本研究利用MISA软件筛选火龙果转录组测序获得的108 127条Unigenes,共检测出7 622个EST-SSR位点,其发生频率为6.02%,平均每9.00 kb出现1个位点。单核苷酸重复类型占优势,占总EST-SSR位点的56.59%,其次是二核苷酸和三核苷酸,分别占28.4%和14.04%;其它特性重复类型数量较少,所占比例均不足1%。二核苷酸重复基元类型中以AG/CT、AC/GT为优势重复基元,分别占总SSR位点数目的25.37%和2.02%;三核苷酸重复基元类型以AAG/CCT为主,占总SSR位点数目的 3.13%。设计合成125对EST-SSR引物,并随机选取8份形态学差异明显的火龙果种质提取基因组DNA,进行PCR扩增,采用琼脂糖凝胶电泳和10%聚丙烯变性凝胶电泳检测方法对引物进行初步检测,筛选出32对扩增条带锐利清晰的引物。选取38份火龙果种质对筛选出的引物进行多态性检测,获得16对多态性较好的引物,共扩增出47个多态性位点,多态信息含量(polymorphism information content, PIC)范围为0.243～0.667,平均多态性信息含量(polymorphism information content, PIC)为0.459,平均观测等位基因数(number of alleles, Na)为3,平均香农信息指数(Shannon's information index, I)为0.891;利用引物C31931、C13719和C32141等8种引物组合可以有效区分38份火龙果种质,构建其DNA的EST-SSR指纹图谱;UPGMA聚类分析,以0.62为阈值,可将38份火龙果种质分为3类:第一类包括红肉与粉红肉种质,第二类为白肉种质,第三类为蛇鞭柱属的2个种质。本研究基于火龙果转录组测序序列开发了一批具有高度多态性潜力的SSR引物,该引物可有效地将38份火龙果种质区分开来。因此,基于火龙果转录组测序开发的EST-SSR标记,可为火龙果种质鉴定、亲缘关系分析及遗传图谱构建等提供更丰富的标记来源。
以苗族常用药材吉祥草(Reineckia carnea(Andr.)Kunth)为试材,采用盆栽控制试验,设置了对照(CK)、单独增二氧化碳(eC:CO_(2)浓度为(800±20)μmol·mol^(-1))、单独施氮(eN:施加5 g NH_(4)NO_(3))、同时增二氧化碳与施氮(eC+eN:...
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以苗族常用药材吉祥草(Reineckia carnea(Andr.)Kunth)为试材,采用盆栽控制试验,设置了对照(CK)、单独增二氧化碳(eC:CO_(2)浓度为(800±20)μmol·mol^(-1))、单独施氮(eN:施加5 g NH_(4)NO_(3))、同时增二氧化碳与施氮(eC+eN:CO_(2)浓度为(800±20)μmol·mol^(-1),且施加5 g NH_(4)NO_(3))4个处理,研究CO_(2)浓度升高、氮沉降及二者的交互作用对吉祥草的生长及其药用成分的影响,以期为吉祥草在药用生产上提供参考依据。结果表明:1)升高CO_(2)浓度和施氮或同时升高CO_(2)浓度和施氮均显著促进了吉祥草的形态生长,总生物量和可溶性蛋白质含量显著增加,茎中的碳含量显著降低,超氧化物歧化酶(SOD)活性无显著变化;2)施氮处理下全氮含量显著增加,过氧化氢酶(CAT)活性、根和叶中的皂苷含量显著下降,在此基础上升高CO_(2)浓度可缓解皂苷下降,CAT活性显著升高,内源激素含量在施氮或同时升高CO_(2)浓度和施氮处理下显著增加。综上所述,在实际生产过程中,可适当增加CO_(2)浓度,氮肥浓度不宜过高,有利于吉祥草的生长,并保证其药用品质不受损害。
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