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天然产物研究与开发 2018年第5期30卷 761-766页

作者：蔺良才赵菲菲王敏陈海东徐国波廖尚高贵州医科大学药学院药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550025 贵州医科大学教育部民族药与中药开发应用工程研究中心贵阳550004

蓑衣莲酮硫酸酯(Auriculatone sulphate,AS)是天然保肝活性化合物蓑衣莲酮的前药。为评估AS的保肝作用,课题采用小鼠腹腔注射300 mg/kg的对乙酰氨基酚(APAP)复制小鼠急性肝损伤模型,通过静脉注射给予25 mg/kg的AS,测定给药后小鼠血清中... 详细信息

蓑衣莲酮硫酸酯(Auriculatone sulphate,AS)是天然保肝活性化合物蓑衣莲酮的前药。为评估AS的保肝作用,课题采用小鼠腹腔注射300 mg/kg的对乙酰氨基酚(APAP)复制小鼠急性肝损伤模型,通过静脉注射给予25 mg/kg的AS,测定给药后小鼠血清中的谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量变化,从肝损伤水平初步了解AS对肝脏的保护作用;通过测定肝组织中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的水平以及超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,了解AS对氧化损伤的保护作用;通过小鼠肝组织的病理学检查,直观评价AS通过静脉注射给药后对肝脏的保护作用。研究结果显示,静脉注射AS能够显著降低血清中ALT、AST和LDH的水平,使其趋近于正常水平(P<0.001)。与模型组相比,AS不但可以显著降低肝脏中MDA的水平(P<0.001),而且显著增加GSH水平和SOD的活性(P<0.001)。病理学检查显示,AS能显著改善APAP对肝组织的破坏,使肝组织的结构趋近于正常。综上,静脉注射AS可有效保护小鼠免受APAP诱导小鼠急性肝损伤,其保护作用可能与抑制肝脏氧化损伤有关。

关键词：蓑衣莲酮硫酸酯静脉注射对乙酰氨基酚肝损伤保肝作用

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氮杂环马蹄金素衍生物的合成及抗HBV活性

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贵阳中医学院学报 2019年第3期41卷 37-41页

作者：姜欣怡曾晓萍卢苇徐必学梁光义贵州中医药大学贵州贵阳550002 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014

目的:对苗药马蹄金的活性成分马蹄金素[N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯丙氨醇,MTS]进行结构修饰,以期获得抗乙肝病毒(HBV)活性更好、毒性更低目标分子。方法:以MTS为先导化合物,设计合成一系列含氮杂环取代的MTS衍生物并对... 详细信息

目的:对苗药马蹄金的活性成分马蹄金素[N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯丙氨醇,MTS]进行结构修饰,以期获得抗乙肝病毒(HBV)活性更好、毒性更低目标分子。方法:以MTS为先导化合物,设计合成一系列含氮杂环取代的MTS衍生物并对其进行抗HBV活性测试。结果:合成了新的MTS衍生物共计6个,经体外活性筛选结果显示有3个衍生物具有抗HBV活性。结论:化合物4b、6b、6c显示较好的抗HBV活性,说明含氮杂环取代的苗药马蹄金的活性成分MTS衍生物值得深入研究。

关键词：马蹄金素衍生物氮杂环合成抗HBV活性

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稳定表达hOAT1的HEK293细胞系的建立及鉴定

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中国药理学通报 2018年第10期34卷 1471-1476页

作者：李静杨洋肖涛李韬欧瑜傅晓钟刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550002 贵州医科大学药学院贵州贵阳550002 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵阳市妇幼保健院药剂科贵州贵阳550002

目的构建人肾脏近曲小管阴离子转运体1(human organic anion transporter 1,hOAT1)-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒,获得稳定表达pEGFP-hOAT1的HEK-293细胞系。方法构建EGFP与hOAT1的融合基因表达载体pEGFP-hOAT1,并利用FuGENE 6转染试剂将其转染至HEK293细胞中,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,经G418抗性筛选获得稳定转染细胞株。用RT-PCR法、qRT-PCR法和Western blot技术,检测稳定转染细胞及正常细胞hOAT1 mRNA和蛋白的表达情况,并进一步用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)考察稳定转染细胞的对氨基马尿酸摄取能力,以及丙磺舒对hOAT1的抑制作用。结果使用该文的方法,细胞转染率可达90%。RT-PCR、qRT-PCR、Western blot,以及对氨基马尿酸摄取、丙磺舒抑制实验结果显示,相对于正常组,转染细胞在荧光显微镜下呈绿色荧光,其hOAT1表达均呈阳性(P<0.01);稳定转染细胞的对氨基马尿酸摄取能力明显升高(P<0.05),且丙磺舒对hOAT1有明显的抑制作用(P<0.05)。结论高效快速地建立了稳定高表达hOAT1的HEK293细胞系,为核苷类膦酸类似物这类药物引起的临床剂量依赖性肾毒性的机制研究奠定了模型基础,也为体外研究hOAT1底物或抑制剂的筛选提供了一个便利的工具。

关键词：人有机阴离子转运体1 融合蛋白稳定转染 HEK293细胞对氨基马尿酸丙磺舒

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固相萃取法-气相色谱-质谱法快速测定水果中36种农药残留

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现代食品科技 2018年第10期34卷 205-213页

作者：周雪陈婷婷李婉蓉刘学吴林菁张嫩玲贵州医科大学中药药剂学教研室(贵州省特色药用植物资源高效利用工程中心贵阳市-贵州医科大学天然药物药理与成药性评价联合实验室贵州省普通高等学校天然药物药理与成药性评价特色重点实验室贵州医科大学天然药物资源优效利用重点实验室)药学院贵州医科大学贵州贵安550025 省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室(贵州医科大学) 贵州贵阳550014

在固相萃取柱,样品提取溶剂及淋洗液体积的选择基础上,建立了水果中36种农药残留的气相色谱-质谱法(GC/MS)检测方法。水果样品经乙腈提取,采用石墨化碳黑/氨基柱(PC/NH2)净化后,用GC/MS单离子监测扫描模式(SIM)进行检测,基质匹配溶液外... 详细信息

在固相萃取柱,样品提取溶剂及淋洗液体积的选择基础上,建立了水果中36种农药残留的气相色谱-质谱法(GC/MS)检测方法。水果样品经乙腈提取,采用石墨化碳黑/氨基柱(PC/NH2)净化后,用GC/MS单离子监测扫描模式(SIM)进行检测,基质匹配溶液外标法定量。各个目标物在70.00ng/m L^560.0ng/m L范围内呈良好的线性相关,相关系数(R2)均不小于0.990,方法的检出限(LOD,S/N=3)为0.0001~0.0018 mg/kg,定量限(LOQ,S/N=10)为0.0002~0.0060 mg/kg。分别在提子基质中做低、中、高3个添加水平的加标回收试验,该方法的平均回收率为60.6%~116.5%,相对标准偏差RSD(n=6)在0.8%~9.5%之间。该方法前处理步骤简便,基质经固相萃取柱净化后的效果满意,特异性更强,适用范围广,适用于仁果类及小型攀缘类水果中多组分农残的筛查和确证工作。

关键词：固相萃取气相色谱串联质谱农药残留水果定量分析

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杜仲内生青霉菌GZWMJZ-068次生代谢产物研究

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天然产物研究与开发 2018年第10期30卷 1721-1727页

作者：龚倩玉许言超左明星饶青周彦伶朱伟明林昌虎王立平省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州医科大学贵州医科大学药学院贵阳550025 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵阳550014 中国海洋大学医药学院青岛266003

为获得活性微生物代谢产物,从贵阳杜仲的叶片中分离得到内生真菌GZWMJZ-068,发酵产物用乙酸乙酯提取,经硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱等进行分离纯化,得到15个单体化合物。运用核磁、质谱和比旋光度等方法鉴定了15个化合... 详细信息

为获得活性微生物代谢产物,从贵阳杜仲的叶片中分离得到内生真菌GZWMJZ-068,发酵产物用乙酸乙酯提取,经硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱等进行分离纯化,得到15个单体化合物。运用核磁、质谱和比旋光度等方法鉴定了15个化合物的结构,即isochromophilones IV(1)、epi-isochromophilone III(2)、(2R,3S)-1-(4-羟基苯基)-2,3-丁二醇(3)、(2S,3S)-1-(4-羟基苯基)-2,3-丁二醇(4)、6-[1-羟基-(1S)-戊基]-4-甲氧基-(6S)-2H,5H-2-吡喃酮(5)、6-(1-羟戊基)-4-甲氧基-2-酮(6)、quinolactacins Al(7a)、quinolactacins A2(7b)、dihydrocitrinone(8)、dihydrocitrinin (9)、原儿茶酸(10)、儿茶酸(11)、5-甲基尿嘧啶(12)、尿嘧啶(13)、citrinal A(14)。对15个化合物进行了抑菌活性评价,化合物1和2对光滑念珠菌和金黄色葡萄球菌具有中等的抑制作用(MIC16-32μg/mL)。

关键词：杜仲内生真菌代谢产物抑菌活性

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骨康胶囊组方药物对成骨细胞SaOS-2增殖分化及矿化的影响

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贵州医科大学学报 2019年第2期44卷 158-162页

作者：杨健李靖彭潇董莉沈艳珍李勇军席晓岚刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州维康子帆药业股份有限公司贵州修文550200

目的:研究骨康胶囊组方药物续断、三七、芭蕉根对体外培养人成骨细胞Sa OS-2增殖、分化和矿化的影响。方法:以不含药培养基培养Sa OS-2作为对照组,给药组Sa OS-2分别用1、10、100、200、400、800 mg/L续断、芭蕉根及三七水提物作用,MTT... 详细信息

目的:研究骨康胶囊组方药物续断、三七、芭蕉根对体外培养人成骨细胞Sa OS-2增殖、分化和矿化的影响。方法:以不含药培养基培养Sa OS-2作为对照组,给药组Sa OS-2分别用1、10、100、200、400、800 mg/L续断、芭蕉根及三七水提物作用,MTT法测定Sa OS-2细胞增殖情况,磷酸苯二钠比色法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,ELISA法检测钙离子和骨钙素(OTC)的分泌以及用茜素红染色法测定成骨细胞矿化结节数。结果:与对照组比较,续断各浓度水提物可显著促进Sa OS-2细胞的增殖、增强ALP活性且对细胞Ca2+的分泌有促进作用(P<0. 05或P <0. 01),浓度为100、200 mg/L的续断水提物对Sa OS-2细胞分泌OTC能力及对细胞的矿化有促进作用(P <0. 05或P <0. 01);三七水提物除了浓度为200 mg/L时有明显促进OTC分泌的作用(P <0. 05)外,浓度为10、100 mg/L的三七水提物及各浓度的芭蕉根水提物对成骨细胞增殖、分化和矿化作用均不明显(P>0. 05)。结论:骨康胶囊治疗骨质疏松作用可能与其组方续断的促进成骨细胞的增殖、分化及矿化的作用有关。

关键词：骨康胶囊续断三七芭蕉根成骨细胞增殖分化矿化碱性磷酸酶骨钙素

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黔产南方红豆杉挥发性成分研究

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广州化工 2019年第19期47卷 86-90,111页

作者：周美王道平张明骆衡杨小生秦志俊秦天贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014 金沙健青生物科技有限公司贵州金沙551802

采用固相微萃取(SPME)-气质联用(GC-MS)法对黔产南方红豆杉雄性叶、雄性枝皮,雌性叶、雌性枝皮、雌性果实、雌性果肉的挥发性成分进行了分析,并用归一化法测定了其相对含量。研究发现,南方红豆杉不同性别不同部位所含挥发性成分的种类... 详细信息

采用固相微萃取(SPME)-气质联用(GC-MS)法对黔产南方红豆杉雄性叶、雄性枝皮,雌性叶、雌性枝皮、雌性果实、雌性果肉的挥发性成分进行了分析,并用归一化法测定了其相对含量。研究发现,南方红豆杉不同性别不同部位所含挥发性成分的种类和相对含量均存在一定差异,其中,雄性叶、雄性枝皮中分别鉴定出45、40个挥发性成分,雌性叶、雌性枝皮、雌性绿色果肉、雌性红色果肉中分别鉴定出50、52、35、23个挥发性成分。结果表明,顶空固相微萃取-气质联用方法操作简便,能够很好地应用于南方红豆杉芳香成分的检测。

关键词：南方红豆杉固相微萃取气质联用挥发性成分

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淫羊藿苷对补体旁路激活诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用

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中国药理学通报 2018年第7期34卷 988-993页

作者：郭静李娇张霖杨毅朱芳娟李敏孙黔云贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室药理与生物活性研究中心贵州贵阳550014 贵州省人民医院干医科贵州贵阳550002

目的探讨淫羊藿苷(ICA)对补体旁路激活造成的小鼠急性肺损伤的保护作用及作用机制。方法 32只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、PDTC组、淫羊藿苷组,预防给药7 d后,用特异性补体旁路激活蛋白眼镜蛇毒因子(CVF),尾静脉注射复制小鼠... 详细信息

目的探讨淫羊藿苷(ICA)对补体旁路激活造成的小鼠急性肺损伤的保护作用及作用机制。方法 32只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、PDTC组、淫羊藿苷组,预防给药7 d后,用特异性补体旁路激活蛋白眼镜蛇毒因子(CVF),尾静脉注射复制小鼠急性肺损伤模型。测定小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量和炎性细胞数目;肺组织匀浆后测定髓过氧化物酶(MPO)活性;ELISA法检测BALF和血清中IL-6、TNF-α、P-selectin、ICAM-1的含量;HE染色法观察肺组织病理形态学变化;免疫组化法测定肺组织中NF-κB p65的磷酸化水平,并采用双萤光素酶报告基因检测系统,在细胞水平上测定补体旁路激活对微血管内皮细胞中NF-κB的核内转录活性的影响。结果 ICA可以明显降低小鼠肺组织匀浆液中MPO含量和BALF中炎性细胞数目,并同时降低BALF中IL-6、TNF-α、P-selectin含量和血清中TNF-α、P-selectin、ICAM-1水平,减轻小鼠肺部炎性细胞浸润,明显抑制小鼠肺组织中NF-κB p65的磷酸化,并有效抑制NF-κB核内转录活性的上调。结论 ICA能有效减轻补体旁路激活诱导的小鼠肺部急性炎症反应,其机制可能与抑制肺组织炎性细胞浸润、NF-κB p65的磷酸化及核内转录活性,从而降低炎症反应水平有关。

关键词：淫羊藿苷补体旁路急性肺损伤眼镜蛇毒因子 NF-κB p65 炎症

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若干天然活性分子对微血管内皮炎症反应的干预作用

若干天然活性分子对微血管内皮炎症反应的干预作用

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中国药理学会第十五次全国学术大会

作者：孙黔云李敏郭静李娇路青瑜李朝胜周英贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州省人民医院

目的微血管内皮炎症反应与一系列重要病征的发病机制高度关联,本研究以微血管内皮炎症反应为靶标挖掘和评价贵州民族药若干重要活性分子的药理功效。方法分别建立补体旁路激活诱导的微血管内皮细胞炎症反应模型和小鼠急性肺损伤模型,研... 详细信息

目的微血管内皮炎症反应与一系列重要病征的发病机制高度关联,本研究以微血管内皮炎症反应为靶标挖掘和评价贵州民族药若干重要活性分子的药理功效。方法分别建立补体旁路激活诱导的微血管内皮细胞炎症反应模型和小鼠急性肺损伤模型,研究绿原酸、淫羊藿苷、白藜芦醇、黄芩苷、川芎嗪等活性分子对炎症反应的干预作用。结果基于细胞模型的研究表明,绿原酸、淫羊藿苷、白藜芦醇、黄芩苷、川芎嗪等活性分子能抑制NF-κB信号通路的活化和核内转录活性的上调,下调黏附分子和炎症介质的表达;小鼠模型的结果表明,上述活性分子可以降低支气管肺泡灌洗液中的蛋白含量、炎性细胞数目、IL-6和TNF-α以及ICAM-1的含量以及肺组织匀浆的髓过氧化物酶活性,并可显著降低血清中IL-6,TNF-α和ICAM-1的水平,肺组织中的炎性细胞浸润明显减轻,NF-κB P65的磷酸化水平也显著降低。结论绿原酸、淫羊藿苷、白藜芦醇、黄芩苷、川芎嗪等活性分子可明显抑制补体旁路激活导致的微血管内皮炎症反应,其机制与抑制炎症相关信号通路的活化从而有效干预炎症反应有关。

关键词：天然活性分子内皮细胞炎症补体旁路急性肺损伤

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基于蛇毒抗补体蛋白解析补体旁路途径的致炎效应及应用研究

基于蛇毒抗补体蛋白解析补体旁路途径的致炎效应及应用研究

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第十四届生物毒素毒理学术大会暨第一届生物毒素——从生存适应到转化医学专题学术会议

作者：孙黔云李敏郭静李娇路青瑜李红玲李朝胜周英贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州省人民医院

补体是免疫系统的重要组成部分,在天然防御和免疫调控中具有重要功能,但补体过度激活会导致炎症和组织损伤,其中补体旁路途径与缺血再灌损伤、急性肺损伤、动脉粥样硬化等一系列重要病征有密切的关联,在这些病征的发生和发展中扮演了重... 详细信息

补体是免疫系统的重要组成部分,在天然防御和免疫调控中具有重要功能,但补体过度激活会导致炎症和组织损伤,其中补体旁路途径与缺血再灌损伤、急性肺损伤、动脉粥样硬化等一系列重要病征有密切的关联,在这些病征的发生和发展中扮演了重要角色。基于补体旁路途径的重要病理作用及旨在发现潜在的药物干预靶点,我们利用眼镜蛇毒因子CVF能特异激活补体旁路途径且其激活补体旁路的方式与体内病理条件下的补体旁路过度激活高度一致的特

关键词：旁路途径抗补体蛋白炎症反应

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