检索结果-内蒙古大学图书馆

郑州大学学报（医学版） 2018年第4期53卷 443-447页

作者：朱红王春王芳邹叶芳陈晓雪刘亭李燕何彬贵州医科大学药学院贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004 贵州医科大学基础医学院化学教研室贵阳550004 贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004

目的:获得表达量较高且有活性的人源SIRT4蛋白。方法:将SIRT4基因克隆到p PICZA载体上,得到重组p PICZA-SIRT4表达质粒。重组质粒线性化后转入到巴斯德毕赤酵母X33感受态细胞中,筛选出阳性菌株。将阳性重组菌株发酵培养,并对诱导剂甲醇... 详细信息

目的:获得表达量较高且有活性的人源SIRT4蛋白。方法:将SIRT4基因克隆到p PICZA载体上,得到重组p PICZA-SIRT4表达质粒。重组质粒线性化后转入到巴斯德毕赤酵母X33感受态细胞中,筛选出阳性菌株。将阳性重组菌株发酵培养,并对诱导剂甲醇浓度进行优化,表达蛋白用镍柱His TrapTMHP进行纯化,并对表达的蛋白进行活性考察。结果:SDS-PAGE显示表达的SIRT4目的蛋白大小约33 000,与预期蛋白相对分子质量大小相符,进一步利用His标签抗体通过Western blot确认了目标蛋白,并且初步验证了SIRT4的去生物素酰化和去硫辛酰化的活性。结论:成功用巴斯德毕赤酵母表达了有活性的SIRT4蛋白,并且获得酵母表达的最佳诱导条件。

关键词：人源SIRT4蛋白巴斯德毕赤酵母胞内表达

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HPLC结合化学计量学法的毛大丁草指纹图谱研究

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中药材 2019年第1期42卷 126-130页

作者：游景瑞熊丹丹刘春花潘洁王爱民邹颖王永林贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学医药卫生管理学院贵州贵阳550004

目的:建立不同产地毛大丁草的HPLC指纹图谱,对不同产地毛大丁草的质量进行评价。方法:采用Phenomenex Gemini C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;进样量为10μL;检测波长:280 ... 详细信息

目的:建立不同产地毛大丁草的HPLC指纹图谱,对不同产地毛大丁草的质量进行评价。方法:采用Phenomenex Gemini C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;进样量为10μL;检测波长:280 nm;柱温:40℃。采用相似度分析、聚类分析、主成分分析三种方法对指纹图谱进行分析。结果:建立了毛大丁草的HPLC指纹图谱,确定了14个共有峰,并指认了其中6个成分。29批毛大丁草指纹图谱的相似度为0.945~0.996。聚类分析结果表明所有样品分为3类。PCA结果表明前3个主成分的累计方差贡献率为89.408%,可对毛大丁草药材进行综合评价。聚类分析和主成分分析结果与相似度评价结果一致。结论:本研究首次建立了毛大丁草药材的HPLC指纹图谱,该方法简单、易行,为毛大丁草药材的质量控制提供了全面、有效的快速评价方法。

关键词：毛大丁草指纹图谱聚类分析主成分分析质量控制

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多波长HPLC法同时测定黔产泽漆中3个有效成分的含量

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中国药房 2018年第21期29卷 2958-2961页

作者：周孟李芮邓连力张荣红李勇军王永林巩仔鹏贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵安新区550025 贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/国家苗药工程技术研究中心贵阳550004

目的:建立同时测定黔产泽漆中没食子酸、原儿茶酸和金丝桃苷含量的方法,为泽漆药材及其相关产品质量标准的制定奠定基础。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法。色谱柱为X-brige C_(18);流动相为乙腈-1%乙酸溶液(梯度洗脱);没食子酸、原儿茶... 详细信息

目的:建立同时测定黔产泽漆中没食子酸、原儿茶酸和金丝桃苷含量的方法,为泽漆药材及其相关产品质量标准的制定奠定基础。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法。色谱柱为X-brige C_(18);流动相为乙腈-1%乙酸溶液(梯度洗脱);没食子酸、原儿茶酸和金丝桃苷检测波长分别为271、259、256 nm;柱温为30℃;流速为1 mL/min;进样体积为10μL。结果:没食子酸、原儿茶酸和金丝桃苷的进样量线性范围分别为0.005 6～0.089 6、0.003 6～0.057 3、0.017 2～0.275 5 mg/mL(R2分别为0.999 9、0.999 7、1.000 0),检测限分别为31.43、39.64、49.05 ng/mL,定量限分别为78.58、99.10、122.63 ng/mL,精密度(n=6)、稳定性(n=6)、重复性(n=9)试验的RSD均小于3.0%,回收率为100.24%～101.64%(RSD小于2.0%,n=9)。结论:本研究建立的HPLC法简便、准确,适用于黔产泽漆中没食子酸、原儿茶酸和金丝桃苷含量的同时测定。

关键词：黔产泽漆高效液相色谱法含量测定多波长

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苗药羊耳菊中7个抗炎活性成分在Raw264.7细胞中含量测定方法的建立

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江苏大学学报（医学版） 2022年第6期32卷 524-531页

作者：周杰薛寸张青陈思颖陈艺黄静李月婷黄勇郑林巩仔鹏贵州医科大学药学院贵州省药物制剂重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

目的:建立同时测定Raw264.7细胞中羊耳菊提取物中7个抗炎活性成分木犀草苷(luteolin,LUT)、绿原酸(chlorogenic acid,CA)、新绿原酸(neochlorogenic acid,NCA)、隐绿原酸(cryptochlorogenic acid,CCA)、3,4-二咖啡酰基奎宁酸(3,4-dicaffeoylquinic acid,3,4-DCQA)、3,5-二咖啡酰基奎宁酸(3,5-dicaffeoylquinic acid,3,5-DCQA)、4,5-二咖啡酰基奎宁酸(4,5-dicaffeoylquinic acid,4,5-DCQA)含量的方法。方法:以小鼠巨噬细胞Raw 264.7为研究对象,采用超高液相色谱-三重四级杆质谱联用仪(UPLC-MS/MS)建立同时测定Raw 264.7细胞中LUT、CA、NCA、CCA、3,4-DCQA、3,5-DCQA、4,5-DCQA等7个成分含量的方法,包括专属性、线性、基质效应、回收率、准确度、精密度和稳定性等。结果:建立了一个快速稳定测量Raw264.7细胞中微量药物的分析方法,该方法的最低定量限为0.48~3.84 ng/mL,准确度为(90.78±5.30)%~(113.99±13.51)%,提取回收率为(87.19±5.33)%~(103.59±14.00)%,基质效应为(94.50±15.17)%~(112.77±7.02)%,稳定性为(91.71±11.70)%~(109.45±10.63)%,能够满足测量的要求。结论:建立了快速、准确的同时测定Raw264.7细胞羊耳菊提取物中7个活性成分(LUT、CA、NCA、CCA、3,4-DCQA、3,5-DCQA、4,5-DCQA)含量的UPLC-MS/MS方法,为开展羊耳菊提取物的细胞药代动力学研究奠定基础。

关键词：羊耳菊提取物 Raw264.7细胞抗炎成分绿原酸细胞药代动力学 UPLC-MS/MS

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参芎葡萄糖注射液抗H9c2细胞凋亡的机制

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贵州医科大学学报 2021年第11期46卷 1277-1282,1288页

作者：吴忠秀陆定艳杨畅何彬李勇军王永林刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004

目的运用网络药理学技术结合细胞体外实验,探究参芎葡萄糖注射液(SGI)的抗细胞凋亡途径。方法采用中药系统药理学平台(TCMSP)和SwissTarget Prediction数据库检索SGI可能的作用靶点,并运用DAVID数据库(DAVID)平台进行京都基因与基因组... 详细信息

目的运用网络药理学技术结合细胞体外实验,探究参芎葡萄糖注射液(SGI)的抗细胞凋亡途径。方法采用中药系统药理学平台(TCMSP)和SwissTarget Prediction数据库检索SGI可能的作用靶点,并运用DAVID数据库(DAVID)平台进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集、基因本体(GO)功能分析,预测SGI抗凋亡机制;体外培养H9c2细胞,将细胞分为空白组(Con组)、模型组(H_(2)O_(2)组)和SGI低、中、高浓度组,Con组加入完全培养基,H_(2)O_(2)组用300μmol/L H_(2)O_(2)处理0.5 h,SGI低、中、高浓度组分别用100、200、400μmol/L SGI预处理6 h后,用300μmol/L H_(2)O_(2)处理0.5 h;利用H_(2)O_(2)建立H9c2细胞凋亡模型,流式细胞术检测线粒体膜电位(MMP)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测H9c2细胞中细胞色素C(Cyt-c)的表达水平。结果网络药理学分析结果显示,SGI的12个成分涉及142个靶点,KEGG通路富集涉及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-AKT)信号通路等,GO功能分析主要富集在线粒体外膜和线粒体,其生物过程与线粒体膜电位的调控有关;流式细胞术和Western blot实验结果显示,与H_(2)O_(2)组比较,SGI低、中、高浓度组均显著增加H_(2)O_(2)诱导H9c2细胞中的MMP(P<0.001),并显著降低Cyt-c的释放(P<0.001)。结论SGI可能通过线粒体途径拮抗H_(2)O_(2)诱导的H9c2细胞凋亡。

关键词：细胞凋亡参芎葡萄糖注射液 H9c2细胞网络药理学线粒体途径线粒体膜电位细胞色素C

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从2005—2023年国家自然科学基金资助项目浅谈中药多糖的研究现状

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中草药 2024年第4期55卷 1053-1062页

作者：吴建军邹剑马致洁徐愿巩仔鹏刘学伟国家自然科学基金委员会医学科学部十处北京100085 浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 暨南大学药学院广东广州511443 首都医科大学附属北京友谊医院药学部北京100050 中日友好医院中医风湿病科北京100029 贵州医科大学药学院贵州省药物制剂重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

该文通过对2005—2023年国家自然科学基金中医药领域资助的中药多糖相关的项目进行回顾性分析,系统梳理和总结中药多糖的研究内容和热点。分析发现,中药多糖的主要研究内容集中于“活性及作用机制”“构效关系”和“吸收和代谢”等方面... 详细信息

该文通过对2005—2023年国家自然科学基金中医药领域资助的中药多糖相关的项目进行回顾性分析,系统梳理和总结中药多糖的研究内容和热点。分析发现,中药多糖的主要研究内容集中于“活性及作用机制”“构效关系”和“吸收和代谢”等方面,主要研究热点包括“黄芪多糖”“肠道菌群”“当归多糖”和“枸杞多糖”等。最后提出了我国中药多糖研究领域主要存在的3个潜在问题:多糖化学结构的表征技术无法满足实际需求;多糖吸收与代谢途径的有待明确;中药多糖与小分子的整体协同作用有待阐明。旨在为今后我国中药多糖的研究者提供参考,并为相关项目的申请者提供借鉴。

关键词：国家自然科学基金中药多糖活性及作用机制构效关系吸收和代谢黄芪多糖肠道菌群当归多糖枸杞多糖

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基于SPSS的贵州中药饮片外源性污染现状分析

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中药材 2019年第4期42卷 765-769页

作者：田海玉孙佳吕婷朱迪薛维娜兰燕宇贵州医科大学医药卫生管理学院贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵阳中医学院第一附属医院贵州贵阳550001 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

目的:调查贵州省不同来源、不同药用部位的中药饮片外源性污染现状,综合分析本地区的污染情况。方法:研究收集了贵州省不同来源的中药饮片286批,对其重金属及有害元素、有机氯及菊酯类农药残留、二氧化硫、黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2进... 详细信息

目的:调查贵州省不同来源、不同药用部位的中药饮片外源性污染现状,综合分析本地区的污染情况。方法:研究收集了贵州省不同来源的中药饮片286批,对其重金属及有害元素、有机氯及菊酯类农药残留、二氧化硫、黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2进行了测定,采用内梅罗综合污染指数法、因子分析法,通过SPSS 22.0软件对测定结果进行统计分析。结果:不同来源的中药饮片中,来源于药材集散市场的饮片外源性污染超标率较高;不同药用部位的中药饮片中污染严重程度依次为动物类>叶类>花类,根茎类和果仁类基本属于清洁级;通过对关键污染因子进行统计分析,结果表明本地区中药饮片中外源性综合污染影响权重依次为Cd、Pb>Hg、As>Cu>SO2,可见本地区的外源性污染物主要为重金属及有害元素。结论:该研究可为本地区药材种植、加工及管理提供理论依据及建议。

关键词：中药饮片外源性污染物污染现状

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合欢花HPLC指纹图谱模式识别及含量测定研究

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中国民族民间医药 2020年第18期29卷 46-51页

作者：李银聂雨杉彭潇马雪潘洁陆苑李勇军贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004

目的:建立合欢花药材HPLC指纹图谱分析方法,结合模式识别与含量测定为其质量控制提供科学依据。方法:采用HPLC法,Waters CORTECS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7μm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长27... 详细信息

目的:建立合欢花药材HPLC指纹图谱分析方法,结合模式识别与含量测定为其质量控制提供科学依据。方法:采用HPLC法,Waters CORTECS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7μm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长270 nm。通过相似度分析、主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析对16批合欢花指纹图谱进行评价,寻找合欢花的主要差异性化学成分,并测定其含量。结果:建立了合欢花药材的指纹图谱,确定12个共有峰,并指认了其中3个共有峰,16批药材相似度均大于0.90。根据聚类分析结果,可将16批药材聚为2类,通过主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析确定槲皮苷为合欢花的主要差异性化学成分,方法学考察符合规定,RSD均小于3.0%。结论:该方法精密度高、重现性好,可为合欢花药材质量控制与评价提供参考。

关键词：合欢花高效液相色谱法指纹图谱模式识别含量测定质量控制

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荭草提取物对异丙肾上腺素诱导大鼠急性心肌缺血的作用及机制

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贵州医科大学学报 2021年第3期46卷 275-280页

作者：孙佳潘洁秦兰杨淑婷刘春花徐兴莲王永林陆苑贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025

目的探讨荭草提取物对异丙肾上腺素(ISO)诱导急性心肌缺血(MI)模型大鼠的作用及机制。方法30只清洁级Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠随机均分为正常组、模型组、阳性对照组、荭草低剂量组及荭草高剂量组,后4组大鼠采用50 mg/kg ISO皮下注... 详细信息

目的探讨荭草提取物对异丙肾上腺素(ISO)诱导急性心肌缺血(MI)模型大鼠的作用及机制。方法30只清洁级Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠随机均分为正常组、模型组、阳性对照组、荭草低剂量组及荭草高剂量组,后4组大鼠采用50 mg/kg ISO皮下注射制备大鼠急性MI模型,造模结束后,正常组和模型组大鼠蒸馏水灌胃、阳性对照组用1 g/kg复方丹参片溶液灌胃、红草低剂量组用3.2 g/kg荭草提取液灌胃、红草高剂量组用6.4 g/kg荭草提取液灌胃,2次/d,连续3 d;末次给药后0.5、2.0及6.0 h,采用针状电极监测各组大鼠心电图(ECG)ST段的偏移程度;于同时点取各组大鼠尾静脉血检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)及磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平;末次取血结束后,取心脏制作切片、苏木精-伊红(HE)染色,观察各组大鼠心肌组织学改变。结果与正常组比较,模型组大鼠ECG ST段、血清LDH及CK-MB均明显升高,但血清SOD含量明显降低(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组、荭草低及高剂量组大鼠ECG ST段、血清LDH及CK-MB均降低,但血清SOD含量均升高(P<0.05或P<0.01);模型组大鼠心肌细胞变性坏死、伴有出血、大量炎性细胞浸润,荭草提取物各组大鼠较模型组的心肌细胞病变明显减轻。结论荭草提取物对ISO致大鼠急性MI具有保护作用,且起效迅速,其机制可能与降低缺血大鼠心肌酶的水平、提高心肌的抗氧化能力及减轻氧化应激反应有关。

关键词：异丙肾上腺素心肌缺血乳酸脱氢酶类超氧化物歧化酶荭草磷酸肌酸激酶同工酶药效

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载阿霉素纳米粒温敏凝胶复合体系的体内缓释性能和抗肿瘤作用及瘤内滞留性能评价

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贵州医科大学学报 2024年第3期49卷 361-367,374页

作者：杜华康陆苑金阳陈玉颖王永林李勇军刘文贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004

目的探讨载阿霉素(DOX)纳米粒温敏凝胶(DOX-NPs-Gel)复合体系的体内缓释性能、抗肿瘤作用及瘤内滞留性能。方法18只SD雄性大鼠随机均分为DOX组、DOX-碘油组(4 g/L DOX溶液1 mL与碘油1 mL混匀现配,5 mL/kg)及DOX-NPs-Gel组(5 mg/kg DOX+2... 详细信息

目的探讨载阿霉素(DOX)纳米粒温敏凝胶(DOX-NPs-Gel)复合体系的体内缓释性能、抗肿瘤作用及瘤内滞留性能。方法18只SD雄性大鼠随机均分为DOX组、DOX-碘油组(4 g/L DOX溶液1 mL与碘油1 mL混匀现配,5 mL/kg)及DOX-NPs-Gel组(5 mg/kg DOX+2 g/L DOX),腹腔注射,分别于给药后不同时间点经眼底静脉丛穿刺取血,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术检测血浆中DOX的浓度,利用WinNonLin 8.1软件拟合主要药代参数[半衰期(t 1/2)、峰浓度(C max)、曲线下面积(AUC)、清除率(CL)、平均驻留时间(MRT)];培养、收集小鼠肝癌细胞株H22细胞制成悬液,单次接种于90只雄性ICR小鼠右腋皮下构建荷瘤模型,分2部分进行实验,第一部分取荷瘤小鼠36只均分为生理盐水组(注射用生理盐水,5 mL/kg)、空白NPs-Gel组(100 mg空白NPs冻干粉分散于1 mL空白Gel,5 mL/kg)、碘油组(碘油,5 mL/kg)、DOX组(2 g/L DOX,5 mL/kg)、DOX-碘油组(4 g/L DOX溶液1 mL与碘油1 mL混匀现配,5 mL/kg)及DOX-NPs-Gel组(2 g/L DOX,5 mL/kg),瘤内注射、给药1次,观测10 d,给药后每2天称体质量1次并计算各组小鼠的体质量变化百分比,称重后同时测量各组小鼠瘤体宽度、长度并计算肿瘤体积(V),观测结束时脱颈处死、剥离肿瘤组织,称取各组小鼠瘤体质量并计算抑瘤率,然后制作切片采用苏木精-伊红(HE)染色观察组织学特征;第二部分取荷瘤小鼠54只均分为DOX组、DOX-碘油组及DOX-NPs-Gel组,给药剂量和途径同前,给药后12、24、48、72、96及120 h时取各组3只小鼠脱颈处死,剥离肿瘤组织,采用UPLC-MS/MS检测瘤体组织中各时间点的DOX瘤内滞留率。结果体内缓释性能研究结果显示,相比于其余组,DOX-NPs-Gel组大鼠t 1/2延长、CL降低(P<0.05);抗肿瘤作用考察结果显示,与其它治疗组相比,DOX-NPs-Gel组小鼠肿瘤组织生长最慢,瘤重降低(P<0.05),抑瘤率最高(76.55%),HE染色显示肿瘤组织出现大范围凋亡和坏死情况;瘤内滞留性能考察结果显示,DOX-NPs-Gel组小鼠第5天时滞留率为(44.14±3.84)%,其余组第4天时滞留率已降至0%。结论与DOX和DOX-碘油相比,DOX-NPs-Gel在动物体内具有更强的缓释性能、抗肿瘤作用及瘤内滞留性能。

关键词：纳米粒温敏凝胶药代动力学抗肿瘤作用缓释作用肝动脉化疗栓塞术

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