检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2019年第6期44卷 626-631页

作者：张鹏崔冬冰舒莉萍范安然贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004

目的:构建3种淀粉样前体蛋白(APP)胞外结构域突变体细胞株并进行功能的初步验证。方法:通过Touch down PCR的方法扩增E1结构域缺失的APP695片段以及E1和信号肽双缺失的片段,采用融合PCR的方法扩增E2结构域缺失的APP695片段,并将获得的... 详细信息

目的:构建3种淀粉样前体蛋白(APP)胞外结构域突变体细胞株并进行功能的初步验证。方法:通过Touch down PCR的方法扩增E1结构域缺失的APP695片段以及E1和信号肽双缺失的片段,采用融合PCR的方法扩增E2结构域缺失的APP695片段,并将获得的片段连接于pCMV-APP695载体中得到APP胞外结构域突变体质粒;质粒转染CHO细胞后,添加G418筛选表达APP胞外结构域突变体的单克隆细胞系;通过Western blot方法检测APP胞外结构域突变体的表达及胞外分泌水平,分析信号肽对该突变体分泌的影响。结果:成功获得了APP的E1结构域突变体、E1/信号肽双缺失突变体以及E2结构域突变体细胞株,且APP突变体可以正常表达和分泌,但是信号肽缺失后APP突变体可以表达、而不能分泌。结论:APP的E1和E2结构域对APP蛋白的胞外分泌无影响。

关键词：淀粉样前体蛋白胞外结构域突变体信号肽神经退行性疾病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Tau蛋白通过外泌体传递到细胞外空间的研究

引用

贵州医科大学学报 2019年第6期44卷 632-636页

作者：张鹏舒莉萍周艳华范安然贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004

目的:验证HEK293-Tau细胞的外泌体中是否存在Tau蛋白、及Tau蛋白是否能够在细胞间通过外泌体传播。方法:通过经典的超速离心结合超滤法分离HEK293-Tau细胞的外泌体,通过透射电镜分析外泌体形态、采用Western blot鉴定外泌体特异性标记物... 详细信息

目的:验证HEK293-Tau细胞的外泌体中是否存在Tau蛋白、及Tau蛋白是否能够在细胞间通过外泌体传播。方法:通过经典的超速离心结合超滤法分离HEK293-Tau细胞的外泌体,通过透射电镜分析外泌体形态、采用Western blot鉴定外泌体特异性标记物(HSP70、CD63及CD9)及外泌体和细胞培养液中Tau蛋白表达。结果:超速离心结合超滤法成功地分离了HEK293-Tau细胞的外泌体,在透射电镜下观察到外泌体呈现典型的杯状形态,分离的外泌体中检测到HSP70、CD63及CD9等外泌体特异性标记物的表达;在外泌体及细胞培养液中能够检测到Tau蛋白的存在。结论: HEK293-Tau 细胞外泌体中存在Tau蛋白,并且Tau蛋白可以通过外泌体传递到细胞外空间。

关键词： Tau蛋白外泌体阿尔茨海默综合征 HEK293-Tau细胞神经退行性疾病超速离心法超滤法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

骨髓间充质干细胞对293T衰老细胞的作用机制研究

引用

西南国防医药 2019年第7期29卷 727-730页

作者：陈裕浩朱向情郑学忠李青青王强阚晓丽王严影潘兴华解放军920医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室昆明医科大学解放军920医院临床学院昆明650032 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心

目的建立293T细胞衰老模型,评价脐带间充质干细胞对293T衰老细胞端粒及端粒酶相关基因TCAB1的影响。方法通过叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导获得293T细胞衰老模型,用猕猴骨髓间充质干细胞(BMSC)分别与293T细胞、293T细胞衰老模型共培养5d后... 详细信息

目的建立293T细胞衰老模型,评价脐带间充质干细胞对293T衰老细胞端粒及端粒酶相关基因TCAB1的影响。方法通过叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导获得293T细胞衰老模型,用猕猴骨髓间充质干细胞(BMSC)分别与293T细胞、293T细胞衰老模型共培养5d后,采用RT-qPCR法检测细胞端粒相对长度及端粒酶相关基因TCAB1的水平变化。结果通过200μmol/Lt-BHP处理293T细胞2h后,大量细胞出现衰老改变,而凋亡较少。与BMSC共培养5d后,293T细胞及衰老模型的端粒延长和TCAB1基因表达水平均有所升高(P<0.05)。结论t-BHP能够诱导293T细胞衰老,BMSC与293T细胞共培养具有提高细胞端粒酶活性和延长端粒的作用。

关键词：间充质干细胞衰老 293T细胞端粒 TCAB1

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

甲基结合蛋白1对小鼠胚胎干细胞增殖及克隆形态的影响

引用

贵州医科大学学报 2019年第6期44卷 621-625页

作者：张鹏杨红兰刘含周艳华杨燕范安然何志旭舒莉萍贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州遵义563000

目的:研究甲基结合蛋白1(Mbd1)对小鼠胚胎干细胞克隆形态及增殖的影响。方法:设计针对Mbd1转录起始位点的gRNA,将表达有gRNA和Cas9蛋白的质粒使用脂质体转染方法转入小鼠胚胎干细胞(J1);使用抗生素将未转染成功的细胞杀死后,细胞继续培... 详细信息

目的:研究甲基结合蛋白1(Mbd1)对小鼠胚胎干细胞克隆形态及增殖的影响。方法:设计针对Mbd1转录起始位点的gRNA,将表达有gRNA和Cas9蛋白的质粒使用脂质体转染方法转入小鼠胚胎干细胞(J1);使用抗生素将未转染成功的细胞杀死后,细胞继续培养7d,挑取单克隆细胞,采用PCR法筛选敲除Mbd1的纯合子细胞,观察Mbd1缺失对小鼠胚胎干细胞克隆形态的影响;使用细胞计数法检验Mbd1对胚胎干细胞增殖的影响。结果:通过Cripsr/Cas9成功获得敲除Mbd1的胚胎干细胞,Mbd1缺失后的小鼠胚胎干细胞丧失了常规小鼠胚胎干细胞的3D克隆形态,细胞呈现单层扁平克隆;Mbd1缺失后小鼠胚胎干细胞增殖速率变慢。结论:Mbd1通过影响小鼠胚胎干细胞克隆形态和增殖而影响胚胎干细胞的多能性。

关键词：甲基结合蛋白胚胎干细胞多能性细胞增殖神经前体细胞基因敲除

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Alexa Fluor 488 NHS Ester染料提高流式细胞周期检测结果的可行性

引用

贵州医科大学学报 2019年第6期44卷 637-640,646页

作者：张鹏彭涛范安然兰金芝何志旭舒莉萍周艳华贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州遵义563000

目的:探讨Alexa Fluor 488 NHS Ester染料用于提高流式细胞周期检测结果的可行性。方法:以293细胞作为研究对象,采用两种方案进行细胞周期检测,每种方案设4组;方案一,按照细胞周期检测试剂盒的说明书对4组细胞进行染色;方案二,先对4组... 详细信息

目的:探讨Alexa Fluor 488 NHS Ester染料用于提高流式细胞周期检测结果的可行性。方法:以293细胞作为研究对象,采用两种方案进行细胞周期检测,每种方案设4组;方案一,按照细胞周期检测试剂盒的说明书对4组细胞进行染色;方案二,先对4组细胞用0.0、0.4、2.0及10.0 mg/L的Alexa Fluor 488 NH S Ester染料染色15 min,然后将4组细胞混合在一支试管中再用碘化丙啶(PI)进行染色;将两种染色方案获得的细胞上流式细胞仪检测,分析比较两种方案的4组细胞检测结果。结果:方案一染色的4组细胞,流式细胞仪检测结果不尽一致,个别组间由于细胞密度不同导致染色结果存在差异;方案二经不同浓度Alexa Fluor 488 NHS Ester染色的4组细胞虽然混合于一支试管,检测结果经Flowjo X软件分析时能明显分出4群细胞,对4群细胞分别进行细胞周期分析比较,结果一致。结论:采用不同浓度Alexa Fluor 488 NHS Ester染料预染细胞后混合在一起进行PI染色能够提高细胞周期检测结果的可信度,在神经退行性疾病研究中可节约病人的取样次数及数量。

关键词：细胞周期检测流式细胞术碘化丙啶神经退行性疾病 AlexaFluor488NHSEster染料

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

深度测序解析年龄及UCMSC治疗对猕猴lncRNA的影响

引用

西南国防医药 2019年第6期29卷 640-643页

作者：朱向情陈裕浩王严影高萌潘兴华解放军920医院细胞生物治疗中心干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明医科大学昆明总医院临床学院昆明650032 贵州医科大学组织工程与干细胞实验室南方医科大学第三附属医院

目的分析年龄和脐带间充质干细胞(UCMSC)治疗对外周血单个核细胞长链非编码RNA(lncRNA)的影响。方法分别采集、分离幼年、中年、老年和老年经UCMSC治疗后的4种不同生理状态的猕猴外周血单个核细胞,提取全基因组RNA,进行转录组测序,通过... 详细信息

目的分析年龄和脐带间充质干细胞(UCMSC)治疗对外周血单个核细胞长链非编码RNA(lncRNA)的影响。方法分别采集、分离幼年、中年、老年和老年经UCMSC治疗后的4种不同生理状态的猕猴外周血单个核细胞,提取全基因组RNA,进行转录组测序,通过生物信息学比较筛选出差异lncRNA并进行分组比较。结果幼年与老年、中年相比,单个核细胞表达上调的lncRNA分别为54和52个,表达下调的lncRNA分别为49和46个;中年与老年相比,表达上调和下调的lncRNA分别为48和63个;老年与经UCMSC治疗组相比,表达上调和下调的lncRNA分别为41和68个。聚类分析发现,随年龄增长,幼年高表达lncRNA减少,而低表达lncRNA增加;UCMSC治疗可使低表达lncRNA升高,而高表达lncRNA降低。结论lncRNA表达谱随年龄的增加而改变,UCMSC治疗可使衰老状态的lncRNA表达谱趋向年轻化方向。

关键词：长链非编码RNA 猕猴年龄脐带间充质干细胞单个核细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

二氢杨梅素对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

引用

贵州医科大学学报 2019年第10期44卷 1140-1144页

作者：刘金河葛章文张望明晏文涛刘志吴昌学贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 贵州省人民医院检验科贵州贵阳550002 贵州中医药大学第一附属医院检验科贵州贵阳550001 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550004

目的:探讨二氢杨梅素(DMY)对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响。方法:将肺癌A549细胞分为DMY组和对照组,DMY组分成5组,分别加入终浓度1、5、10、15及20mg/L的DMY,对照组加入等量DMSO;各组细胞培养72h时,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,计算DM... 详细信息

目的:探讨二氢杨梅素(DMY)对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响。方法:将肺癌A549细胞分为DMY组和对照组,DMY组分成5组,分别加入终浓度1、5、10、15及20mg/L的DMY,对照组加入等量DMSO;各组细胞培养72h时,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,计算DMY对A549细胞的半数致死量(IC50值);选取IC50值附近浓度的DMY处理细胞,分别在24、48及72h时,采用MTT检测细胞存活率;肺癌A549细胞分为DMY组(终浓度大约为IC50值的DMY)及对照组,细胞培养48h时,采用Hoechst33342/PI双染法结合倒置荧光显微镜检测细胞凋亡,DNAladder凝胶电泳检测细胞内DNA的断裂程度。结果:DMY能显著抑制A549细胞的增殖,细胞抑制率随着DMY浓度的增加逐渐增高(P<0.01),呈明显的浓度依赖性,IC50值为(13.16±0.098)mg/L;以15mg/LDMY处理A549细胞,细胞存活率随着时间的延长逐渐降低(P<0.01),呈明显的时间依赖性;15mg/LDMY孵育A549细胞48h,Hoechst33342/PI染色后荧光显微镜下细胞核内呈现强蓝光,说明细胞处于凋亡状态,DNAladder凝胶实验检测发现凋亡DNA片段明显增加,出现Ladder现象。结论:DMY能抑制肺癌A549细胞增殖并促进其凋亡,可能与染色体DNA断裂有关。

关键词：二氢杨梅素肺肿瘤癌细胞增殖细胞凋亡 DNAladder凝胶电泳

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：