺癌A549细胞增殖并促进其凋亡,可能与染色体DNA断裂有关。

关键词：二氢杨梅素肺肿瘤癌细胞增殖细胞凋亡 DNAladder凝胶电泳

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丝素蛋白材料对成神经分化人脐带间充质干细胞生长的影响

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癫痫与神经电生理学杂志 2022年第4期31卷 197-202页

作者：许键炜解小芬匡涛胡光线王道勇冉渺杨小军伍徐娴贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院药理学教研室遵义医科大学第二附属医院神经外科贵州医科大学药学院纳雍国华一心医院黔南民族医学高等专科学校生理学教研室

目的研究成神经分化的人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)在丝素蛋白(SF)材料上的生长发育,明确细胞与SF膜材料的生物相容性。方法从新生儿脐带分离培养hUC-MSC,接种在家蚕SF膜材料上,并诱导其向神经样细胞分化,作为实验组。同时在常规培养... 详细信息

目的研究成神经分化的人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)在丝素蛋白(SF)材料上的生长发育,明确细胞与SF膜材料的生物相容性。方法从新生儿脐带分离培养hUC-MSC,接种在家蚕SF膜材料上,并诱导其向神经样细胞分化,作为实验组。同时在常规培养基上培养hUC-MSC作为对照组。对不同时间段的细胞进行β-Ⅲ-tubulin特异性免疫荧光染色,并通过CCK-8及流式细胞术等对细胞增殖及存活率等生物学性状进行分析。结果经过诱导,hUC-MSC逐渐向成神经元样细胞分化,神经细胞特异性标志物Nestin和NSE呈阳性表达。SF薄膜能较好地支持成神经样分化hUC-MSC的生长。CCK-8及流式细胞检测表明SF膜能促进细胞的增殖并提高成活率。结论 SF膜具有良好的生物相容性,能有效支持成神经分化hUC-MSC的生长。

关键词：人脐带间充质干细胞(hUC-MSC) 成神经分化丝素蛋白(SF) 生物相容性神经损伤修复

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心血管发育相关基因mpx在斑马鱼早期胚胎发育中的表达

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贵州医科大学学报 2020年第5期45卷 526-530,615页

作者：向文碧周栋珍李志操周艳华张鹏崔冬冰何志旭舒莉萍贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学儿科学教研室贵州贵阳550004 贵州大学贵州贵阳550025 贵州省贵阳市妇幼保健院贵阳市儿童医院贵州贵阳550003 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州遵义563000

目的:探讨斑马鱼体内髓样特异性过氧化物酶(mpx)在胚胎发育过程中的表达模式。方法:按Trizol法提取斑马鱼总RNA后逆转录成cDNA,再以cDNA为模板RT-PCR扩增mpx基因片段;用基因重组技术构建pCS2^+-mpx重组质粒后将质粒酶切线性化,T3聚合酶... 详细信息

目的:探讨斑马鱼体内髓样特异性过氧化物酶(mpx)在胚胎发育过程中的表达模式。方法:按Trizol法提取斑马鱼总RNA后逆转录成cDNA,再以cDNA为模板RT-PCR扩增mpx基因片段;用基因重组技术构建pCS2^+-mpx重组质粒后将质粒酶切线性化,T3聚合酶制备mpx反义RNA探针,用全胚胎原位杂交检测mpx基因的表达。结果:成功构建了pCS2^+-mpx重组质粒,原位杂交结果显示在24 hpf,mpx基因在斑马鱼胚胎中间细胞团表达;从24 hpf开始,mpx基因在斑马鱼胚胎卵黄囊表面、心脏和轴向脉管系统中高表达,一直持续到72 hpf;尤其是在72 hpf,mpx基因在整个胚胎头部、卵黄囊表面、尾部中弥散表达。结论:mpx基因在斑马鱼心血管系统发育的时间和部位中都有表达,mpx基因可能参与调控斑马鱼心血管系统发育。

关键词：斑马鱼心血管疾病早期胚胎发育 mpx基因全胚胎原位杂交心血管

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hUC-MSC在成神经分化过程中的趋化迁移研究

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癫痫与神经电生理学杂志 2021年第1期30卷 25-31页

作者：李晨卞凯鹏熊英张丽娟匡梦岚王岚王恒许键炜长江航运总医院肿瘤科湖北武汉430000 苏州克睿基因生物科技有限公司贵州医科大学基础医学院机能学实验室贵州医科大学护理学院贵州医科大学药学院贵州医科大学医学科学研究所黔南民族医学高等专科学校药理学教研室贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵州医科大学基础医学院药理学教研室

目的探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSC)向神经样细胞的分化,并对其分化的神经样细胞的趋化作用进行研究。方法检测hUC-MSC细胞表面的标记;无血清的诱导培养基[含2%二甲基亚砜(DMSO)和200μm... 详细信息

目的探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSC)向神经样细胞的分化,并对其分化的神经样细胞的趋化作用进行研究。方法检测hUC-MSC细胞表面的标记;无血清的诱导培养基[含2%二甲基亚砜(DMSO)和200μmol/L丁羟基茴香醚(BHA)]诱导其向神经细胞分化,并进行神经细胞特异性标志物神经上皮干细胞蛋白(nestin)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的免疫荧光染色检测,并对分化的成神经诱导过程中的形态变化进行鉴定。此外,不同分化状态的hUC-MSC,在加入500μL含有20 ng/mL浓度的基质细胞衍生因子(stromal Cell-derived Factor-1α,SDF-1α)的不含血清的L-DMEM培养基,利用倒置相差显微镜下拍照,统计迁移至室膜下方的细胞数。结果成功分离出hUC-MSC,行流式细胞仪检测结果显示MSC:CD71+、CD29+,而CD34-、CD45-符合MSC的生物学特征。对不同诱导时间的hUC-MSC免疫荧光结果的统计学分析,nestin的表达呈现出先增高后降低的趋势,NSE在诱导期和维持前期均为阴性,在整个过程中末期才开始表达,到维持48 h时有62.5%的细胞表达,维持72 h时有76.5%的细胞表达。不同成神经分化状态的hUC-MSC迁移能力不同,诱导30 h,细胞向SDF-1α的趋化迁移能力达到最强。结论hUC-MSC具有易分离并扩增培养的生物特性,能诱导分化成为成神经细胞,并且具有一定的迁移能力,该研究能为中枢神经系统细胞的移植提供理论基础。

关键词：人脐带间充质干细胞(hUC-MSC) 成神经细胞诱导分化荧光检测趋化迁移

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吉祥草水提物对小鼠慢性阻塞性肺疾病的作用和机制

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贵州医科大学学报 2020年第12期45卷 1412-1416页

作者：陈剑波张丽娟邱念念匡梦岚田永昌张观学罗桂林崔燕王涛许键炜沿河土家族自治县人民医院贵州沿河565300 贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室&组织工程与干细胞实验中心&贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学护理学院贵州贵阳550004 贵州中医药大学第一附属医院呼吸内科贵州贵阳550001 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院药理学教研室贵州贵阳550004

目的:探讨吉祥草水提物对小鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)的作用及机制。方法:采用随机数字表法将昆明种小鼠其分为正常对照组(n=20)、模型组(n=30)和治疗组(n=20),模型组与治疗组小鼠通过过滤嘴香烟烟熏法建立COPD模型,治疗组在过滤嘴香烟... 详细信息

目的:探讨吉祥草水提物对小鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)的作用及机制。方法:采用随机数字表法将昆明种小鼠其分为正常对照组(n=20)、模型组(n=30)和治疗组(n=20),模型组与治疗组小鼠通过过滤嘴香烟烟熏法建立COPD模型,治疗组在过滤嘴香烟烟熏8周后,予小鼠吉祥草水提物灌胃治疗15 d,模型组和正常对照组予以同剂量纯水灌胃;于灌胃15 d后,采用FlexiVent肺功能仪检测小鼠气道阻力(Rrs)、气道弹性阻力(Ers)、动态顺应性(Crs)、主气道阻力(P-3Rn),ELISA法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、环氧合酶-2(COX-2)、前列腺素E2(PGE2)和基质金属蛋白酶-9(MMP9)等炎症相关因子的含量,肺组织HE染色观察小鼠肺组织病理学变化。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠呼吸系统Rrs增加、Ers增加、Crs降低以及P-3Rn增加(P<0.05或P<0.01),且血清中IL-1β、IL-6、COX-2、PGE2和MMP9升高(P<0.05),说明小鼠COPD模型造模成功;与模型组比较,治疗组小鼠Rrs降低、Ers降低、Crs升高以及P-3Rn降低,并且血清中IL-1β、IL-6、COX-2、PGE2以及MMP9表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);肺脏HE染色显示,与模型组比较,治疗组小鼠气道结构未见明显异常,炎性细胞浸润减少,肺泡结构更完整,大小趋于正常。结论:吉祥草水提物可有效治疗烟熏所致的小鼠COPD症状,其机制可能与抑制炎症因子的表达、修复COPD小鼠肺脏病理损害有关。

关键词：肺疾病,慢性阻塞性小鼠气道阻力白细胞介素吉祥草水提物

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