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中国实验方剂学杂志 2019年第14期25卷 142-149页

作者：杨淑婷陈思颖孙慧园陈浩黄勇李月婷李勇军郑林王永林贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室民族药与中药开发应用教育部工程研究中心药学院

目的:考察荭草花有效组分在大鼠肠道菌群中的代谢特征。方法:采用超高效液相色谱串联电喷雾四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)检测荭草花有效组分在大鼠体外肠道菌群中的孵育样品,流动相0. 1%甲酸水溶液-0. 1%甲酸乙腈... 详细信息

目的:考察荭草花有效组分在大鼠肠道菌群中的代谢特征。方法:采用超高效液相色谱串联电喷雾四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)检测荭草花有效组分在大鼠体外肠道菌群中的孵育样品,流动相0. 1%甲酸水溶液-0. 1%甲酸乙腈溶液梯度洗脱,流速0. 3 m L·min^-1,电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式扫描,使用Metabolite ToolsTM和质量亏损过滤(MDF)等代谢产物分析技术,并结合化合物精确相对分子质量、碎片离子信息及文献数据,分析荭草花有效组分在大鼠体外肠道菌群中的代谢产物,推测其可能的生物转化途径。结果:荭草花有效组分经离体大鼠肠道菌群孵育后共检出18个代谢产物色谱峰,其生物转化途径主要是以还原、氧化、水解为主的Ⅰ相反应,甲基化为主的Ⅱ相反应。结论:荭草花有效组分能够在大鼠肠道菌群作用下转化为多种代谢产物,提示荭草花用药时,应考虑代谢产物是否为其生物活性成分。

关键词：荭草花有效组分质量亏损过滤肠道菌群代谢途径甲基化体外孵育

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基于HPLC-ELSD指纹图谱与化学计量学相结合的舒眠胶囊质量评价

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中国现代应用药学 2021年第17期38卷 2088-2092页

作者：朱敏汇彭潇刘理燕马雪陆苑李勇军林昌虎贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵阳550004

目的建立舒眠胶囊HPLC-ELSD指纹图谱与化学计量学相结合,全面、系统评价舒眠胶囊质量的方法。方法采用ACE Excel AR C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,柱温30℃,流速为1.0 mL·min^(–1),ELSD漂移管... 详细信息

目的建立舒眠胶囊HPLC-ELSD指纹图谱与化学计量学相结合,全面、系统评价舒眠胶囊质量的方法。方法采用ACE Excel AR C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,柱温30℃,流速为1.0 mL·min^(–1),ELSD漂移管温度50℃,N2流速为3.0 mL·min^(-1)。用HPLC-ELSD对15批次舒眠胶囊进行分析,建立指纹图谱共有模式,采用聚类分析(cluster analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)等化学计量学方法进行区分与比较,寻找导致不同批次间差异的主要标志性成分。结果共确定了16个共有峰,归属了10个共有峰的药材来源,通过对照品比对指认了4个共有峰归属,分别为柴胡皂苷a、芍药内酯苷、芍药苷、槲皮苷,样品相似度均>0.90,CA将样品分为3类,PCA筛选出不同批次间差异的主要标记物,分别为3(芍药苷),14,15号峰。结论本研究建立的HPLC-ELSD指纹图谱与HPLC-DAD指纹图谱相结合能对舒眠胶囊产品一致性、稳定性进行全面有效评价,可用于舒眠胶囊的质量综合评价。

关键词：舒眠胶囊 HPLC-ELSD 指纹图谱化学计量学质量评价

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野生珠芽蓼群落生物学特性与药材品质对海拔和坡向的响应

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中国药学杂志 2022年第3期57卷 181-191页

作者：张开弦陈翠莎任艳刘莎吴发明遵义医科大学贵州遵义563000 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014 西南民族大学药学院民族药物研究所成都610041

目的研究典型生态环境对珠芽蓼生物学特性及药材品质的影响,为高品质珠芽蓼药材生产模式及资源可持续利用与开发奠定基础。方法通过样方调查对3个海拔、2个坡向样地的生态环境特征、种群结构,植物多样性以及珠芽蓼的生物学特征进行测定... 详细信息

目的研究典型生态环境对珠芽蓼生物学特性及药材品质的影响,为高品质珠芽蓼药材生产模式及资源可持续利用与开发奠定基础。方法通过样方调查对3个海拔、2个坡向样地的生态环境特征、种群结构,植物多样性以及珠芽蓼的生物学特征进行测定与统计分析;分别采用烘干法与灼烧失量法测定土壤水分含量与土壤有机质含量。对珠芽蓼性状指标进行测量并采用高效液相色谱法对其主要药效成分没食子酸和绿原酸的含量进行测定。结果珠芽蓼群落物种丰富度呈现低海拔>高海拔,阴坡向>阳坡向的趋势。珠芽蓼在群落中的优势度表现为阴坡向>阳坡向,其中阴坡向随海拔升高呈增大趋势,阳坡向与阴坡向基本一致。植株表型指标随海拔的增高而减小,但药材综合质量则表现为高海拔地区优于低海拔地区。相关性分析表明海拔和坡向对珠芽蓼群落生物学特性与药材品质具有显著的影响,坡向、水分含量、有机质含量和海拔是影响珠芽蓼生物性状的关键生态因子,海拔、生态类型、砂石含量、水分含量和坡向是影响珠芽蓼药材品质的关键生态因子(P<0.01,P<0.05),鲜重、地下干物质量和群落植物多样性是影响珠芽蓼药材品质的关键生物学因子。结论珠芽蓼对海拔和坡向具有一定的选择性,阴坡更适宜珠芽蓼的生长与繁衍,高海拔地区药材质量相对较佳,但种群密度过大则容易滋生病害,同时生长年限过长会造成药用部位枯死炭化。

关键词：珠芽蓼群落海拔坡向中药材

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基于UPLC-MS/MS建立同时测定自发性高血压大鼠主动脉血管内皮细胞中杜仲7个活性成分含量的方法

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中国中药杂志 2023年第13期48卷 3623-3632页

作者：李梦婷胡贺佳金阳陈艺陈思颖李月婷黄勇郑林黄静巩仔鹏贵州医科大学药学院、贵州省药物制剂重点实验室、省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室、民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

该文旨在采用UPLC-MS/MS技术建立同时测定自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)主动脉血管内皮细胞中杜仲7个活性成分京尼平苷酸(genipinic acid,GA)、原儿茶酸(protocatechuic acid,PCA)、新绿原酸(neochlorogenic acid,NCA)、绿原酸(chlorogenic acid,CA)、隐绿原酸(cryptochlorogenic acid,CCA)、松脂醇二葡萄糖苷[(+)-pinoresinol di-O-β-D-glucopyranosid,PDG]、松脂醇单葡萄糖苷[(+)-pinoresinol 4′-O-β-D-glucopyranoside,PG]含量的方法。首先选取合格的SHR模型,采用结扎贴壁法分离、培养原代大鼠主动脉血管内皮细胞(VEC),并进行传代培养,鉴定成功后,以VEC为研究对象,采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(UPLC-MS/MS)建立同时测定VEC中GA、PCA、NCA、CA、CCA、PDG、PG等7个成分含量的方法,包括专属性、线性、基质效应、回收率、准确度、精密度和稳定性等。该文所建方法的最低定量限为0.97~4.95μg·L^(-1),准确度为87.26%~109.6%,提取回收率为89.23%~105.3%,基质效应为85.86%~106.2%,稳定性为86.00%~112.5%,能够满足测量的要求。表明该文建立了快速、准确地同时测定自发性高血压大鼠主动脉血管内皮细胞中杜仲7个活性成分含量的UPLC-MS/MS测定方法,为开展杜仲提取物7个活性成分的细胞药代动力学研究奠定基础。

关键词：杜仲提取物血管内皮细胞京尼平苷酸松脂醇二葡萄糖苷细胞药代动力学

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基于指纹图谱和多指标定量测定的苗药红禾麻质量控制研究

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中草药 2020年第16期51卷 4325-4330页

作者：胡贺佳唐娟陈思颖吴耽肖红琴兰燕宇王爱民席晓岚巩仔鹏贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室民族药与中药开发应用教育部工程研究中心药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院贵州贵阳550004

目的建立合理的苗药红禾麻Laporteabulbifera质量控制方法。方法采用高效液相色谱建立以指纹图谱为特征的多指标定性定量控制方法,对红禾麻12批次的药材进行质量控制,运用指纹图谱相似度评价系统对所测定的指纹图谱进行评价。结果建立... 详细信息

目的建立合理的苗药红禾麻Laporteabulbifera质量控制方法。方法采用高效液相色谱建立以指纹图谱为特征的多指标定性定量控制方法,对红禾麻12批次的药材进行质量控制,运用指纹图谱相似度评价系统对所测定的指纹图谱进行评价。结果建立了同时测定红禾麻药材中10个成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁、异槲皮苷、木犀草苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮苷、表没食子儿茶素、表儿茶素)的多指标质量控制方法,该方法的线性关系、精密度、重复性和稳定性良好,加样回收率为95.89%~98.62%、RSD<3%。同时测定了12批次红禾麻药材的指纹图谱并建立了共有模式,标定共有峰20个,12批次红禾麻药材指纹图谱相似度为0.805~0.931。结论所建立的基于指纹图谱和多指标含量测定的红禾麻质量控制方法,灵敏度高、准确度好、稳定可靠,为控制和评价红禾麻药材的内在质量提供科学依据。

关键词：红禾麻新绿原酸绿原酸隐绿原酸芦丁异槲皮苷木犀草苷山柰酚-3-O-芸香糖苷槲皮苷表没食子儿茶素表儿茶素指纹图谱质量控制

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DNA条形码技术在淫羊藿属植物分类鉴定中的可行性分析

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中华中医药学刊 2021年第3期39卷 69-72,I0015,I0016页

作者：严福林孙庆文任得强徐文芬魏升华何顺志贵州中医药大学药学院贵州贵阳550025 贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550000

目的拟探讨基于叶绿体基因片段psbA-trnH与matK序列的DNA条形码技术在淫羊藿属中的分类与鉴定中的可行性。方法选用不同来源的34个种,共计84份材料,对其psbA-trnH与matK序列片段进行PCR扩增、测序,分析其序列组成和结构特点,应用Kimura... 详细信息

目的拟探讨基于叶绿体基因片段psbA-trnH与matK序列的DNA条形码技术在淫羊藿属中的分类与鉴定中的可行性。方法选用不同来源的34个种,共计84份材料,对其psbA-trnH与matK序列片段进行PCR扩增、测序,分析其序列组成和结构特点,应用Kimura双因素模型(Kimura-2-parameter,K-2-P)计算遗传距离,同时应用邻接法(Neighbor-Joining,N-J)构建系统发育树。结果PsbA-trnH序列在34种淫羊藿属材料中的通用性较matK好;通过K-2-P模型评估,psbA-trnH鉴定成功率为36.7%,matK鉴定成功率为24.2%,2条序列遗传距离均存在一定gap;N-J进化树显示,matK序列N-J系统进化树鉴定效率为17.1%,psbA-trnH序列N-J系统进化树鉴定效率为25.7%。结论本研究丰富了淫羊藿属植物的分类鉴定资料,但在淫羊藿属中的分类与鉴定中,应用基于叶绿体基因片段psbA-trnH与matK序列的DNA条形码技术仍具有一定局限性。

关键词：淫羊藿属 psbA-trnH matK 分类鉴定 DNA条形码

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基于大鼠在体循环肠灌流模型研究不同粒径天麻粉的肠吸收动力学

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中国中药杂志 2020年第1期45卷 179-187页

作者：李梅刘帆陈艳陈亭亭李月婷陈思颖黄勇郑林李勇军王爱民巩仔鹏贵州医科大学药学院贵州省药物制剂重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

为研究不同粒径天麻粉在大鼠体内的吸收特性。该研究基于大鼠在体循环肠灌流模型,建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定不同粒径天麻粉中各成分的累积吸收量,考察不同粒径天麻粉、同一粒径不同质量浓度、不同肠段和胆汁对天麻... 详细信息

为研究不同粒径天麻粉在大鼠体内的吸收特性。该研究基于大鼠在体循环肠灌流模型,建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定不同粒径天麻粉中各成分的累积吸收量,考察不同粒径天麻粉、同一粒径不同质量浓度、不同肠段和胆汁对天麻素等成分的肠吸收的影响,阐明天麻粉中天麻素等成分吸收的特点,并比较不同粒径天麻粉中天麻素等成分的吸收差异。实验结果表明天麻素在各个肠段的吸收没有显著性差异,提示天麻素吸收可能为被动吸收,巴利森苷类化合物吸收为主动吸收。其中天麻素在超微粉中的吸收较好于细粉、极细粉,在高浓度下,巴利森苷类化合物的吸收在超微粉中较好,天麻粉中天麻素等各成分吸收均受到胆汁的影响。因此,适宜的超微粉碎能够提高天麻粉中有效成分的吸收,能为超微粉碎技术应用于天麻的深层次开发提供试验依据。

关键词：在体循环肠灌流模型天麻超微粉肠吸收

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稳定表达CYP2A13和CYP2A13/POR的Flp-In CHO重组细胞系的构建

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中国药理学通报 2022年第5期38卷 795-799页

作者：孙莉陆定艳刘欢何俊奇孙佳王永林李勇军杨畅刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550025 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004

目的分别构建稳定表达细胞色素P450家族2亚家族A成员13(cytochrome P450 family 2 subfamily A member 13,CYP2A13)的Flp-In CHO细胞系(CYP2A13-CHO)和稳定表达CYP2A13和细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In CHO细胞系(CYP2A13-POR-CHO),并从中筛选代谢活性较好的细胞系。方法课题组前期通过慢病毒转染构建了稳定表达POR的Flp-In CHO细胞系(POR-Flp-In CHO)。该文构建了pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒,利用Lipofectamine^(TM) 2000转染试剂将pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒分别转染到Flp-In CHO细胞和POR-Flp-In CHO细胞中。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot和黄曲霉素B1(AFB1)/4-甲基亚硝胺-1-3-吡啶基-1-丁酮(NNK)细胞毒实验来检测CYP2A13的表达及其活性,并比较了CYP2A13-CHO和CYP2A13-POR-CHO两种重组细胞系的代谢活性。结果与未转染的细胞相比,CYP2A13-CHO和CYP2A13-POR-CHO的CYP2A13 mRNA和蛋白的表达量均明显增加。且与CYP2A13-POR-CHO相比,CYP2A13-CHO细胞对AFB1、NNK的敏感度更高。结论建立了稳定表达CYP2A13且代谢活性较好的CYP2A13-CHO细胞系,为后续筛选能被CYP2A13代谢活化的前致癌物提供了工具。

关键词：细胞色素P450家族2亚家族A成员13 细胞色素P450氧化还原酶稳定表达 Flp-In CHO细胞代谢活性前致癌物

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基于UHPLC-Q-TOF-MS^E技术研究红禾麻提取物在大鼠粪便中的代谢产物

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中国中药杂志 2020年第13期45卷 3220-3227页

作者：吴耽李莹陈思颖唐娟李月婷潘洁黄勇郑林王爱民李勇军兰燕宇巩仔鹏贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室民族药与中药开发应用教育部工程研究中心药学院贵州贵阳550004

研究红禾麻提取物在大鼠粪便中的代谢产物。SD大鼠灌胃给予红禾麻提取物(给药剂量为136 g·kg^-1,按生药量计)后,运用超高效液相色谱-串联电喷雾飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF-MS^E)技术对其粪便中的代谢产物进行检测,根据得到的质谱数... 详细信息

研究红禾麻提取物在大鼠粪便中的代谢产物。SD大鼠灌胃给予红禾麻提取物(给药剂量为136 g·kg^-1,按生药量计)后,运用超高效液相色谱-串联电喷雾飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF-MS^E)技术对其粪便中的代谢产物进行检测,根据得到的质谱数据结合UNIFI软件进行预测,结合对照品和相关文献报道,对大鼠粪便中原型成分、代谢产物进行鉴定分析。总共检测出43个代谢产物(包括8个原型成分,35个代谢产物),代谢途径主要包括单咖啡酰基奎宁酸氢化还原、开环裂解、硫酸化、羟基化、葡萄糖醛酸化、槲皮素O-C2键开环裂解、C2-C3双键还原、芦丁羰基化等。研究红禾麻提取物在大鼠粪便中的代谢产物,阐明了其在大鼠粪便中的代谢过程,为该药材的药效物质及其作用机制研究提供了依据。

关键词：红禾麻提取物 UHPLC-Q-TOF-MS^E 代谢产物咖啡酰基奎宁酸黄酮

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基于UPLC-Q-TOF-MS技术的黑骨藤血清药物化学分析

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中国实验方剂学杂志 2019年第6期25卷 125-129页

作者：覃小丽陈浩夏涛黄勇巩仔鹏李月婷李勇军郑林贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室药用植物功效与利用国家重点实验室民族药与中药开发应用教育部工程研究中心药学院贵阳550004

目的:对黑骨藤的血清药物化学进行研究,探讨黑骨藤提取物在大鼠体内的药效物质基础。方法:采用UPLCQ-TOF-MS技术,以及Data Analysis和Metabolite Detect等软件分析,通过比对黑骨藤提取物、含药血清、空白血清指纹图谱以及空白血清与含... 详细信息

目的:对黑骨藤的血清药物化学进行研究,探讨黑骨藤提取物在大鼠体内的药效物质基础。方法:采用UPLCQ-TOF-MS技术,以及Data Analysis和Metabolite Detect等软件分析,通过比对黑骨藤提取物、含药血清、空白血清指纹图谱以及空白血清与含药血清的差异图谱,根据质谱所提供的保留时间、精确相对分子质量以及与对照品的比较,判定口服黑骨藤提取物后在大鼠体内的入血成分。结果:口服黑骨藤提取物后,从血清中检测出17个入血成分,其中10个为原型成分,7个为代谢产物。鉴定了其中7个原型吸收入血成分,依次为5-O-咖啡酰基奎宁酸,4-O-咖啡酰基奎宁酸,3-O-咖啡酰基奎宁酸,3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸,3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸,4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、杠柳毒苷。结论:这些入血成分可能是黑骨藤在体内直接作用的物质,有助于阐明其药效物质基础和作用机制。

关键词：黑骨藤血清药物化学咖啡酰基奎宁酸类药效物质基础杠柳毒苷提取物代谢途径

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