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理化检验（化学分册） 2021年第3期57卷 210-217页

作者：周美王瑜李春燕张明李青魏福晓王道平贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014 中国科学院贵州省天然产物化学重点实验室贵阳550014

为探究李子发酵为李子酵素前后挥发性成分及游离氨基酸的变化规律,采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法(HS-SMPE-GC-MS)和氨基酸分析仪分析了其中的挥发性成分和游离氨基酸。将新鲜的李子样品去核、匀浆、熟化后,加入白砂糖和发酵剂发酵... 详细信息

为探究李子发酵为李子酵素前后挥发性成分及游离氨基酸的变化规律,采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法(HS-SMPE-GC-MS)和氨基酸分析仪分析了其中的挥发性成分和游离氨基酸。将新鲜的李子样品去核、匀浆、熟化后,加入白砂糖和发酵剂发酵3个月制备李子酵素。发酵前后的样品用顶空固相微萃取仪提取挥发性成分,然后通过HP-5MS色谱柱在程序升温条件下分离,用带有电子轰击(EI)离子源的质谱仪测定;通过质谱碎片信息、保留指数、保留时间等进行定性分析。选择LCAK07/Li型标准分析阳离子型交换树脂为固定相,用pH分别为2.90,4.20,8.00的柠檬酸-柠檬酸锂缓冲溶液和0.5mol·L^(-1)的氢氧化锂再生液的混合溶液为流动相进行梯度洗脱,分别在440nm(脯氨酸)和570nm(其他30种氨基酸)检测波长处测定发酵前后样品中的游离氨基酸,定量方法为单点外标法。结果显示:李子酵素中的挥发性成分增加了20种,这是其香气浓郁,风味和口感得到显著改善的主要原因;李子酵素中的游离氨基酸总量降低,必需氨基酸的种类和总含量增加,且新增了牛磺酸、胱氨酸、蛋氨酸、3-甲基组氨酸、1-甲基组氨酸等共5种氨基酸。

关键词：顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法氨基酸分析法挥发性成分游离氨基酸李子李子酵素

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泌淋清胶囊对不同白血病细胞株增殖及凋亡的影响

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贵州医科大学学报 2023年第6期48卷 634-639,646页

作者：秦川霞黎中恒黄磊饶青宋晶睿黄裕兵李艳梅省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室&贵州医科大学基础医学院免疫教研室贵州贵阳550000 贵阳市公共卫生救治中心感染二科贵州贵阳550001

目的探讨泌淋清胶囊(MLQ)对不同白血病细胞株增殖及凋亡的影响。方法取适量MLQ,采用醇提旋蒸冻干方法配制成100 g/L MLQ母液备用;取对数生长期人红白血病细胞株HEL分为125、250及500 mg/L MLQ组及对照组,取对数生长期人慢性髓系白血病细... 详细信息

目的探讨泌淋清胶囊(MLQ)对不同白血病细胞株增殖及凋亡的影响。方法取适量MLQ,采用醇提旋蒸冻干方法配制成100 g/L MLQ母液备用;取对数生长期人红白血病细胞株HEL分为125、250及500 mg/L MLQ组及对照组,取对数生长期人慢性髓系白血病细胞K562分为62.5、125.0、250.0及500.0 mg/L MLQ组及对照组,取对数生长期的人急性淋巴细胞白血病细胞Jurkat分为62.5、125.0及250.0 mg/L MLQ组及对照组,3种细胞均培养不同时间及多个时间点、采用噻唑蓝比色法(MTT)测定各组细胞的存活率;取对数生长期Jurkat细胞,设置150、300及600 mg/L及对照组(600 mg/L浓度等量的溶剂),分别培养24和48 h,采用流式细胞仪检测Jurkat细胞24和48 h的细胞凋亡率。结果各浓度MLQ组于48 h时,细胞株HEL、K562的存活率均随MLQ浓度的增加而降低(P<0.0001),各浓度MLQ组Jurkat细胞的存活率随MLQ浓度的增加而降低、细胞活力随时间的延长而下降(P<0.005或P<0.001或P<0.0001);各浓度MLQ组Jurkat细胞的凋亡率随着MLQ浓度的增加而增高(P<0.0001)。结论MLQ可抑制不同类型白血病细胞(HEL、K562及Jurkat)增殖,促进Jurkat细胞凋亡。

关键词：白血病 Jurkat细胞 K562细胞增殖凋亡泌淋清胶囊 HEL细胞

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石吊兰化学成分和药理作用的研究进展及其质量标志物预测

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中国药房 2021年第11期32卷 1391-1396页

作者：周坤谢家丽李勇军王永林张旭刘春花贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004

目的:了解石吊兰的化学成分和药理作用的研究进展,为石吊兰质量标志物(Q-marker)的筛选和质量控制提供科学依据。方法:对石吊兰的化学成分和药理作用的研究进行归纳与总结,并结合中药Q-marker概念,从化学成分特有性、有效性、可测性、... 详细信息

目的:了解石吊兰的化学成分和药理作用的研究进展,为石吊兰质量标志物(Q-marker)的筛选和质量控制提供科学依据。方法:对石吊兰的化学成分和药理作用的研究进行归纳与总结,并结合中药Q-marker概念,从化学成分特有性、有效性、可测性、入血成分等方面对其Q-marker进行预测分析。结果与结论:石吊兰的主要化学成分包括黄酮类、挥发油、苯乙醇苷类、苯甲醇苷类、植物甾醇类和三帖皂苷类等;其药理作用有抗菌、抗炎、保肝、止咳祛痰、平喘镇静、降血压、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤以及抗过敏等。根据Q-marker核心概念,可将单一成分石吊兰素、木通苯乙醇苷B和isonuomioside A作为石吊兰的Q-marker,将黄酮类、苯乙醇苷类、三萜皂苷类作为石吊兰Q-marker筛选的备选物质。

关键词：石吊兰化学成分药理作用质量标志物质量控制

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PEG模拟干旱胁迫对不同抗旱性玉米品种苗期形态与生理特性的影响

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作物杂志 2021年第1期 82-89页

作者：杨娟姜阳明周芳张军罗海登田山君贵州大学农学院贵州贵阳550025 海南大学热带作物学院海南海口570228 贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014

为探讨玉米(Zea mays L.)苗期对水分亏缺的响应机制,以抗旱性具有显著差异的2个玉米品种为材料,使用PEG-6000溶液模拟不同强度的干旱胁迫,对逆境中玉米苗期的形态及生理生化特性进行分析。结果表明:干旱胁迫后抗旱性强的成单30的株高、... 详细信息

为探讨玉米(Zea mays L.)苗期对水分亏缺的响应机制,以抗旱性具有显著差异的2个玉米品种为材料,使用PEG-6000溶液模拟不同强度的干旱胁迫,对逆境中玉米苗期的形态及生理生化特性进行分析。结果表明:干旱胁迫后抗旱性强的成单30的株高、叶面积、根长及根重呈上升趋势,抗旱性弱的金玉306呈下降趋势;干旱胁迫使成单30的地上部干重、根重和干物重等生物产量增加,而金玉306的各生物产量逐渐下降;干旱胁迫导致玉米的丙二醛含量升高,细胞膜稳定性下降,成单30的变化幅度比金玉306小;干旱胁迫使玉米的叶绿素a/b比值及叶绿素含量下降,类胡萝卜素含量增加;成单30的可溶性糖及可溶性蛋白含量在干旱胁迫后变化不显著,而金玉306在后期才出现显著变化;干旱胁迫后,成单30与金玉306的脯氨酸含量均极显著增加;干旱胁迫使玉米的超氧化物歧化酶、过氧化物酶及过氧化氢酶活性提高。这些结果说明不同抗旱性玉米品种的抗旱机制存在一定差异。

关键词：玉米苗期干旱胁迫响应机制

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头花蓼提取物对左氧氟沙星血浆蛋白结合率的影响

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中南药学 2022年第8期20卷 1793-1798页

作者：王玲袁丽郑林巩仔鹏李月婷潘洁黄勇贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004

目的考察头花蓼提取物对左氧氟沙星血浆蛋白结合率的影响。方法采用超高效液相-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定左氧氟沙星含量,色谱柱为Waters BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)柱,流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水,柱温为45℃,流速... 详细信息

目的考察头花蓼提取物对左氧氟沙星血浆蛋白结合率的影响。方法采用超高效液相-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定左氧氟沙星含量,色谱柱为Waters BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)柱,流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水,柱温为45℃,流速为0.30 mL·min^(-1),进样体积为1μL。以中药灌胃预处理大鼠后,分离血浆与左氧氟沙星作用,通过平衡透析法考察左氧氟沙星在3μg·mL^(-1)、6μg·mL^(-1)两种浓度下,头花蓼提取物对左氧氟沙星血浆蛋白结合率的影响。结果左氧氟沙星在血浆及透析外液浓度范围内线性关系良好,其精密度、准确度、稳定性、提取回收率及基质效应均符合生物样品分析测定要求。左氧氟沙星单独与大鼠血浆作用,血浆蛋白结合率分别为(22.53±3.16)%、(20.03±8.00)%;大鼠灌胃头花蓼提取物预处理后,分离的血浆与左氧氟沙星蛋白结合率显著增加,分别增加至(43.95±4.14)%、(35.27±6.05)%(P<0.05)。结论头花蓼提取物能够使左氧氟沙星的血浆蛋白结合率升高。

关键词：头花蓼提取物左氧氟沙星血浆蛋白结合率 UPLC-MS/MS 平衡透析法

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五倍子单宁酸中没食子酸的去除及其含量测定

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广西大学学报（自然科学版） 2022年第1期47卷 229-234页

作者：李志遥李珂张妮任海宋俊蓉王绍江陈超潘卫东贵州大学药学院贵州贵阳550002 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州省天然药物工程研究中心贵州贵阳550014 贵阳单宁科技有限公司贵州贵阳550001

单宁酸是五倍子提取物中的主要成分,被广泛应用于医药、食品、日化等方面。但由常规方法制备的单宁酸中常含有没食子酸杂质,影响产品的品质和应用。为了提高五倍子单宁酸提取物的纯度,以单宁酸为原料、没食子酸含量为考察指标,采用简单... 详细信息

单宁酸是五倍子提取物中的主要成分,被广泛应用于医药、食品、日化等方面。但由常规方法制备的单宁酸中常含有没食子酸杂质,影响产品的品质和应用。为了提高五倍子单宁酸提取物的纯度,以单宁酸为原料、没食子酸含量为考察指标,采用简单易得的无机碱(碳酸氢钠)选择性去除没食子酸,对单宁酸的提纯工艺进行优化。对优化后的工艺进行放大实验,并考察该方法的适用性。结果表明:纯化前单宁酸中没食子酸质量分数为2.47%,纯化后没食子酸质量分数为0.15%,且该工艺放大至160 kg的规模下仍能够实现重复。本纯化工艺操作简便、经济性好,能够实现高纯度单宁酸的高效制备,具有显著的应用前景和实用价值。

关键词：单宁酸没食子酸精制高效液相色谱方法纯化工艺

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细胞色素P450 3A4基因C239S突变体稳定表达Flp-In^(TM)CHO细胞系的建立

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贵州医科大学学报 2023年第12期48卷 1454-1458页

作者：何俊奇陆定艳陈帅帅李勇军王永林郑江刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 凤冈县妇幼保健院药剂科贵州凤冈564299 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

目的构建稳定表达细胞色素P450家族3亚家族A成员4(CYP3A4)的C239S突变体(CYP3A4-C239S)的Flp-In^(TM)CHO细胞系。方法使用Lipofectamine2000转染试剂将pcDNA5/FRT-CYP3A4-C239S突变型重组质粒和pcDNA5/FRT-空质粒转染至Flp-In TM CHO细胞,潮霉素B(500 g/L)进行稳定筛选,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞中CYP3A4-C239S的mRNA和蛋白表达,采用黄曲霉素B1(AFB1)细胞毒性实验检测细胞活性。结果与Flp-In^(TM)CHO-空质粒组相比,Flp-In^(TM)CHO-3A4-C239S组的CYP3A4-C239S mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P<0.001),AFB1细胞毒性实验显示,CYP3A4-C239S细胞组对AFB1的毒性敏感度显著增加(P<0.001)。结论成功构建了稳定表达CYP3A4-C239S的Flp-In^(TM)CHO细胞系,且为后续研究CYP3A4突变对药物代谢的影响支撑基础。

关键词：细胞色素P4503A4 黄曲霉毒素B1 突变体稳定表达 Flp-In^(TM)CHO细胞

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微波辅助提取刺梨多糖工艺优化及抗肿瘤活性研究

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食品与机械 2021年第9期37卷 160-167页

作者：唐健波吕都潘牧彭梅杨娟贵州省农科院食品加工研究所贵州贵阳550025 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014 贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014

目的:优化微波辅助提取刺梨多糖工艺,并对最优条件下提取的刺梨多糖进行抗肿瘤活性评价。方法:以刺梨多糖得率为考察指标,在单因素试验的基础上,采用响应面试验优化提取工艺参数,并通过建立S180实体瘤模型来进行抗肿瘤活性评价。结果:... 详细信息

目的:优化微波辅助提取刺梨多糖工艺,并对最优条件下提取的刺梨多糖进行抗肿瘤活性评价。方法:以刺梨多糖得率为考察指标,在单因素试验的基础上,采用响应面试验优化提取工艺参数,并通过建立S180实体瘤模型来进行抗肿瘤活性评价。结果:微波辅助提取刺梨多糖的最优工艺条件为微波功率240 W,液料比37∶1 (mL/g),微波时间24 min,微波提取次数3次,此条件下的刺梨多糖得率为(3.19±0.05)%。当灌胃剂量为100 mg/kg时,微波辅助提取刺梨多糖对S180肿瘤小鼠的抑瘤率为(52.13±1.84)%,比超声辅助提取刺梨多糖的抗肿瘤活性更强,并能显著提高肿瘤小鼠的白细胞数量、胸腺指数和脾脏指数。结论:在最优工艺条件下,微波辅助提取的刺梨多糖具有一定的提升肿瘤小鼠免疫能力和抗肿瘤作用,并具有成为功能性食品添加剂的潜力。

关键词：刺梨多糖微波辅助提取抗肿瘤免疫能力

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汉桃叶的化学成分研究

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中药材 2021年第7期44卷 1631-1635页

作者：杨婷李小双黄勇郑林马雪蒋礼李勇军贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004

目的:研究汉桃叶的化学成分。方法:运用D-101大孔树脂柱层析、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、正相硅胶柱等色谱技术进行分离,并运用MS、NMR技术对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果:从汉桃叶的70%乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴... 详细信息

目的:研究汉桃叶的化学成分。方法:运用D-101大孔树脂柱层析、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、正相硅胶柱等色谱技术进行分离,并运用MS、NMR技术对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果:从汉桃叶的70%乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为:芥子醛(1)、香草醛(2)、咖啡酸乙酯(3)、(+)-syringaresinol(4)、erythro-guaiacyl-glycerol-β-coniferyl aldehyde ether(5)、ω-hydro-xypropioguaiacone(6)、5-hydroxymethyl-furfural(7)、对苯二酚(8)、3,4-dihydroxybenzaldehyde(9)、threo-1,2-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-propane-1,3-diol(10)、erythro-1,2-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-propane-1,3-diol(11)、coniferaldehyd(12)、3-表-白桦脂酸(13)、3-表-齐墩果酸(14)、kobophenol A(15)。结论:其中,化合物1、3~12、15为首次从鹅掌柴属植物中分离得到。

关键词：汉桃叶化学成分结构鉴定

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细胞色素P4502E1稳定转染Flp-In^(TM)CHO细胞模型的建立

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贵州医科大学学报 2022年第12期47卷 1390-1395页

作者：赵永龙郭玮钰龙昌兰陆定艳陈帅帅李勇军刘亭贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004

目的构建稳定表达细胞色素P450家族2亚家族E成员1(CYP2E1)的Flp-In^(TM)CHO细胞系,并进行药物相互作用筛选。方法利用Lipofectamine■2000转染试剂将pcDNA5/FRT-CYP2E1重组质粒和pcDNA5/FRT-空质粒-并转染Flp-In^(TM)CHO细胞,采用潮霉素B(500 mg/L)进行稳定性筛选、聚合酶链式反应(PCR)检测细胞中是否成功插入能够表达CYP2E1酶的目的基因、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中CYP2E1 mRNA和蛋白表达,采用对乙酰氨基酚(APAP)检测CYP2E1酶对APAP的毒性敏感性。结果与Flp-In^(TM)CHO空质粒组比较,PCR结果显示Flp-In^(TM)CHO-CYP2E1细胞分别在2000 bp、200 bp左右有CYP2E1酶目的基因的明显条带;qRT-PCR和Western blot结果显示,Flp-In^(TM)CHO-CYP2E1细胞的CYP2E1 mRNA和蛋白表达水平均明显增加(P<0.001);APAP检测结果显示CYP2E1酶对APAP的毒性敏感性也显著增强。结论成功构建了稳定表达CYP2E1的Flp-In^(TM)CHO细胞模型,且表达的CYP2E1酶对APAP的毒性敏感性增强。

关键词：细胞色素P450家族2亚家族E成员1 稳定表达 Flp-In^(TM)CHO细胞蛋白免疫印迹法实时荧光定量PCR 转染

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