检索结果-内蒙古大学图书馆

食品工业科技 2023年第18期44卷 449-457页

作者：解小芬胡光线潘露伍徐娴周丹陈九琼匡梦岚叶兰秦臻许键炜贵州医科大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学口腔医学院贵州贵阳550025

目的:旨在探讨黄精提取物(Polygonatum sibiricum extract,PSE)对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致衰老小鼠重要脏器的保护作用及其潜在的分子机制。方法:将小鼠随机分为五组(n=10):对照组、D-gal(500 mg/kg)组、PSE低(0.5 g/kg)、中(1 g/kg)、高(2 g/kg)剂量组。测定小鼠器官指数(胸腺、脾脏、肝脏、肾脏);测定血清中肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、尿酸(UA)、尿素(UREA)、肌酐(CREA)、尿素肌酐比值(BUN/Scr)、肾小球滤过率(eGFR)活性;HE及Masson染色观察各组小鼠皮肤、肝脏、肾脏、心脏、大脑、肺等器官病理学变化;用Real-time PCR法检测各组小鼠肝脏、肾脏、心脏、大脑等组织中p53、p16、p21、RB、HO-1、Nrf2及Keap1 mRNA的表达水平。结果:与D-gal组相比,PSE各剂量组胸腺、脾脏、肝脏和肾脏指数均升高(P<0.05);此外,在各治疗组中,PSE降低了(P<0.05)小鼠血清中CK、CK-MB、ALT、AST、ALP、UA、UREA、CREA和BUN/Scr水平,升高了eGFR(P<0.05)水平;HE及Masson染色发现,PSE能减轻D-gal对小鼠重要器官造成的病理损伤;与对照组比较,模型组肝、肾、心、脑中p53、p16、p21、RB、Keap1 mRNA表达升高(P<0.05),HO-1、Nrf2 mRNA表达降低(P<0.05),与D-gal组比较,PSE各治疗组小鼠肝脏、肾脏、心脏、大脑组织中p53、p16、p21、RB、Keap1 mRNA降低(P<0.05),HO-1、Nrf2 mRNA升高(P<0.05)。结论:PSE具有延缓衰老作用,其机制可能与其抑制p53/p21和p16-RB通路以及Keap1/Nrf2/HO-1通路有关。

关键词：黄精提取物抗衰老 p53/p21 信号通路 p16-RB 信号通路 Keap1/Nrf2/HO-1 信号通路

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彗星实验方法的优化及影响因素的分析

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安徽医科大学学报 2024年第2期59卷 219-223页

作者：范南英张鹏贵州医科大学基础医学院生物学教研室贵阳550025 贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵阳550025

目的为了更有效地检测细胞DNA损伤,对彗星实验的影响因素进行优化并建立阳性对照。方法以传统碱性彗星实验为基础,对制胶方法、凝胶浓度、琼脂糖溶剂、裂解时间、细胞密度和电泳电压加以优化。以过氧化氢(H_(2)O_(2))作为DNA损伤诱导剂... 详细信息

目的为了更有效地检测细胞DNA损伤,对彗星实验的影响因素进行优化并建立阳性对照。方法以传统碱性彗星实验为基础,对制胶方法、凝胶浓度、琼脂糖溶剂、裂解时间、细胞密度和电泳电压加以优化。以过氧化氢(H_(2)O_(2))作为DNA损伤诱导剂诱导HL-60细胞作为该实验的阳性对照。结果优化后的实验结果显示,制胶方法由三步法进步为两步法,以PBS为琼脂糖溶剂,0.8%正常熔点琼脂糖制备底层胶,0.7%低熔点琼脂糖与细胞悬液混合作为第二层胶,制胶效果好,操作更简单省时,较好地解决了脱胶问题。裂解1 h,1 V/cm电压电泳,获得了具有代表性的彗星图像,结果易于判读,能有效避免假阳性结果。并对不同浓度H_(2)O_(2)诱导的HL-60细胞DNA损伤情况进行比较,成功建立了彗星实验的阳性对照。结论与传统方法相比,优化后的彗星实验方法成本更低,更简单、快速、准确,重复性也更好,能够快速检测细胞中的DNA损伤。

关键词：彗星实验 HL-60 DNA损伤模型

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汉防己甲素衍生物HL-49对Bloom DNA解旋酶生物学特性的影响

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中国药理学通报 2022年第2期38卷 209-214页

作者：刘金河张望明晏文涛向天罗维杨凯琳徐泽权刘杰麟贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院免疫教研室贵州贵阳550025 贵州中医药大学第一附属医院检验科贵州贵阳550001 贵州医科大学检验学院贵州贵阳550004

目的汉防己甲素衍生物是一类双苄基异喹啉类化合物,具有明显的抗肿瘤活性。研究汉防己甲素衍生物HL-49对Bloom DNA解旋酶(bloom DNA helicase,BLM)构象和生物学活性的影响对于探索其抗肿瘤作用机制具有重要意义。方法采用紫外光谱扫描... 详细信息

目的汉防己甲素衍生物是一类双苄基异喹啉类化合物,具有明显的抗肿瘤活性。研究汉防己甲素衍生物HL-49对Bloom DNA解旋酶(bloom DNA helicase,BLM)构象和生物学活性的影响对于探索其抗肿瘤作用机制具有重要意义。方法采用紫外光谱扫描研究药物HL-49对BLM DNA解旋酶构象的影响,荧光偏振技术和孔雀绿-磷钼酸铵比色法分析HL-49对BLM解旋酶的DNA结合活性、DNA解链活性、ATPase活性。结果紫外光谱扫描结果显示,HL-49对BLM DNA解旋酶的三维构象影响不明显。荧光偏振法结果显示,HL-49对BLM解旋酶的DNA(dsDNA/ssDNA)结合活性的影响不明显,但随浓度的增加,与DNA相互结合的能力越强(P<0.01)。随着HL-49浓度的增加,BLM DNA解旋酶的DNA解链能力下降,K_(obs)值逐渐降低。孔雀绿-磷钼酸铵比色结果说明,随着HL-49浓度的增加或作用时间延长,HL-49能明显抑制BLM DNA解旋酶的ATPase活性。结论汉防己甲素衍生物HL-49通过与DNA的可逆性结合,抑制BLM DNA解旋酶的ATPase活性和DNA解链活性。

关键词：汉防己甲素衍生物 Bloom解旋酶生化活性构象荧光偏振 ATP酶活性

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高活性脐带间充质干细胞干预老年树鼩衰老脾脏的作用与机制

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4000-4010页

作者：叶丽田川赵晓娟陈梦蝶叶倩倩李强廖珠银李晔朱向情阮光萍何志旭舒莉萍潘兴华贵州医科大学基础医学院免疫学教研室组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明市干细胞与再生医学重点实验室基础医学实验室云南省昆明市650032 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作... 详细信息

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作用及机制。方法:从剖腹产的新生树鼩脐带组织中分离、培养和获得高活性脐带间充质干细胞,三系分化试剂盒检测成脂、成骨、成软骨分化能力,流式细胞术检测细胞周期和表面标志物。以感染复数值分别为100,120,140,160,180,200的吉凯基因绿色荧光蛋白转染第2代高活性脐带间充质干细胞,筛选最佳转染条件;转染后的第4代高活性脐带间充质干细胞尾静脉输注给老年治疗组树鼩,青年对照组和老年模型组不予特殊处理,治疗4个月时取脾脏组织,苏木精-伊红染色观察脾脏组织结构;β-半乳糖苷酶染色检测衰老相关半乳糖苷酶活性;免疫组织化学染色检测p21和p53蛋白表达水平;Ki67和PCNA免疫荧光染色检测细胞增殖活性;免疫荧光染色检测脾脏自噬蛋白分子Beclin1和APG5L/ATG5表达水平;活性氧荧光染色检测脾脏组织的活性氧含量;CD3免疫荧光染色检测总T淋巴细胞比例变化;酶联免疫吸附实验检测脾脏组织白细胞介素1β和转化生长因子β1分泌水平;DAPI复染细胞核观察绿色荧光蛋白标记的高活性脐带间充质干细胞在脾脏组织的分布情况。结果与结论:①高活性脐带间充质干细胞呈核小短梭形、鱼群样生长,G_(0)/G_(1)期占比大,具有向成脂、成骨和成软骨分化潜能。②感染复数为140且转染72 h为吉凯基因绿色荧光蛋白标记树鼩高活性脐带间充质干细胞的最佳条件。③与老年模型组相比,老年治疗组树鼩脾脏组织细胞排列紧密,白髓面积增加(P<0.01),红白髓界线清晰,生发中心占比无显著差异(P>0.05),脾脏组织衰老相关半乳糖苷酶活性水平降低(P<0.001),衰老蛋白分子p21和p53表达下调(P<0.001),增殖相关分子Ki67和PCNA表达上调(P<0.001,P<0.05),自噬相关分子Beclin1和APG5L/ATG5表达上调(P<0.001),活性氧含量降低(P<0.001),CD3^(+)T细胞比例增加(P<0.05),衰老相关分泌表型中白细胞介素1β分泌水平降低(P<0.001),转化生长因子β1分泌水平无显著差异(P>0.05)。与青年对照组相比,以上检测指标在老年治疗组中均有显著差异(P<0.05)。④冰冻组织切片观察可见老年治疗组树鼩脾脏组织中有绿色荧光蛋白标记的绿色荧光细胞。结果表明:静脉输注高活性脐带间充质干细胞可迁移至脾脏组织,抑制活性氧产生,下调衰老相关蛋白分子表达,诱导细胞自噬,促进细胞增殖,降低慢性炎症,进而改善脾脏组织结构和功能。

关键词：高活性脐带间充质干细胞树鼩脾脏衰老免疫自噬炎症

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可注射葡萄糖酸内酯-海藻酸钠/β-磷酸三钙-聚乙二醇复合水凝胶支架的性能评价

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中国组织工程研究 2022年第27期26卷 4308-4313页

作者：刘印刘琴陈娇古先扬陈佳文马敏先贵州医科大学贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属口腔医院贵州省贵阳市550004 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 贵阳市口腔医院口腔种植科贵州省贵阳市550004 贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省贵阳市550004

背景:可注射海藻酸钠水凝胶可以通过非侵入性或微创方式修复骨缺损,但力学性能欠佳,聚乙二醇基水凝胶具有弹性,将材料复合有望提高水凝胶支架的机械性能及细胞生物相容性。目的:探索葡萄糖酸内酯-海藻酸钠/β-磷酸三钙-聚乙二醇复合水... 详细信息

背景:可注射海藻酸钠水凝胶可以通过非侵入性或微创方式修复骨缺损,但力学性能欠佳,聚乙二醇基水凝胶具有弹性,将材料复合有望提高水凝胶支架的机械性能及细胞生物相容性。目的:探索葡萄糖酸内酯-海藻酸钠/β-磷酸三钙-聚乙二醇复合水凝胶的理化性能,以及对鼠骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响。方法:以葡萄糖酸内酯为交联剂,分别制备葡萄糖酸内酯-海藻酸钠/β-磷酸三钙-聚乙二醇水凝胶(交联剂的浓度分别为5,10,20 g/L,依次记为A、B、C组)与葡萄糖酸内酯-海藻酸钠/β-磷酸三钙水凝胶(交联剂的浓度为10 g/L,记为D组),表征4组水凝胶的形态、机械性能与凝胶时间。将SD大鼠骨髓间充质干细胞分别与4组水凝胶共培养,利用CCK-8法检测细胞增殖,Live/Dead荧光染色观察细胞存活情况,Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色检测成骨分化情况。结果与结论:①扫描电镜下,A、B、C组可见类似黏结性的丝状结构,A组孔径分布不均匀,B组孔径分布均匀且孔隙率高,C组孔隙率高但孔径大小不一,D组孔径分布不均且孔隙率低。②理化性质:B组的压缩应力高于D组(P<0.05),并且随着交联剂浓度的增加,A、B、C组支架的压缩应力增强(P<0.05);压缩50%后水凝胶的大体观显示,压缩后D组有较大裂纹,B组仅有较小裂纹;A、B、C组凝胶时间随加入交联剂浓度的增加而缩短,B组凝胶时间较D组稍延长(P<0.05)。③CCK-8实验检测显示,A、B组的细胞增殖速率高于C组(P<0.05),B组高于D组(P<0.05);Live/Dead染色显示,各组细胞存活率均较高,但C组死细胞较其他3组多。④免疫细胞化学染色显示,A、B、D组细胞呈多角形,C组细胞部分呈圆形,B组绿色荧光强度较其他3组高,且细胞骨架和微丝的形态及细胞数量也优于其他3组。⑤结果表明,葡萄糖酸内酯-海藻酸钠/β-磷酸三钙-聚乙二醇水凝胶具有良好的机械性能和稳定性,其中以10 g/L葡萄糖酸内酯制备的水凝胶能有效促进鼠骨髓间充质干细胞的增殖和分化。

关键词：组织工程支架可注射水凝胶海藻酸钠 β-磷酸三钙聚乙二醇葡萄糖酸内酯

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骨髓间充质干细胞对衰老猕猴胸腺及脾脏结构和功能的影响

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中国组织工程研究 2023年第19期27卷 2953-2959页

作者：潘杭朱向情何洁杨再玲田川吕冠柯阮光萍叶丽何志旭舒莉萍潘兴华贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室、云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室、昆明市干细胞与再生医学重点实验室、基础医学实验室云南省昆明市650032 贵州医科大学基础医学院免疫学教研室、细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室、贵州省再生医学重点实验室、省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室、中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院肿瘤医院贵州省贵阳市550004 四川省医学科学院、四川省人民医院四川省成都市610000 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:随着年龄的增长,脾脏的结构和功能发生改变,胸腺在青春期之后逐渐萎缩退化,导致机体发生免疫功能障碍。目的:探讨骨髓间充质干细胞对衰老猕猴胸腺及脾脏结构和功能的作用。方法:筛选出平均年龄25岁老年猕猴6只,随机分为老年组和老... 详细信息

背景:随着年龄的增长,脾脏的结构和功能发生改变,胸腺在青春期之后逐渐萎缩退化,导致机体发生免疫功能障碍。目的:探讨骨髓间充质干细胞对衰老猕猴胸腺及脾脏结构和功能的作用。方法:筛选出平均年龄25岁老年猕猴6只,随机分为老年组和老年治疗组各3只;老年治疗组猕猴经股静脉输注超顺磁性铁纳米颗粒标记的第4代骨髓间充质干细胞(1×10^(7)个/kg),1次/d,连续输注3 d,老年组猕猴在同一时间输注等体积的生理盐水;猕猴最后一次输注骨髓间充质干细胞5个月后给予安乐死处理,取出胸腺以及脾脏组织;苏木精-伊红染色观察胸腺组织和脾脏组织的结构变化;免疫荧光染色分析胸腺组织中各种T细胞亚群以及衰老相关基因蛋白P21的表达量变化;免疫组织化学染色分析脾脏组织中各种T细胞亚群以及衰老相关基因蛋白P21的表达量变化;安乐死处理猕猴之前抽取各组猕猴股静脉血5 mL,运用酶联免疫分析外周血血清中衰老相关分泌表型肿瘤坏死因子α和白细胞介素1α的分泌水平。结果与结论:①超顺磁性铁纳米颗粒标记的骨髓间充质干细胞经过股静脉输注入猕猴体内能够成功定植在衰老胸腺和脾脏组织中发挥作用;②骨髓间充质干细胞移植治疗后,衰老猕猴中胸腺部分组织出现清晰的皮质与髓质交界,脂肪细胞减少,出现胸腺小体,向正常的胸腺组织结构转变;衰老猕猴中脾脏组织出现清晰的红髓与白髓分界,脾小体的边缘多完整,且巨噬细胞减少,向正常的脾脏组织结构转变;③与老年组相比,老年治疗组衰老胸腺和脾脏组织中CD3^(+)、CD4^(+)以及CD8^(+)T细胞的表达量呈现增高的趋势,老年治疗组衰老胸腺和脾脏组织中P21蛋白的表达量呈现显著下降趋势;④与老年组相比,老年治疗组外周血中衰老相关分泌表型肿瘤坏死因子α以及白细胞介素1α的分泌水平呈现显著下降趋势;⑤上述结果表明,通过骨髓间充质干细胞的移植治疗,能够改善老年猕猴胸腺及脾脏组织的结构和功能。

关键词：干细胞骨髓间充质干细胞猕猴胸腺脾脏抗衰老免疫衰老相关分泌表型

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骨髓间充质干细胞调控猕猴卵巢的衰老

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中国组织工程研究 2022年第7期26卷 985-991页

作者：田川朱向情杨再玲鄢东海李晔王严影杨育坤何洁吕冠柯蔡学敏舒丽萍何志旭潘兴华贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 解放军联勤保障部队第920医院基础医学实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省昆明市650032 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:卵巢作为女性生殖系统的核心器官,通过排卵与分泌激素行使女性生殖功能并影响全身的组织器官,随着人口老龄化加速以及多种诱因导致卵巢衰老人群不断增加,但卵巢衰老在整体上还处于初步研究阶段,依旧是尚待解决的科学问题。目的:探... 详细信息

背景:卵巢作为女性生殖系统的核心器官,通过排卵与分泌激素行使女性生殖功能并影响全身的组织器官,随着人口老龄化加速以及多种诱因导致卵巢衰老人群不断增加,但卵巢衰老在整体上还处于初步研究阶段,依旧是尚待解决的科学问题。目的:探索骨髓间充质干细胞对老年猕猴卵巢衰老的修复作用。方法:健康老年雌猴10只,年龄23-27岁,体质量4.5-8.0 kg,随机分为老年对照组(n=4),老年治疗组(n=6)。第4代幼年猕猴骨髓间充质干细胞经股静脉输注到老年猕猴体内,1次/d,隔日输注,连续输注3次;老年对照组猕猴同一时间输注等体积生理盐水。在输注细胞的第8个月,安乐死处理猕猴取卵巢组织,称质量,40 g/L多聚甲醛固定,苏木精-伊红染色观察各级卵泡和卵巢结构变化;Tunel染色统计细胞凋亡率;Masson染色分析胶原蛋白所占面积比;免疫组织化学法观察CD34标记阳性血管数量。结果与结论:①老年对照组卵巢脏器指数为1.8×10^(-5),老年治疗组卵巢脏器指数为6.0×10^(-5),两组比较差异有显著性意义(P<0.05);②苏木精-伊红染色结果显示老年治疗组可见原始、初级、次级、闭锁卵泡,未见成熟卵泡,髓质与间质明显,有少量钙结节;老年对照组基本无卵泡结构,局部只见闭锁卵泡,有大量脂肪组织填充;③Masson染色结果显示老年治疗组卵巢组织胶原纤维所占面积比明显低于老年对照组,两组比较差异有显著性意义(P<0.05);④Tunel染色结果显示老年治疗组细胞凋亡率明显低于老年对照组,两组比较差异有显著性意义(P<0.05);⑤免疫组织化学结果显示老年治疗组血管数明显多于老年对照组,两组比较差异有显著性意义(P<0.05)。⑥结果表明,骨髓间充质干细胞能够促进卵泡再生、改善卵巢组织结构、减少卵巢细胞凋亡、抑制卵巢纤维化进展、促进血管再生,以延缓甚至逆转卵巢衰老。

关键词：干细胞骨髓间充质干细胞卵巢衰老卵泡再生血管内皮细胞猕猴

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四肢痛风石外科治疗时机和适应证

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中国组织工程研究 2021年第30期25卷 4883-4890页

作者：朱坤智卢涛罗张风吴展羽周玉虎叶川贵州医科大学附属医院骨科贵州省贵阳市550004 贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室贵州省贵阳市550004 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004

背景:四肢痛风石的治疗包括内科和外科干预,目前对外科干预的适应证和时机仍有争论,且对于手术操作的技巧认识不足,导致很大一部分患者没有得到有效和及时的救治。目的:综述目前四肢痛风石外科治疗的研究进展和发展前景,探讨各种外科治... 详细信息

背景:四肢痛风石的治疗包括内科和外科干预,目前对外科干预的适应证和时机仍有争论,且对于手术操作的技巧认识不足,导致很大一部分患者没有得到有效和及时的救治。目的:综述目前四肢痛风石外科治疗的研究进展和发展前景,探讨各种外科治疗方式的适应证、时机及手术要点,希望为四肢痛风石的外科治疗起到一定的指导作用。方法:通过计算机检索中国知网、万方和PubMed等数据库,中文检索词为"痛风,手术,外科治疗,关节镜,关节置换,医学工程,生物材料",英文检索词为"tophi,tophaceous,gout,gouty arthritis,tophus,surgery,surgical treatment,arthroplasty,arthroscopy,medical engineering,biomaterials"。通过纳入与排除标准,最终选择74篇相关文献进行归纳总结。结果与结论:(1)目前药物治疗是痛风石治疗的基石,但仍有很大一部分患者需要进行外科干预;(2)对于早期痛风石患者,在平衡手术治疗的潜在优势和相关风险后可开展手术;对于晚期痛风石患者,外科治疗是一种较为有效的办法,但外科治疗避免不了医源性的损伤;(3)未来还需要寻找一种有效且无副损伤的方法来治疗痛风石,医学工程及组织工程技术有望解决这一难题。

关键词：痛风石痛风性关节炎外科治疗手术关节镜关节置换综述

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脐带间充质干细胞对衰老胸腺上皮细胞的作用及影响

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中国组织工程研究 2022年第24期26卷 3880-3885页

作者：杨再玲田川吕冠柯潘杭朱向情王金祥王凯阮光萍何志旭舒丽萍潘兴华贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室、云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室、昆明市干细胞与再生医学重点实验室、基础医学实验室云南省昆明市650032 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:据文献报道,胸腺上皮细胞数量减少、功能紊乱是胸腺退化的重要因素之一,可导致胸腺发育、增殖缺陷以及外周T细胞功能障碍。课题组前期研究发现间充质干细胞在体内可以逆转衰老胸腺的结构和功能,具体作用机制尚不清楚。目的:探讨脐... 详细信息

背景:据文献报道,胸腺上皮细胞数量减少、功能紊乱是胸腺退化的重要因素之一,可导致胸腺发育、增殖缺陷以及外周T细胞功能障碍。课题组前期研究发现间充质干细胞在体内可以逆转衰老胸腺的结构和功能,具体作用机制尚不清楚。目的:探讨脐带间充质干细胞在体外对衰老胸腺上皮细胞的作用及影响。方法:将200μmol/L过氧化氢分别作用于第4代胸腺上皮细胞24,48,72,96 h,通过CCK8法检测细胞活力,筛选200μmol/L过氧化氢作用72 h为制备衰老模型合适时间。取第4代脐带间充质干细胞,与衰老的胸腺上皮细胞共培养48 h后进行β-半乳糖苷酶染色检测衰老细胞变化;免疫荧光ki-67染色检测细胞增殖活性;流式细胞仪分析细胞周期变化;免疫组织化学染色法检测p53、p21蛋白阳性表达量;RT-PCR检测衰老相关基因p21、p53以及pRb的mRNA表达水平。结果与结论:与模型组相比,脐带间充质干细胞共培养组衰老胸腺上皮细胞β-半乳糖苷酶表达降低,细胞增殖能力升高,G_(2)期细胞减少而S期细胞增多,免疫荧光p53、p21表达降低,p53、p21 mRNA表达水平降低而pRb mRNA表达水平升高。共培养组β-半乳糖苷酶表达、细胞增殖能力、p53、p21、pRb表达等结果向着对照组趋势靠近。结果表明,脐带间充质干细胞能调控胸腺上皮细胞的衰老相关指标表达,促进胸腺上皮细胞的增殖与分裂,以逆转胸腺上皮细胞的衰老。

关键词：干细胞脐带间充质干细胞胸腺胸腺上皮细胞共培养抗衰老:免疫

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简易高效的5-醛基尿嘧啶核苷液相分离方法的建立与优化

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化学研究与应用 2025年第6期 1571-1576页

作者：罗庆元艾立丽冯小云张鹏贵州医科大学基础医学院生物学教研室细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室

本研究旨在建立一种简单高效的高效液相分析方法,用于分离5-醛基尿嘧啶核苷。采用XSelect HSS T3色谱柱(100?,5μm,4.6 mm×250 mm),通过比较磷酸二氢钾、甲酸铵-甲醇和水-乙腈三种不同流动相,以及在不同流速及柱温下,dA、dT、dC、d... 详细信息

本研究旨在建立一种简单高效的高效液相分析方法,用于分离5-醛基尿嘧啶核苷。采用XSelect HSS T3色谱柱(100?,5μm,4.6 mm×250 mm),通过比较磷酸二氢钾、甲酸铵-甲醇和水-乙腈三种不同流动相,以及在不同流速及柱温下,dA、dT、dC、dG、5fdU及5hmdU六种混合核苷标准品的分离效果,以得到最佳的分离条件。采用磷酸二氢钾等度洗脱法进行分离时,未能检测到d A,且核苷d G和5fdU未实现分离;甲酸铵-甲醇梯度洗脱法同样无法有效分离核苷d G和5fdU。然而,使用水-乙腈作为流动相洗脱时,能够实现d G与5fdU的分离,但各核苷分离度较低。当降低柱温后,各核苷分的离度有所增加,但温度过低会导致峰型宽度增加,不利于后续分析。通过提高流速,各核苷峰型得到改善。最终确定水-乙腈作为洗脱机在流速1 m L/min,柱温30℃时,能够实现d C、5hmdU、dG、5fdU、dT及d A的最佳分离,分离度分别为6.74、11.89、3.37、7.31及6.13。本研究通过优化流动相、流速及柱温,成功建立了一种分离度高、成本低,效率高5-醛基尿嘧啶检测方法,为研究5hmdU/5fdU引起的DNA损伤机制提供检测方法参考。

关键词：高效液相 5-醛基尿嘧啶脱氧鸟嘌呤核苷分离

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