检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2025年第05期52卷 2198-2207页

作者：贾雨轩李尧江曾广湖沈祥玉龚婷贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵州大学动物科学学院

[目的]试验旨在建立一种从江香猪睾丸生精细胞的高效体外分离和培养方法,为香猪繁殖特性研究提供材料,并为其他哺乳动物生精细胞分离培养提供技术参考。[方法]从贵州从江粤黔集团香猪原种繁殖场采集60日龄从江香猪睾丸组织,用0.25%胰酶-... 详细信息

[目的]试验旨在建立一种从江香猪睾丸生精细胞的高效体外分离和培养方法,为香猪繁殖特性研究提供材料,并为其他哺乳动物生精细胞分离培养提供技术参考。[方法]从贵州从江粤黔集团香猪原种繁殖场采集60日龄从江香猪睾丸组织,用0.25%胰酶-EDTA溶液和0.1%Ⅳ型胶原酶对其进行消化,再通过差速贴壁的方法对生精细胞进行纯化;利用间接免疫荧光染色对生精细胞进行生殖细胞特异性蛋白4（DEAD-box helicase 4,DDX4）鉴定后,再用PCR方法对3个生精细胞特异表达的标志基因DDX4、泛素羧基末端水解酶同工酶L1（ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L1,UCHL-1）和Thy-1细胞表面抗原（Thy-1 cell surface antigen,THY1）进行检测,验证生精细胞。采用CCK-8细胞增殖试剂盒检测生精细胞增殖情况,并用HE染色对从江香猪的睾丸组织进行形态学验证分析。[结果]采用0.25%胰酶-EDTA溶液+0.1%Ⅳ型胶原酶组合酶消化法+差速贴壁法,分别获得大量香猪生精细胞和支持细胞悬液。免疫荧光染色结果显示,生精细胞特异性表达的DDX4和支持细胞特异性表达的GATA结合蛋白4（GATA binding protein 4,GATA-4）的免疫阳性率均超过90%。进一步利用RTPCR方法验证体外分离的生精细胞,特异表达DDX4、UCHL-1、THY1基因。在此基础上,建立生精细胞-支持细胞2D培养体系,将圆形或椭圆形的生精细胞附着于支持细胞上或悬浮培养基中（含10%胎牛血清的DMEM/F12,33℃,5%CO2）,可稳定传至第5代。培养24 h内,生精细胞增殖效率较高,进入对数增长期;但经过72～96 h的培养后,生精细胞增殖效率减慢,培养120 h后,细胞活性开始下降,活力变差,原代生精细胞呈S型曲线增长。香猪睾丸组织HE染色验证显示,生精小管里的细胞构成与本研究所分离的生精细胞类型一致。[结论]本试验采用0.25%胰酶-EDTA溶液+0.1%Ⅳ型胶原酶的组合酶消化法对从江香猪生精细胞进行体外分离,采用差速贴壁法进行了纯化,DDX4免疫阳性率达90%以上,生精细胞特异性标志基因DDX4、UCHL-1、THY1均扩增出预期条带。分离的生精细胞采用2D培养体系,在0～24 h达到对数生长期,72～120 h进入平台期,符合生精细胞的常规生长模式和增殖规律。

关键词：从江香猪睾丸生精细胞分离培养鉴定

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中药及活性成分抗耐药菌作用及其机制研究进展

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畜牧兽医学报 2025年第4期56卷 1632-1647页

作者：吴俊杰吕世明龙小霞王忠王立琦贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵阳550025

细菌对抗菌药的耐药性可导致感染性疾病治疗难度增加、医疗负担加重及死亡率升高等问题,对全球人类和动物健康造成威胁,目前形势已十分严峻。在减抗禁抗的背景下,开发新的抗菌药或替代品以及抗菌药佐剂已刻不容缓。中药及活性成分在协... 详细信息

细菌对抗菌药的耐药性可导致感染性疾病治疗难度增加、医疗负担加重及死亡率升高等问题,对全球人类和动物健康造成威胁,目前形势已十分严峻。在减抗禁抗的背景下,开发新的抗菌药或替代品以及抗菌药佐剂已刻不容缓。中药及活性成分在协同抗菌药控制细菌耐药性方面已展示出明显优势,具有广阔的开发应用前景。本文对2017年我国禁止硫酸黏菌素用作促生长剂(中华人民共和国农业部公告第2428号)以来,关于控制耐药菌的中药及活性成分以及其对耐药质粒、外排泵、细胞膜通透性、耐药酶、耐药基因、生物被膜等的作用等的最新研究进展进行综述,以期为开发对耐药菌有效的新抗菌药或抗菌增效剂提供参考。

关键词：中草药中药活性成分抗菌药耐药性作用机制

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单宁酸对猪精液常温保存效果的影响

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中国畜牧杂志 2025年第05期 249-254页

作者：张才在钟登宇石庆武胡光玲杨振清施晓丽敖政贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室

试验旨在探究不同浓度的单宁酸（TA）对猪精液在常温条件下保存效果的影响。本试验在Modena稀释液中添加不同浓度TA(3、5、7、9、11μg/mL)，分别检测17℃条件下第1、3、5、7天精子的活率、活力、质膜与顶体完整性，以及精液氧化应激指... 详细信息

试验旨在探究不同浓度的单宁酸（TA）对猪精液在常温条件下保存效果的影响。本试验在Modena稀释液中添加不同浓度TA(3、5、7、9、11μg/mL)，分别检测17℃条件下第1、3、5、7天精子的活率、活力、质膜与顶体完整性，以及精液氧化应激指标。结果表明：猪精液在常温保存过程中，在Modena稀释液中添加TA可提高精子活率、活力、质膜完整率和顶体完整率（P<0.05）,7μg/mL TA组各项指标高于对照组（P<0.05），且第7天的精子活力仍达到61.2%；在第5天和第7天时，5、7、9μg/mL TA组的活性氧（ROS）水平和丙二醛（MDA）含量低于对照组（P<0.05），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）活性高于对照组（P<0.05），且7μg/mL TA组抗氧化活性效果较好。由此可见，在猪精液Modena稀释液中添加TA可通过提高精子抗氧化能力来改善猪精子常温保存质量，从而延长其保存时间，其中添加7μg/mL TA效果较好。

关键词：单宁酸精液氧化应激常温保存精子质量猪

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添加番茄红素对猪精液常温保存效果的影响

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中国畜牧杂志 2025年第05期 269-274页

作者：钟登宇张才在石庆武杨振清张依裕施晓丽敖政贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室

为探究番茄红素（Lycopene，LYC）对猪精液常温保存质量的影响，本试验通过在Modena稀释液中添加不同浓度LYC（1、3、5、7、9 μmol/L），在17℃条件下检测第1、3、5、7天的精子活率、活力、畸形率、顶体完整性、质膜完整性，以及精液... 详细信息

为探究番茄红素（Lycopene，LYC）对猪精液常温保存质量的影响，本试验通过在Modena稀释液中添加不同浓度LYC（1、3、5、7、9 μmol/L），在17℃条件下检测第1、3、5、7天的精子活率、活力、畸形率、顶体完整性、质膜完整性，以及精液丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量、活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS）水平、总抗氧化（Total Antioxidant Capacity，T-AOC）能力和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）活性。结果显示：在猪精液常温保存过程中，在Modena稀释液中添加适当浓度的LYC可有效提高精子活力、质膜完整率和顶体完整率，其中，3 μmol/L LYC处理组的各项指标显著高于对照组和其他处理组。3 μmol/L和5 μmol/L LYC处理组的ROS水平和MDA含量均显著低于对照组，而T-AOC能力和SOD活性均显著高于对照组。因此，在猪精液Modena稀释液中LYC可通过提高精子抗氧化能力来改善猪精子常温保存质量，其中添加3 μmol/L LYC效果最佳。

关键词：番茄红素猪精液常温保存精子活力氧化应激

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干扰OPN基因对贵州黑山羊卵巢颗粒细胞增殖、凋亡及繁殖相关基因的影响

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畜牧与兽医 2025年第5期57卷 1-8页

作者：马丝夏薇温晓艳潘智仁付业海刘彬陆情梅赵佳福贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵州贵阳550025

旨在探究骨桥蛋白(OPN)基因与贵州黑山羊卵巢颗粒细胞(OGCs)增殖和凋亡间的关系。以贵州黑山羊为研究对象,通过构建OPN基因的4个干扰载体,转染至OGCs,并采用实时荧光定量PCR技术检测不同干扰载体对OPN基因的抑制效率,筛选最佳干扰载体;... 详细信息

旨在探究骨桥蛋白(OPN)基因与贵州黑山羊卵巢颗粒细胞(OGCs)增殖和凋亡间的关系。以贵州黑山羊为研究对象,通过构建OPN基因的4个干扰载体,转染至OGCs,并采用实时荧光定量PCR技术检测不同干扰载体对OPN基因的抑制效率,筛选最佳干扰载体;采用细胞计数试剂盒-8(CCK8)检测细胞增殖活力,细胞划痕试验检测其迁移能力;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测与其相关的繁殖标记基因和凋亡相关基因的表达情况。结果:成功构建了OPN基因的4个干扰载体,与shRNA-NC组相比,shRNA-OPN-222、shRNA-OPN-385和shRNA-OPN-741均极显著抑制了OPN基因的表达(P<0.01),且shRNA-OPN-222抑制效果最佳;CCK8和细胞划痕试验结果表明,与shRNA-NC组相比,shRNA-OPN-222极显著抑制了OGCs的增殖活力和迁移能力(P<0.01);RT-qPCR结果发现沉默OPN基因极显著抑制了核心蛋白聚糖2(DCN2)、细胞色素P450家族19亚家族A肽1(CYP19A1)和雌激素受体1(ESR1)的基因表达(P<0.01),显著促进了β-连环蛋白结合因子2(CTNNB2)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)和Bcl-2关联X蛋白(Bax)的基因表达(P<0.05),对铁蛋白重链1(FTH1)、胱天蛋白酶9(Caspase-9)的基因表达无显著影响。结论:干扰OPN基因,可以有效抑制OGCs的增殖和迁移,降低繁殖相关基因的表达水平,同时促进细胞的凋亡进程,这一研究为进一步阐明OPN基因影响山羊繁殖率的分子机制奠定了基础。

关键词： OPN基因贵州黑山羊卵巢颗粒细胞细胞增殖繁殖相关基因

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真核延伸因子2在病毒复制中的作用机制研究进展

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中国动物传染病学报 2025年

作者：刘金佯杨清莹段钰琦段志强贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州大学动物科学学院

真核延伸因子2（eukaryoticelongationfactor2，eEF2）是真核生物翻译延伸循环过程中最重要的辅助因子，它在人、哺乳动物和禽类中保守性高且具有相似的结构与功能。研究表明，eEF2是真核延伸因子2激酶（eEF2kinase，eEF2K）已知的唯一... 详细信息

真核延伸因子2（eukaryoticelongationfactor2，eEF2）是真核生物翻译延伸循环过程中最重要的辅助因子，它在人、哺乳动物和禽类中保守性高且具有相似的结构与功能。研究表明，eEF2是真核延伸因子2激酶（eEF2kinase，eEF2K）已知的唯一底物，eEF2K通过对eEF2中高度保守的Thr56 残基磷酸化，从而抑制其活性并负向调节蛋白质合成。因此，eEF2K/eEF2活性变化在调控翻译延伸速率和蛋白质合成方面扮演着重要角色。近年来，研究发现eEF2与人和动物多种病毒的复制存在紧密联系，如病毒通过利用eEF2使病毒内部核糖体进入位点发生易位、诱导宿主翻译系统关闭、调节病毒蛋白合成、阻断应激颗粒形成等方式促进自身的复制。鉴于eEF2在病毒复制中的多重作用，本文就eEF2的分子结构特征和活性调节机制以及与病毒复制的关系研究进展进行综述，以期为深入认识人和动物相关病毒潜在的复制与致病机理，并为开发新型抗病毒药物提供理论参考。

关键词：真核延伸因子2 真核延伸因子2激酶病毒复制抗病毒药物

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赤水乌骨鸡EDNRB2基因多态性及其与肤色性状的关联分析

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中国畜牧兽医 2025年第2期52卷 759-770页

作者：杨金林李辉赵德鹏石钰仕龙霞谭启松贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵阳550025 贵州大学动物科学学院贵阳550025

[目的]分析赤水乌骨鸡内皮素受体B亚型2(endothelin receptor B subtype 2,EDNRB2)基因多态性对乌骨鸡肤色性状的影响,并筛选EDNRB2基因调控赤水乌骨鸡肤色的关键多态位点,为深入探究乌骨鸡黑色素沉积调控的内在机制与赤水乌骨鸡肤色性... 详细信息

[目的]分析赤水乌骨鸡内皮素受体B亚型2(endothelin receptor B subtype 2,EDNRB2)基因多态性对乌骨鸡肤色性状的影响,并筛选EDNRB2基因调控赤水乌骨鸡肤色的关键多态位点,为深入探究乌骨鸡黑色素沉积调控的内在机制与赤水乌骨鸡肤色性状的优化改良提供新的遗传标记。[方法]以赤水乌骨鸡作为研究对象,对EDNRB2基因第1~9外显子进行PCR扩增后测序,对所获序列进行比对鉴定其单核苷酸多态性(SNP)位点,并分析EDNRB2基因的遗传多样性。利用RNAfold web server分析EDNRB2基因SNP位点突变前后的mRNA二级结构;利用SHEsis在线网站进行EDNRB2基因SNP位点的连锁不平衡及单倍型、双倍型分析;利用SPSS 27.0软件分析EDNRB2基因多态性与赤水乌骨鸡肤色性状的关联性。[结果]在赤水乌骨鸡EDNRB2基因第3与9外显子上共发现5个SNPs位点,其中第3外显子中存在2个SNPs位点(g.11120193 T>C和g.11120382 C>T),第9外显子中在3个SNPs位点(g.11125882 G>A、g.11125917 T>A、g.11125931 C>A)。g.11120193 T>C位点存在TT、TC、CC 3种基因型,g.11120382 C>T位点存在CC、CT 2种基因型,突变类型均属于同义突变;g.11125882 G>A位点存在GG、AG、AA 3种基因型,属于错义突变(Gly→Glu);g.11125917 T>A位点存在TT、AT、AA 3种基因型,属于错义突变(Phe→Ile);g.11125931 C>A位点存在CC、AC、AA 3种基因型,属于无义突变。EDNRB2基因5个SNPs位点共发现10种单倍型与24种双倍型,其中优势单倍型与双倍型分别为H4与H4H4。关联分析结果显示,EDNRB2基因g.11120193 T>C位点CC基因型个体的鸡冠△a值显著高于TC基因型(P<0.05),背部△a值显著低于TT基因型(P<0.05);g.11125931 C>A位点CC基因型个体鸡冠△L值显著高于AC基因型(P<0.05);其余SNP位点不同基因型个体间的肤色参数差异均不显著(P>0.05)。双倍型H5H5与H7H7对赤水乌骨鸡的肤色性状影响最为明显。[结论]在EDNRB2基因第3、9外显子上共发现5个SNPs位点,其中g.11120193 T>C和g.11125931 C>A位点与赤水乌骨鸡的鸡冠、背部的肤色有显著关联性。双倍型H5H5对鸡冠△L值与△a值、背部△b值、翅下△b值有明显影响。EDNRB2基因能够作为赤水乌骨鸡的肤色性状育种选择的候选基因。

关键词：赤水乌骨鸡 EDNRB2基因单核苷酸多态性肤色关联分析

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黔北麻羊黑色多胎肉用新品系选育

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中国畜牧杂志 2025年第5期 173-181页

作者：季全吴大江张劲松王小东曹茂盛骆金红汪艳妃鞠泳虹安鹏程陈祥高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州大学动物科学学院贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室习水县农业农村局

黔北麻羊长期闭锁繁育过程中，出现了被毛纯黑的黔北麻羊群体，该群体体型明显比同年龄段的黔北麻羊健硕。因此，本课题组于2021—2024年在贵州省遵义市习水县富兴牧业有限公司利用纯系育种法开展黔北麻羊黑色多胎肉用新品系选育工作，... 详细信息

黔北麻羊长期闭锁繁育过程中，出现了被毛纯黑的黔北麻羊群体，该群体体型明显比同年龄段的黔北麻羊健硕。因此，本课题组于2021—2024年在贵州省遵义市习水县富兴牧业有限公司利用纯系育种法开展黔北麻羊黑色多胎肉用新品系选育工作，对F2世代选留率、生长性能、繁殖性能及屠宰性能等指标进行研究。结果表明：选育后，F1世代公、母羊选留率分别为61.54%和85.4%,F2世代公、母羊选留率分别为80.00%和86.30%。新品系被毛均为黑色，公羊体重达37.30 kg，母羊体重达32.71 kg，显著高于黔北麻羊公羊体重（32.74 kg）和母羊体重（30.59 kg）。新品系胎产羔数2.29只，产羔率达229%，高于黔北麻羊胎产羔数2.06只及产羔率206%。对比2个群体12月龄屠宰性能发现，新品系与黔北麻羊屠宰率差异显著，分别为52.29%和45.91%，且新品系宰前活重、胴体重、净肉重与熟肉率等指标差异显著高于黔北麻羊群体。测定肉品质及营养成分发现，新品系与黔北麻羊水分含量（66.95%、74.47%）及总脂肪含量（19.88%、13.74%）差异显著，而氨基酸含量差异不显著，这表明选育过程中保持了黔北麻羊原有肉品质特性。本研究为进一步提高黔北麻羊生产性能及进行定向选育提供了重要理论依据。

关键词：黔北麻羊生长性能产肉性能肉品质新品系

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动物营养学报 2025年第4期37卷 2674-2683页

作者：鄂晓迪胡友军赵晓南程皇座文伟施晓丽广东酸动力生物科技有限公司清远511500 高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州大学动物科学学院贵阳550025

本试验旨在研究复配黄豆苷元-藤茶黄酮(DA-DHM)是否通过介导核因子E2相关因子2(Nrf2)-Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)信号通路来缓解叔丁基过氧化氢(TBHP)引起的蛋鸡卵巢颗粒细胞(GCs)氧化损伤。以蛋鸡卵巢GCs为研究对象,利用不同浓... 详细信息

本试验旨在研究复配黄豆苷元-藤茶黄酮(DA-DHM)是否通过介导核因子E2相关因子2(Nrf2)-Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)信号通路来缓解叔丁基过氧化氢(TBHP)引起的蛋鸡卵巢颗粒细胞(GCs)氧化损伤。以蛋鸡卵巢GCs为研究对象,利用不同浓度TBHP(0、200、400、600、800μmol/L)分别处理细胞12和24 h,利用CCK-8法检测细胞活力,确定TBHP的浓度和时间。试验分为4个组:C组在M199基础培养基处理24 h;T1组在含400μmol/L的TBHP培养基处理12 h;T2组为在含10 ng/mL的DA-DHM培养基处理12 h后,更换含400μmol/L的TBHP培养基处理12 h;T3组在含10μmol/L的ML385培养基处理12 h后,更换含10 ng/mL的DA-DHM培养基处理12 h,再更换含400μmol/L的TBHP培养基处理12 h。检测细胞活性、活性氧(ROS)含量、线粒体膜电位、钙离子(Ca^(2+))浓度以及抗氧化相关基因mRNA的相对表达量。结果表明:1)TBHP的最佳造模剂量和时间分别为400μmol/L和12 h。2)与C组相比,T1组GCs内ROS含量、Ca^(2+)浓度和Keap1的mRNA的相对表达量显著升高(P<0.05),细胞线粒体膜电位和Nrf2、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶1(SOD1)和谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)的mRNA的相对表达量显著降低(P<0.05)。与T1组相比,T2组GCs内ROS含量、Ca^(2+)浓度和Keap1的mRNA的相对表达量显著降低(P<0.05),线粒体膜电位和Nrf2、SOD1、谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰亚基(GCLM)的mRNA的相对表达量显著升高(P<0.05)。与T2组相比,T3组GCs内Nrf2、CAT、SOD1、GCLM和GCLC的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),Keap1的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05)。综上所述,DA-DHM能够缓解TBHP引起的蛋鸡卵巢GCs氧化应激损伤,其潜在机制可能是通过调控Nrf2-Keap1信号通路上下游基因的表达,从而减轻GCs的氧化应激和线粒体损伤,并抑制细胞凋亡。

关键词：蛋鸡卵巢颗粒细胞氧化应激 Nrf2-Keap1信号通路黄豆苷元藤茶黄酮

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织金白鹅PPP3CA基因多态性及其与体尺性状的关联分析

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中国畜牧兽医 2025年第4期52卷 1729-1738页

作者：赵中龙张勇杨红杨润黔艾照碧叶丽舒畅贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵阳550025 毕节市畜牧站毕节551700

【目的】鉴定织金白鹅蛋白磷酸酶3催化亚基α(PPP3CA)的单核苷酸多态性(SNPs)位点,并探究PPP3CA基因多态性对体尺性状的影响。【方法】以织金白鹅为试验对象,通过PCR扩增和Sanger直接测序法鉴定144羽织金白鹅PPP3CA基因SNPs位点,利用Exc... 详细信息

【目的】鉴定织金白鹅蛋白磷酸酶3催化亚基α(PPP3CA)的单核苷酸多态性(SNPs)位点,并探究PPP3CA基因多态性对体尺性状的影响。【方法】以织金白鹅为试验对象,通过PCR扩增和Sanger直接测序法鉴定144羽织金白鹅PPP3CA基因SNPs位点,利用Excel 2010软件对基因频率、基因型频率、有效等位基因数(Ne)、多态信息含量(PIC)进行计算,分析Hardy-Weinberg平衡状态,利用SPSS 25.0软件一般线性模型(GLM)中单因素方差分析144羽织金白鹅体尺性状指标与SNPs位点间的关联性。【结果】在织金白鹅PPP3CA基因内含子2、4区域处共发现9个SNPs位点,分别为g.58398 A>G、g.58504 A>G、g.58541 A>G、g.68997 A>G、g.69001 C>T、g.69034 C>T、g.69052 T>C、g.69070 T>C和g.69114 C>T。其中,除g.69034 C>T为低度多态性位点外(PIC<0.25),其余位点均为中度多态性位点(0.25G、g.69001 C>T、g.69070 T>C和g.69114 C>T符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),而位点g.58504 A>G、g.58541 A>G、g.68997 A>G、g.69034 C>T和g.69052 T>C均偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.05)。关联分析结果发现,在g.58504 A>G和g.58541 A>G位点中,GG基因型个体的髋骨宽极显著或显著高于AA基因型(P<0.01;P<0.05)。【结论】织金白鹅PPP3CA基因共存在9个SNPs位点,其中g.58504 A>G与g.58541 A>G位点不同基因型与髋骨宽存在不同程度相关,表明以上位点可作为织金白鹅分子标记辅助选育参考位点,为深入研究鹅PPP3CA基因奠定理论基础。

关键词：织金白鹅 PPP3CA基因 SNPs 体尺性状关联分析

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