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西北植物学报 2025年第1期45卷 11-18页

作者：龙郡兰罗睿罗须张兰贵州大学生命科学学院贵阳550025 贵州大学山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵阳550025

【目的】通过构建NtCET4基因过表达植株分析该基因在调控烟草开花时间中的作用,探讨基于NtCET4操纵提高烟草有效叶数量从而提高烟叶产量的可行性。【方法】构建NtCET4基因过表达载体后通过农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草获得转化植株,... 详细信息

【目的】通过构建NtCET4基因过表达植株分析该基因在调控烟草开花时间中的作用,探讨基于NtCET4操纵提高烟草有效叶数量从而提高烟叶产量的可行性。【方法】构建NtCET4基因过表达载体后通过农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草获得转化植株,PCR和GUS染色鉴定的转化植株通过苗期qRT-PCR分析过表达特性,过表达株系移栽后观察其开花时间、有效叶数量的变化,并通过qRT-PCR分析NtCET4在开花前后的相对表达量变化。【结果】与野生型‘K326’相比,9个转基因株系中4个株系为NtCET4过表达株系。NtCET4过表达株系花芽分化时间显著延迟(较‘K326’晚14d左右)、有效叶片数量增加。检测开花前后的NtCET4表达量发现,过表达株系的表达量均高于野生型,且开花前表达量大于开花后。【结论】烟草植株中NtCET4过表达能有效延长营养芽活动时间从而实现延迟开花,增加植株的有效叶片数量。

关键词：烟草 NtCET4基因开花时间有效叶数量

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贵州桴焉自然保护区大型真菌物种多样性

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菌物学报 2025年第1期44卷 25-39页

作者：杨云深王万坤邓春英韩燕峰贵州大学生命科学学院真菌资源研究所山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵州科学院贵州省生物研究所

本文对贵州省正安县桴焉自然保护区大型真菌的种类组成、优势科属种的数量、物种区系地理成分、资源评价、濒危等级进行评估。该地区分布大型真菌392种，隶属于5纲26目70科152属，新增地区新记录物种212种。优势科为红菇科Russulaceae... 详细信息

本文对贵州省正安县桴焉自然保护区大型真菌的种类组成、优势科属种的数量、物种区系地理成分、资源评价、濒危等级进行评估。该地区分布大型真菌392种，隶属于5纲26目70科152属，新增地区新记录物种212种。优势科为红菇科Russulaceae、多孔菌科Polyporaceae、类脐菇科Omphalotaceae、小菇科Mycenaceae等，优势科的物种数占总种数的51.78%；优势属为红菇属Russula、裸脚伞属Gymnopus、小皮伞属Marasmius、小菇属Mycena、鹅膏属Amanita等，占总种数的31.38%。以科、属为单位分析，桴焉自然保护区大型真菌以世界广布科和世界分布属为主，但具北温带特征；以种为单位分析，地理成分以世界广布种、北温带分布种为主。该地区食用菌有74种；药用菌和食药兼用菌分别有62和54种；毒菌有34种。濒危等级评价表明，该调查区生态环境良好，大型真菌物种多样性未受到明显威胁，但发现近危种(NT)4个；中国特有种有17种。该研究为桴焉自然保护区的大型真菌物种多样性保护和可持续发展提供了科学基础。

关键词：物种多样性优势科属区系分布应用价值濒危等级

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颠茄AbWRKY1基因的克隆与功能研究

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农业生物技术学报 2025年第2期33卷 316-329页

作者：潘航穆德会杨嘉谭艾娟马炳南许国菊杨立航强玮贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室

颠茄(Atropa belladonna)是《中国药典》收录的托品烷生物碱(tropane alkaloids, TAs)商业药源植物，WRKY转录因子可能调控TAs的生物合成。本研究对颠茄中WRKY转录因子基因家族进行了组织表达、系统进化和诱导表达分析，筛选出正调控TA... 详细信息

颠茄(Atropa belladonna)是《中国药典》收录的托品烷生物碱(tropane alkaloids, TAs)商业药源植物，WRKY转录因子可能调控TAs的生物合成。本研究对颠茄中WRKY转录因子基因家族进行了组织表达、系统进化和诱导表达分析，筛选出正调控TAs生物合成的基因AbWRKY1，并鉴定了其功能。AbWRKY1具有和TAs合成途径基因相同的组织和诱导表达特征，特异性地在颠茄不定根中表达，并且受到钙通道抑制剂维拉帕米(verapamil)的诱导。AbWRKY1和其他物种具有次生代谢调控功能的WRKY聚在同一簇。AbWRKY1蛋白包含326个氨基酸，定位于细胞核。酵母单杂交显示，AbWRKY1能够和莨菪碱6β-羟化酶(hyoscyamine 6β-hydroxylase, H6H)基因启动子上W-box富集区发生相互作用。在颠茄中通过病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing, VIGS)技术抑制AbWRKY1表达使东莨菪碱和莨菪碱含量分别降低了44.91%和79.33%。超表达AbWRKY1显著提高了颠茄发根中东莨菪碱、山莨菪碱和莨菪碱3种药用TAs的含量，同时上调了4个TAs合成途径基因腐胺N-甲基转移酶(putrescine Nmethyltransferase, PMT)、托品酮还原酶Ⅰ(tropinone reductaseⅠ, TRⅠ)、莨菪碱脱氢酶(hyoscyamine dehydrogenase, HDH)和H6H的表达量。本研究为阐明TAs生物合成的转录调控和颠茄分子育种提供了理论基础。

关键词： WRKY转录因子颠茄托品烷生物碱(TAs) 病毒诱导的基因沉默(VIGS) 超表达

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华东、华中和华北城市不同生境土壤可培养真菌组成和多样性

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菌物学报 2025年第1期44卷 40-54页

作者：白艳敏任玉连董醇波张延威韩燕峰贵州大学生命科学学院生态系真菌资源研究所山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵州师范学院贵州省高等学校生物资源开发利用重点实验室

随着城市化进程的加快，人类活动对城市不同生境土壤中的微生物产生了很多影响，但城市不同生境中的真菌组成和多样性仍不清楚。本研究主要收集了我国20个高度城市化的省市城市近郊农用地、医院绿地、污水处理厂绿地和动物园绿地的240... 详细信息

随着城市化进程的加快，人类活动对城市不同生境土壤中的微生物产生了很多影响，但城市不同生境中的真菌组成和多样性仍不清楚。本研究主要收集了我国20个高度城市化的省市城市近郊农用地、医院绿地、污水处理厂绿地和动物园绿地的240份土壤样品，采用传统可培养技术，探究城市不同生境土壤可培养真菌的群落组成及多样性特征，基于FUNGuild解析不同生境的真菌生态功能群并对其进行解钾、解磷、固氮和降解角蛋白的功能注释分析。从240份土壤样品中共分离获得真菌9779株，隶属于3门14纲44目101科250属582种。在门分类水平上，它们主要隶属于子囊菌门Ascomycota、担子菌门Basidiomycota和毛霉菌门Mucoromycota。不同土壤生境可培养真菌群落α多样性存在明显差异。污水处理厂绿地土壤真菌α多样性最高，其次为动物园绿地和医院绿地，农业用地土壤样本中的真菌群落α多样性最小。动物园和医院绿地的降解角蛋白真菌类群最丰富、多样性最高。本研究揭示了我国高度城市化地区不同生境绿地土壤可培养真菌的群落组成、多样性和功能群。这为未来城市土壤微生物资源的管理提供了关键信息。

关键词：城市化城市绿地土壤真菌多样性功能多样性

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香猪CD2AP基因第1内含子282 bp插入/缺失结构变异介导的表达调控研究

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农业生物技术学报 2025年第2期33卷 330-343页

作者：王丹冉雪琴王维牛熙李升黄世会王嘉福贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院/山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室

结构变异(structural variation, SV)可以通过影响相关基因的稳定性和表达调控来影响基因表型。为探究CD2相关蛋白(CD2-associated protein, CD2AP)基因内含子1中的282 bp结构变异在香猪(Xiang pig)(Sus scrofa)群体中的多态分布以及对C... 详细信息

结构变异(structural variation, SV)可以通过影响相关基因的稳定性和表达调控来影响基因表型。为探究CD2相关蛋白(CD2-associated protein, CD2AP)基因内含子1中的282 bp结构变异在香猪(Xiang pig)(Sus scrofa)群体中的多态分布以及对CD2AP基因表达的影响，本研究以香猪、大白猪(Large White)为研究对象，采用PCR测序方法对该SV位点进行鉴定和基因分型，研究群体分布规律以及CD2AP基因结构变异与疾病的关联；采用生物信息学方法检测CD2AP基因内含子1中SV区间所包含的重复元件和转录因子结合位点；用qPCR和Western blot检测SV对CD2AP基因和蛋白表达的影响；通过构建pEGFP荧光表达载体检验CD2AP基因SV中功能元件短散在核元件(short interspersed nuclear element, SINE)对基因转录活性的影响。结果显示，CD2AP-I1-sv282结构变异片段长度为282 bp，区间存在1个260 bp的SINE元件，属于tRNA家族，位于猪基因组Chr7:42249739～42249998 bp，含有8个转录因子结合位点；在SINE元件序列片段中具有RNA聚合酶Ⅲ启动子和2个AluⅠ限制性内切酶识别位点。PCR扩增和测序分析表明，该SV在香猪和大白猪基因组中均呈现多态性，有II (纯合插入型)、ID (杂合型)和DD (纯合缺失型) 3个基因型，χ2检验表明，该SV在香猪和大白猪群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)，香猪和大白猪群体之间的基因型频率差异极显著(P<0.01),D等位基因频率极显著高于I等位基因频率(P<0.001)。在肺部患病样本中，D基因型为优势等位基因；在肺部健康样本中，I基因型为优势等位基因；Kendall's tau-b相关性分析表明，该结构变异与猪的肺部疾病具有相关性，患病群体与DD基因型显著正相关。qPCR和Western blot检测发现，DD基因型的香猪脾脏中CD2AP基因的mRNA和蛋白的表达量极显著高于ID基因型(P<0.01)。针对SINE元件所在序列构建了pEGFP荧光报告载体，转染细胞后检测其荧光强度及蛋白表达量，结果显示，含SINE序列的表达载体细胞与不含SINE序列相比，荧光强度和EGFP蛋白的表达量均降低。上述结果表明，CD2AP基因内含子1中282 bp结构变异在猪群中存在，且均以缺失型为主，可以导致基因的表达发生上调，结构变异区域存在的SINE元件影响基因转录活性，CD2AP基因的结构变异与香猪易感肺部疾病存在相关性。研究结果对解析香猪疾病易感分子机制具有重要意义。

关键词：香猪 CD2AP基因结构变异(SV) 短散在核元件(SINE)

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sigW与rsiW失活对沙福芽孢杆菌ST7耐锰能力的影响

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微生物学通报 2025年第3期52卷 1323-1336页

作者：方争林王嘉福冉雪琴牛熙贵州大学生命科学学院贵州大学农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵州贵阳550025 贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025

【背景】前期转录组学研究提示RNA聚合酶σ因子W(sigma factor W,SigW)和反σ因子W(anti-sigma factor W,RsiW)可能参与沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)锰胁迫应激途径。【目的】研究sigW和rsiW基因缺失对沙福芽孢杆菌ST7的运动能力、... 详细信息

【背景】前期转录组学研究提示RNA聚合酶σ因子W(sigma factor W,SigW)和反σ因子W(anti-sigma factor W,RsiW)可能参与沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)锰胁迫应激途径。【目的】研究sigW和rsiW基因缺失对沙福芽孢杆菌ST7的运动能力、生物膜形成能力和锰氧化能力的影响。【方法】以沙福芽孢杆菌ST7为研究对象,使用同源重组敲除技术构建沙福芽孢杆菌ST7的sigW和rsiW缺失突变株,检测野生株与突变株在运动能力、生物膜形成能力和锰氧化能力方面的差异,比较鞭毛形成相关基因的表达变化。【结果】在非锰胁迫培养条件下sigW和rsiW基因缺失对ST7突变株的生长无明显影响;锰胁迫培养条件下sigW和rsiW基因缺失迟滞突变株的生长。相较于野生株,sigW突变株的运动能力和锰氧化能力减弱,生物膜形成能力增强;rsiW突变株的运动能力减弱,生物膜形成能力和锰氧化能力增强。并且sigW和rsiW突变株中与鞭毛合成相关基因flim、flgd、flii的表达量下降。【结论】sigW和rsiW基因可促进沙福芽孢杆菌的鞭毛合成和运动能力,促进细菌的生长,共同调控菌株的锰氧化能力。

关键词：沙福芽孢杆菌 sigW和rsiW基因敲除鞭毛运动性生物膜锰氧化

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萌发对薏米淀粉结构和功能特性的影响

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食品与发酵工业 2025年第3期51卷 207-214页

作者：高丹敖志超李丰羽杨海明潘家艳赵锋廖海民满建民贵州大学生命科学学院农业生物工程研究院山地植物资源保护与保护种质创新教育部重点实验室山地生态与农业生物工程协同创新中心贵州贵阳550025 贵州培力农本方中药有限公司贵州黔东南苗族侗族自治州551500

萌发是一种天然、高效的淀粉改性方法。该文探究了薏米萌发过程中淀粉的性质变化规律,通过不同萌发时间处理薏米,提取萌发薏米淀粉后,分析淀粉结构和功能特性。结果表明,萌发后薏米淀粉表面出现明显孔洞,淀粉粒径减小,膨胀势、溶解度增... 详细信息

萌发是一种天然、高效的淀粉改性方法。该文探究了薏米萌发过程中淀粉的性质变化规律,通过不同萌发时间处理薏米,提取萌发薏米淀粉后,分析淀粉结构和功能特性。结果表明,萌发后薏米淀粉表面出现明显孔洞,淀粉粒径减小,膨胀势、溶解度增加,支链淀粉A链比例降低,直链淀粉含量先增大后减小。萌发薏米淀粉均为A-型晶体。萌发后薏米淀粉的吸水性、吸油性、快消化淀粉以及淀粉凝胶的黏性增加,而糊化焓、慢消化淀粉含量、抗性淀粉含量、淀粉凝胶的硬度、内聚性以及胶着性降低。该研究表明萌发可以调控薏米淀粉的性质,改善薏米淀粉制品的品质。

关键词：薏米淀粉萌发糊化特性体外消化特性

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利用杜仲漆酶基因(EuLAC1)创制抗灰霉病番茄新种质

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农业生物技术学报 2025年第3期33卷 523-535页

作者：杨金玉王作日赵德刚赵懿琛贵州大学生命科学学院/山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室喀斯特山区植物资源利用与育种国家地方联合工程研究中心贵州省农业科学院农业生物技术重点实验室/植物保育技术应用工程研究中心贵州大学茶学院

漆酶(laccase, LAC)是一种糖蛋白氧化酶，影响木质素的合成，调节植物体内酚类物质含量，并参与植物对病虫害的防御机制。为获得抗灰霉病能力强且符合转基因安全的番茄(Solanum lycopersicum)新种质，本研究基于实验室前期构建的载体pGM... 详细信息

漆酶(laccase, LAC)是一种糖蛋白氧化酶，影响木质素的合成，调节植物体内酚类物质含量，并参与植物对病虫害的防御机制。为获得抗灰霉病能力强且符合转基因安全的番茄(Solanum lycopersicum)新种质，本研究基于实验室前期构建的载体pGM626-Act1，设计并成功构建了1个由果实特异性E8启动子调控FLP基因的基因删除系统，同时构建了Act1启动子驱动杜仲漆酶1 (Eucommia ulmoides laccase 1,EuLAC1)基因的植物表达载体pGM626-Act1-EuLAC1。采用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的转化技术，对番茄品种'Micro-Tom'进行遗传转化，最终成功获得了5株过表达EuLAC1的阳性番茄转基因植株。抗性分析结果表明，接种灰霉菌(Botrytis cinerea)后，过表达EuLAC1基因的番茄植株在发病时间方面与野生型及转空载体的番茄植株相比呈现出明显延迟。此外，过表达EuLAC1基因的番茄植株病斑直径显著小于对照组(野生型和转空载体的番茄植株)(P<0.05)，表明EuLAC1基因的过表达能够明显增强番茄植株对灰霉病的抗性。过表达EuLAC1基因还可提高番茄植株中保护性酶的活性以及病程相关蛋白(pathogenesis related protein, PR)基因的表达水平。对转基因番茄果实中外源基因的删除分析发现，在40个番茄果实中有22个未检测到外源基因，外源基因删除效率为55%。本研究为开发满足转基因安全要求的抗病番茄新种质提供了一种新的技术手段。

关键词：杜仲漆酶(EuLAC1) 番茄遗传转化灰霉病抗病性分析

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玛瑙红樱桃多胺氧化酶基因的克隆及其表达分析

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分子植物育种 2025年第4期23卷 1057-1064页

作者：冉佳鑫乔光候黔东梅利那黎霜田田贵州大学生命科学学院农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室山地生态与农业生物工程协同创新中心贵阳550025 贵州大学林学院贵州森林资源与环境研究中心贵阳550025

多胺氧化酶(PAO)是生物多胺分解代谢中的关键酶之一,为研究玛瑙红多胺氧化酶基因进化机制及其对非生物胁迫(高温,干旱)响应的特性,本研究以玛瑙红樱桃成熟叶片为材料,利用实验室构建的玛瑙红转录组数据库,筛选出PAO基因cDNA序列,对其开... 详细信息

多胺氧化酶(PAO)是生物多胺分解代谢中的关键酶之一,为研究玛瑙红多胺氧化酶基因进化机制及其对非生物胁迫(高温,干旱)响应的特性,本研究以玛瑙红樱桃成熟叶片为材料,利用实验室构建的玛瑙红转录组数据库,筛选出PAO基因cDNA序列,对其开放阅读框(ORF)进行克隆和生物信息学分析。结果表明:克隆获得该基因cDNA全长为1917 bp;开放阅读框为1485 bp,编码494个氨基酸,预测蛋白大小为54.4 kD,等电点为5.28,为亲水性蛋白。RT-qPCR结果表明,CpPAO在不同组织中表达量存在差异,表达量依次为:膨大果(盛花期后45 d)>成熟果(盛花期后55 d)>初果(盛花期后35 d)>花芽>花>根>叶>茎。CpPAO能够响应高温、干旱胁迫,在胁迫处理后的叶片中,表达量明显提高。本研究为进一步解析CpPAO的功能奠定了理论基础。

关键词：玛瑙红樱桃克隆多胺氧化酶表达分析

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三个红肉火龙果品种采前果实品质变化规律比较

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中国南方果树 2025年

作者：魏治远解璞晏霜郑乾明贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院/山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵州省农业科学院贵州省果树科学研究所贵州省农业科学院喀斯特山区作物基因资源与种质创新重点实验室

为了揭示红肉火龙果果实成熟过程中淀粉酶的变化趋势，以及淀粉酶与基本生理性质之间的相关性，本文以“金都”“桂红龙”“软枝大红”为材料，检测果实成熟过程中硬度、可滴定酸含量、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、甜菜红素含量、甜... 详细信息

为了揭示红肉火龙果果实成熟过程中淀粉酶的变化趋势，以及淀粉酶与基本生理性质之间的相关性，本文以“金都”“桂红龙”“软枝大红”为材料，检测果实成熟过程中硬度、可滴定酸含量、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、甜菜红素含量、甜菜黄素含量、淀粉含量等品质指标，以及总淀粉酶、α-淀粉酶和β-淀粉酶活性。结果表明，花后19～28 d，果实的硬度逐渐下降，可滴定酸先上升后下降，可溶性糖、可溶性蛋白、甜菜红素和甜菜黄素逐渐上升，淀粉含量积累到最大值后，随即急剧下降，总淀粉酶、α-淀粉酶和β-淀粉酶活性逐渐上升。通过相关性分析，得到总淀粉酶、α-淀粉酶和β-淀粉酶活性与硬度、淀粉含量呈负相关，与可溶性糖、可溶性蛋白、甜菜红素和甜菜黄素等品质指标呈正相关。总淀粉酶、α-淀粉酶和β-淀粉酶活性与淀粉含量呈显著和极显著负相关，与可溶性糖含量呈显著和极显著正相关，推测淀粉酶活性在品质形成过程中发挥重要作用。

关键词：红肉火龙果淀粉降解 β-淀粉酶品质指标

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