检索结果-内蒙古大学图书馆

基于蛋白质组学分析参芎葡萄糖注射液拮抗H_(2)O_(2)诱导H9c2细胞氧化损伤的作用机制

中国实验方剂学杂志 2022年第1期28卷 141-149页

作者：陆定艳吴忠秀孙佳陆苑王永林李勇军郑林刘亭贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550025

目的:利用串联质谱标记(TMT)定量蛋白质组学技术探究参芎葡萄糖注射液(SGI)拮抗过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导H9c2细胞氧化损伤的作用机制。方法:体外培养H9c2细胞,H_(2)O_(2)诱导H9c2细胞建立氧化损伤模型,利用细胞增殖与毒性检测法(MTS)... 详细信息

目的:利用串联质谱标记(TMT)定量蛋白质组学技术探究参芎葡萄糖注射液(SGI)拮抗过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导H9c2细胞氧化损伤的作用机制。方法:体外培养H9c2细胞,H_(2)O_(2)诱导H9c2细胞建立氧化损伤模型,利用细胞增殖与毒性检测法(MTS)检测细胞存活率,高效液相色谱法(HPLC)进行肽段分级,超高效液相色谱-质谱联用技术检测H9c2细胞的蛋白表达,使用MaxQuant(v1.5.2.8)进行数据检索,高分辨质谱定量分析筛选差异表达蛋白,通过基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对差异表达蛋白进行生物信息学分析,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内脂质结合蛋白2(Plin2)和原肌球蛋白1(Tpm1)的蛋白表达水平进行验证。结果:通过谱图解析鉴定有48608个特异性肽段,5903个可定量蛋白。与模型组比较,SGI组有82个差异表达的蛋白,其中有22个蛋白上调,60个蛋白下调。GO分析结果显示,差异表达蛋白主要参与程序性细胞死亡调节、细胞增殖调控、心血管系统发育和细胞迁移等生物进程。KEGG分析结果表明,这些蛋白与过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR),黏着斑和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt),Ras相关蛋白1(Rap1)等通路有关。Western blot结果显示,与模型组比较,SGI能显著增加Plin2蛋白表达水平,显著降低Tpm1蛋白表达水平(P<0.01),与蛋白质组学结果一致。结论:提示SGI可能通过调控PPAR,黏着斑,PI3K/Akt和Rap1等通路抑制细胞凋亡,从而拮抗H_(2)O_(2)诱导细胞氧化损伤,但需要后续实验进一步验证研究。

关键词：参芎葡萄糖注射液氧化损伤蛋白质组学过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)通路黏着斑通路磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路 Ras相关蛋白1(Rap1)通路

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黑骨藤靶向TNF-α抗类风湿关节炎的药效物质基础分析

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中国实验方剂学杂志 2022年第3期28卷 187-195页

作者：曹陶涛杨畅孙佳王永林刘春花李勇军何彬刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004

目的:应用网络药理学和实验验证,分析黑骨藤靶向肿瘤坏死因子-α(TNF-α)治疗类风湿关节炎的药效物质基础。方法:课题组前期研究发现黑骨藤醇提组分(CDLF,CQAF)具有显著抗类风湿关节炎(RA)活性,并鉴定出10个具有抗RA的活性单体。应用酶... 详细信息

目的:应用网络药理学和实验验证,分析黑骨藤靶向肿瘤坏死因子-α(TNF-α)治疗类风湿关节炎的药效物质基础。方法:课题组前期研究发现黑骨藤醇提组分(CDLF,CQAF)具有显著抗类风湿关节炎(RA)活性,并鉴定出10个具有抗RA的活性单体。应用酶联免疫吸附测定法(ELISA),以白细胞介素-6(IL-6),一氧化氮(NO),白细胞介素-1β(IL-1β)和前列腺素E(2 PGE2)为指标比较活性单体,CDLF和CQAF组分抗RA活性;网络药理学分析黑骨藤抗RA可能的分子机制;TNF-α分子对接、表面等离子分子互作(SPR)技术和TNF-α诱导L929损伤模型验证黑骨藤化学单体靶向TNF-α能力。结果:ELISA发现,CDLF和CQAF组分抗RA活性明显高于鉴定出的10个活性单体;网络药理学分析,发现黑骨藤抗RA的核心靶点为信号传导及转录因子3(STAT3),肿瘤坏死因子(TNF)和IL-6,基因本体(GO)富集有胶原分解代谢、炎症反应,核转录因子(NF)-κB转录因子活性的正调控,B细胞增殖的正调控等,基于京都基因与基因组百科全书(EKGG)富集有TNF信号通路,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路,NF-κB信号通路,Toll样受体信号通路,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路等;TNF-α分子对接,SPR技术和TNF-α诱导L929损伤模型实验发现,CDLF和CQAF组分具有较好的结合并拮抗TNF-α的活性,但从两组分中分离鉴定的活性成分,并没有表现出与CDLF和CQAF组分一致的抗TNF-α活性。结论:黑骨藤的CDLF和CQAF组分可能通过靶向TNF-α治疗RA,实验发现已分离的化学成分与TNF-α结合活性低于CDLF和CQAF组分,同时课题组在黑骨藤药材中分离到最低质量分数为0.25 ng·g^(-1)的化学成分,说明与TNF-α结合而产生抗RA活性成分可能为痕量成分。

关键词：类风湿关节炎黑骨藤网络药理学肿瘤坏死因子(TNF)-α 分子对接

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利用超高效液相色谱质谱联用分析羊耳菊7种成分在大鼠尿液中的排泄过程

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中国药学杂志 2019年第21期54卷 1797-1803页

作者：黎娜杨淑婷陆苑巩仔鹏李勇军曹闯王永林贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550004

目的建立UPLC-MS/MS分析方法,同时测定羊耳菊提取物中7种成分在SD大鼠尿液中的含量,并对其在大鼠尿液中的排泄进行研究。方法大鼠灌胃羊耳菊提取物后,分别收集给药后0~2、2~6、6~12、12~24、24~36h时间段的尿液。色谱柱采用AcquityUPLCB... 详细信息

目的建立UPLC-MS/MS分析方法,同时测定羊耳菊提取物中7种成分在SD大鼠尿液中的含量,并对其在大鼠尿液中的排泄进行研究。方法大鼠灌胃羊耳菊提取物后,分别收集给药后0~2、2~6、6~12、12~24、24~36h时间段的尿液。色谱柱采用AcquityUPLCBEHC18(2.1mm×50mm,1.7μm),柱温45℃,0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.25mL·min^-1。质谱采用电喷雾离子源(ESI),正负离子扫描,多反应离子监测(MRM)模式进行定量。结果7种成分在测定浓度范围内线性关系良好(r≥0.9910),日内、日间精密度RSD<15%,稳定性良好,提取回收率大于84.41%,不存在明显的基质效应,符合要求。结论UPLC-MS/MS方法简便、快捷、灵敏度高,可用于SD大鼠尿液中羊耳菊提取物7种成分的含量测定。大鼠尿液排泄结果显示,7种成分在尿液中的原型排泄率均较低,累积排泄率不足5%。

关键词：超高效液相色谱质谱联用羊耳菊含量测定尿液排泄

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正交实验优化金骨莲胶囊的提取工艺研究

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中国新药杂志 2022年第5期31卷 464-469页

作者：张熊莉付志丽刘慧肖金超蒲健袁红飞李勇军郑林黄勇贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室贵州医科大学药学院贵州益佰制药股份有限公司贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心

目的:优化金骨莲胶囊的提取工艺。方法:设计正交实验，采用UPLC-MS测定提取液中富马酸、鹅掌楸苷、滇白珠苷A的含量，以各成分的转移率和流浸膏得率为评价指标，优选出金骨莲胶囊中透骨香、汉桃叶、大血藤和八角枫这4味药材的提取工艺... 详细信息

目的:优化金骨莲胶囊的提取工艺。方法:设计正交实验，采用UPLC-MS测定提取液中富马酸、鹅掌楸苷、滇白珠苷A的含量，以各成分的转移率和流浸膏得率为评价指标，优选出金骨莲胶囊中透骨香、汉桃叶、大血藤和八角枫这4味药材的提取工艺；采用比色法测定金铁锁总皂苷的含量，以总皂苷转移率和总固体得率为指标，优选金铁锁的提取工艺。结果:透骨香等4味药材的优选提取工艺为加4倍水提取3次、每次2 h;金铁锁的优选提取工艺为加5倍水提取1次、每次2 h。结论:此方法简单可行、重复性好、提取效率高，可用于金骨莲胶囊的提取工艺。

关键词：金骨莲胶囊提取工艺滇白珠苷A 富马酸鹅掌楸苷总皂苷

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UPLC-MS/MS同时测定舒肝宁注射液在大鼠血浆中4种活性成分的含量及其药代动力学研究

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中国中药杂志 2020年第11期45卷 2626-2633页

作者：康宁芳李梅胡贺佳肖红琴刘利琴李银李月婷王爱民王永林张昀何峰巩仔鹏贵州医科大学药学院贵州省药物制剂重点实验室省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州瑞和制药有限公司贵州贵阳550000

该研究旨在揭示舒肝宁注射液在正常大鼠体内的药代动力学特征。实验采用超高液相色谱-电喷雾-串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)技术建立大鼠血浆样品中同时测定绿原酸、栀子苷、千层纸素A及黄芩苷4个活性成分的分析方法,并使用WinN onL in 6.4... 详细信息

该研究旨在揭示舒肝宁注射液在正常大鼠体内的药代动力学特征。实验采用超高液相色谱-电喷雾-串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)技术建立大鼠血浆样品中同时测定绿原酸、栀子苷、千层纸素A及黄芩苷4个活性成分的分析方法,并使用WinN onL in 6.4软件中的非房室模型(NCA)进行药代动力学参数的拟合。经方法学验证,大鼠血浆样品中各成分的线性关系良好(r>0.995),低、中、高剂量的血浆样品的提取回收率和基质效应在79.14%~101.4%。日内、日间精密度、准确度和稳定性均符合生物样品分析要求。药代动力学参数结果表明,绿原酸、栀子苷、千层纸素A在实验剂量下的半衰期(t1/2)没有发生显著性变化,药时曲线下面积(AUC0-t)与剂量成正比,提示3种成分在体内表现出线性动力学的特征,而黄芩苷表现出非线性动力学特征,且各成分在大鼠体内的滞留时间短。建立的UPLC-MS/MS定量分析方法快速、灵敏、准确,可用于大鼠血浆中绿原酸、栀子苷、千层纸素A以及黄芩苷的测定及舒肝宁注射液的药代动力学研究。

关键词：舒肝宁注射液绿原酸栀子苷千层纸素A 黄芩苷药代动力学

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醒脾养儿颗粒化学成分鉴定

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中成药 2024年第4期46卷 1395-1401页

作者：姜玮李银马雪刘春花刘亭潘洁王永林贵州医科大学药学院民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004

目的运用UHPLC-QE-Orbitrap-HRMS法鉴定醒脾养儿颗粒化学成分。方法分析采用Hypersil GOLD C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.9μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;柱温30℃;进样量2μL;热电喷雾离子源(HESI);... 详细信息

目的运用UHPLC-QE-Orbitrap-HRMS法鉴定醒脾养儿颗粒化学成分。方法分析采用Hypersil GOLD C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.9μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;柱温30℃;进样量2μL;热电喷雾离子源(HESI);正负离子模式下分别进行一级、二级高分辨质谱数据采集,并根据对照品、数据库及文献报道进行鉴定。结果共鉴定出95个化合物,包括32个有机酸类、31个黄酮类、5个香豆素类、2个生物碱类、3个醛类、4个氨基酸类、7个核苷类和11个其他类。结论 UHPLC-QE-Orbitrap-HRMS法能快速、准确地鉴定醒脾养儿颗粒化学成分,可为该制剂进一步的药效物质基础和质量控制研究提供依据。

关键词：醒脾养儿颗粒化学成分 UHPLC-QE-Orbitrap-HRMS

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白及有效部位中主要成分在Caco-2细胞中的吸收特性研究

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中国中药杂志 2019年第1期44卷 167-174页

作者：杨淑婷潘洁陆苑梅朝叶刘亭黄勇王永林贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004

为研究白及有效部位中主要成分在Caco-2细胞中的吸收特性,初步阐明白及有效部位的口服吸收机制。该实验采用Caco-2细胞单层细胞吸收模型,通过UPLC-Q-TOF分析白及有效部位在Caco-2细胞中的摄取成分,并建立UPLC-TQD分析方法测定白及有效... 详细信息

为研究白及有效部位中主要成分在Caco-2细胞中的吸收特性,初步阐明白及有效部位的口服吸收机制。该实验采用Caco-2细胞单层细胞吸收模型,通过UPLC-Q-TOF分析白及有效部位在Caco-2细胞中的摄取成分,并建立UPLC-TQD分析方法测定白及有效部位主要成分在Caco-2细胞中的含量,分别考察时间、浓度、pH和P-gp抑制剂对各成分的吸收影响。经过UPLC-Q-TOF指认白及有效部位中的主要成分B6,B12,B14,B17,B19,B23,研究发现该6个成分能够摄取进入Caco-2细胞中,并且在Caco-2细胞中的吸收呈现浓度依赖性。其中B12,B14的吸收在0～180 min为上升趋势,未呈现饱和,B6,B17,B19,B23在60 min后吸收趋于饱和;各成分在偏酸性或酸性条件下吸收较好,其中B6在pH 6.0环境中吸收较好,其余成分B12,B14,B17,B19,B23在pH 4.0环境中吸收较好;且加入维拉帕米P-gp抑制剂后和空白相比,B6,B12的吸收无差异,而B14,B17,B19,B23的Caco-2细胞摄取量增加,但无显著性差异,说明B6等6个成分的摄取过程中没有P-gp的参与,即B6等6个成分不是P-gp底物。由此结果可知白及有效部位主要成分进入Caco-2细胞以被动扩散为主,且吸收过程不受P-糖蛋白的外排作用影响。

关键词：白及 Caco-2细胞 UPLC-Q-TOF UPLC-TQD 被动扩散 P-gp

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良附滴丸HPLC指纹图谱的建立及同时测定6种指标成分的含量

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中国新药杂志 2019年第12期28卷 1511-1516页

作者：李莉娜潘洁陆苑刘春花冷进郭振虎李勇军王永林贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州医科大学药学院贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州黄果树立爽药业有限公司

目的:建立良附滴丸高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱以及同时测定6种成分含量的分析方法,评价良附滴丸质量均一性并进行质量分析。方法:采用HPLC色谱柱为Luna PFP(2) 100A(250 mm×4. 60 mm,5... 详细信息

目的:建立良附滴丸高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱以及同时测定6种成分含量的分析方法,评价良附滴丸质量均一性并进行质量分析。方法:采用HPLC色谱柱为Luna PFP(2) 100A(250 mm×4. 60 mm,5μm);流速1. 0 m L·min-1;柱温40℃;以流动相乙腈-0. 1%磷酸水溶液为流动相;在190 nm波长下进行梯度洗脱,建立良附滴丸HPLC指纹图谱;乙腈-0. 1%磷酸水(40∶60)为流动相;波长为254 nm对6个指标成分进行含量测定。结果:建立了良附滴丸HPLC指纹图谱及含量测定分析方法,对15批良附滴丸进行了相似度评价,相似度值均> 0. 9;确定了21个共有峰,其相对保留时间和相对峰面积RSD值均<0. 3%,并指认了其中6种成分,分别为高良姜素、鼠李柠檬素、高良姜素-3-O-甲醚、香附烯酮、诺卡酮、α-香附酮; 6种指标成分在一定浓度范围内线性良好,平均加样回收率良好。结论:建立的高效液相色谱指纹图谱及多指标成分同时测定。分析方法简单、专属性强,灵敏度和重复性高,可为良附滴丸的质量控制提供参考。

关键词：良附滴丸高效液相色谱指纹图谱含量测定

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舒肝宁注射液与方中黄芩提取物在大鼠胆汁、尿液、粪便中排泄的比较研究

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中国中药杂志 2024年第3期49卷 809-818页

作者：周杨王玲巩仔鹏李月婷金阳郑林黄勇何峰贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室/贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/国家苗药工程技术研究中心贵州贵阳550004

黄芩提取物是舒肝宁注射液中重要的组分之一。该研究建立了一种超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定舒肝宁注射液及方中黄芩提取物的5种成分在大鼠胆汁、尿液和粪便中含量的方法,揭示舒肝宁注射液与单味黄芩提取物在大鼠体内... 详细信息

黄芩提取物是舒肝宁注射液中重要的组分之一。该研究建立了一种超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定舒肝宁注射液及方中黄芩提取物的5种成分在大鼠胆汁、尿液和粪便中含量的方法,揭示舒肝宁注射液与单味黄芩提取物在大鼠体内的排泄过程差异,探讨黄芩配伍前后5种成分的体内排泄过程规律。大鼠分别尾静脉注射4.2 mL·kg^(-1)的舒肝宁注射液和黄芩提取物,观察48 h内大鼠胆汁、尿液和粪便中黄芩苷、黄芩素、千层纸素A、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和野黄芩苷的动态排泄情况。结果显示,大鼠静脉注射舒肝宁注射液和黄芩提取物后,除黄芩苷外,其余4种指标成分均以较高的比例以原型成分排泄。各成分在尿液中排泄量较大,在粪便和胆汁中的排泄量较少。黄芩提取物经配伍后,5种指标成分在大鼠体内的累积排泄量均降低。其中,黄芩素在胆汁、尿液和粪便的累积排泄量显著降低了26.67%、48.11%、31.01%;黄芩苷在胆汁、尿液和粪便的累积排泄量显著降低了70.69%、19.43%、31.22%。研究表明,黄芩提取物中的5种指标成分主要经肾脏排泄,且注射液中其他组分可能会延缓其排泄过程,延长在体内的滞留时间。该研究对阐明舒肝宁注射液配伍合理性具有重要的意义。

关键词：舒肝宁注射液黄芩提取物 UPLC-MS/MS 排泄胆汁尿液粪便

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基于UPLC-MS/MS的舒肝宁注射液与黄芩提取物中5种成分的组织分布比较研究

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中国中药杂志 2024年第17期49卷 4768-4776页

作者：鲁婷婷王玲田燕迟明艳黄勇巩仔鹏郑林何峰贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州省药物制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心国家苗药工程技术研究中心贵州贵阳550004

该研究建立了一种超高液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法,测定给予舒肝宁注射液或黄芩提取物后5种指标成分在大鼠组织器官中的含量,研究二者经时动态变化规律和差异,探讨黄芩配伍前后对5种成分组织分布的影响。大鼠尾静脉注射舒肝... 详细信息

该研究建立了一种超高液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法,测定给予舒肝宁注射液或黄芩提取物后5种指标成分在大鼠组织器官中的含量,研究二者经时动态变化规律和差异,探讨黄芩配伍前后对5种成分组织分布的影响。大鼠尾静脉注射舒肝宁注射液或黄芩提取物后,分别于0.17、0.5、1、2 h 4个时间点采集心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、脑组织样品,采用UPLC-MS/MS检测5种指标成分(黄芩苷、黄芩素、千层纸素A、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、野黄芩苷)在2组大鼠组织中的浓度。结果表明建立的UPLC-MS/MS测定方法简便快速且专属稳定。组织分布结果表明,给予舒肝宁注射液和黄芩提取物后,5种指标成分在体内分布广泛且存在一定差异,2组中黄芩苷、黄芩素和千层纸素A在肾和肝组织、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷在肾和脑组织以及野黄芩苷在肾和心组织中分布较多。配伍组方后在心、肝、肾、肠组织中黄芩苷和肝、肾组织中黄芩素以及肺组织中千层纸素A含量均显著增加。研究表明,舒肝宁注射液与黄芩提取物中的5种成分在大鼠体内分布广泛且无蓄积情况,黄芩配伍组方后可增加有效成分在大鼠体内的分布,为从体内过程角度阐释舒肝宁注射液的配伍合理性提供依据。

关键词：舒肝宁注射液黄芩提取物 UPLC-MS/MS 组织分布

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